三聚氰胺对小鼠睾丸病理损伤的观察

本研究采用组织病理学和免疫组织化学技术观察了三聚氰胺（Melamine,MA）对雄性小鼠睾丸的毒性作用,以深入揭示三聚氰胺的毒性作用及其机理。将25只28日龄SPF雄性昆明小鼠随机均分为5组,1组为对照组,其他4组为试验组。4个试验组分别按下述不同剂量灌服三聚氰胺：0.6 mg/kg（bw）/d（每日每公斤体重0.6 mg）、3.0 mg/kg（bw）/d、15.0 mg/kg（bw）/d和17.5 mg/kg（bw）/d,用玉米油做溶剂;空白对照组每日灌服等量玉米油。连续灌胃30天后剖检小鼠并取其睾丸组织进行固定、切片和染色,观察睾丸的组织病理变化。同时,采用免疫组织化学方法检测睾丸组织中增殖细胞核抗原（PCNA）的表达量。观察结果表明,与对照组相比,试验组不同剂量浓度的三聚氰胺对小鼠睾丸组织造成不同程度的病理损伤;三聚氰胺也会在一定程度上影响睾丸组织中PCNA的表达。研究结果表明三聚氰胺对于小鼠生殖系统有明显毒性作用。     

三聚氰胺与三聚氰酸联用诱导禽肝脏氧化损伤的研究

为了研究三聚氰胺与三聚氰酸联合导致蛋雏鸡肝脏氧化损伤,试验分别在基础饲料中添加30 mg/kg三聚氰胺+10 mg/kg三聚氰酸(低剂量组)和50 mg/kg三聚氰胺+16.7 mg/kg三聚氰酸(高剂量组),饲喂8日龄蛋雏鸡,在第7,14,21,28,35,42天宰杀鸡群(每次每组8只),取肝脏提取蛋白,检测蛋白浓度、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、丙二醛(MDA)含量。结果表明:三聚氰胺与三聚氰酸联合作用后第1~5周内,试验组T-SOD活性差异不显著(P0.05);第6周试验组TSOD活性低于对照组,低剂量组差异极显著(P0.01),高剂量组差异显著(P0.05)。第1~6周试验组MDA含量与对照组相比差异不显著(P0.05)。说明三聚氰胺与三聚氰酸联用可显著增加肝细胞线粒体损伤,但对法氏囊组织细胞生物膜损伤不明显。     

三聚氰胺联合三聚氰酸对攻毒大肠杆菌小鼠抵抗力的影响

试验旨在研究三聚氰胺及其同系物对机体免疫力产生的可能影响,为完善该类污染物的毒理学评价资料提供依据。试验将雄性KM小鼠144只随机分为8组,分别为空白对照组、大肠杆菌阳性对照组,试验组包括三聚氰胺高、中、低剂量组(50 mg/kg、10 mg/kg、2mg/kg)、三聚氰胺与三聚氰酸联合高、中、低(25+25mg/kg、5+5mg/kg、1+1mg/kg)剂量组,试验组隔天灌胃15d后,腹腔注射大肠杆菌,48h后检测小鼠脾脏B淋巴细胞增殖率、血清溶血素光密度值和迟发性变态免疫反应指标。研究结果表明,与对照组相比,当三聚氰胺和三聚氰酸攻毒剂量达到25+25mg/kg时,B淋巴细胞转化能力下降(0.01P0.05),血清溶血素吸光度值下降(P0.01),当攻毒剂量达到三聚氰胺50mg/kg、三聚氰胺和三聚氰酸剂量25+25mg/kg、5+5mg/kg时,小鼠足趾增厚度减小(P0.01),提示三聚氰胺和三聚氰酸能够降低小鼠对大肠杆菌的抵抗能力。     

