复合酶提取灵芝多糖工艺及其抗氧化能力研究

[目的]获得复合酶提取灵芝多糖的最佳工艺,探讨灵芝多糖的体外抗氧化能力。[方法]以多糖提取率为指标,在单因素试验的基础上,采用正交试验对复合酶用量配比、酶解条件进行优化;采用清除1,1-二苯基苦基苯肼（DPPH）自由基模型评价灵芝多糖的体外抗氧化能力。[结果]复合酶提取优于单酶提取,酶用量最佳配比为纤维素酶1.5%、木瓜蛋白酶0.8%、菠萝蛋白酶3.5%（质量分数,相对于底物浓度）;最佳酶解条件为pH5.5,温度50℃、酶解时间为100 min。复合酶提取的灵芝多糖具有良好的清除DPPH自由基作用,其清除能力优于水提灵芝多糖（P〈0.01）,且在浓度0.8～4.8 mg/ml范围内,其对DPPH自由基的清除率随浓度增大而增大。[结论]该研究为灵芝多糖的开发提供了科学依据。     

可口革囊星虫多糖酶法—碱梯次提取工艺优化及其抗氧化和抑菌性能分析

【目的】优化可口革囊星虫多糖酶法—碱梯次提取工艺,并分析两阶段提取多糖的体外抗氧化和抑菌活性,为可口革囊星虫酶解产物及不溶性虫体成分的梯次化加工利用提供参考依据。【方法】以新鲜可口革囊星虫为材料、多糖提取率为考察指标,经木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶处理,联合酶解和滤渣碱提工艺,两阶段梯次化提取多糖,并测定可口革囊星虫多糖对DPPH自由基和羟基自由基(·OH)的清除率,采用纸片法测定其抑菌性能。【结果】可口革囊星虫多糖酶法—碱梯次提取最佳工艺为:复合酶(木瓜蛋白酶∶碱性蛋白酶=1∶2)添加量4.0%、酶解温度55℃、酶解时间4 h、料液比1∶5(g/mL)、滤渣碱提时间2.0 h、氢氧化钠浓度1.5%,在此条件下,获得酶解多糖提取率为1.076%,滤渣碱提多糖提取率为0.171%,总多糖提取率为1.247%。酶提多糖和滤渣碱提多糖对·OH清除的半抑制浓度(IC50)分别为2.6和4.9 mg/mL,清除DPPH自由基的IC50分别为4.4和5.1 mg/mL。酶提多糖和碱提多糖在1.560 mg/mL以上对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌均有一定的抑制作用。【结论】采用优化的酶法—碱梯次提取工艺可从可口革囊星虫酶解液和滤渣中有效提取多糖,且两种多糖均具有较强的抗氧化活性和抑菌作用。     

南苜蓿叶总黄酮提取及抑菌抗氧化活性

以南苜蓿为原料,通过复合酶解协同乙醇法提取其叶片中的总黄酮。采用响应面分析法优化其最佳提取工艺,进一步考察南苜蓿叶总黄酮对大肠杆菌(Escherichia coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抑制性能,再通过对羟基自由基的清除能力、DPPH自由基的清除能力测定其抗氧化性能。结果表明最佳提取工艺为:复合酶用量3.0%,酶解时间15.7 min,酶解温度39.0℃。在此条件下,南苜蓿叶总黄酮得率达到(1.9±0.3)%。抑菌试验结果表明,南苜蓿叶总黄酮对大肠杆菌ATCC 25922最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,简称MIC)为0.15 mg/mL,对金黄色葡萄球菌ATCC 25923 MIC为0.20 mg/mL。南苜蓿叶总黄酮对羟基自由基和DPPH均表现出一定的清除能力,当样品浓度为1.0 mg/mL时,清除率分别为54.75%、88.48%,对DPPH自由基、羟自由基半数抑制浓度IC_(50)分别为0.368、0.947 mg/mL。     

