离体培养高山杜鹃增殖的影响因子研究

[目的]培养基种类以及激素TDZ、NAA对高山杜鹃组培苗增殖的影响.[方法]应用正交试验设计拟定试验方案,以增殖系数为测定指标,筛选适合高山杜鹃组培苗增殖的最优培养基.[结果]经直观分析、方差分析和多重比较进行综合评价,高山杜鹃增殖的最优培养基为WPM培养基+NAA 0.01 mg/L+TDZ1 mg/L,其中培养基种类和激素TDZ对其影响最大,通过方差分析达到了极显著水平.[结论]用组织培养方法进行杜鹃的快速繁殖生产,为工厂化育苗提供了科学依据.     

春兰根状茎增殖及其分化影响因子

以春兰无菌根状茎为材料,研究不同激素配比及接种极向对其增殖和分化的影响.结果表明:添加2 mg/LKT有利于春兰根状茎增殖；横向平放接种处理的春兰根状茎分化数量显著高于倒接和正接处理；添加ZT能显著促进春兰根状茎分化.     

春兰根状茎增殖与分化培养

以10种培养基进行了春兰根状茎增殖培养研究,结果表明,不同培养基对增殖率有明显影响,以White NAA 5 mg/L培养再转入1/2 MS NAA 5 mg/L培养基,可获得较高的平均生长速度,但获得的根状茎总量以2号培养基最多。春兰根状茎的最适增殖条件为:1/2 MS为基本培养基,不加或添加少量NAA,60 d为1个增殖周期;5种培养基分化培养结果表明,根状茎分化受BA浓度影响较大,当BA浓度达3 mg/L时,经45 d培养平均每g根状茎可分化出20个芽,每芽重约0.15 g。活性炭的存在会抑制分化。     

春兰根状茎离体培养的研究

以春兰种子诱导出来的根状茎为材料,探讨培养方式、培养条件等因素对春兰组培快繁的影响.结果表明:春兰根状茎在液体振荡培养与固体培养的交替培养中不仅增殖率高,而且生长迅速.光照是根状茎分化成苗的必要条件;28℃时,根状茎的分化率可达62.5％,高温下(30℃)根状茎分化受抑制;另外,春兰不定芽基部保留适当长度的根状茎有利于其生根.     

春兰根状茎的增殖与分化的影响因素研究

以春兰品种绿云的根状茎为外植体,研究了多个因素对根状茎的增殖与分化的影响.结果表明,B5与1/2MS基本培养基的转换培养较单一培养基利于根状茎的增殖;细胞分裂秦BA、KT对根状茎的增殖有明显的促进作用,但KT浓度超过1.0 mg·L-1后根状茎易玻璃化;在0～3.0 mg·L-1范围内生长素浓度越高越利于伸长型根状茎的形成,IBA促进根状茎的生长较NAA效果好.1/2MS+BA 1.0 mg·L-1+IBA 1.0 mg·L-1培养基最有利于根状茎的分化,芽分化率达到37.3%.3种培养基附加物中,芋艿糊优于椰子汁和香蕉泥.根状茎分割以掰开方式较好,增殖团块带有3～5条根状茎较适宜.     

春兰‘金荷鼎’杂交后代离体快繁的研究

以‘金荷鼎’ב赤蕙’根状茎为材料,研究根状茎的增殖情况,包括基本培养基的筛选、6-BA与NAA的浓度组合对增殖的影响。不同培养基对根状茎生长情况有明显影响。1/2MS培养基为春兰根状茎的基本培养基,1/2MS+NAA1mg/L+6-BA0.5mg/L为春兰根状茎的最佳增殖培养基,增殖倍数达3.00。杂交育种技术结合组织培养是国兰新品种选育的有效途径。     

春兰根状茎增殖分化的组织细胞学研究

为了对春兰珍稀品种的组培繁育提供科学参考,对春兰组培产生的类原球茎、根状茎石蜡切片进行了观察,春兰类原球茎顶端分生组织不断分裂并延伸成为根状茎;根状茎节间的表皮或皮层细胞不断分裂形成侧生分生组织区,直接发育成芽或继续延伸成根状茎的侧枝.形成具多个分生组织区的丛生根状茎后再分化出芽.     

