湖南省草莓灰霉病菌遗传多样性研究

为探明湖南省草莓灰霉病菌群体遗传结构、分化及变异规律,采用荧光标记技术对湖南省9个地理菌群的180株草莓灰霉病菌基因组DNA进行SSR分析。结果表明:9对SSR引物共检测到56个观察等位基因(Na),平均值为6.22;有效等位基因(Ne)为1.27~4.89,平均值为3.44;不同位点的基因多样性指数(H)为0.21~0.80,平均值为0.65;不同位点Shannon’s信息指数(I)为0.37~1.83,平均值为1.34。供试180株样品9个SSR多态性位点上多态性信息量PIC变化范围为0.13~0.91,不同位点PIC差异大,这一规律与I和H基本一致。不同SSR位点总的遗传多样性(Ht)为0.21~0.77,平均值为0.65;群内遗传多样性(Hs)为0.19~0.50,平均值为0.40;遗传分化系数(Gst)为0.10~0.46,平均值为0.37;基因流(Nm)为0.58~4.47,平均值为1.16。不同地理菌群平均观察等位基因(Na)、有效等位基因数目(Ne)分别为2.93和2.07,Shannon’s信息指数(I)平均为0.67,基因多样性指数(H)平均为0.40,平均多态性位点数(NP)、多态位点百分率(P)分别为6.78和75%。依据不同地理菌群之间的遗传距离(0.2797~1.9225),将供试湖南省9个地理菌群分为4大类:第Ⅰ大类主要由长沙、邵阳、岳阳、衡阳、张家界、湘潭种群组成;第Ⅱ大类主要由郴州种群组成;第Ⅲ大类主要由株洲种群组成;第Ⅳ大类由常德种群组成。总之,湖南省各地草莓灰霉病菌群体遗传多样性丰富,但地理群体间差异小,病菌遗传变异主要来自群体内部,不同地区间存在病菌的移动。     

草莓灰霉病的发生与防治

灰霉病菌广布世界各地,是世界各国草莓上的主要病害,是造成烂果的主要原因之一,国内一般减产1～3成,重者在5成以上。1症状在草莓上主要侵害蕾花、浆果及花果梗,尚可侵害叶及叶柄。     

草莓灰霉病菌及其生理特性的研究

草莓灰霉病是草莓的主要病害,严重者有60%以上的果实受害腐烂,造成产量大减。该病是由Bofrytis cinerea所致。经过病菌分生孢子在不同温度、湿度、营养及酸碱度下的萌发试验表明,最适温度为24～25℃,最适湿度为饱和湿度,最适营养为红果汁,pH6为最适宜。     

黄瓜灰霉病菌拮抗菌BBC-3的筛选、鉴定及抑菌特性

以黄瓜根际土壤为分离对象,采用稀释平板法分离到1株对黄瓜灰霉病抑菌作用明显的拮抗菌BBC-3,利用对峙培养法和平板扩散法对其抑菌特性进行鉴定。结果表明:经过形态特征、生理生化及16SrDNA序列分析,BBC-3鉴定为短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis);该菌具有广谱抗菌活性,对所选14种植物病原菌均有较强抑制作用。该菌产生的抗菌物质对高温、酸碱及光照稳定性强,对蛋白不敏感,常温和4℃储存6个月抑菌活性大于80%。     

抗草莓灰霉病的芽孢杆菌CM3的分离与筛选

以发病草莓根际土壤为分离对象,采用平板稀释法及平板对峙法,分离并鉴定抗草莓灰霉病的病原菌。结果表明:从土壤中分离到1株对草莓灰霉病具有明显抑菌作用的细菌,通过形态、生理生化特性分析以及16SrDNA序列同源性比较,鉴定该菌株为解淀粉芽孢杆菌,命名为CM3。菌株CM3的发酵产物对温度、酸碱度和紫外线均不敏感,储存多天后仍能保持抑菌活性。     

啶酰菌胺和咯菌腈复配对草莓灰霉病菌的室内毒力测定及田间防效

采用生长速率法测定了啶酰菌胺、咯菌腈及其复配物对草莓灰霉病菌的室内毒力,通过Wadley法进行增效作用评价,并验证了复配物对草莓灰霉病的田间防效。结果表明:啶酰菌胺和咯菌腈以质量比1∶1、5∶1、3∶1、2:1、3∶2复配对草莓灰霉病菌表现增效作用,以质量比1∶3、1∶4、1∶5、4∶1复配则表现相加作用。其中3∶1复配的增效作用最明显,增效系数为4.47,田间对草莓灰霉病的最佳防效可达74.40%。     