三聚氰胺与三聚氰酸对小鼠肾脏损伤及其机理的研究

旨在探讨三聚氰胺及其同系物三聚氰酸对肾脏组织的损伤及其损伤机理,为防制其对动物泌尿器官的危害提供理论依据。120只雄性SD小鼠随机分为6组,每组20只,体质量20～30g。对照组蒸馏水灌胃,染毒组采取隔天灌胃方式,A组三聚氰胺50mg·kg-1体质量,B组三聚氰酸50mg·kg-1体质量,C、D、E组三聚氰胺与三聚氰酸混合物(三聚氰胺+三聚氰酸等量混合)高、中、低剂量分别按50、10、2mg·kg-1体质量灌胃,持续30d。测定血清尿素氮(BUN)、肌酐(CRE),肾脏组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)含量,观察肾组织形态学,TUNEL法检测肾脏组织细胞凋亡,RT-PCR法检测肾脏组织Bcl-2、Bax、Cyt-c基因的相对表达以及免疫组化法检测相关蛋白的表达。三聚氰胺与三聚氰酸混合物能引起明显的肾脏组织细胞损伤,呈剂量相关性,表现为BUN和CRE升高,SOD活性降低,MDA含量升高,组织形态学可见明显的肾小管损害;混合组凋亡率明显增高,其中混合高剂量组与对照组相比,差异极显著(P0.01),Bax、Cyt-c表达均高于对照组,而Bcl-2则低于对照组。三聚氰胺与及其与三聚氰酸混合物可以通过脂质过氧化和线粒体通路介导凋亡共同作用引起肾损伤。     

三聚氰胺及其三聚氰酸混合物对小鼠肝脏的损伤及损伤机理

试验采取检测各攻毒组小鼠肝脏受损情况、肝脏细胞凋亡及相关凋亡机制。结果显示,三聚氰胺及其三聚氰酸混合物对小鼠肝脏的损伤随着混合物剂量的上升呈量效关系,剂量越高损伤作用越严重,而三聚氰胺单独组和三聚氰酸单独组对小鼠肝脏无明显损伤作用。三聚氰胺与三聚氰酸混合物主要是通过诱导小鼠肝脏细胞凋亡而致肝组织损伤,Bax和caspase-3基因参与了三聚氰胺和三聚氰酸诱导小鼠肝细胞凋亡的调控。     

三聚氰胺对小白鼠亚慢性毒性

将80只昆明小白鼠随机分为4组（每组20只）：空白对照组（Ⅰ组）、三聚氰胺高剂量组（300mg／kg）（Ⅱ组）、三聚氰胺中剂量组（150mg／kg）（Ⅲ组）和三聚氰胺低刺量组（37．5mg／kg）（Ⅳ组）,试验周期为30d。试验期内观察小白鼠一般情况、体质量变化及食物利用率。结果显示：三聚氰胺染毒组小鼠体增重缓慢,食物利用率极显著降低（P〈0．01）;Ⅱ、11组小鼠血清ALT、AST、BUN、Cr和UA值显著高于Ⅰ组（P〈O．05）,Ca和P显著低于Ⅰ组（P〈0．05）;Ⅱ组小鼠肝、肾指数显著高于I组（P〈0．05）,Ⅱ、Ⅲ组脾指数显著低于Ⅰ组（P〈o．05）;Ⅱ、Ⅲ组小鼠肺、肝、脾、肾及膀胱有病理变化。结果表明,三聚氰胺亚慢性毒性会影响动物生长,造成肺、肝、肾及脾损害。     

槲皮素对双酚A致小鼠生精功能障碍的治疗作用

将50只雄性昆明小鼠随机分为5组,A组（n=10）正常喂饲,B、C、D、E组（各10只）小鼠均腹腔注射50mg／kg·d的BPA,1次／d,连续注射7d,构造小鼠睾丸损伤模型,同时C、D、E组分别用100、200、400mg／kg·d浓度的Que灌胃7d,A组和B组给予等量生理盐水。记录小鼠的体征、体质量变化及试验结束时睾丸、附睾和精囊腺的质量;试剂盒检测血清中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GsH—Px）和丙二醛（MDA）的含量;酶联免疫法测定血清睾酮（T）、黄体生成素（LH）和促性腺激素释放激素（GnRH）的水平;对睾丸组织进行组织学观察。结果显示：D组200mg／kg·d小鼠体质量、各脏器质量均较B组有明显改善（P〈O．05或P〈0．01）,接近A组,C组和E组只有附睾质量变化显著（P〈0．05）;Que各剂量组血清中的SOD、GSH—Px活性均高于BPA组,差异极显著（P〈0．01）,其中D组抗氧化酶的活性最高;MDA测定结果显示,D组明显降低,差异极显著（P〈0．01）,E组也有所降低,差异显著（P〈0．05）;C、D、E组小鼠血清生殖激素水平均有一定程度的恢复,但D组各生殖激素指标均接近A组;组织学观察见各给药组睾丸生精小管生精细胞层数、精子数目均高于B组,尤以D组200mg／kg·d恢复最为明显。结果表明：Que能够促进BPA致小鼠睾丸生精功能障碍后生精功能的恢复,且最佳剂量为200mg／kg·d。     