酶解法提取大高良姜多糖工艺优化及抗氧化活性分析

[目的]优化酶解法提取大高良姜多糖工艺,并分析其抗氧化活性,为大高良姜多糖的有效利用提供技术支持.[方法]以多糖提取率为评价指标,在单因素试验的基础上,采用Plackett-Burman(PB)试验法对影响大高良姜多糖提取率的5个因素进行筛选;根据PB试验结果,选取3个主要影响因素,通过Box-Behnken响应面试验对提取工艺进行优化,确定最佳工艺条件;同时测定大高良姜多糖对DPPH和ABTS自由基的清除率.[结果]酶解法提取大高良姜多糖最佳工艺条件:料液比1:24、pH 6.0、酶解时间50.5 min、酶解温度44℃、酶用量2%,在此条件下多糖提取率为13.53%.与传统热水浸提法比较,酶解法提取时间缩短72.0%,提取率提高24.1%.大高良姜多糖对DPPH和ABTS自由基均有较强的清除能力,其半数有效质量浓度(IC50)分别为2.21 mg/mL和2.15 g/mL.[结论]响应面试验模型能较好优化酶解法提取大高良姜多糖工艺,优化后的工艺具有操作简单、省时高效、无毒环保等优点,提取得到的多糖有较强的抗氧化能力,可为后续开发利用大高良姜提供技术支持.     

青叶胆多酚复合酶协同超声辅助提取工艺及抗氧化性研究

为确定复合酶协同超声辅助提取青叶胆多酚Swertia mileens polyphenols(SMP)的最佳工艺及其抗氧化活性，以青叶胆为材料，设计复合酶协同超声辅助提取工艺单因素试验，筛选影响显著因素，再利用Box-Benhnken中心组合设计响应面试验，确定最优工艺，并通过测定SMP对DPPH自由基(DPPH·)和亚硝酸根离子(NO₂^-)的清除能力来评价其抗氧化性。结果表明：复合酶协同超声辅助提取SMP最佳工艺条件为酶解温度40℃，酶解时间50 min，液料比35∶1 mL·g^-1，乙醇体积分数63%，超声功率300 W，复合酶用量6%(木瓜酶用量5%，纤维素酶用量1%，以青叶胆干粉质量为基准，下同)，在此条件下SMP提取量为17.50 mg·g-1;SMP对DPPH自由基、亚硝酸根离子有较强的清除能力，且随着多酚质量浓度的增大，清除能力增强；SMP质量浓度为0.007 mg·mL^-1时，对DPPH自由基和亚硝酸根离子清除率分别为80.3%和92.3%。响应面法优化的复合酶协同超声辅助提取青叶胆...     

复合酶法提取金银花多糖及其抗氧化性

本文旨在优化金银花多糖的复合酶法提取工艺,并评价金银花多糖的抗氧化活性。以不同复合酶(纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶)配比、液料比、pH、酶解温度、酶解时间为试验因素,以金银花多糖得率为考察指标,正交试验筛选复合酶法提取的最佳工艺条件;采用自由基清除能力体系评价金银花多糖的抗氧化活性。结果表明,复合酶最佳配比为纤维素酶2.0%,果胶酶2.0%,木瓜蛋白酶0.5%;复合酶酶解金银花提取多糖的工艺条件为液料比25:1(m L/g)、pH为4.5、酶解温度50℃、酶解时间60 min,在此条件下金银花多糖得率为12.36%;金银花多糖具有较强的抗氧化活性,对DPPH和O2-·自由基的半数抑制浓度分别为0.811 mg/m L、1.363 mg/m L,但与维生素C比较,抗氧化活性较弱。金银花多糖提取工艺方便可行,得率较高,提取到的多糖具有较强的抗氧化活性。     

