大批量注射花鲈疫苗方法的研究

花鲈(Lateolabrax japonicus)生长迅速,适温性强,肉质细嫩,味道鲜美,营养价值高,为优质食用鱼,国内鲜活品的需求量较大,并销往港、澳地区和日本、韩国等国家。花鲈养殖始于20世纪70年代,近年养殖地位不断上升。目前,用于养殖的花鲈,大多数还依靠春季捕自北方海域的天然苗,规格约30mm,在北方养至秋季规格约20cm,卖往南方或日本继续养殖。     

中国花鲈与日本花鲈营养成分的研究

对中国花鲈和日本花鲈的野生群体肌肉营养成分进行了研究。结果表明，中、日花鲈间肌肉营养成分有一定差异：中国花鲈灰分、脂肪含量高于日本花鲈，蛋白质含量低于日本花鲈；总氨基酸含量及必需氨基酸含量低于日本花鲈；中国花鲈脂肪酸中不饱和脂肪酸总量低于日本花鲈，其中单不饱和脂肪酸含量高于日本花鲈，多不饱和脂肪酸含量低于日本花鲈；二者都含有丰富的无机元素并且中国花鲈高于日本花鲈。     

花鲈人工繁殖的研究

１９９３～１９９５年，作者从浙江沿海三门湾及象山港采捕花鲈亲鱼，经暂养促熟处理（控制水温、盐度、溶氧水平，投喂、填喂活饵，不定期注射适量的ＬＲＨ－Ａ等），雌鱼的性腺可发育到Ⅳ＿３期，对外源激素能引起正常的排卵反应。试验用的催产剂及剂量为：雌鱼每千克体重用１．５～２．５ｍｇＰＧ＋１２００～２２００ＩＵＨＣＧ＋７０～１４０μｇＬＲＨ－Ａ，或用６～１０ｍｇＤＯＭ＋２００～３８０μｇＬＲＨ－Ａ；雄鱼的注射剂量减半。在水温１４．５～１６℃的条件下，注射后的效应时间为３６～９７小时。本试验的平均受精率为８９．２２％，平均孵化率为７５．４３％。     

花鲈

花鲈，隶属鲈形目，角旨科，花鲈属，分布于中国、朝鲜及日本。     

池养尖吻鲈和花鲈的生长特性

尖吻鲈（Ｌａｔｅｓｃａｌｃａｒｉｆｅｒ）、花鲈（Ｌａｔｅｏｌａｂｒａｘｊａｐｏｎｉｃｕｓ）为河口性鱼类,可作为池塘养殖的对象。尖吻鲈的适宜生长水温为２５℃～３４℃,快速生长年龄在Ⅰ～Ⅱ龄;花鲈在珠江口地区一年四季均能生长,快速生长年龄在Ⅲ～Ⅳ龄。应用ＶｏｎＢｅｒｔａｌａｎｆｙ方程求得它们在人工饲养条件下体长、体重生长方程：尖吻鲈Ｌｔ＝７０６．５５５３［１－ｅ－０．５１２８（ｔ＋０．２０３２）］,Ｗｔ＝６５５４．４６４９［１－ｅ－０．５１２８（ｔ＋０．２０３２）］３．０３３５;花鲈Ｌｔ＝８８７．４９５８［１－ｅ－０．４０２５（ｔ＋０．０２０９）］,Ｗｔ＝１０８８２．１８８４［１－ｅ－０．４０２５（ｔ＋０．０２０９）］３．１４２７。它们的体重生长拐点分别位于１．９６和２．８２龄处。商品鱼的合理起捕时间应选在生长转折点。参照生物学指标,珠江口地区池养尖吻鲈、花鲈的上市商品鱼应为Ⅰ～Ⅱ龄和Ⅲ～Ⅳ龄,这不仅符合经济原则,也适应当地的消费习惯。     

