PCR技术及其在畜牧兽医领域的应用

PCR(polymerase Chain reaction聚合酶链反应),又称DNA或基因体外扩增技术。它是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA片段的分子生物学新技术。1985年,Saiki首次报道用PCR检测镰刀贫血病;1986年Erlish分离并纯化了适用于PCR的热稳定性Tag DNA聚合酶,并于1988年获专利;1988年,Saiki开始使用耐热     

兽医生物安全实验室PCR试验中的污染与防制对策

聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）是20世纪80年代中期发展起来的一种体外基因扩增技术,该技术在体外可在短时间内获得大量特定目的基因片段,从而大大简化了传统的分子克隆技术。随着科学技术的迅猛发展,PCR仪自动化程度的不断被提高,使PcR成为具有特异、敏感、产率高、快速、高通量、简便、易自动化等突出优点的常规操作技术之一。     

PCR技术在原虫病诊断中的应用

聚合酶链反应(Polymerasrchainreaction,PCR)作为一种快速体外基因扩增技术,因其操作简便、敏感性好、结果可靠等优点,近年来在生物医学的各个领域得到广泛应用。本文就PCR技术在原虫病诊断中的应用,做一综述。     

动物疫病PCR检测实验室的污染与对策

PCR(polymerase chain reaction,聚合酶链式反应)技术是美国Cetus公司人类遗传研究室的科学家Mullis于1985年发明的一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法,又称为基因的体外扩增法。这种技术操作简单,容易掌握,有极高的灵敏度,结果可靠。近几年,随着PCR相关技术的发展,复合PCR、定量PCR、荧光PCR等PCR技术在动物疫病的快速检测方面得到了广泛应用,为动物疫病的诊断及检验检疫提供了良好的依据。但该方法较强的扩增能力也带来了令人头痛的问题?易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。1引起PCR污染的因素1.1 PCR试剂的…     

信息之窗

PCR新技术可扩增多目标DNA聚合酶链反应又称PCR技术,是1980年代中期发展出来的体外核酸扩增技术,其原理类似于DNA的体内复制,只是在试管中给DNA的体外合成提供一种合适的条件,能在一个试管内将一种目标基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断。     

PCR技术在动物疫病诊断中的应用

聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction,PCR）,又称体外扩增技术,最早于1985年由Kary Mullis研制,是一种根据生物体内DNA复制的特点而设计的在体外对特定DNA序列进行快速扩增的新技术,具有特异性和敏感性高、操作简便、快速高效等特点。它能特异地在体外扩增微量基因或DNA片段,将皮克（pg）水平的DNA特异地扩增10^6～10^7倍,达到检测诊断的目的;在对特异性基因进行扩增时可使核苷酸的错配率低于万分之一;其操作过程在2～4h即可完成,有效缩短了诊断的时间。PCR技术目前已广泛应用于从基因扩增、基因检测到基因克隆、基因改造、     

PCR技术在犬病毒病诊断上的应用

随着分子生物学的发展，PCR基因扩增技术已越来越多的应用于犬的病毒病、细菌病和寄生虫病的诊断和研究之中。聚合酶链反应(Polymerase chain reaction．PCR)技术是在从样品中提取病原DNA或RNA后，体外扩增某一特定病原的DNA或RNA序列的一种分子生物学方法。与常规病原诊断方法相比，PCR技术更特异，更快捷。目前PCR技术已广泛应用于犬病毒病诊断。     

PCR检测动物疫病样品的种类及处理方法

PCR即聚合酶链反应是利用DNA聚合酶在体外大量扩增两段已知序列之间的某一特定DNA片段(又称模板)的分子生物学技术.这种技术可以利用几乎所有的临床样品探查病原体基因的存在和变异,从而对生物体的状态和疫病作出诊断.因而,如何从被检临床样品中高效、简便地提取核酸作为模板,就成为普及、推广PCR技术检测动物疫病亟待解决的问题.现依据笔者操作和学习体会,将能有效检测动物疫病的样品种类及处理方法介绍如下,以图共同发展PCR检测动物疫病技术.     

PCR技术发展近况及其在奶牛业中的应用

聚合酶链反应(Palymerase Chain Reaction)简称PCR,又称体外扩增方法,是80年代中期美国Cetus公司Mullis等人发明的一种新的分子生物技术。是利用DNA聚(?),依赖于DNA模板的特性,模仿体内复制过程,在附加的一对引物之间诱发聚合酶反应。它能在一根试管内将所要研究的一个目的的基因或某一DNA片断,借助DNA聚合酶(Tag聚合酶)的催化作用,于数小时内扩增成数十万至千百万     

PCR技术及其在寄生虫学研究中的应用

聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,简称PCR)是Mullis等人(1985)发明的一项DNA扩增技术。它利用耐热的DNA聚合酶快速特异地扩增任何所希望的目的基因或DNA片段。PCR技术不仅可以用于基因分离、克隆和核酸序列分析,还可用于遗传病及传染病的早期诊断等诸多方面。目前,PCR技术在传染病的诊断     

防止PCR检测动物疫病反应体系污染措施

PCR技术是利用DNA聚合酶,在体外大量合成(扩增)DNA片段的分子生物学技术.具有特异性好、灵敏度高、简便快速等特点.即使在10万个细胞中含有一个拷贝的待检核苷酸序列,也可用PCR技术检测出来.     

