大蒜素对猪卵巢卵泡颗粒细胞凋亡的影响

为了探究大蒜素对猪卵巢卵泡颗粒细胞类固醇激素合成功能以及H_2O_2引起的颗粒细胞凋亡的影响,采用免疫组化法鉴定凋亡相关蛋白Cleaved Caspase3在成年母猪卵巢组织中的表达情况,体外培养猪卵巢原代颗粒细胞,采用放射免疫(RIA)方法检测培养液中孕酮(P4)和雌二醇(E2)水平,采用MTT法检测大蒜素对细胞增殖活性的影响,进一步检测卵巢颗粒细胞的凋亡情况。免疫组化结果显示,Cleaved Caspase3在猪卵巢不同发育阶段卵泡的颗粒细胞、膜细胞中有广泛表达,在卵母细胞的胞质中也有分布,在闭锁卵泡中也见明显表达。猪卵巢原代颗粒细胞经大蒜素处理后,细胞培养液中的孕酮含量显著低于H_2O_2处理组,而雌激素水平显著高于H_2O_2处理组,与对照组无明显差异。此外,免疫荧光结果显示,与H_2O_2处理组相比,大蒜素处理组减少了颗粒细胞的凋亡,进一步证实了大蒜素对H_2O_2引起的颗粒细胞凋亡具有缓解作用;进一步应用MTT细胞毒性和增殖试剂盒进行检测,结果显示,与H_2O_2处理组相比,大蒜素处理显著提高了细胞增殖活性。结果表明,大蒜素能够作用于卵巢颗粒细胞,缓解H_2O_2造成的氧化应激,本结果为畜牧生产中进一步应用大蒜素提供参考依据。     

镉暴露对蛋鸡卵巢的毒性损伤及酵母硒的保护效应

将90羽40周龄海兰褐蛋鸡随机分为3组,每组30羽,每组设3个重复,每个重复10羽。采用饮水染毒方式对蛋鸡进行Cd暴露(50 mg/L)和酵母硒保护试验(饲料中添加3%酵母硒),试验周期为8周。结果表明:与对照组比较,Cd组血清E2、P4含量呈类似变化,分别自第2、4周显著下降(P0.05);卵巢组织中SOD活性、GSH-Px活性、GSH含量均显著或极显著降低(P0.05或P0.01),MDA含量极显著升高(P0.01);Cd组SOD活性下降了32.45%(P0.01),GSH-Px活性下降了26.26%(P0.01),GSH含量下降了19.83%(P0.01),MDA含量升高了37.03%(P0.01);卵巢Cd含量极显著升高。超微结构观察发现Cd组卵巢颗粒细胞染色质边集、线粒体嵴断裂、空泡化、微绒毛断裂等损伤变化。与Cd组相比,Se保护组血清E2、P4含量自第6周显著升高,卵巢SOD活性、GSH含量均显著升高(P0.05),MDA含量显著降低(P0.05)。卵巢硒含量极显著升高,Cd含量差异不显著,卵巢微绒毛、线粒体、细胞核等损伤变化轻于Cd组。综上所述,Cd引起的氧化应激是Cd致蛋鸡卵巢损伤的重要原因,氧化应激引起的卵巢颗粒细胞凋亡可能是造成蛋鸡血清雌激素水平下降的原因之一。酵母硒通过缓解卵巢组织脂质过氧化损伤,减轻Cd对卵巢细胞微绒毛及线粒体的损伤,对蛋鸡Cd暴露引起的卵巢损伤具有一定缓解作用。     