适合花鲈的几种染色体制备方法的比较

比较了6种适于制备花鲈(Lateolabrax japonicus)染色体的制片方法。结果表明,细胞系(LJES)培养法和头肾-PHA活体注射-淋巴分离液富集法可制备高质量的染色体标本;外周血短期培养法和头肾-PHA活体注射法得到的结果重复性好,但制片时有红细胞的干扰;小鱼游泳法和组织浸泡法操作简单,适于野外条件下的染色体制备,但得到的染色体图象有背景杂质,分裂指数较低,仅适用于染色体组型的研究。     

绿色荧光蛋白基因向花鲈胚胎的转移及其表达

通过显微注射的方法,将绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)基因注射入花鲈(Lateolabrax japonicus)单细胞期受精卵动物极细胞质内。初步研究了显微注射后的花鲈胚胎的存活状况。在荧光显微镜下观察到了GFP的表达,多数胚胎表现为嵌合性表达。利用PCR技术,从花鲈尾芽期胚胎DNA中扩增出了特异片段,大小为750bp,表明显微注射胚胎中整合了外源GFP基因。     

花鲈精养技术

花鲈分布于黄渤海、东海、南海、台湾海峡以及朝鲜、日本等沿海海区，为浅海内湾性鱼类。由于自然资源的日益衰退，其自然捕捞产量不断减少，而该鱼具有体形好、生长快、肉味鲜美、病害少、易起捕等优点，是一种具有较高养殖价值的经济鱼类。为此，我区利用精养塘养殖花鲈，取得成功。经多年的实践，亩产成鲈达到250公斤左右，亩均盈利3000元以上。其做法如下：1．池塘条件：鱼塘面积以2～10亩较适宜，水深可在2m以上，塘埂坡度1：2～1：2．5，塘底有少量淤泥，进排水方便，水源充沛，水质清新。2．放养前的准备：精养塘经过较长时间曝晒，…     

花鲈的胚胎发育和仔鱼发育

本文描述了温度为１２．２－１４．０℃、盐度为２２‰的天然海水中用捕自浙江省宁海县和奉化市沿海的花鲈进行人工繁殖时，花鲈的胚胎发育和仔鱼发育情况。     

花鲈在短期周期性饥饿下的补偿生长

试验设3个饥饿处理组和1个对照组,研究花鲈在短期周期性饥饿下的补偿生长。试验结果表明,不同饥饿处理下的花鲈具有部分补偿生长能力,再投喂下的干物质摄食率(FR)显著高于对照组(P<0.0001),但饲料效率(FE)与对照组相比差异不显著(P<0.05),表明花鲈在短期周期性饥饿下的补偿生长通过提高摄食率实现。花鲈在补偿生长期间的生长效率大幅度提高,在投喂时间为对照组50%的条件下,周期性饥饿7 d(SR77)和周期性饥饿2 d(SR22)组平均特定生长率达到对照组的70.0%。     

壳聚糖对花鲈生长和非特异性免疫力的影响

在基础饲料中分别添加0.5%、1%和2%的壳聚糖,连续投喂花鲈(Lateolabrax japonicus)60d,探讨壳聚糖对花鲈生长和非特异性免疫力的影响。结果表明,添加0.5%和1%壳聚糖可以显著促进花鲈的生长,但是不同添加浓度对成活率均无影响。在30d时添加0.5%或1%壳聚糖能有效提高花鲈的补体活性、溶菌酶活性和吞噬活性;在60d时仅明显提高补体活性。添加壳聚糖对白细胞的数量没有影响。     

