不同海拔全缘叶绿绒蒿繁殖分配的差异

以全缘叶绿绒蒿为试材,采用野外采样调查和实验室烘干称重法,研究不同海拔全缘叶绿绒蒿的繁殖分配特征,以期认识全缘叶绿绒蒿繁殖分配策略对海拔的响应。结果表明:随着海拔升高,全缘叶绿绒蒿个体大小(地上部分生物量)、营养器官生物量显著降低,而繁殖器官生物量、雄蕊生物量、雌蕊生物量和繁殖分配显著增加;全缘叶绿绒蒿存在个体大小依赖的繁殖分配,个体越大,繁殖分配比例越小;不同海拔梯度,全缘叶绿绒蒿花期营养器官与繁殖器官、雄蕊与雌蕊间均存在资源分配上的权衡。随着海拔升高,全缘叶绿绒蒿将更多资源投入繁殖器官且雌蕊获得资源多于雄蕊,这有助于保障植株的成功繁殖。     

全缘叶绿绒蒿种子散播功能性状及其与种群空间分布格局的相关性

以全缘叶绿绒蒿为试材,运用野外调查与点格局相结合的分析方法,研究了海拔变化对全缘叶绿绒蒿种子散播功能性状、种群空间分布格局特征的影响,并探讨种子散播功能性状与种群空间分布格局特征的相关性,以期揭示植物繁殖生长的生态适应对策。结果表明:全缘叶绿绒蒿单果胚珠数随海拔升高而增加,而种子千粒质量、花梗长度和株高均随海拔升高而降低,单因素方差分析表明不同海拔梯度间种子千粒质量和单果胚珠数差异不显著(P0.05),而花梗长和植株高度在不同海拔间则存在显著差异(P0.05)。样地1(4 452m)、样地2(4 215m)、样地3(4 081m)、样地4(3 841m)和样地5(3 681m)全缘叶绿绒蒿种群分别在0~5.82、0~8.6、0~8.8、0~9.2、0~20m空间尺度上呈聚集分布,不同海拔全缘叶绿绒蒿种群呈现聚集分布的空间尺度存在显著差异,即随着海拔的升高,种群聚集分布的空间尺度越小。Pearson相关分析表明,植株花梗长、株高、种子千粒质量与种群聚集分布空间尺度呈正相关,单果胚珠数与种群聚集分布空间尺度呈负相关,但均不显著(P0.05)。     

红花绿绒蒿的研究现状

红花绿绒蒿是具有较高观赏价值和药用价值的野生珍惜植物。本文论述了红花绿绒蒿的特点及功能、资源分布和应用现状,并对红花绿绒蒿的开发和利用提出了一些建议。     

芒果ISSR反应体系的建立与优化

运用L16（4^5）正交设计对芒果ISSR反应的5个因素,即DNA模板浓度、M矿浓度、dNTPs浓度、引物浓度、TaqDNA聚合酶浓度在4个水平上进行优化试验,通过不同反应体系扩增效果比较,建立优化的芒果ISSR反应体系,     

大葱ISSR反应体系的建立及优化

以大葱嫩叶为试材,采用单因素试验和正交实验探讨了Mg~(2+)浓度、dNTPs浓度、引物浓度、TaqDNA聚合酶用量、模板DNA以及Buffer用量对大葱ISSR-PCR扩增的影响,建立了大葱ISSR反应体系。结果表明:优化后的最佳反应体系为10μL反应体系中,10×Buffer缓冲液1.0μL,Mg~(2+)浓度为2.0mmol·L~(-1),dNTPs浓度为0.3mmol·L~(-1),引物浓度为0.65μmol·L~(-1),Taq酶1.0U,模板DNA为60ng,用灭菌的超纯水补齐体积至10μL。对大葱71份样品材料进行ISSR-PCR扩增体系的检测结果显示,该优化体系扩增的产物条带清晰,稳定性高,为大葱种质ISSR分子标记遗传结构分析提供参考依据。     

枇杷属植物ISSR反应体系的建立和优化

首次通过正交实验,对影响枇杷属植物ISSR反应较大的Mg2+、Taq酶、dNTPs、引物、模板DNA浓度进行筛选,并对扩增反应程序进行优化。优化后的反应体系为:25μL反应体系中,含10×buffer2.5μL,Mg2+浓度2.0mmol·L-1,Taq酶1.5U,引物0.3μmol·L-1,模板DNA60ng,dNTPs0.15mmol·L-1。反应程序为94℃预变性5mim;94℃变性1mim,退火温度70s,72℃延伸1.5mim,40次循环;72℃延伸7mim,4℃保存。     

金钻蔓绿绒组培再生体系的建立

以金钻蔓绿绒幼苗茎段为外植体,进行愈伤组织诱导、不定芽分化及增殖培养的研究。结果表明:金钻蔓绿绒茎段在MS+6-BA 5.0mg/L+NAA 0.1mg/L培养基可成功诱导出愈伤组织,继而分化出不定芽;不定芽适宜增殖培养基为MS+6-BA 6.0mg/L+NAA 0.2mg/L,增殖倍数可达3.93;不定芽适宜的生根培养基为1/2MS+NAA 1.0mg/L,生根率可达100%,移栽30d后成活率达95%以上。     