亚精胺诱导小鼠卵巢组织氧化损伤的作用

【目的】探讨亚精胺对小鼠卵巢组织形态、抗氧化功能和氧化损伤的影响.【方法】采用不同质量分数亚精胺(0.05、0.10、0.15 mg/g)腹腔注射6周龄昆明小鼠,分别于24、48 h后采集卵巢样品,研究亚精胺对小鼠卵巢组织形态,CAT活性和MDA含量,CAT、SOD、NQO1和HO-1基因表达的影响.【结果】0.05 mg/g亚精胺处理组与对照组小鼠卵巢形态无明显差异,0.10 mg/g亚精胺组小鼠卵巢组织中部分卵泡形态和颗粒细胞排列不规整;0.15 mg/g亚精胺处理24 h时,卵巢颗粒细胞排列紊乱,部分卵泡卵母细胞皱缩,小鼠卵巢CAT活性极显著低于对照组(P<0.01),而MDA水平极显著高于对照组(P<0.01);0.10、0.15 mg/g亚精胺处理48 h时,小鼠卵巢CAT活性显著低于对照组(P<0.05);0.15 mg/g亚精胺组小鼠卵巢组织CAT、SOD、NQO1和HO-1基因表达量均显著高于对照组(P<0.05).【结论】0.15 mg/g亚精胺可通过抑制CAT活性,降低卵巢抗氧化能力,诱导小鼠卵巢组织脂质过氧化,进而造成小鼠卵巢组织氧化损伤.     

脂肪因子Chemerin对牛卵巢颗粒细胞凋亡与自噬的影响

[目的]本试验旨在探讨脂肪因子Chemerin在牛卵巢颗粒细胞凋亡与自噬中的作用。[方法]体外培养牛卵巢颗粒细胞并用重组Chemerin蛋白(0.2μg·mL~(-1))处理24 h,采用流式细胞术和CCK-8检测细胞凋亡,通过免疫荧光检测细胞中活性氧(ROS)含量变化,测定细胞超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量;RT-qPCR分析凋亡与自噬相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-3、P62和Atg7 mRNA表达,Western blot技术检测凋亡与自噬相关蛋白表达情况。[结果]与对照组相比,Chemerin处理卵巢颗粒细胞后,细胞中ROS和MDA含量显著上升(P0.05),SOD和GSH-px活性极显著降低(P0.01)。凋亡相关基因Bax和Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平显著升高,P62和Atg7 mRNA等的表达也显著上调(P0.05)。[结论]Chemerin可通过调控相关基因的表达诱导牛卵巢颗粒细胞凋亡并伴随自噬的发生。     

去乙酰化酶SIRT1过表达对猪卵巢颗粒细胞中AMPK活性的影响

构建猪SIRT1基因全长编码区(coding region sequence,CDS)的真核表达载体,转染猪原代卵巢颗粒细胞,探讨SIRT1基因过表达对猪卵巢颗粒细胞中AMPK基因的转录及其蛋白活性的影响。测序结果表明,猪SIRT1基因的CDS区全长大小为2 229 bp,与NCBI发布的猪SIRT1基因m RNA序列(EU030283.2)一致;转染p EGFP–C1–SIRT1载体的颗粒细胞中SIRT1的m RNA表达水平和蛋白表达水平极显著高于空载体对照组(P0.01);p EGFP–C1–SIRT1转染组细胞中,AMPK–α1和AMPK–α2基因的m RNA表达量显著高于空载体对照组,且细胞中AMPKαThr172位点的磷酸化水平显著升高(P0.05)。结果表明,体外培养的原代猪卵巢颗粒细胞中的SIRT1基因过表达使AMPK的表达显著增加,影响AMPK的活性,推测SIRT1可能通过AMPK在猪卵巢颗粒细胞凋亡过程中发挥重要的调控作用。     

G-CSF对脑挫伤大鼠血清及脑组织中NO、MDA和SOD含量的影响

目的观察粒细胞集落刺激因子（G-CSF）对脑挫伤大鼠血清及脑组织中一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）含量的影响,探讨G-CSF在治疗脑挫伤中的作用.方法将大鼠随机分为治疗组、对照组和正常组,采用自由落体法致SD大鼠脑挫伤动物模型,正常组不致伤.治疗组脑挫伤2h后开始应用G-CSF（浓度为2mg/L）一次性皮下注射50μg/kg治疗.对照组和正常组皮下注射等量生理盐水.给药结束后24h检测治疗组、对照组及正常组大鼠血清及脑组织中NO、MDA和SOD的含量.结果脑挫伤后,对照组大鼠血清及脑组织中NO和MDA含量明显高于正常组,SOD的活性明显低于正常组.治疗组大鼠血清及脑组织中NO和MDA含量明显低于对照组,SOD的活性明显高于对照组.结论G-CSF能有效地提高脑挫伤大鼠血清及脑组织中SOD的活性,降低NO和MDA含量,保护脑组织,改善脑水肿,从而起到了一定的治疗作用.     