PCR技术在禽病诊断中应用的研究进展

聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction,PCR),又称体外基因扩增技术,是80年代中期由Mullis.发明的一种新的分子生物学技术,与传统的检测方法如生物化学、细菌学、病毒学和血清学方法等相比较,PCR方法具有特异性和敏感性高、操作简便、快速高效等特点,而且应用广泛。在病原方面,它既可作病原体的检测,也可同时进行不同病原或同一病原不同株的检测。特别适合难以培养的病毒和细菌的检测。经过近20年的发展,目前已开发出多种PCR技术,以适应不同试验需要,现综述PCR技术在禽病诊断中的应用。1PCR原理PCR是由三个基本反应组成的反复循…     

应用聚合酶链反应检测口蹄疫病毒

聚合酶链反应(RT—PCR)是一种体外扩增 RNA 基因方法。农业部动物检疫所自1990年以来开始应用 PCR 技术检测口蹄疫病毒(FMDV)的研究。将 FMDV 的细胞培养物、疫苗以及乳鼠毒用 RT—PCR 进行扩增出 FMDV—RNA 的第2961位至3071位区间的 cDNA 片段,扩增片段用琼脂糖凝胶电泳迅速判定结果。用此方法对来自疫区的屠宰猪的样品进行检测,结果为阳性。RT—PCR 技术从样品处理到观察结果约需5～6小时,具有简便、快速、     

犬病毒病分子生物学诊断技术与临床应用

一、PCR技术聚合酶链反应(Poly-merase Chain Reaction,PCR)是一种对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的新方法。目前已广泛应用到分子生物学研究的各个领域,在犬病毒病诊断中也得到广泛应用。(一)基本原理     

PCR定量方法概述

聚合酶链式反应(Polynlerase Chain Reaction,PCR)是20世纪80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断。PCR技术自诞生之日起就决定了它不仅是一种检测核酸分子的定性方法,而且也是一个能对核酸分子进行定量分析的有力工具。     

在四个西方蜜蜂品种的线粒体基因组中存在相同的CytB基因

为了探明在西方蜜蜂不同品种中是否存在相同的CytB基因,本研究以4个西方蜜蜂品种中的线粒体基因组为研究对象,通过体外聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术特异性扩增了CytB,结果发现4个西方蜜蜂品种的线粒体基因组具有相同的分子量为600-700(bp)的CytB基因片段,这提示在西方蜜蜂不同品种的线粒体基因组中存在相同的CytB基因。     

聚合酶链反应在动物病毒检测中的应用

八十年代中期问世的聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,简称PCR)技术,被认为是分子生物学发展的一个新的里程碑。PCR的主要特点是能在体外大量迅速地扩增所选定的核酸(指DNA)片段。PCR技术用于检测传染病时,只要样品中含有极少量的病毒(或细菌)     

环介导等温扩增技术及其在鸡病诊断中的应用

环介导等温扩增技术(Loop-mediated Isothermal Amplification,简称LAMP)是一种体外等温扩增核酸片段的新技术,利用4条特异性引物,在Bst DNA聚合酶的催化下能够有效地扩增出靶基因。与常规PCR法相比该法具有特异性强、灵敏度高、快速准确以及操作简便等优点,现已广泛应用于动物疾病检测中。此文综述了LAMP技术原理及其在鸡传染性疾病病原检测中的应用,旨在为该技术的深入研究和应用提供参考。     

聚合酶螺旋反应（PSR）在病原微生物快速检测中的研究进展

聚合酶螺旋反应（polymerase spiral reaction,PSR）是基于环介导等温扩增技术（LAMP）和聚合酶链式反应（PCR）建立的一种新型恒温体外核酸扩增技术,其利用混合引物的设计思路和BstDNA聚合酶的链置换活性,实现了在体外等温条件下的核酸扩增,表现出灵敏性及特异性较PCR显著提高,引物设计较LAMP简单等优点,在保证检测灵敏、特异的同时,耗时相对较短,且操作简便,对仪器设备要求低,可肉眼直观判定结果,特别适用于公共卫生、动物健康、食品安全和生物防御等领域的快速诊断。本文介绍了PSR技术的原理及其在病原微生物检测方面的应用,以期为相关领域的检测技术研究提供参考。     

微滴式数字PCR绝对定量应用研究进展

<正>1前言PCR是在核酸聚合酶作用下体外扩增DNA或RNA的实验技术。1985年美国科学家Kary Mullis申请了有关PCR的第一个专利~([1]),至此PCR发展成为科学研究领域的一项关键和常规技术,这种以PCR技术进行定性分析作为第一代PCR,此PCR也可以进行定量检测,但仅能进行终点检测。为了能够实时观察PCR过程和定量分析