光核桃ISSR扩增体系的优化

为确保光核桃ISSR反应条件的稳定性,以改良的CTAB法提取光核桃基因组DNA,对模板DNA浓度、MgCl2浓度、dNTPs浓度、Taq酶用量、引物浓度等因素进行了优化,确立了光核桃ISSR反应体系。结果表明:最佳反应体系为模板浓度40ng/μL、引物浓度0.4μmol/L、Mg2+的浓度2.5mmol/L、酶浓度0.5U、dNTPs浓度0.5mmol/L,为光核桃这一优质的种质资源的遗传多样性研究奠定了理论基础。     

莲雾ISSR反应体系的优化与应用

以黑珍珠莲雾为试材,对ISSR反应体系中的各个主要影响因子进行了优化筛选,结果表明,25μL ISSR反 应体系各组分的最适浓度分别为:1×Buffer(不含Mg2+)、2.0 mmol/L Mg2+、0.2 mmol/L dNTPs、Taq DNA聚合酶1.5 U、引 物0.2 μmol/L、模板1.0 ng/μL。此外,加入1.6％的甲酰胺有利于减轻背景噪音的干扰。并利用该优化体系对12个连 雾类型和2个近缘种进行了ISSR扩增,证实了该体系稳定可靠。     

贝利叶绿绒蒿及其两个栽培种种子萌发比较

以贝利叶绿绒蒿(Meconopsis baileyi)、贝利叶'Hensol Violet'(Meconopsis baileyi'Hensol Violet')、贝利叶'Alba'(Meconopsis baileyi'Alba')种子为研究对象,采用游标卡尺测量、电子天平称量、不同温度处理和赤霉素(GA3)处理等试验方法,研究了 3种绿绒蒿种子长宽、千粒质量、吸水率和萌发率,以及25℃/15℃与20℃/10℃2种温度处理和不同浓度GA3处理对3种绿绒蒿种子萌发的影响,以期比较3种绿绒蒿种子表型及萌发差异,找到促进其萌发的方法.结果表明:贝利叶绿绒蒿、贝利叶'Hensol Violet'、贝利叶'Alba'种子平均长度分别为(1.149 1±0.127 8)(1.173 5±0.124 1)(1.292 1±0.146 4)mm,平均宽度分别为(0.652 6±0.079 4)(0.702 8±0.073 4)(0.753 3±0.086 8)mm,千粒质量分别为(0.289 7±0.012 7)(0.320 5±0.005 5)(0.370 7±0.014 6)g.20℃/10℃较25℃/15℃温度条件下3种绿绒蒿种子萌发效果更好,同一温度条件下萌发效果上贝利叶绿绒蒿＞贝利叶'Hensol Violet'＞贝利叶'Alba'.400 mg·L-1 GA3最有利于贝利叶绿绒蒿种子萌发,发芽率达到74.44％,比对照高出20％.     

青海地方核桃ISSR-PCR反应体系建立及优化

以青海地方核桃嫩叶为试材,采用正交设计对ISSR-PCR反应体系中主要影响因子进行了优化,以建立反应的最佳条件。结果表明:青海地方核桃20μL ISSR-PCR最佳反应体系为0.45 mmol·L~(-1) dNTP、0.5μmol·L~(-1)引物、1.75 mmol·L~(-1) Mg~(2+)、0.75 U Taq酶和80ng DNA。     

云南松ISSR-PCR反应体系建立及优化

为建立和优化云南松ISSR-PCR反应体系,运用正交实验分析了模板DNA、TagDNA聚合酶、引物、Mg~(2+)和dNTPs 5个因子对云南松ISSR-PCR反应的影响。结果表明:云南松ISSR-PCR 25μL反应体系中5个因子最佳水平为:DNA模板为3.6 ng、TagDNA聚合酶为2.0 U、引物浓度为0.8 mmol/L、dNTPs浓度为0.20 mmol/L、Mg~(2+)浓度为2.0 mmol/L。     

国兰ISSR-PCR反应体系的建立与优化

采用正交设计与单因素结合法,对国兰ISSR-PCR反应体系中的4个因素(dNTPs、引物浓度、Mg2+、Taq DNA聚合酶)进行优化试验,结果用DPS软件进行分析.结果表明:各因素对PCR结果均有显著影响,其中Taq DNA聚合酶对反应的影响最大;筛选出了各反应因素的最佳水平,建立国兰ISSR-PCR的最佳反应体系(25μL)为:dNTPs 0.2mmol/L、引物1.0 μmol/L、Mg2+2.5 mmol/L、Taq DNA聚合酶1U.     