印度人参根提取物体内抗氧化作用研究

采用序贯法和霍恩法结合确定提取物LD50并确定实验剂量,选用50只昆明种小鼠随机分成空白对照组、模型对照组和3个剂量组（5．00,2．50,0．80g／kg&#183;BW）,分别灌喂不同剂量印度人参根提取物,30d后采血测定小鼠和肝损伤小鼠血清丙二醛含量和抗氧化酶活性．结果表明,剂量组小鼠血清MDA含量显著低于空白对照组和模型对照组;血清SOD和GSH—Px活性显著高于空白对照组;对肝损伤小鼠,剂量组MDA含量明显低于模型对照组,而SOD和GSH—Px活性则明显高于模型对照组．表明印度人参根乙醇提取物有一定抗氧化作用,对化学性肝损伤小鼠有一定保护作用．     

小鼠卵巢颗粒细胞的体外培养

为了探讨小鼠卵巢颗粒细胞体外生长的特点及增殖的调控因素,分别添加2μg/mL胰岛素、50ng/mL FSH和20 ng/mL EGF的培养液培养小鼠卵巢颗粒细胞,每隔24 h对细胞进行计数,研究其对小鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响。此外,还对培养过程中出现的卵巢颗粒细胞集落进行了AKP染色和C-kit免疫组化染色鉴定。结果显示,在培养的第4天添加EGF组和FSH组与对照组相比均具有显著的促增殖作用(P<0.05),添加胰岛素组促增殖作用不显著(P>0.05);卵巢颗粒细胞集落经AKP染色和C-kit免疫组化染色均呈阳性。提示EGF和FSH对小鼠卵巢颗粒细胞具有促增殖效应,小鼠卵巢颗粒细胞具有干细胞的部分特性。     

棉花黄萎病菌毒素对棉花生化代谢的影响

为明确棉花黄萎病菌毒素对棉花生化代谢的影响,采用棉花黄萎病菌毒素处理棉花黄萎病抗病和感病品种的棉苗后,测定棉株体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性以及丙二醛(MDA)和木质素含量的动态变化。结果表明,抗病品种陕7191对病菌毒素的抗性显著高于感病品种中棉19;接种毒素后2品种棉苗叶片SOD活性都降低,感病品种降幅高于抗病品种;感病品种POD活性升高较快,到达峰值后迅速下降,而抗病品种POD活性持续上升;2品种PAL活性变化趋势相似,接种后抗病品种活性始终高于感病品种;2品种MDA和木质素含量均增多,感病品种MDA含量的增幅和增量高于抗病品种。     

NAC对河南华溪蟹卵巢镉氧化损伤的缓解作用

采用慢性镉暴露同时加入不同浓度N-乙酰半胱氨酸(NAC)的方法,以河南华溪蟹卵巢组织镉含量,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性,脂质过氧化水平(MDA含量)和卵巢组织细胞结构的变化为指标,探究了NAC对河南华溪蟹(Sinopotamon henanense)卵巢镉氧化损伤的缓解作用。实验设置对照组、镉(0.725 mg·L~(-1))单一作用组、镉(0.725 mg·L~(-1))和NAC(0.1、0.2、0.4 g·L~(-1))联合作用组,结果显示:镉单一作用下,卵巢组织镉含量和MDA含量显著高于对照组;SOD、CAT和GPx活性在不同时间点显著升高;组织显微结构出现不同程度损伤。NAC和镉联合作用下,卵巢组织镉含量在14 d和28 d显著降低;SOD活性于14 d显著降低;CAT、GPx活性和MDA含量均在28 d降低,并逐渐恢复到正常水平;随着时间的延长和NAC浓度的增加,卵巢组织细胞损伤程度出现改善,核膜逐渐完整,仅有少量染色质凝集,细胞内及细胞核内空泡化现象基本消失,卵巢组织结构趋于正常化。实验结果表明,NAC对镉诱导的河南华溪蟹的生殖毒性具有缓解作用,同时进一步证实了氧化损伤是镉生殖毒性的重要机制之一。     