超声波协同酶法提取黄山贡菊总黄酮及其抗氧化活性

[目的]黄山贡菊总黄酮(total flavonoids from Huangshan Gongju,HGTF)提取工艺优化和抗氧化活性测定。[方法]以HGTF提取率为指标,采用单因素和正交试验优化超声波协同酶法提取HGTF工艺。通过自由基清除试验评价HGTF的抗氧化活性。[结果]HGTF的最佳提取条件为酶解时间20 min、复合酶质量分数0.1%、纤维素酶和果胶酶配比1∶1、乙醇浓度60%、料液比1∶20(g∶mL)、超声时间40 min、超声功率280 W、超声温度50℃,HGTF提取率为2.78%。抗氧化活性试验结果表明,HGTF溶液对DPPH·、·OH和O₂·^-的清除率较高,分别为90.47%(0.05 mg/mL)、73.44%(0.10 mg/mL)和78.73%(0.10 mg/mL)。[结论]复合酶解后超声波提取HGTF条件温和、提取率高。该研究为HGTF的应用提供参考依据。     

玛咖多糖提取工艺的优化及其抗氧化活性

为了更好地开发和利用云南地区的功能食品玛咖,选取玛咖多糖作为研究对象,在单因素试验基础上设置响应面优化试验对玛咖多糖提取工艺进行优化以提高玛咖多糖提取效率,并测定玛咖多糖的抗氧化性强弱,评价玛咖多糖的活性价值;采用Sephadex G-100凝胶层析纯化玛咖多糖,用去离子水进行洗脱(洗脱速度为1mL/min),通过多糖对羟自由基、DPPH自由基、ABTS自由基的清除效率研究玛咖多糖的抗氧化性作用。结果表明:在液料比59mL/g、浸提温度82℃、提取时间157min的条件下,玛咖多糖的提取率为9.60%。对纯度为65.6%的玛咖粗多糖进行纯化,得到纯度为90.7%的纯化多糖。当粗多糖和纯多糖浓度为6mg/mL时,对羟自由基和DPPH自由基的清除率达到最大,分别为63.9%、46.5%和72.8%、81.7%;粗多糖浓度为5mg/mL时,对ABTS自由基清除率达到最大,为61.4%;纯多糖浓度为8mg/mL时,对ABTS自由基的清除率最大,为83.8%。     

矮冷水花多糖提取工艺及其抗氧化活性研究

采用水提醇沉法提取矮冷水花多糖,以多糖得率为指标,考察提取时间、提取温度、料液比及提取次数对多糖提取率的影响,在单因素试验基础上采用正交试验优化提取工艺参数。通过测定矮冷水花多糖清除·OH自由基能力,1,1-二苯基-2-苦基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基及螯合力来评价其抗氧化活性。结果表明,矮冷水花多糖水提取的最佳工艺条件为提取温度100℃、提取时间4 h、料液比1∶40(g/m L)、提取次数4次,在该条件下,矮冷水花多糖的提取率为1.19%,以正交试验极差分析得出温度对矮冷水花粗多糖提取影响最大。矮冷水花多糖清除DPPH自由基、·OH自由基及金属螯合力均随多糖浓度的增加而上升;1.28 mg/m L的多糖对DPPH自由基的清除率达70.7%,对羟基自由基的清除率为41.1%,1.28 mg/m L多糖的金属螯合力在562 nm下吸光值为0.98。因此,矮冷水花多糖有较强的抗氧化能力。     