抗氧化酶在硝基苯中毒小鼠睾丸细胞凋亡中的作用

将10周龄雄性昆明小鼠随机分为硝基苯染毒组（26mg／kg、52mg／kg、105mg／kg）、花生油溶剂对照组、生理盐水对照组。对各组试验小鼠进行处理后，于第30d检测小鼠血清和睾丸中SOD、GSH-Px、CAT的活性及MDA含量，并通过DNA Ladder条带和透射电镜检测睾丸细胞的凋亡。结果，染毒组血清及睾丸中SOD、GSH—Px、CAT的活性显著或极显著（P〈0.01或P〈0．05）低于溶剂对照组，MDA含量显著或极显著（P〈0．01或P〈0，05）高于溶剂对照组，染毒组均显示DNA Ladder条带；电镜下细胞核皱缩，异染色质边聚，呈现典型凋亡现象。结果表明，硝基苯中毒能够诱使睾丸发生氧化应激，进而导致睾丸细胞发生凋亡，抗氧化酶在睾丸细胞凋亡中具有一定的作用。     

棉酚对雄性小鼠的生殖毒性作用

为了观察棉酚对雄性小鼠的生殖毒性,将48只雄性小鼠随机分成4组。对照组(羧甲基纤维素钠)、低剂量组(30 mg/kg·d)、中剂量组(60 mg/kg·d)和高剂量组(240 mg/kg·d)。连续灌胃给药20 d。第21天处死,取睾丸称重并计算脏器指数,将睾丸进行病理组织学观察。结果:前两周,高剂量组体重显著下降(P0.05),对照组体重显著上升(P0.05),第3周高剂量组体重差异极显著(P0.01);与对照组相比,低剂量组睾丸脏器指数差异极显著(P0.01),中剂量组差异显著(P0.05),高剂量组差异不显著(P0.05);睾丸组织进行H.E.染色,对照组无明显病理变化,低、中剂量组病变轻微,高剂量组正常结构遭到破坏,结构松散。结论:棉酚能够抑制小鼠体重的增长,不同浓度的棉酚对小鼠睾丸组织造成不同程度的病理损伤,60 mg/kg·d和240 mg/kg·d棉酚对雄性小鼠有致死作用。     

银杏叶对小鼠抗炎镇痛作用的研究

目的：观察不同剂量银杏叶水煎醇沉液对小鼠的抗炎、镇痛作用。方法：采用二甲苯诱导小鼠耳壳肿胀法,50只小鼠随机均分5组,分别为银杏叶水煎醇沉液腹腔注射高（10.0 g/kg）、中（5.0 g/kg）、低（2.5 g/kg）剂量组,空白对照组腹腔注射等量生理盐水,阳性对照组腹腔注射地塞米松（10 mg/kg）,连续给药6 d,测定小鼠耳廓的肿胀率和肿胀抑制率;采用热板法测定小鼠的镇痛作用,取合格小鼠100只随机均分10组,分别为银杏叶水煎醇沉液腹腔注射和水煎液灌胃高（10.0 g/kg）、中（5.0 g/kg）、低（2.5 g/kg）剂量组,空白对照组腹腔注射和灌胃等量生理盐水,阳性对照组腹腔注射和灌胃安乃近（20 mg/kg）,给药后30 m in测定小鼠的痛阈值的变化。结果：腹腔注射银杏叶水煎醇沉液各剂量组小鼠耳廓肿胀率均低于生理盐水组（P〈0.01）,其肿胀抑制率以高剂量组最高;与生理盐水组比较,腹腔注射银杏叶水煎醇沉液各个剂量组痛阈值均明显提高（P〈0.01）;灌胃给药高剂量组有镇痛作用（P〈0.01）。结论：银杏叶水煎醇沉液腹腔注射对小鼠具有较强的抗炎和镇痛作用,灌胃给药镇痛效果相对较差。     