大叶风兰离体增殖影响因子分析

利用正交试验设计研究基本培养基及激素6-BA、NAA等因子对大叶风兰离体增殖的影响。结果表明,大叶风兰离体增殖的最优培养基为花宝1号+6-BA2.0 mg/L+NAA0.05 mg/L。其中基本培养基和激素6-BA对大叶风兰离体增殖影响最大,方差分析达到极显著水平(P0.01),二者的交互作用对其增殖系数的影响达到显著水平(P0.05)。     

春兰根状茎的增殖与分化条件优化

以春兰种子无菌萌发的根状茎为材料,采用正交设计方法,研究了春兰根状茎增殖与分化的适宜条件.结果表明,根状茎增殖适宜的培养基为1/2MS+3 mg·L-1BA+蔗糖3%+香蕉5%+琼脂0.8%,根状茎分化适宜的培养基为1/2MS+3.0mg·L-1BA+1.0mg·L-1NAA+0.8mg·L-1IBA+蔗糖3%+琼脂0.8%.使用100 g.L-1香蕉作为附加物,春兰根状茎在培养30d后重量可达初重的2.1倍.根状茎在固体培养过程中不发生褐变现象,添加活性炭能促使根状茎产生根毛类似物.     

铁皮石斛原球茎增殖培养基配方的优化

[目的]获得铁皮石斛（Dendrobium candidum Wall.ex Lindl.）原球茎组织培养的最佳培养基配方。[方法]用正交试验筛选出6-BA、NAA、KT最佳的浓度配比,并考察各因素对铁皮石斛原球茎增殖率的影响。[结果]铁皮石斛原球茎增殖的最佳培养基配方为1/2MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L NAA＋1.0 mg/L KT。[结论]该研究为工业化生产铁皮石斛原球茎及其有效成分,推进铁皮石斛工厂化育苗奠定了基础。     

大花蕙兰原球茎增殖影响因素的研究

[目的]为探明组培过程中大花蕙兰原球茎增殖生长的影响因素。[方法]以大花蕙兰茎尖诱导的原球茎为外植体,研究了MS培养基浓度、BA浓度及培养方式对原球茎增殖和生长的影响。[结果]1MS基本培养基适合大花蕙兰原球茎培养;在振荡培养时MS培养基中加入BA1．5mg／L时,原球茎生长良好,显著好于其他浓度处理;在液体培养基中培养原球茎明显优于在固体培养基中培养,液体培养基培养的原球茎鲜重和增殖系数均为固体培养的1．75倍。[结论]培养基配方为Ms＋BA1．5mg／L＋NAA0．2mg／L＋蔗糖30g／L且振荡培养时,大花蕙兰原球茎增殖及生长效果较好。     

大花蕙兰原球茎诱导培养影响因素及褐化防治的研究

[目的]研究大花蕙兰茎尖外植体原球茎诱导及增殖培养、褐化污染的影响因素。[方法]以大花蕙兰茎尖作为外植体,研究无菌系建立、诱导培养的灭菌方法与褐化防治、原球茎诱导培养初始培养基的筛选、原球茎增殖培养的影响因素。[结果]结果表明:解决茎尖内生菌污染及褐化严重的问题,两段式灭菌(75%酒精30 s+0.1%升汞10 min+剥去幼叶+0.05%升汞5 min)优于单一式的灭菌;原球茎诱导培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;原球茎增殖培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+2.0 g/L活性炭+10%马铃薯。[结论]该研究可为大花蕙兰的茎尖快速繁殖及工厂化生产提供技术依据。     

春兰与大花蕙兰杂交后代根状茎增殖与分化条件

为了筛选适合根状茎增殖分化的条件,以春兰Cymbidium goeringii与大花蕙兰Cymbidium hybridum杂交后代的根状茎为材料进行培养,比较了不同基本培养基、植物生长调节物质和有机添加物等对根状茎增殖与分化的影响。结果表明:1/2MS(Murashige and Skoog)培养基对杂交根状茎增殖与分化效果最适宜;2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和激动素(KT)对杂交组合春兰与大花蕙兰‘梦境’‘Wanderland’的根状茎分化作用不显著,1/2MS培养基添加1.0mg·L-16-苄基腺嘌呤(6-BA)+1.0 mg·L-1萘乙酸(NAA)对春兰与大花蕙兰‘梦境’的杂交后代增殖分化效果最佳;使用有机添加物对根状茎增殖有显著影响,其中以椰汁增殖效果最好,其次为香蕉泥、土豆汁;添加100 g·L-1香蕉泥+50 mL·L-1椰汁最利于根状茎的增殖与分化。图1表4参16     

大花蕙兰原球茎的诱导、增殖及植株再生研究

从大花蕙兰(Cymbidium hybridum)试管苗取材,诱导原球茎,建立植株再生体系,分析了不同激素及其浓度对原球茎诱导、增殖和植株生根的影响.结果表明,不定芽比叶片更容易诱导出原球茎;生长素NAA对原球茎的诱导效果好于2,4-D,最适合原球茎诱导的激素组合为1.0 mg/L BA+1.0 mg/L NAA;原球茎增殖培养基中添加1.0 mg/L BA+0.5 mg/L NAA增殖效果较好,增殖系数可达7.90;最适生根培养基为1/2 MS+0.5 mg/L NAA+30 g/L蔗糖.     