银杏叶渣中多糖和黄酮的综合提取及其抗氧化活性研究

以银杏叶渣为原料,分别采用水提醇沉法和复合酶辅助醇水溶剂提取法获取银杏叶渣多糖和总黄酮;通过DPPH自由基、ABTS⁺自由基、羟自由基清除试验考查其体外抗氧化活性。结果显示,银杏叶渣与纯水1∶9,85℃提取3 h,其粗多糖得率为17.90%,多糖提取率达3.03%。提取多糖后的银杏叶渣,添加β-葡萄糖甘酶、纤维素酶与果胶酶(1∶1∶2)复合酶,添加量为8.0%,p H值为5,50℃酶解2.5 h,之后在80%乙醇、料液比1∶8、80℃条件下提取4 h,银杏叶渣总黄酮提取率0.59‰,3种游离苷元(槲皮素、山奈酚、异鼠李素)提取率0.93‰,与仅用80%乙醇提取的银杏叶渣总黄酮相比,其总黄酮提取率增加126.9%,游离苷元提取率增长102.2%。3.0 mg/m L多糖对DPPH自由基、ABTS⁺自由基、羟自由基清除率分别为67.59%、52.56%、56.47%;复合酶辅助醇水溶剂提取法提取的银杏叶渣总黄酮对3种自由基IC₅₀值分别为0.63、1.08、0.35 mg/m L,与溶剂提取法所得银杏叶渣总黄酮IC_...     

林蛙卵多糖的提取工艺及其抗氧化作用研究

【目的】研究木瓜蛋白酶解法提取林蛙卵多糖的最佳工艺,测定提取的林蛙卵多糖的抗氧化活性。【方法】以林蛙卵为材料,通过单因素试验和正交试验分析料(g)液(mL)比、木瓜蛋白酶加酶量、pH值和酶解时间对多糖提取率的影响,确定林蛙卵多糖的木瓜蛋白酶法最佳提取工艺;应用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法测定林蛙卵多糖的抗氧化活性。【结果】木瓜蛋白酶提取林蛙卵多糖的最佳条件为:料(g)液(mL)比1∶20,酶添加量为每g样品70mg,pH 6.0,酶解时间2.5h,在此条件下,林蛙卵多糖提取率为2.67%。林蛙卵多糖对DPPH自由基的半数清除率为1.81mg/mL。【结论】木瓜蛋白酶法对林蛙卵多糖的提取效果较好,林蛙卵多糖具有明显的抗氧化作用。     

复合酶制备抗氧化活性核桃多肽工艺优化

以碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶复合水解核桃蛋白制备抗氧化活性多肽的工艺条件优化为对象,通过研究酶解时间、酶解温度、酶与底物浓度比及复合酶比例对核桃蛋白酶解物清除DPPH·能力的影响,并利用正交试验优化工艺条件,以提高核桃蛋白多肽对DPPH·的清除率。结果表明,酶解时间、酶解温度、酶与底物浓度比及复合酶比例对核桃蛋白酶解物清除DPPH·能力有一定影响;当木瓜蛋白酶与碱性蛋白酶复合酶解温度为45℃、时间1.5h、酶与底物浓度1500U/g、pH值7.0、复合酶比例为2∶1时,酶解物清除DPPH·的能力最强,清除率达78.7%。     

响应面法优化糯高粱多糖提取工艺及其抗氧化活性分析

[目的]优化糯高粱多糖提取工艺,并分析其抗氧化活性,为糯高粱食品开发利用提供理论依据.[方法]以国窖红1号糯高粱籽粒为材料,在单因素试验的基础上,采用响应面法优化其多糖提取工艺,并测定所提取多糖清除DPPH自由基和羟基自由基的能力.[结果]建立了料液比(X1)、微波功率(X2)和提取时间(X3)与糯高粱多糖提取率(Y)的回归模拟方程:Y=6.43277+0.26425X1+0.89398X2+0.35226X3-0.09537X1X2-0.14083X1X3-0.10898X2X3-1.39713X12-1.35532X22-0.26889X32,回归方程模型极显著(P<0.01),R2=0.999885,方程拟合程度高.糯高粱多糖提取的最佳工艺条件为:料液比1:400、微波功率480 W、提取时间110 s,在此条件下,得到多糖平均值为6.48%,与预测值(6.68%)相对误差为2.91%.糯高粱多糖的DPPH自由基清除率随多糖质量浓度的增加先增后减,多糖质量浓度为0.4 mg/mL时,清除率最高达54.38%,低于对照2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)的清除率;羟基自由基清除率随多糖质量浓度的增加而增加,多糖质量浓度为0.10 mg/mL时达最大值(94.70%),高于相同质量浓度对照BHT的清除率.[结论]采用响应面法优化的工艺条件可用于糯高粱多糖提取,且糯高粱多糖具有较强的抗氧化活性,可用于健康食品开发.     