杀菌剂对草莓灰霉病菌的毒力测定及田间防效

以"甜查理"草莓为试材,草莓灰霉病菌(Botrytis cinerea)为供试菌,采用菌丝生长速率法,研究了12种杀菌剂对草莓灰霉病菌的影响。结果表明:室内毒力试验中,50g·L~(-1)己唑醇SC的毒力最强,EC_(50)值为0.051 9mg·L~(-1);500g·L~(-1)异菌脲SC、430g·L~(-1)戊唑醇SC和400g·L~(-1)氟硅唑EC对草莓灰霉病菌也有很好的抑制作用。田间试验中,50g·L~(-1)己唑醇SC对草莓灰霉病的防治效果最好,防治效果达81.57%~85.42%;500g·L~(-1)异菌脲SC、430g·L~(-1)戊唑醇SC和400g·L~(-1)氟硅唑EC对草莓灰霉病也具有较好的防治效果,防治效果均在74%以上;10%多抗霉素WP和3%中生菌素WP对草莓灰霉病也有一定的防治效果,防效均能达到65%以上。     

注意防治草莓灰霉病

草莓灰霉病又叫腐烂病,是草莓的主要病害,大棚和露地栽培均可发生,主要危害花器和果实,对产量和品质影响很大。我市浉河区、罗山县等地草莓种植面积较大,是当地主要的经济作物之一,植保部门近几年调查,灰霉病在部分草莓主栽区呈逐年加重发生趋势。因此,重视灰霉病防治对减少产量损失、提高果农的收入具有重要意义。     

草莓根腐病土壤拮抗放线菌的筛选

为获得草莓根腐病病原菌的拮抗放线菌,从草莓根围土壤中分离放线菌,采用平板对峙法筛选出了2株对草莓根腐病病原菌具有拮抗作用的生防放线菌.结果显示:同时对峙的平均抑菌直径分别是F3-8为20毫米、F2-2为17毫米;错时对峙的平均抑菌直径分别是F3-8为32毫米、F2-2为28毫米.     

草莓灰霉病的药剂防治

草莓灰霉病是露地和保护地草毒栽培的最重要病害。此病由灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea Pers）寄生所致,主要浸染花器危害果实,严重时还会危害果柄、花梗和整个花序。果实发病多从果实基部近萼处开始,发病初期果实表面呈水渍状,逐渐变褐果实腐烂,当环境潮湿烂果表面还可形成灰白色霉层。 一、材料与方法 （一）供试药剂:50 ％农利灵可湿性粉剂,由巴斯夫公司提供。 （二）试验方法:试验选在上海郊区主要草莓生产区青浦县,供试品种为宝交早生,是当前上海地区主栽品种。试验地前茬为水稻,栽培方式为地膜     

马铃薯早疫病拮抗菌的筛选及其代谢产物的抑菌活性

以马铃薯早疫病病原菌茄链格孢菌(Alternaria solani)为指示菌,通过平板对峙法,筛选出菌株及其发酵滤液对马铃薯早疫病病原菌均具有较强拮抗作用的生防菌株BAF-6;通过形态特征、生理生化特性鉴定以及16S r DNA序列分析,该菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。菌株发酵滤液经60~80℃热处理,抑菌活性均在95%以上;紫外线照射8 h或在p H值为2~10的酸碱环境下,发酵滤液的抑菌活性稳定;经蛋白酶处理后抑菌活性仍达50%以上。     

一株黄瓜枯萎病拮抗菌的鉴定及发酵培养基的优化

采用形态观察和生理生化特性检测方法,结合16SrRNA基因序列分析,将一株黄瓜枯萎病拮抗菌株KC24鉴定为类芽孢杆菌,并对其进行了抑菌谱测试。结果表明:KC24能拮抗多种植物病原菌,具有广谱抗菌活性,利用响应面法对其产芽孢发酵培养基进行了优化,优化后的发酵液中芽孢数量达13.5×108 cfu·mL~(-1),比优化前提高了107.7%。最优产孢培养基配方为玉米粉20g,豆粕5g,KNO_32.0g,KH_2PO_4 2.59g,NaCl 1.0g,(NH_4)_2SO_4 2.04g,Fe_SO_40.009 1g,MgSO_4·7H_2O 1g,H_2O 1L,pH 7.0。     

番茄灰霉病拮抗细菌的分离筛选及鉴定

以番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)为供试菌,采用平板对峙方法,研究了不同植物根围土壤中的细菌对番茄灰霉病(Botrytis cinerea)的拮抗效果。结果表明:对分离纯化的75株细菌进行拮抗测定,其中30株对番茄灰霉病有不同程度抑制作用,分离频率为40.00%。其中3株拮抗细菌YM8、FQ10、FQ11对番茄灰霉病病原菌拮抗效果较好,抑菌圈直径在1.5~3.0cm。通过生理生化试验、形态特征观察对其进行了种属初步鉴定,鉴定结果为菌株YM8为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis),FQ10为短芽孢杆菌(Bacillus brevis),FQ11为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)。     

一株链霉菌发酵液的杀虫活性及稳定性研究

从土壤中分离得到一株放线菌菌株,分别以叶片夹毒法和玻片浸渍法检测该菌株发酵液对小菜蛾和二斑叶螨的杀虫活性,48 h后校正死亡率分别为71.7%和56%.通过对发酵液稳定性的初步研究,结果表明:发酵液中的活性物质在60℃以下、偏酸性条件下比较稳定.是一株值得深入研究的杀虫抗生素生产菌株.     

