中华鳖腐皮病的病原研究

从具有典型腐皮病症状的中华鳖体中分离到P—1、P—2两株细菌,经人工感染试验对健康鳖均产生了较强的致病力,出现与自然病鳖相同的症状,从而证实这两株菌株是中华鳖腐皮病的病原菌。经对菌体的形态特征、培养特性和生理生化反应进行鉴定,证明致病菌为嗜水气单胞菌。     

中华鳖腐皮病及防治方法研究

研究了中华鳖腐皮病的病原、病理，认为腐皮病的病原是气单胞菌属的两个种（或亚种），并通过具有病例阐述了腐皮病的防治方法。     

中华鳖出血性肠炎病病原的研究

对中华鳖出血性肠炎病病原进行了分离,纯化,强毒菌株可使幼鳖,稚鳖,鱼,小白鼠在５￣１６ｈ内１００％死亡,对致病力强的９６－７－２６和９８－６－２６菌株进行培养,生化测定,依《伯杰细菌鉴定手册》（第８版）,鉴定为嗜水气单胞菌。     

中华鳖腐皮病的免疫预防研究

选择对中华鳖毒力最强的Ｐ－１菌株,经扩大培养制成灭活福尔马林菌苗（Ｆ－ＡＨ）及Ｓｐａｎ白油佐剂菌苗（Ｚ－ＡＨ）,对中华鳖进行了Ｆ－ＡＨ菌苗的１次注射、２次注射及Ｚ－ＡＨ菌苗的注射免疫试验。结果表明,受免疫组鳖血液白细胞吞噬活性、凝集抗体效价及脾脏吞噬活性均显著高于对照组鳖,免疫保护力均达到８８％以上。     

中华鳖腐皮病血液病理初步研究

对患有腐皮病的中华鳖的血液病理进行了初步研究,结果表明：病鳖的嗜中性粒细胞、红细胞外形上均有较大变形,甚至破碎,淋巴细胞个体增大;从生理指标值上来看,病鳖的红细胞数目减少,白细胞数目尤其是嗜中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞数目明显增加,红细胞脆性增加,沉降率增加。     

中华鳖腐皮病的药物控制

对患腐皮病的中华鳖病灶进行细菌分离、培养、菌种提纯、药敏试验,该病对呋喃哂林、呋喃唑酮和红霉素较敏感,抑制细菌生长的最低浓度分别为3.15、6.25和12.5 ug/mL.     

中华鳖腐皮病病原菌及防治药物研究

从具有典型腐皮病症状的中华鳖体中分离到Ｐ－１,Ｐ－２两株细菌,人工感染,经菌株形态特征和培养特性及生理生化反应的鉴定,证实均为中华鳖腐皮病的病原菌,且为嗜水气单有民菌。同时进行了该菌的药物敏感试验,筛选了１５种最佳防治药物。     

美国青蛙腐皮病病原菌的分离鉴定和致病因素研究

从患腐皮病美国青蛙的体表以及心,肝,肺,肾中分离出２７株细菌,通过形态观察和革兰氏染色等试验将其分为两种类型,再挑出具代表性的三株菌进行人工感染实验和生理生化鉴定,确定美国青蛙腐皮病的病原菌主要为嗜水气单胞菌,其次为布兰汉氏菌。该病的发生与周围环境密切相关,保持良好的水质和避免蛙体受伤是预防该病的关键。     

中华鳖出血性肠炎病免疫防治的初步试验

将中华鳖出血笥肠炎病原病菌－－嗜水气单胞菌制成灭活菌苗家兔,６０天家兔血液中产生抗体,能与抗原凝集反应,凝集效价为６４０～１２８０。用嗜水气单胞菌苗免疫２０～６９ｇ的鳖,３周抗攻击保护率为７３．３３％,５周为８６．６７％;土法灭活轩免疫ｇ的鳖,３周抗攻击保护率为６６．６７％,５周为８０％。中华鳖出血性肠炎病免疫防治是可行的。     

一株鳖源致病性气单胞菌的分离与鉴定

对典型病症为体表腹甲严重斑块状充血、甚至出血,体表某些部位出现溃疡,严重的会口鼻充血、流血,内脏肝、脾、肾肿大的病鳖进行了病原菌鉴定分析。从肝脏中分离菌株ARC090812,经VITEK-32全自动细菌鉴定仪鉴定,结果为嗜水气单胞菌。药敏实验显示分离菌株对庆大霉素、丁胺卡那霉素等药物敏感,对恩诺沙星及强力霉素中度敏感。致病性实验表明,半数致死量LD50为7.87×108CFU/mL。     