复方茵芩制剂血清对小鼠体外肝细胞损伤的保护作用

采用H2O2建立小鼠原代肝细胞的体外损伤模型,小鼠灌胃含复方茵芩制剂药物血清后,检测不同时期肝细胞培养上清液天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、超氧化物岐化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的变化来研究其对体外肝细胞损伤的保护作用.结果表明:与正常细胞组相比,模型组的SOD活性低于药物血清组(P<0.01);模型组的MDA含量高于药物血清组(P<0.01);与对照组相比,模型组的AST和ALT活性高(P<0.01),而药物血清组变化不明显.在损伤的肝细胞中添加药物血清的第3-7天,与模型组相比,药物血清组AST活性在第3-5天均较低(P<0.01),第6天差异不显著(P>0.05);ALT活性在第3-6天均较低(P<0.01).可见,含药的血清可减轻H2O2对肝细胞的损伤和破坏.     

汞暴露对草鱼氧化损伤及抗氧化能力的影响

将草鱼分为对照组和处理组,对照组试验期内置于正常养殖用水中饲养,处理组先暴露在Hg2+浓度为0.5 mg·L-1水体中,24 h后置于正常养殖用水中进行恢复饲养。各组分别于恢复饲养0（即Hg2+暴露24 h）、5、12、21 d取样,测定鳃、肝胰脏、脾脏和肾脏组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathion and peroxidase,GPx）活性,以及还原型谷胱甘肽（glutathione,GSH）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）的含量。结果显示,与对照组相比,处理组鳃SOD、GPx活性（0、5 d）和CAT活性（0、5、12 d）,以及GSH（5 d）、MDA（5、12、21 d）含量显著上升（P<005）,GPx活性（12、21 d）和GSH、MDA含量（0 d）显著下降（P<005,P<001）;肝胰脏SOD、CAT、GPx活性（0 d）和GSH（21 d）、MDA（0、5 d）含量显著上升（P<0.05）,CAT（5、12 d）活性、GSH（0、5、12 d）和MDA（12、21 d）含量显著下降（P<0.05）。处理组脾脏SOD、CAT、GPx活性在试验期内与对照组相比无显著变化（P>0.05）,GSH含量（0 d）极显著下降（P<001）,GSH（12 d）和MDA（0 d）含量显著上升（P<0.05）;肾脏SOD（0、5、12 d）、GPx（0 d）活性和GSH（12 d）、MDA（0 d）含量显著上升（P<0.05）,CAT（0、5、12 d）活性和GSH（0、5 d）含量显著下降（P<0.05）。试验期内,处理组各组织SOD、CAT活性均恢复到对照组水平,肝胰脏GSH含量得到反弹性恢复,MDA含量降到了较对照组更低的水平,鳃GPx活性及MDA含量一直未恢复至对照组水平。     

冬枣黑疔病病原菌毒素致病机制研究

利用不同浓度的冬枣(Zizyphus jujuacv.Dongzao)黑疔病病原菌毒素提取液处理冬枣果皮组织,通过测定其对果皮组织细胞膜透性、丙二醛(MDA)含量变化、过氧化物酶(POD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和过氧化氢酶(CAT)活性的影响,研究该毒素在致病机制中的作用。结果表明:经毒素处理后,果皮组织浸出液的相对电导率随毒素浓度增大而增加;细胞内丙二醛含量增加,高于对照,随毒素浓度的增大而升高;细胞内CAT活性在处理9 h内低于对照,随处理时间延长呈总体下降趋势,APX、POD活性在处理中期呈下降趋势,APX活性与对照差异不明显,POD活性在中后期与对照差异明显。     