复合微生态制剂对花鲈非特异性免疫力及抗病力的影响

将复合微生态制剂以0(control)、500mg/kg(PR-500)和3000mg/kg(PR-3000)的添加量加入到花鲈(Lateolabraxjaponicus)基础饲料中,在饲喂42d和84d后分别取样,以血清溶菌酶活力、替代补体活力(ACH50)、头肾巨噬细胞杀菌力及呼吸爆发活力为判据,确定微生态制剂对花鲈非特异性免疫力的影响;用鳗弧菌Vibrio anguillarum对饲喂84d后的花鲈进行攻毒实验,测定累积死亡率,以确定微生态制剂对花鲈抗病力的影响。结果表明,饲喂84d时,实验组的特定生长率(SGR)较对照组有增高的趋势,但与对照组间无显著性差异(P>0.05)。饲喂42d时,实验组花鲈的血清溶菌酶活力与对照组相比无显著性差异(P>0.05);84d时,实验组的溶菌酶活力显著低于对照组(P<0.05)。饲喂42d与84d时实验组花鲈的替代补体活力(ACH50)与对照组相比无显著性差异(P>0.05);饲喂84d时,实验组花鲈巨噬细胞的呼吸爆发活力与对照组相比无显著性差异(P>0.05);PR-3000组花鲈的巨噬细胞杀菌力显著高于对照组(P<0.05);实验组花鲈的头肾巨噬细胞数量显著高于对照组(P<0.05)。攻毒实验结果显示,对照组花鲈最早出现死亡;攻毒后第27~32h期间,对照组花鲈的累积死亡率显著高于实验组(P<0.05)。     

Estimation of dietary biotin requirement of Japanese seabass,Lateolabrax japonicus C.

A 9‐week feeding experiment was conducted to determine the dietary biotin requirement of Japanese seabass, Lateolabrax japonicus C. Six isonitrogenous and isoenergetic purified diets (Diets 1–6) containing 0, 0.01, 0.049, 0.247, 1.238 and 6.222 mg biotin kg^?1 diet were fed twice daily to triplicate groups (30 fish per group) of fish (initial average weight 2.26 ± 0.03 g) in 18 fibreglass tanks (300 L) filled with 250 L of water in a flow‐through system. Water flow rate through each tank was 2 L min^?1. Water temperature ranged from 25.0 to 28.0 °C, salinity from 28.0 to 29.5 g L^?1, pH from 8.0 to 8.1 and dissolved oxygen content was approximately 7 mg L^?1 during the experiment. After the feeding experiment, fish fed Diet 1 developed severe biotin deficiency syndromes characterized by anorexia, poor growth, dark skin colour, atrophy and high mortality. Significant lower survival (73.3%) was observed in the treatment of deficient biotin. The final weight and weight gain of fish significantly increased with increasing dietary biotin up to 0.049 mg kg^?1 diet (P < 0.05), and then slightly decreased. Both feed efficiency ratio and protein efficiency ratio showed a very similar change pattern to that of weight gain. Dietary treatments did not significantly affect carcass crude protein, crude lipid, moisture and ash content. However, liver biotin concentration (0–6.1 μg g^?1) significantly increased with the supplementation of dietary biotin (P < 0.05), and no tissue saturation was found within the supplementation scope of biotin. Broken‐line regression analysis of weight gain showed that juvenile Japanese seabass require a minimum of 0.046 mg kg^?1 biotin for maximal growth.     

应用间接荧光抗体技术快速检测花鲈病原菌——鳗弧菌

以花鲈（Lateolabrax japonicus)弧菌病的病原菌-鳗弧菌（Vibrio anguillarum)W-1为抗原，制备兔抗血清；利用异硫氰酸荧光素标记的羊抗兔免疫球蛋白（FITC-IgG）为荧光标记二抗，并以罗丹明标记的牛血清白蛋白为背景染色，建立检测鳗弧菌的间接荧光抗体快速检测技术。应用该技术对人工感染后的花鲈组织（肌肉、鳃、肠、肾）样品和养殖水体样品进行了鳗弧菌检测，结果显示间接荧光抗体技术不仅可以用于诊断发病的感染花鲈，也可用于检测带菌状态或未发病的感染花鲈。     

