一株寒地高效解无机磷细菌发酵条件优化

为了探究解无机磷细菌B51-7最佳发酵培养条件,以发酵液初始pH、碳源、氮源和培养温度为研究对象,以钼蓝比色法测定发酵液中可溶性磷含量为评价指标,通过单因素试验和正交实验确定其发酵条件的最佳组合。结果表明:初始pH 4.5、30℃、10 g·L~(-1)葡萄糖、0.1 g·L~(-1)蛋白胨培养条件下,菌株B51-7发酵液中可溶性磷含量最高;菌株B51-7解磷能力的最优发酵条件组合为初始pH 4.0,葡萄糖12 g·L~(-1),蛋白胨0.05 g·L~(-1),温度30℃。该研究为菌株B51-7解磷能力的掌握以及其在微生物磷肥的开发与利用提供了重要的参考依据。     

拮抗细菌菌株YJ15的分离鉴定、发酵条件优化及对越橘灰霉病的防效

从越橘(Vaccinium spp.)健康果实中分离获得65株内生细菌,采用琼脂平板扩散法筛选出1株对灰葡萄孢具有高拮抗作用的菌株YJ15,经形态特征观察、生理生化测定和16S rRNA序列分析,鉴定该菌株为暹罗芽胞杆菌(Bacillus siamensis)。在单因素试验的基础上,通过Plackett-Burman设计筛选出3个发酵重要因素(温度、pH和氮源)。利用最陡爬坡试验和响应面分析对菌株YJ15的发酵条件进行优化,获得最优发酵条件为葡萄糖20 g·L~(-1),酵母粉36.01 g·L~(-1),FeSO4 1.5 g·L~(-1),甘油1 g·L~(-1),K2HPO41.5 g·L~(-1),接种量1 mL,摇床转速150 r·min-1,温度31.35℃,pH 7.43,培养时间15 h。采用生长速率法测定菌株YJ15的发酵液对9种病原真菌均有抑制作用,抑菌率在43.42%～92.39%之间。菌株YJ15发酵液处理越橘果实后,灰霉病的发病率和病斑直径均明显小于对照,与多菌灵防效差异不显著,可用于越橘灰霉病的防治。     

柑橘果酒富硒酵母的选育及其富硒条件优化

以柑橘果汁为自然发酵原料,结合有机硒含量及感官评价结果,采用亚硒酸钠抗性平板筛选与紫外诱变的方法,选育得到一株富硒能力较强的酵母菌B1,通过单因素分析的方法对该富硒酵母的发酵条件进行优化。结果表明:酵母菌B1富硒发酵最适亚硒酸钠浓度为75μg·mL~(-1),在此最佳硒浓度下,当菌株接种量为5%,发酵液初始pH为4.4,在装液量为80%的摇瓶(250mL)中32℃发酵3d后,其总硒含量可达4 756.76μg·L~(-1),同时该菌株的生物量可高达2.57g·L~(-1)。     

不同发酵条件对苹果轮纹病拮抗细菌生长的影响

对1株苹果轮纹病细菌No.1菌株的发酵条件进行了探索,确定了其最佳培养基组成及培养条件。单因素发酵试验和正交试验结果表明,在含酵母浸膏5g、蔗糖20g、蛋白胨10g的1000mL液体培养基中,菌体生长量最大;细菌生长所需的最佳碳源为淀粉,最佳氮源为酵母浸膏和蛋白胨;当温度为28℃,pH7.0,在250mL三角瓶中装40mL液体培养基,接种量体积分数为5%,培养时间96h时,菌体生长量最大;在酸性条件下(pH4),细菌几乎不生长。     

梨矮化砧木'青砧D3'叶片高效再生体系的构建

以梨矮化砧木'青砧D3'为试材,进行了离体叶片组织培养高效再生体系的构建。结果表明:TDZ和IBA均可以促进'青砧D3'离体叶片不定芽的诱导,但TDZ效果更显著,其诱导效果和TDZ的浓度成正比,研究发现'青砧D3'离体叶片不定芽再生最佳培养基为NN69+TDZ 3.0 mg·L~(-1)+IBA 0.3 mg·L~(-1)+琼脂7 g·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1),再生率与再生芽数分别为100.00%和7.69;IBA对'青砧D3'不定根的诱导优于NAA,不定根再生最佳培养基为1/2MS+IBA 0.2 mg·L~(-1)+琼脂7 g·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1),根诱导率达到100%。该研究的开展为梨矮化砧木'青砧D3'的工厂化育苗奠定了基础。     