春兰种子无菌播种萌发过程及其影响因素

 研究了不同化学试剂预处理和暗培养时间对春兰Cymbidium goeringii种子初始萌发时间及萌发率的影响,并从形态学角度观察了种子萌发的过程。无菌条件下,分别采用氢氧化钠和次氯酸钠对春兰种子进行预处理,将不同处理及未处理种子置于相同培养基上不同暗培养时间0,30,60,90,120,150,180 d下进行培养,暗培养后转入光照下继续培养。结果表明：暗培养以后进行光照培养是春兰种子萌发启动所必须的,全光照或全黑暗条件下种子均未萌发,暗培养30 d的种子在光照条件下培养约35 d时开始萌发,初始萌发所需时间最短;化学试剂预处理对种子萌发率的影响显著,氢氧化钠和次氯酸钠处理组种子萌发率均高于对照组。化学试剂预处理与暗培养时间对种子的萌发率存在交互作用,暗培养150 d的氢氧化钠预处理种子萌发率最高为79.2%。春兰种子萌发过程包括以下几个状态：未萌发状态种子、胚吸水膨胀、原球茎、根状茎。图3表1参16     

春兰菌根的显微结构观察

应用石蜡切片法,借助于光学显微镜观察春兰无菌组培苗、接菌组培苗的根及野生状态下的新生营养根、老根,结果表明:接菌组培苗的根及野生状态下的新生营养根、老根,其皮层组织细胞内有大量的菌丝结等兰科菌根的典型结构,而无菌组培苗的根则无菌丝、菌丝结等结构.菌根真菌自外皮层薄壁通道细胞侵入根的皮层细胞,春兰菌根是典型的地生兰菌根.     

墨兰组织培养中原球茎的形态解剖研究

通过对墨兰（Ｃｙｍｉｄｉｕｍ ｓｉｎｅｎｓｅ）组织培养中原球茎外部形态、内部结构的观察研究,发现墨兰茎尖组织培养中产生的原球茎和丛生型原球茎虽外形差别较大,但内部结构都具有根的典型特征。牙的分生组织可以在原球茎表层、丛生型原球茎或其顶端发生。芽的顶端分生组织与随后产生的根的顶端分生组织共同构成胚状结构,其形态与种子胚相似。由于墨兰组培中先后产生的原球茎和丛生型原球茎其内部结构都属典型的根结构,故称     

春兰ISSR-PCR反应体系的优化

以春兰为材料,对影响ISSR-PCR扩增结果的因素如模板DNA、dNTPs、MgCl2、primer、TaqDNA聚合酶的浓度及引物退火温度、反应循环数进行了探讨,确立了适合春兰ISSR-PCR分析的最佳反应体系和PCR扩增参数:在15μL反应体系中含1×buffer,0.2 mmol/L dNTPs,2.0 mmol/L MgCl2,0.2μmol/L引物,0.3 UTaqDNA聚合酶,20 ng模板DNA。PCR扩增程序:94℃预变性2.5 min;94℃变性45 s,48~58℃退火(退火温度随引物不同而定)45 s,72℃延伸2 min,35个循环;72℃延伸5 min。     

春兰授粉和种胚无菌萌发研究

为提高春兰品种间授粉坐果率、缩短种子无菌萌发时间、提高萌发率,对春兰品种自交和杂交的适宜授粉时间、种子无菌萌发进行研究。结果显示最佳授粉时间为花后2~5 天。品种自交坐果率仅33.3%,品种杂交的坐果率达100%。蒴果的纵横径生长呈单“S”形曲线。成熟种子萌发时间为281~296天;授粉后130 天的未成熟种子萌发时间仅需96~99 天,萌发数量最多,为116 ~132 个/瓶。本研究使春兰从授粉到种子萌发的时间缩短8个月,且萌发率增加,节约了成本,提高了效率。     

大花蕙兰原球茎培养基激素配比试验初报

采用改良的配方诱导增殖大花蕙兰原球茎，不同激素配比的多个培养基配方比较试验，筛选出适于原球茎生长发育的液体和固体配方，使继代时间缩短5－10d，更有利于原球茎生长发育及分生复壮。