鲈鱼(Lateolabrax japonicus)生长后期对苏氨酸需要量

在半精制饲料中分别添加0、0.35%、0.70%、1.05%、1.40%、1.75%苏氨酸,制成苏氨酸实际梯度为1.05%、1.35%、1.65%、2.00%、2.42%、2.65%的6组等能等氮饲料(44.67%粗蛋白质,21.65 k J/g总能),对初始体重为(333.93±6.60)g的鲈鱼(Lateolabrax japonicus)在海水浮式网箱(1.5 m×1.5 m×2.0 m)中进行了70 d的喂养实验,研究其对苏氨酸的最适需求量。结果显示,鲈鱼成活率在89.58%–95.83%之间,各处理组之间无显著差异(P0.05);随着饲料中苏氨酸水平的升高,鲈鱼的特定生长率(SGR)显著增加(P0.05),且在2.00%苏氨酸饲料组出现最大值,但随着苏氨酸水平的继续升高,SGR呈减小的趋势;饲料效率(FE)随饲料中苏氨酸水平的升高呈先增加后减小的趋势,2.00%苏氨酸组的FE显著高于1.05%组及2.65%组(P0.05);随着饲料中苏氨酸水平的升高,蛋白质沉积率(PPV)呈先增加后减小的趋势,且于2.00%苏氨酸组出现最大值;肝脏谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性随饲料中苏氨酸水平的升高呈先增加后减小的趋势;饲料中不同水平苏氨酸对鱼体粗蛋白、粗脂肪、粗灰分无显著影响(P0.05)。以特定生长率、饲料效率及蛋白质沉积率为评价指标,经二次回归分析得出,鲈鱼对饲料中苏氨酸的最适需求量分别为占饲料干重的1.84%、1.87%及1.83%,占饲料蛋白质的4.11%、4.18%及4.09%。     

花鲈人工育苗技术

从养殖网箱中选择性发育良好的 4龄鱼为亲体 ,经室内暂养培育、激素催产 ,获受精卵 4 0 5× 10 5粒 ,孵出仔鱼 30 1× 10 5尾。在水温 18 0～ 2 0 0℃ ,pH值 8 1～ 8 6 ,盐度 2 2～ 2 3条件下 ,经 6 0～ 70d的培育 ,共出池全长2 5cm左右的鱼苗 8 0 5× 10 5尾 ,育苗成活率 2 6 7%。     

Effects of dietary squid viscera meal on growth and cadmium accumulation in tissues of Japanese seabass, Lateolabrax japonicus (Cuvier 1828)

Cadmium (Cd) is a toxic environmental pollutant with a long biological half‐life and can produce both hepatic and renal injuries in mammals and fish. Squid viscera meal (SVM), an effective attractant for aquatic animals, is widely used as an ingredient in aquafeeds. However, SVM is rich in Cd and its complexes. A study was conducted to evaluate the effects of dietary SVM on the growth and Cd deposition in tissues of Japanese seabass, Lateolabrax japonicus. Three practical diets were formulated to contain 0, 50 and 100 g SVM kg^?1 diet, respectively, containing 0.21, 7.26 and 12.08 mg Cd kg^?1 diet. Each diet was randomly assigned to triplicate groups of 80 Japanese seabass (mean initial weight, 10.89±0.21 g) in floating sea cages (1.5 × 1.5 × 2.0 m). Fish were fed twice daily (06:30 and 16:30 hours) to satiation for 8 weeks. The results showed that there were no significant differences in fish survival among three dietary treatments, but significant higher specific growth rates (SGR) were observed in the fish fed diets with 50 or 100 g SVM kg^?1 diet than that from the control group (P<0.05). The Cd concentrations in the kidney, liver and gill were found in a decreasing order at each treatment, and positively correlated with dietary Cd levels. Fish fed diets with 50 and 100 g SVM kg^?1 diet had significantly higher Cd accumulations in the kidney (3.25, 5.85 mg kg^?1), liver (0.76, 1.26 mg kg^?1) and gill (0.42, 0.58 mg kg^?1) compared with the control group (0.82, 0.34 and 0.32 mg kg^?1 respectively) (P<0.05). The Cd concentration in fish muscle; however, was undetectable in any treatment. Therefore, based on these results, accumulation of Cd in edible tissue (muscle) of farmed Japanese seabass is not a food safety issue. However, long‐term feeding of diets with SVM may result in accumulation of Cd in the kidneys, liver and gills of fish.     