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为了更好地开发和利用云南地区的功能食品玛咖,选取玛咖多糖作为研究对象,在单因素试验基础上设置响应面优化试验对玛咖多糖提取工艺进行优化以提高玛咖多糖提取效率,并测定玛咖多糖的抗氧化性强弱,评价玛咖多糖的活性价值;采用SephadexG-100凝胶层析纯化玛咖多糖,用去离子水进行洗脱(洗脱速度为1 mL/min),通过多糖对羟自由基、DPPH自由基、ABTS自由基的清除效率研究玛咖多糖的抗氧化性作用.结果表明:在液料比59 mL/g、浸提温度82℃、提取时间157 min的条件下,玛咖多糖的提取率为9.60％.对纯度为65.6％的玛咖粗多糖进行纯化,得到纯度为90.7％的纯化多糖.当粗多糖和纯多糖浓度为6 mg/mL时,对羟自由基和DPPH自由基的清除率达到最大,分别为63.9％、46.5％和72.8％、81.7％;粗多糖浓度为5 mg/mL时,对ABTS自由基清除率达到最大,为61.4％;纯多糖浓度为8 mg/mL时,对ABTS自由基的清除率最大,为83.8％.     

雪胆多糖提取工艺优化及其抗氧化活性分析

[目的]优化雪胆水溶性和水不溶性多糖提取工艺,并分析其抗氧化活性,为雪胆多糖的开发利用提供参考依据.[方法]采用热水浸提法提取雪胆水溶性多糖、碱液浸提法提取雪胆水不溶性多糖,以多糖提取率为考察指标,通过单因素试验和正交试验优化2种雪胆多糖的提取工艺条件,同时测定雪胆多糖清除羟基自由基(·OH)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和超氧阴离子(O-2·)的能力及还原能力.[结果]影响热水浸提雪胆水溶性多糖的因素排序为提取温度>料液比>提取时间,最佳提取工艺条件为:料液比1:16、提取温度80℃、提取时间2.0 h,在此条件下,雪胆水溶性多糖提取率为(28.70±0.63)%;影响碱液浸提雪胆水不溶性多糖的因素排序为料液比>提取温度>提取时间,最佳提取条件为:料液比1:18、提取温度70℃、提取时间2.0 h,在此条件下,雪胆水不溶性多糖提取率为(31.43±0.42)%.雪胆水溶性多糖和水不溶性多糖对·OH和DPPH自由基均有较好的清除效果,2种雪胆多糖质量浓度为0.5 mg/mL时,对DPPH自由基的清除率在50.00%以上,质量浓度为0.1 mg/mL时,对·OH的清除率在50.00%以上;此外,2种多糖具有良好的还原能力和清除O-2·能力,均随多糖质量浓度的增加而增强.[结论]采用正交试验优化获得雪胆水溶性多糖热水浸提工艺和雪胆水不溶性多糖碱液浸提工艺,提取操作简便,方法可行,提取的2种多糖均具有较强的抗氧化活性,可作为天然抗氧化资源加以利用.     

红毛七多糖体外抗氧化活性研究

测定了红毛七多糖对DPPH、O-2·、·OH、亚硝酸盐的清除作用.结果表明,红毛七多糖对DPPH、O-2 ·、·OH、亚硝酸盐具有较强的清除能力.当多糖浓度为4.0 mg/mL时,对DPPH清除率接近80%,对O-2 ·的清除率达78.1%,对·OH的清除率达96.6%,对NO2-的清除率达85.1%.     