高温诱导蛋鸡氧化损伤及对卵泡发育的影响

【目的】研究高温诱导蛋鸡氧化损伤及对卵泡发育的影响,探讨环境高温抑制蛋鸡卵泡发育、降低产蛋量的机制。【方法】试验分两部分进行：试验一,将180只27周龄的海兰褐蛋鸡随机分为3个处理组,分别饲养于人工环境控制舱内,3个处理组分别为常温组（23℃,饲喂基础日粮）、日循环高温组（28—35—28℃,饲喂基础日粮）和高温补充VE组（28—35—28℃,饲喂基础日粮+250 IU•kg-1 VE）,试验期14 d;试验二,分离蛋鸡F1和F2卵泡颗粒层并制备颗粒细胞悬浮液,将颗粒细胞分别在39或44℃下培养。【结果】试验一结果显示,日循环高温显著抑制蛋鸡卵泡发育,表现为产蛋数量下降（P＜0.05）、卵巢重量降低（P＜0.05）、大卵泡数量减少（P＜0.05）,同时颗粒细胞层细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶（P450scc）mRNA的表达量以及孕酮（P4）分泌量均显著（P＜0.05）减少;日循环高温还诱导蛋鸡氧化损伤,表现为蛋鸡血浆、肝脏和卵黄中丙二醛（MDA）水平上升（P＜0.05）;高温环境下补充250 IU•kg-1 VE,显著降低蛋鸡血浆、肝脏和卵黄中MDA水平（P＜0.05）,同时显著缓解高温对卵泡发育的抑制（P＜0.05）。试验二结果显示,提高培养温度可显著增加颗粒细胞中活性氧（ROS）的产生量（P＜0.05）,同时抑制颗粒细胞的增殖活性（P＜0.05）;培养液中添加VE预处理24 h可显著缓解高温的影响,表现为细胞ROS降低（P＜0.05）,细胞增殖活性增加（P＜0.05）。【结论】高温增加蛋鸡颗粒细胞ROS的产生量,诱导蛋鸡机体（肝脏,血浆和卵黄）氧化损伤,同时影响颗粒细胞增殖及分泌孕酮的能力,抑制蛋鸡卵泡发育;补充VE可以缓解高温诱导的蛋鸡氧化损伤,并缓解高温对卵泡发育的抑制。表明高温抑制蛋鸡卵泡发育与诱导蛋鸡氧化损伤有关。     

马铃薯黑痣病菌毒素诱导马铃薯幼苗丙二醛含量、细胞膜透性及PAL活性的变化

本试验选取对黑痣病菌抗性不同的马铃薯材料,研究黑痣病菌毒素对马铃薯幼苗体内丙二醛( MDA)含量、细胞膜透性及苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的变化及其与抗病性的关系.结果显示,经毒素处理后,马铃薯幼苗体内MDA含量大幅增加,96 h以前感病品种大西洋的累积量大于抗病品种底西芮的,96h以后抗病品种的累积量大于感病品种的;马铃薯幼苗细胞膜透性增加,感病品种增加的较早且幅度较大;黑痣病菌毒素可诱导马铃薯幼苗体内PAL活性升高,抗病品种升高较早且幅度较大,抗病品种和感病品种的PAL活性分别在12 h和36 h达到最大,增幅分别为48.8％和38.7％,24h以后,二者的增幅没有差异.     

串珠镰刀菌粗毒素对玉米根系细胞膜的影响

为了明确串珠镰刀菌毒素对玉米根系的致病机制,采用串珠镰刀菌粗毒素处理抗、感品种玉米幼苗根系,测定根系的细胞膜透性、丙二醛和可溶性糖含量,结果表明:抗病品种玉米对毒素的耐受能力强,细胞膜透性、丙二醛含量低于感病品种,而可溶性糖含量高于感病品种。抗病品种3个指标之间的相关性较高,而感病品种的3个指标相关性较低。表明抗、感品种玉米对串珠镰刀菌毒素的耐受能力不同。     