萝芙木内生真菌的分离及发酵产物抑菌活性的研究

从萝芙木的果实中分离得到5株内生真菌:LG-A、LG-B、LG-C、LG-D与LG-E,以5株内生真菌为试验材料,采用微量滤纸片法,研究了5株内生真菌发酵乙醇粗提物对苹果腐烂病菌、苹果轮纹病菌与苹果果实链格孢菌的抑菌活性,以期筛选出具有农用抗植物病原真菌的活性菌株。并采用菌丝生长速率法,进一步测定了菌株LG-B与LG-D乙醇粗提物的不同溶剂萃取物的抑菌活性。结果表明:菌株LG-B与LG-D对3种苹果病原真菌均有明显的抑制作用。LG-B与LG-D发酵产物的乙酸乙酯萃取物抑菌活性较好,菌株LG-B对苹果腐烂病菌的EC50仅为16.2mg·L~(-1),LG-D对苹果腐烂病菌与苹果轮纹病菌的EC50分别为21.0mg·L~(-1)和52.8mg·L~(-1)。     

核桃花粉萌发适宜培养基的筛选

以早实核桃品种"绿岭"和"绿波"花粉为试材,采用离体培养方法,研究了培养基中不同比例蔗糖、硼酸、氯化钙对花粉萌发的影响,以明确核桃花粉萌发的适宜条件,为核桃花粉萌发找到适宜的培养基提供参考依据。结果表明:"绿岭"和"绿波"核桃花粉在蔗糖浓度为160g·L~(-1)时的发芽率最高,分别为48.09%和57.23%;"绿岭"和"绿波"花粉萌发最适宜的硼酸浓度分别为0.10、0.07g·L~(-1);2个品种的花粉萌发最适宜的氯化钙浓度为0.20g·L~(-1)。适宜"绿岭"核桃花粉萌发的最佳培养基为蔗糖160g·L~(-1)、硼酸0.10g·L~(-1)、氯化钙0.20g·L~(-1),在此培养基下"绿岭"核桃花粉萌发率达到61.06%;适宜"绿波"核桃花粉萌发的最佳培养基为蔗糖160g·L~(-1)、硼酸0.07g·L~(-1)、氯化钙0.20g·L~(-1),在此培养基下"绿波"核桃花粉萌发率为72.71%。     

吲哚乙酸(IAA)对黑脉羊肚菌胞外SOD活性的影响

为了优化液体发酵环境条件,通过向培养基中添加吲哚乙酸(IAA),改变培养基成分组成的方法,研究吲哚乙酸对黑脉羊肚菌发酵培养产胞外SOD酶以及菌丝体生长的影响。结果表明,黑脉羊肚菌发酵培养过程中,最适菌丝体生长的培养条件为温度28℃,初始p H7,培养时间9 d;最适产酶的培养条件为温度20℃,初始p H5.5,培养时间5 d;IAA添加浓度为1.0μg·m L~(-1)时,菌丝体重量最大为14.03 g·L~(-1),浓度为2.5μg·m L~(-1)时,相对酶活性达到最高。     

蛹虫草深层发酵产虫草素培养基的优化

以蛹虫草(Cordyceps militaris(L.)Link)NS-810为菌种,通过对接种量的考察,探索不同孢子浓度对蛹虫草液体一级种制作效果的影响;通过单次单因子试验和正交实验,优化深层发酵产虫草素的最佳培养基,筛选制备蛹虫草液体一级种和液体发酵生产虫草素的最佳工艺。结果表明:孢子浓度3.0×10~8 cfu·mL~(-1)时制作的母种最适合作为蛹虫草菌种扩大培养中的一级种子液;深层发酵的最佳培养基配方为葡萄糖25g·L~(-1)、土豆100g·L~(-1)、鱼蛋白胨18g·L~(-1)、(NH_4)_2SO_40.8g·L~(-1)、KH_2PO_41.0g·L~(-1)、MgSO_4·7H_2O 0.5g·L~(-1)、蚕蛹粉5.0g·L~(-1)、维生素B118mg·L~(-1)、水1L。优化后虫草素的总产量为1 144.31mg·L~(-1),较基础培养基提高了1.46倍。分别以价格低廉葡萄糖和鱼蛋白胨作为发酵培养基的碳源和有机氮源,利于蛹虫草产业化发酵生产虫草素。     

野生猕猴桃同源四倍体诱导

以河南省平顶山市伏牛山区野生猕猴桃为试材,采用秋水仙碱诱导离体叶片体细胞染色体加倍的方法,研究了不同预培养时间以及不同秋水仙碱浓度对四倍体诱导效率的影响,以期获得野生猕猴桃同源四倍体诱导的最佳条件。结果表明:猕猴桃叶片不定芽诱导的最适培养基为MS+3.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.2 mg·L~(-1) NAA,叶片分化率可达88.00%;不定芽生根的最适培养基为1/2 MS+1.0 mg·L~(-1) IBA,生根率可达86.67%。四倍体诱导最佳处理组合为预培养3 d的离体叶片在含有50 mg·L~(-1)的秋水仙碱培养基中浸泡72 h,四倍体植株诱导率最高为18.52%,共获得19个四倍体植株,继代培养3次后进行倍性检测,其倍性水平仍保持稳定。