杏叶总黄酮提取工艺及抗氧化性研究

以杏叶为材料,在单因素试验的基础上,用正交试验的方法优化醇提法的提取工艺,得到最佳提取条件为:料液比1∶40(g/mL),温度60℃,提取时间6 h,乙醇体积分数30%。在此条件下,杏叶总黄酮得率达23.98%。醇提物通过旋蒸纯化,浓缩后溶入95%乙醇中得到纯化杏叶黄酮。通过杏叶黄酮对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基的清除抑制能力研究其抗氧化活性。结果表明,杏叶黄酮对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基具有较高的清除抑制能力,且杏叶黄酮对自由基的清除能力均随着其浓度增加而增加。当黄酮质量浓度为1.0 mg/mL时,对DPPH自由基清除率为44.69%;当黄酮质量浓度为0.8 mg/mL时,对羟自由基清除率为76.28%,对超氧阴离子自由基清除能力为84.75%。由此可知,杏叶黄酮具有较强的抗氧化活性。试验结果可为植物源抗衰老食品添加剂的研究提供理论依据。     

林蛙卵黑色素的提取工艺及其抗氧化活性

【目的】研究盐酸水解法提取林蛙卵黑色素的最佳工艺,并分析林蛙卵黑色素的抗氧化活性。【方法】以林蛙卵为原料,通过单因素试验和正交试验,分析盐酸浓度、原料与盐酸料(g)液(mL)比、水解温度、水解时间对黑色素提取率的影响,确定林蛙卵黑色素盐酸水解法的最佳提取工艺;应用DPPH法、邻二氮菲法及邻苯三酚自氧化检测法,测定林蛙卵黑色素对DPPH、羟基自由基和O-·2的清除能力。【结果】酸水解法提取林蛙卵黑色素的最佳条件为:盐酸浓度6mol/L,料液比1∶30,水解温度70℃,水解时间2h,在此条件下,林蛙黑色素提取率达7.02%。黑色素对DPPH自由基具有显著的清除作用,清除50%DPPH自由基对应的黑色素质量浓度为0.6 mg/mL;1.0mg/mL黑色素对羟基自由基的清除率达到65%;黑色素对O-·2的清除率不佳,最高达28.3%。【结论】盐酸水解法对林蛙卵黑色素的提取效果较好,林蛙卵黑色素具有明显的抗氧化作用。     

姜辣素提取工艺及其对亚硝酸盐的清除作用研究

采用纤维素酶法辅助提取姜辣素,确定姜辣素最优提取工艺条件;将提取出的姜辣素用于清除亚硝酸盐,确定最优清除条件.结果表明,姜辣素最优提取工艺条件为酶添加量1.4％、料液比1:40、酶解温度65℃、酶解时间85 min,在该条件下平均提取率为2.61％;姜辣素清除亚硝酸盐的最优反应条件为添加5μg/mL亚硝酸钠溶液2.0 mL,姜辣素浓度15 mg/mL、反应温度80℃、反应时间20 min、姜辣素添加量4.5 mL,在该条件下平均清除率为98.74％.     

香菇多糖提取工艺优化及其体外抗氧化活性

采用微波预处理(功率为250 W,时间为30 s)超声波辅助提取法提取香菇多糖,以正交试验优化工艺条件,且通过测定香菇多糖的总抗氧化能力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和羟自由基清除能力,研究其体外抗氧化活性。结果表明,最佳工艺参数为料液比1 g∶20 m L、超声功率80 W、超声温度60℃、超声时间20 min,在此优化条件下,香菇多糖提取率最高,为7. 16%。香菇多糖具有良好的抗氧化活性,其总抗氧化能力随着质量浓度的升高而明显增强,在其质量浓度为25 mg/m L时,其DPPH自由基、羟自由基清除率分别达到76. 22%、92. 41%。