饲料中不同水解蛋白对鲈鱼(Lateolabrax japonicus)幼鱼鱼体及组织脂肪含量的影响

本研究通过8周的摄食生长实验来探讨高植物蛋白饲料中添加不同类型的水解蛋白对鲈鱼(Lateolabrax japonicus)幼鱼(初始平均体重为31.99 g)鱼体及组织脂肪含量的影响.实验设4个等氮等能的饲料处理组,对照组含有30％的鱼粉,通过在对照组饲料基础上分别添加水解猪血蛋白、水解豆粕蛋白和水解酵母蛋白替代10％的鱼粉来获得不同类型的实验组饲料,即水解猪血蛋白组、水解豆粕蛋白组和水解酵母蛋白组.养殖实验在近海浮式网箱中进行,每组饲料投喂3个重复的养殖网箱,每个网箱30尾鱼.实验结果显示,高植物蛋白饲料中水解猪血蛋白、水解豆粕蛋白及水解酵母蛋白并没有对鲈鱼幼鱼的鱼体、肝脏、肌肉和内脏的脂肪含量产生显著影响.但与对照组相比,添加水解酵母蛋白的处理组显著降低了鲈鱼幼鱼的血清甘油三酯、总胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇含量(P＜0.05).水解酵母蛋白替代鱼粉显著提高了鲈鱼幼鱼肌肉中C20:1n-9的含量,而水解豆粕蛋白和水解酵母蛋白显著降低了肌肉中C22:5n-3的含量(P＜0.05).与对照组相比,水解酵母蛋白显著降低了血清中C20:5n-3的含量(P＜0.05).在腹部脂肪组织中,与对照组相比,猪血、豆粕及酵母蛋白水解物替代鱼粉极显著提高了饱和脂肪酸、十八碳及十六碳单不饱和脂肪酸、亚油酸及亚麻酸的含量,而极显著降低了C20:1n-9、C20:4n-6、C22:5n-3和C22:6n-3的含量(P＜0.01).本研究表明,高植物蛋白饲料中猪血、豆粕及酵母蛋白水解物替代10％的饲料鱼粉并未有效调节鲈鱼幼鱼鱼体、肝脏、肌肉及内脏的脂肪累积,但水解酵母蛋白在一定程度上改善了血清甘油三酯和胆固醇的代谢.水解蛋白对鲈鱼幼鱼脂肪酸组成的调节因水解蛋白的类型及鱼体组织类型而异.本研究是国内外首次系统研究不同类型水解蛋白对养殖鱼类脂肪累积的调节作用,对该领域相关研究具有重要借鉴和参考意义.     

不同盐度条件下饥饿及恢复摄食鲈稚鱼脂肪酸的组成

采用气相色谱法测定和分析了15.00、7.50及淡水3个盐度条件下鲈稚鱼在饥饿时及其恢复摄食后的脂肪酸变化。结果显示,在3个盐度条件下,饥饿的鲈稚鱼均首先消耗饱和脂肪酸,随后才会消耗不饱和脂肪酸;恢复摄食后的鲈稚鱼,其不饱和脂肪酸也优先得到补充。在3个盐度条件下,以淡水组饥饿稚鱼的多不饱和脂肪酸的消耗量最大,但在恢复摄食后,其EPA、DHA的含量又为最高,这可能与不同盐度条件下鲈稚鱼的生物转化能力不同有关。