鳖保宁对中华鳖气单胞菌病的药效学研究

采用常规方法对中华鳖（Trionyx sinensis)常见病害进行细菌学检查，测定了鳖保宁及相关单味药对中华鳖主要病原菌温和气单胞菌（Aeromonas sobria)和豚鼠气单胞菌（A.caviae)的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC），并观察鳖保宁预防鳖病害的效果，结果表明：20例患病鳖中共分离到28株细菌，其中温和气单胞菌和豚鼠气单胞菌分别占32.14%和21.43%;鳖保宁及相关单味药对温和气单胞菌和豚鼠气单胞菌均有不同程度的抑制和杀灭作用。其中鳖保宁的作用最强；鳖保宁预防鳖病害的效果优于对照组。     

中华鳖弗氏柠檬酸杆菌的分离、鉴定及药物敏感性试验

从患病中华鳖（Trionyx sinensis）内脏中分离到一株细菌（LCJY-002）。ATBExpression型微生物鉴定系统艋示：该菌为弗氏柠檬峻杆菌（Citrobcwter fundii）。16SrDNA分析得到1条长度为1456bp的核甘=酸序列（genBank登录号为KC691177）;Blast分析显示：该分离株与弗氏柠檬酸杆菌的同源性达99％,在系统发育树上与C．frgulldii聚为一支。鉴定结果确认：菌株LCJY-002为弗氏柠檬酸杆菌。人工回归感染试验证文：该菌具有敛病性,PCR检测表明：分离的弗氏柠檬酸杆菌具有c屈毒力因子。药敏试验结果显爪：该菌对16种抗菌药物中的庆大霉素等7种药物敏感。     

中华鳖白底板病病原的分析

从患白底板病的中华鳖(Trionyx sinensis)肾、肝、脾分离出致病力较强的细菌TS6-1和TS6-2。同时样品经超薄切片,电子显微镜观察,在脾、肝、肾组织细胞质中观察到直径为30 nm病毒样颗粒。经人工感染试验证实,分离菌株及患病鳖内脏组织过滤液均可导致中华鳖发病死亡,TS6-1和TS6-2的LD50分别为3.2×107CFU/mL和1.0×108CFU/mL。以患病鳖肝、脾组织的过滤液注射健康鳖后,3～5天内所有鳖全部死亡。通过对细菌形态、生理生化特性的测定,判定TS6-2属于嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。同时对TS6-1进行了16S rRNA分子鉴定,将测定的序列递交NCBI进行BLAST同源序列比对,与迟缓爱德华氏菌的16S rRNA基因具有较高的同源性(99%),该序列在GenBank上的登录号为DQ884466。结合细菌的生理生化特性,判定TS6-1属于迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tard)。由此认为中华鳖白底板病由病毒和嗜水气单胞菌、迟钝爱德华氏菌混合感染引起。药敏试验结果表明,TS6-1对先锋V、丁胺卡那敏感,TS6-2对卡那霉素、庆大霉素、丁胺卡那敏感。     

中华鳖常见细菌病的病原鉴定及药物体外拮抗比较

对中华鳖疖疮穿孔病、腐皮病、出血性肠道坏死症、细菌性肝水肿病与白点病等5种常见鳖病的16株病原菌进行鉴定与抑菌效果测定,其中温和气单胞菌6株,类志贺邻单胞菌1株,嗜水气单胞菌6株,豚鼠气单胞菌3株。各分离株对中华鳖与实验小鼠均具强毒力。对16株病菌的体外拮抗结果统计表明,不同鳖病致病菌的药物拮抗作用存在明显差异,而病症一致采集地各异的中华鳖病菌其体外药物敏感性亦有所不同,以丁胺卡那、氟嗪酸、环丙沙星、新霉素、庆大霉素、红霉素、卡那霉素、呋喃妥因等抗生素的抑菌效用最为显著,中高敏频次≥10。     

虎纹蛙烂趾病病原菌分离鉴定与药敏试验

从息典型烂趾病的虎纹蛙病灶组织分离到1株细菌.暂命名为WD-01,经人工感染证实该细菌为虎纹蛙烂趾病的病原菌.通过形态学、生理生化特性对其进行鉴定,并用纸片法进行药敏试验.鉴定结果表明,细菌WD-01为嗜水气单胞菌.药敏试验结果表明,新霉素、利福平、先锋霉紊、诺氟沙星、庆大霉素、强力霉素、链霉素、卡那霉素、土霉素和金霉素等12种药物对菌株WD-01具有明显的抑制作用.     