苦杏仁苷对醋酸铅诱导雄性小鼠睾丸组织损伤的影响

为了观察苦杏仁苷(amygdalin)对醋酸铅诱导雄性小鼠睾丸组织损伤的影响,试验腹腔注射醋酸铅(20 mg/kg)致小鼠睾丸组织损伤,然后分别按体重60,30,15 mg/kg腹腔注射苦杏仁苷,连续注射42 d。结果表明:与对照组比较,模型组睾丸指数、精子密度降低,精子顶体完整率降低,AKP及Ca~(2+)-ATPase活性显著降低,MDA含量升高(P0.05或P0.01);与模型组比较,苦杏仁苷高剂量组睾丸指数升高,苦杏仁苷各剂量组精子密度升高,MDA含量降低,苦杏仁苷高、中剂量组的精子顶体完整率、AKP活性、Ca~(2+)-ATPase活性升高(P0.05或P0.01)。说明苦杏仁苷对醋酸铅诱导的雄性小鼠睾丸组织损伤有一定改善作用,其机制可能与影响能量利用关键酶活性及抗氧化有关。     

番茄红素对钼暴露小鼠睾丸氧化损伤的保护作用

该研究旨在探讨番茄红素这种高效抗氧化剂在金属钼暴露在雄性小鼠生殖系统造成氧化损伤后能否起到一定程度的保护效果。在对照组、损伤组、低、中、高剂量保护组5组中各组随机分配8只雄性昆明小鼠（钼：0、60、60、60、60 mg/kg;番茄红素：0、0、10、20、30 mg/kg）,连续28 d。最后实验数据表明：损伤组的脂质氧化指标谷胱甘肽（GSH）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量和对照组相比明显改变,Nrf2和HO-1蛋白表达水平也显著上调。与损伤组相比,低剂量、中剂量、高剂量保护组的氧化指标降低,蛋白质表达提高,在实验浓度范围内呈现剂量—效应关系,以高剂量保护组的差异最为明显。     

枸杞多糖对己烯雌酚生殖损伤仓鼠抗氧化能力及生殖激素水平的影响

为探讨枸杞多糖（LBP）对己烯雌酚（DES）致成年雄性仓鼠生殖损伤的保护作用,66只成年雄性仓鼠随机分为空白对照组（A）、DES组（B）、LBP组（C、D、E）及VC＋VE组（F）。除对照组注射橄榄油外,其余5组皮下注射DES,连续用药7d,同时C、D、E组分别灌服1,10,50mg/kg的LBP,F组灌服100mg/kg的VC及200IU/kg的VE,A、B组灌服等剂量的生理盐水,于末次给药24h后取材。摘取睾丸、附睾和精囊腺测质量并观察睾丸组织结构,检测血清中SOD、GSH-Px、MDA及T、LH、FSH、E2的水平。结果显示,DES能显著降低仓鼠体质量及生殖器官质量,而10,50mg/kg LBP及维生素对其有显著缓解作用（P〈0.05）;DES处理组仓鼠睾丸组织结构严重损伤,应用LBP后其损伤程度显著减轻,其中以10,50mg/kg LBP的作用最为明显,VC＋VE的缓解作用与50mg/kg LBP组接近;随着LBP剂量的增加,血清中SOD、GSH-Px的水平增加（P〈0.01）,而MDA的水平下降（P〈0.01）,维生素组与LBP组的变化趋势一致;LBP对血清激素水平也有不同程度的提高,其中以50mg/kg作用最为显著（P〈0.01）。这表明50mg/kg LBP能显著缓解DES致成年雄性仓鼠睾丸生精损伤。     