一株侵染草莓的落叶松葡萄座腔菌的分离鉴定及拮抗菌筛选

以患根腐病的草莓植株为试材,采用组织分离法获得了一株菌株,通过分子生物学技术对该菌株进行鉴定,并测定了其菌丝生长的最佳条件;同时,通过平板对峙法研究了解淀粉芽孢杆菌Y-48、Lh-1和CM3对此病原菌的抑制作用,以期为根腐病病原菌分离及生防菌株筛选等提供参考依据。结果表明:通过18S rDNA序列分析鉴定,菌株BL2016-6为落叶松葡萄座腔菌;菌株BL2016-6生长的适合温度为20~30℃,25℃为最适温度,菌丝由白色变为灰色,最终变成黑色,菌株致死条件为为70℃,处理20min;解淀粉芽孢杆菌Y-48、Lh-1和CM3均对此病原菌有抑制作用,抑菌率分别为64.6%、62.2%和57.9%。     

放线菌对番茄灰霉病和早疫病的拮抗作用研究

在室内对峙培养的基础上,对接种放线菌F的盆栽番茄植株接种早疫病A1、灰霉病菌B1进行田间抗性鉴定.结果表明:F菌株对2种靶标真菌均有一定的抑制作用.接种F A1、F B1的番茄植株,病情指数要明显低于对照,差异极显著.接种放线茵表现为不同程度的发病症状,且生长势差.接种生防菌真菌F对番茄PPO、POD具有一定诱导作用,在"放线菌-病原菌"双菌体系中对番茄叶片MDA含量有明显的抑制作用,双茵处理的番茄叶片、茎MDA含量明显低于单接番茄病原菌处理.     

哈茨木霉对设施草莓灰霉病的防治效果

以草莓品种"红颜"为试材,通过田间试验研究了3×10~8 CFU·g~(-1)哈茨木霉菌可湿性粉剂对草莓灰霉病的防治效果。结果表明:3×108 CFU·g~(-1)哈茨木霉菌可湿性粉剂每667m~2施药量100~150g,对设施种植草莓灰霉病的防效最高可达75%左右。哈茨木霉可以用于防治草莓灰霉病,在草莓坐果期开始施药,每667m~2每次施药量100g,可取得较好的防治病害效果。     

拮抗蔬菜土传病害木霉菌株的筛选及鉴定

以分离获得的87个木霉菌株为试材,采用平板对峙法初筛获得8个拮抗效果较好的菌株,通过测定并分析其生长速度、产孢量及耐性等指标,研究了不同菌株对蔬菜土传病害的拮抗作用。结果表明:获得的高效拮抗木霉菌株Tr-20对温度、酸碱度和多菌灵耐性强,生长速度达2.26cm·d~(-1),产孢量为5.3×10~9个,对立枯丝核菌抑菌率达63.50%。通过ITS同源性比对分析,鉴定为哈茨木霉。     

芝麻立枯病拮抗菌的筛选方案优化

通过对峙培养法,利用PDA、KBM和MYG等3种培养基分别测定399株内生细菌对立枯丝核菌的拮抗作用.结果表明:在3种培养基上均表现出一定拮抗作用的菌株95株,拮抗率为23％.温室条件下测定399株内生细菌对芝麻立枯病的生防效果,共筛选到25株茵可有效降低芝麻立枯病发病率和严重度.优化后的筛选方案为:首先利用3种培养基对内生细菌的拮抗性进行体外初筛,选择3种培养基上均有拮抗性的菌株为目标菌株(95株),再将初筛的拮抗性菌株进行体内复筛,选择可有效降低芝麻立枯病发病率和严重度的生防菌株(22株).     

草莓根腐病菌拮抗细菌的分离与鉴定

 采用平板对峙法,从分离自土壤的436株细菌菌株中筛选对草莓根腐病菌——尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）具有拮抗作用的细菌,得到了3株稳定性好,具有较高拮抗活性的菌株w-25、w-79和w-181。拮抗菌w-25对尖孢镰刀菌的抑菌带达到11.0 mm,w-79和w-181的抑菌带分别达到5.4和6.4 mm。此外,3株拮抗菌对草莓灰霉病菌（Botrytis cinerea）、草莓红中柱致病菌（Fragria ananassa）和草莓胶孢炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）等具有很强的拮抗作用。经过对3株菌株形态观察、理化分析和分子鉴定,认为w-25可能为荧光假单孢菌（Pseudomonas fluorescens）,w-181和w-79可能为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。研究表明3株拮抗菌对致病菌生长有较好的抑制作用,显微观察发现拮抗菌代谢产物会破坏致病菌菌丝形态,电镜观察发现致病菌细胞器溶解,细胞内液泡变大。