桦褐孔菌ISSR-PCR反应体系优化与建立

采用改良CTAB法提取了桦褐孔菌总DNA,确定ISSR最适25 μL反应体系为模板DNA浓度15 ng·μL-1,dNTPs 浓度150 μmol· L-1,引物浓度25 μmol·L-1,Taq DNA聚合酶浓度2.0 U,Mg2+浓度1.4 mmol· L-1,10×buffer 2.5 μL,其余用ddH2O补足;确定ISSR扩增程序为:94℃预变性5 min,35个循环:94℃变性1 min、45℃～51℃退火1 min(退火温度因不同引物而定)、72℃延伸1 min,最后72℃延伸5 min,4℃保存.筛选出16条ISSR引物,并成功应用引物UBC842完成了21株桦褐孔菌的ISSR-PCR反应.     

锦带花ISSR-PCR反应体系的建立与优化

以锦带花幼叶为试材,提取锦带花基因组的DNA,并对其纯度、浓度进行检测,建立适合锦带花的ISSR-RCR反应体系.结果表明:DNA扩增效果良好,完全能满足进一步试验的需要.同时对锦带花ISSR-PCR反应体系中各个影响因素进行优化,建立了适合锦带花ISSR分子标记的最佳反应体系,即在20μL的反应体系中,含稀释浓度为3倍的DNA模板,0.20 mmol/LdNTP,稀释10倍体积高保真PCR缓冲液含(Mg2+)3.0 μL;1.00 μmol/L引物,1.25 U Taq酶.扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,52.0℃退火45 s,72℃延伸1.50 min,45个循环;最后72℃延伸5 min,4℃保存.应用该ISSR体系对3份锦带花种质进行了扩增,证实了该体系的适用性和稳定性.     

玉树地区独一味ISSR-PCR反应体系的建立与优化

为了建立玉树地区独一味的简单重复序列区间聚合酶链式反应(ISSR-PCR)体系并筛选出引物,采用M2+、DNA Taq酶、dNTP、模板DNA和引物进行5因素4水平正交实验,对独一味ISSR-PCR反应体系进行筛选.结果表明:最佳反应体系(25μL)为:10×PCR Buffer,75 ng模板DNA,0.75 μmol/L引物,0.5 UTaq DNA聚合酶,1.25 mmol/L MgCl2,0.05 mmol/LdNTP.然后确定了引物的最佳退火温度,并筛选出811、818、825、826、834、835、836、840这8条丰富多态稳定扩增的引物.该研究建立的玉树地区独一味ISSR反应体系具有稳定、清晰以及重复性好等特点,可为该区独一味的繁育系统和遗传多样性的进一步研究提供参考.     

石榴ISSR-PCR反应体系的正交设计优化

现利用正交设计L16(45)探讨DNA模板、Mg2+、dNTPs、引物、TaqDNA聚合酶对石榴ISSR-PCR反应体系的影响,首次应用加权平均法及百分制对正交实验结果进行评分,并应用DPS数据处理系统进行数据分析;同时对石榴ISSR-PCR最佳反应体系进行退火温度梯度试验。结果表明:适合石榴的ISSR-PCR最优反应体系(25μL)为:Mg2+1.75 mmol/L、dNTPs0.15 mmol/L、TaqDNA聚合酶1 U、引物0.8 mmol/L、DNA模板20 ng;引物UBC 811的最适退火温度为51.2℃,且最适退火温度因引物而异。     

正交设计优化莲藕ISSR-PCR反应体系研究

利用正交实验设计的方法,对莲藕ISSR-PCR反应的四因素(TaqDNA聚合酶浓度、dNTP浓度、引物浓度、Mg2+浓度)三水平进行优化分析,并在此基础上对模板DNA浓度、PCR反应过程中的退火温度进行梯度检测。结果表明:20μL的ISSR-PCR反应体系中各因素的最佳浓度为:10×PCRbuffer 2.0μL、dNTP150μmol/L、引物1.2μmol/L、Mg2+2.0 mmol/L和TaqDNA聚合酶4 U,最佳模板DNA浓度为40～60 ng,引物U826的最佳退火温度为48.7℃。     

茉莉花ISSR-PCR反应体系的建立

以茉莉花为材料,研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度对茉莉花ISSR扩增结果的影响.结果表明:在20μL的反应体中,Mg2 的用量为1.2～1.6 mmol/L,dNTPs 浓度为0.15 mmol/L,引物的浓度为0.5μmol/L,Taq DNA 聚合酶的用量为1U,模板DNA的用量为40～70 ng,在48～50℃的退火温度下40个循环,能得到清晰、多态性高的ISSR带谱.     

基于PAGE检测技术的平菇ISSR-PCR体系的建立和优化

以平菇"唐平26"基因组DNA为模板,以U836为引物,比较了琼脂糖凝胶电泳和不同浓度聚丙烯酰氨凝胶(PAGE)电泳对ISSR-PCR产物的分离效果,并且采用PAGE电泳技术对影响ISSR反应体系的主要因素进行优化。结果表明:以PAGE电泳技术检测平菇ISSR-PCR产物的效果最好,最佳ISSR-PCR反应体系为,在20μL反应体系中,模板20ng,Mg2+浓度为1.5mmol·L~(-1),引物0.8μmol·L~(-1),dNTPs 200μmol·L~(-1),Taq酶1.0U,30个扩增循环。