熊胆粉抗乙醇诱导的小鼠肝细胞氧化损伤研究

目的：研究熊胆粉对乙醇诱导的小鼠肝细胞氧化损伤的保护作用。方法：Ⅰ型、Ⅳ型胶原酶和DNA酶联合消化分离、培养小鼠原代肝细胞,乙醇诱导小鼠肝细胞损伤,MTT法检测肝细胞存活率,不同浓度熊胆粉预处理肝细胞,观察培养液中丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果：乙醇对肝细胞的损伤呈量效关系,与正常对照组相比,损伤组培养液中MDA含量明显增加,GSH含量显著降低（P〈0.05）。熊胆粉保护各组（125,150,175μg·ml～（-1））与损伤组相比,培养液中MDA含量明显减少（P〈0.05）,GSH含量和SOD活性显著升高（P〈0.05）。结论：熊胆粉对乙醇诱导损伤的肝细胞具有明显的保护作用。     

淫羊藿苷对辐射损伤小鼠保护作用研究

目的：探讨淫羊藿苷（ICA）对辐射损伤小鼠的保护作用。方法：将50只昆明小鼠按体重随机分为5组,3个剂量组分别按20、80、160 mg/kg体质量给小鼠灌服淫羊藿苷水溶液,正常对照组和照射对照组给予同体积生理盐水,1次/d,连续灌胃16 d。第6天照射对照组和3个剂量组小鼠用5.0 Gy60Co-γ射线进行单次全身照射。照射后第10天检测小鼠的血液学指标、脏器系数及MDA含量、SOD和GSH-Px活性。结果：与照射对照组比较,高剂量组的白细胞和GSH-Px活性显著增加（P〈0.05）,3个剂量组的血小板显著升高（P〈0.05）,SOD含量显著降低（P〈0.05）。结论：淫羊藿苷对小鼠辐射造成的损伤具有保护作用。     

还原型谷胱甘肽对氟中毒小鼠睾丸的影响

研究不同剂量还原型谷胱甘肽(GSH)对氟中毒小鼠睾丸的影响。将50只3周龄ICR雄性小鼠随机分为5组,其中1组为对照组,其余4组为高氟组。对照组给予蒸馏水,染氟组给含100mg/L NaF的蒸馏水,自由饮用30d。在染氟组中选取3组分成100mg/L NaF+200mg/kg GSH组、100mg/L NaF+400mg/kg GSH组和100mg/L NaF+800mg/kg GSH组,这3组小鼠每只每日分别以200、400、800mg/kg GSH的剂量进行灌胃,同时这5组小鼠再自由饮含氟水30d。饲养结束后,摘取小鼠睾丸进行活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、GSH含量及谷胱甘肽过氧化氢酶(GPx)、谷胱甘肽硫转移酶(GSTs)、谷胱甘肽还原酶(GR)的活性检测;制作石蜡切片,HE染色进行组织形态结构分析。结果显示,与对照组相比,100mg/L NaF组ROS和MDA含量显著升高,GSTs和GR活性显著降低;与100mg/L NaF组相比,添加GSH组100mg/L NaF+800mg/kg GSH组GR活性显著升高。与对照组相比,100mg/L NaF组曲细精管结构稀疏,细胞壁细胞层厚度变小,各级生精细胞排列紊乱,还有部分生精细胞脱落,管腔半径变大且管腔中央精子数量明显减少;随着GSH浓度的增加,100mg/L NaF+800mg/kg GSH组得到最大程度的恢复。添加GSH后氟中毒小鼠谷胱甘肽抗氧化系统酶活性有所升高,睾丸组织形态结构一定程度上有所恢复,对睾丸功能有一定的改善作用。     