中华倒刺鲃溃烂病组织病理学及药敏试验

对嘉陵江船体网箱养殖的中华倒刺鲃(Spinibarbus sinensis)在春末夏初流行的溃烂病进行了组织病理学和药物敏感试验。结果表明,病灶部位的红细胞溶血,淋巴细胞增生,肌原纤维和肌细胞溶解,肌细胞膜消失,血管充血、出血;病鱼的肾小管上皮细胞与基底膜分离,肾小管管壁细胞之间产生缝隙,肾脏中的血管破裂,红细胞溶血;病鱼的肝小叶中央细胞大量坏死,部分外周细胞也出现了坏死;病鱼的胰脏和脾脏没有发生明显病变。21种抗菌类药物和5种组合药物的药敏试验结果表明,病原菌对硫酸庆大霉素、硫酸妥布霉素、硫酸链霉素、硫酸阿米卡星、头孢曲松钠、氧氟沙星葡萄糖、氨苄西林钠7种药物敏感,对溴氯海因、食盐、强氯精、高锰酸钾、甲基蓝、甲醛6种药物表现耐药性。     

中华鳖体表和体内菌群多样性分析

采用16S rDNA分析方法,分别提取中华鳖体表和体内细菌总DNA,以之为模板进行PCR扩增获得细菌16S rDNA基因片段,并构建16S rDNA克隆文库.从2个文库中分别随机选取100个重组克隆子,抽提重组质粒,用Hae Ⅲ和MspⅠ限制性内切酶进行酶切,获得酶切指纹图谱,从每种图谱随机挑选克隆子测序,获得其16S rDNA部分序列,构建了系统进化树.在中华鳖体表和体内细菌克隆文库中分别包含13种和10种RFLP谱型,分别挑选了70个和60个克隆子进行测序.结果表明,中华鳖体表和体内文库克隆子分别归为15类和11类OTU,体表和体内菌群多样性较强,优势细菌类群分别为拟杆菌和变形菌,并在文库中检测到了几株益生菌和条件致病菌.     

茯苓多糖对中华鳖非特异性免疫功能的免疫调节作用

研究了口服茯苓多糖对中华鳖(Trionyxsinensis)非特异性免疫功能的影响。试验共分3个组,在基础饲料中添加20·0mg/kg茯苓多糖作为试验组,添加500·0mg/kg酵母细胞壁作为免疫刺激剂对照组,以投喂基础饲料作为空白对照组。连续投喂28d后,测定中华鳖血液中白细胞的吞噬活性、血清溶菌活力和补体活性。结果表明:在中华鳖饲料中添加茯苓多糖和酵母细胞壁能显著提高中华鳖白细胞的吞噬活性(t检验,P<0·05),而2个试验组之间中华鳖血液中白细胞的吞噬活性没有显著差异(t检验,P>0·05);2个试验组中华鳖血清中补体C3和C4的活性与对照组之间呈显著差异(t检验,P<0·05),而试验组之间无显著性差异(t检验,P>0·05)。本研究结果说明在中华鳖饵料中添加茯苓多糖和酵母细胞壁对中华鳖的非特异性免疫功能有增强作用。     

鳖池一些环境因子变化特征及其对鳖生长的影响

本文通过对鳖池水体进行理化处理,分析了主要的环境因子对养殖鳖生长的影响。结果表明鳖池水体溶解氧的提高对鳖池水质和底质改善及养殖鳖的生长具有明显的促进作用,但对皮肤病的治疗没有明显的作用;大换水后鳖池水体pH值昼夜变化较大,午后出现较高的pH值高峰;午后高pH值对正常养殖鳖虽无明显的不适反应,但在随后的养殖过程中出现较多的疖疮病和白底板病。利用外加电源提高鳖池氧化还原电位,试图改善鳖池底质和水质的方法,未能得到满意效果。