甜瓜属野生种耐铝盐胁迫的初步研究（英文）

[目的]初步研究甜瓜属野生种耐铝盐胁迫的能力。[方法]以甜瓜属野生种和3种栽培种黄瓜为供试材料,研究铝盐胁迫下叶片中POD活性、SOD活性、电解质外渗透率、丙二醛（MDA）、脯氨酸（Pro）、可溶性糖含量等生理指标的变化。[结果]甜瓜属野生种的POD活性、SOD活性、脯氨酸含量和可溶性糖含量均高于3种栽培种黄瓜,电解质外渗透率和MDA含量均低于3种栽培种黄瓜,这表明甜瓜属野生种的耐铝胁迫性强于栽培种黄瓜。[结论]该研究为利用甜瓜属野生种改良栽培黄瓜种的研究奠定了基础。     

乙醇胁迫对小麦幼苗几个生理生化指标的影响

[目的]研究小麦幼苗对乙醇污染的耐受性。[方法]用不同浓度的乙醇溶液培养小麦幼苗4d,测定叶片的POD活性、Pro含量及MDA含量。[结果]乙醇浓度为0.20%、0.40%时,POD活性和Pro含量均随乙醇浓度增加而升高,MDA含量低于对照;当乙醇浓度达到0.60%时,POD活性大幅下降且低于对照,Pro含量大幅升高,MDA含量大幅升高且高于对照。[结论]小麦幼苗对低浓度的乙醇胁迫有一定抗性,但对高浓度的乙醇没有抗性。不同品种小麦之间对乙醇胁迫的表现有差异,这是由基因型导致的,但这种差异具有一致性。     

山羊胎盘肽对幼犬免疫功能和抗氧化功能的影响

将24只健康幼犬随即分成4组,一个对照组(n=6),3个实验组:小剂量(1mg/kg.bw)胎盘肽(Goat placenta peptide,GPP)组(n=6)、中剂量(2mg/kg.bw)胎盘肽组(n=6)、高剂量(4mg/kg.bw)胎盘肽组(n=6)。在口服羊胎盘肽的前1 d和连续口服羊胎盘肽10 d后的第1 d各组采血样一次,测定外周血白细胞数、ANAE 淋巴细胞百分率、血清球蛋白含量、血清溶菌酶活性、血清总抗氧化能力、血清谷胱甘肽过氧化物酶活性、血清超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量。结果表明:连续给药10 d后实验组幼犬血液白细胞总数、ANAE 淋巴细胞百分率、血清球蛋白含量、血清中溶菌酶活性与给药前相比均明显增加,并且中剂量组、高剂量组与给药前相比差异显著或极显著(P<0.05,P<0.01)。同时犬血清总抗氧化能力、血清谷胱甘肽过氧化物酶活性及超氧化物歧化酶活性均较给药前相比有所增强,血清丙二醛含量与给药前相比明显减少,并且中剂量组、高剂量组与给药前相比差异显著或极显著(P<0.05,P<0.01)。实验结果提示中剂量(2mg/kg.bw)、高剂量(4mg/kg.bw)羊胎盘肽可提高幼犬的免疫功能和抗氧化能力,从而提高幼犬的抗病防病能力。     

栽参土壤提取物活性组分筛选及其对人参幼苗生理效应研究

研究了栽参土壤水提取液用不同化学试剂(乙酸乙酯、水饱和正丁醇)萃取和直接采用不同化学试剂(乙酸乙酯、正丁醇、甲醇和蒸馏水)提取,对所得各个组分以人参种子为试材进行生物活性测定,经筛选所得活性较强组分再以人参幼苗为试材进行其根系活力和丙二醛含量测定。结果表明:栽参土壤提取液不同组分均对人参种子胚根生长有不同程度的影响,抑制作用随浓度逐渐增加而增强,其中生物活性较强的组分为栽参土壤水提取液乙酸乙酯萃取相和栽参土壤乙酸乙酯提取组分,两个组分对幼苗根系活力和丙二醛含量都产生显著性影响,在培养96h后,丙二醛含量分别增加23.8%、37.5%,与对照达极显著差异(P<0.01),根系活力分别下降17.2%、27.1%,极显著低于对照(P<0.01)。由此可知,用乙酸乙酯提取栽参土壤可有效获得部分人参化感物质,其可促进人参幼苗根细胞膜质过氧化作用,使膜透性增加,降低人参幼苗根系活力,影响其生长发育。