山羊胎盘复方制剂对小白鼠缓解疲劳和抗氧化功能的影响

研究了山羊胎盘复方制剂对小鼠抗疲劳和抗氧化功能的影响。将40只小鼠随机等量分成高、中、低3个试验组（剂量分别为2mg／d、10mg／d、20mg／d）和1个对照组（生理盐水）,每组雌雄各半,30d后对试验组小鼠的负重游泳时间、血尿素氮水平、血细胞SOD活性和MDA含量进行测定。抗疲劳试验中,仅高剂量组小鼠游泳时闯明显高于对照组（P〈0．05）,中、高剂量组小鼠的血清尿素氮水平与对照组相比差异极显著（P〈0．01）;抗氧化功能试验中,中、高剂量组小鼠红细胞SOD活性与对照组相比达到极显著水平（P〈0．01）,且与对照组相比．这两组小鼠的血清MDA含量明显减少（P〈0．05）。山羊胎盘复方制剂对小鼠具有缓解机体疲劳,提高机体抗氧化能力的作用。     

羊胎盘复方制剂对小白鼠缓解疲劳和抗氧化功能的影响

研究了山羊胎盘复方制剂对小鼠抗疲劳和抗氧化功能的影响。将40只小鼠随机等量分成高、中、低3个试验组（剂量分别为2mg／d、10mg／d、20mg／d）和1个对照组（生理盐水）,每组雌雄各半,30d后对试验组小鼠的负重游泳时间、血尿素氮水平、血细胞SOD活性和MDA含量进行测定。抗疲劳试验中,仅高剂量组小鼠游泳时闯明显高于对照组（P〈0．05）,中、高剂量组小鼠的血清尿素氮水平与对照组相比差异极显著（P〈0．01）;抗氧化功能试验中,中、高剂量组小鼠红细胞SOD活性与对照组相比达到极显著水平（P〈0．01）,且与对照组相比．这两组小鼠的血清MDA含量明显减少（P〈0．05）。山羊胎盘复方制剂对小鼠具有缓解机体疲劳,提高机体抗氧化能力的作用。     

不同铜水平对KM小鼠生长、血液生化指标、组织铜残留的影响

将64只健康KM种小鼠随机分为对照、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ四个组,每组16只,雌雄各半,分笼饲养。以硫酸铜作为铜源,采用灌胃方式染铜,以小鼠体重计,灌胃剂量分别为0mg／kg、10mg／kg、20mg／kg、40mg／kg,进行30d蓄积性毒性试验。试验过程中每6d称重小鼠1次,30d后测定血液生化指标及各可食组织和血液铜含量。结果表明：10mg／kg铜水平对小鼠促生长作用明显（P〈0.01）,20mg／kg和40mg／kg铜水平对小鼠生长起阻碍作用（P〈0.01）;血清AST、ALT和ADH活性随着染铜剂量的增加而升高（P〈0.05或P〈0．01）,10mg／kg和20mg／kg铜水平有效提高AKP活性发挥（P〈0.01）,40mg／kg铜水平则不利于该酶活性最大限度的发挥;肝脏和肾脏是铜残留的主要器官,染铜剂量与肝铜、肾铜含量有良好相关性,染铜组肝铜、肾铜和对照组相比差异显著（P〈0.05）或极显著（P〈0.01）。     

钼对TM3小鼠睾丸间质细胞周期和凋亡的影响

以体外培养的小鼠睾丸间质细胞系TM3 为材料,加入不同质量浓度的钼酸钠溶液（0,10,20,40,80,160mg/L）染毒培养,分别在干预4,8,12,24,48h采用MTT法检测细胞的增殖。干预48h后,采用流式细胞术检测细胞周期和凋亡,单细胞凝胶电泳检测DNA损伤的变化。结果表明：与对照组相比,不同剂量钼酸钠作用24h后,睾丸间质细胞的增殖活性均受到抑制;不同质量浓度的钼酸钠作用48h后,细胞周期阻滞于G0/G1期,20mg/L及其以上剂量组G0/G1期细胞百分率与对照组相比显著升高（P〈0.05或P〈0.01）;与对照组相比,各剂量组TM3 小鼠睾丸间质细胞凋亡率显著升高,差异极显著（P〈0.01）;细胞尾部DNA含量及细胞尾长随着钼剂量的增加呈不同程度的增加,且存在着剂量—效应关系。结论说明钼能够引起睾丸间质细胞周期的紊乱,并诱导睾丸间质细胞发生DNA损伤和凋亡。