牡丹种皮乙酸乙酯提取物抗癌活性研究

研究了牡丹种皮乙酸乙酯提取物对人源性乳腺癌细胞株(MCF-7)的增殖抑制率及细胞活性的影响。制备不同浓度梯度的牡丹种皮乙酸乙酯提物作用于MCF-7细胞,通过细胞形态学分析,AO/PI双染色,MTT法和线粒体膜电位法检测MCF-7细胞的生长活力,增殖抑制能力和线粒体膜电位变化。研究结果表明,当牡丹种皮乙酸乙酯提物质量浓度为5 mg/mL时,对MCF-7细胞的抑制效果最佳,细胞抑制率可达89.67%,并且在药物作用下,细胞活性和线粒体膜电位均明显下降。牡丹种皮乙酸乙酯提取物对乳腺癌细胞MCF-7的生长有抑制作用,能够降低细胞活性,促使MCF-7细胞线粒体膜电位降低,诱导细胞产生凋亡现象。     

杜仲叶多糖的制备及其体外活性

【目的】分离制备杜仲叶多糖,研究其体外抗氧化和抗肿瘤活性,为杜仲叶多元化开发利用提供依据。【方法】以杜仲叶为原料,采用水提醇沉法制备杜仲叶粗多糖,以DEAE-52纤维柱色谱法进行分离纯化。测定多糖对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基、ABTS自由基的清除作用;采用MTT法、LDH法和流式细胞术,检测多糖对乳腺癌MCF-7细胞生长抑制和细胞周期的影响。【结果】水提醇沉法制备的杜仲叶粗多糖经DEAE-52柱分离纯化后得到EFPs-1、EFPs-2共2个组分,其多糖质量分数分别为75.8%和84.3%。EFPs 2个组分对各自由基体系的清除能力均呈现良好的剂量依赖关系,其中EFPs-2的作用比EFPs-1强。EFPs-1对DPPH自由基、超氧阴离子、羟基自由基和ABTS自由基的半数有效浓度（EC₅₀）分别为3.393,5.259,3.692和2.463 mg/mL,EFPs-2的EC₅₀值依次为2.379,2.893,2.516和2.066 mg/mL。EFPs 2个组分对MCF-7细胞均有一定的体外生长抑制作用,其半数抑制浓度（IC₅₀）分别是226.23 μg/mL（EFPs-1）和173.04 μg/mL（EFPs-2）,其中EFPs-2可使MCF-7细胞的细胞周期阻滞于G0/G1期。【结论】杜仲叶多糖具有良好的体外抗氧化和抑瘤活性。     

橘皮色素的抑菌活性

从橘皮中提取醇溶性色素、醚溶性色素、醇水溶性色素和水溶性色素,以苹果腐烂菌等7种病原真菌为目标,采用菌丝生长速率法对橘皮的不同溶剂提取物的抑菌活性进行初步测定。结果表明,醚溶性色素、醇水溶性色素对7种植物病原真菌均有不同程度的抑制作用。在浓度为0.01g/mL时,醚溶性、醇水溶性色素对苹果腐烂病菌的抑菌率均达100.00%。醇水溶性色素对番茄灰霉病菌的抑菌率为82.14%;醚溶性色素对黄瓜枯萎病菌、小麦赤霉病菌、番茄灰霉病菌和苹果斑点落叶病菌的抑菌率分别为67.11%、61.00%、65.71%和64.18%。     

HCV p7下调基因p7TP2启动子序列的克隆及转录活性检测

【目的】克隆p7TP2基因的启动子区域,并检测HCV p7TP2启动子的转录活性。【方法】通过分析确定p7TP2基因翻译起始密码子ATG上游1 203 bp至下游147 bp的基因组DNA序列作为启动子,克隆启动子片段并构建载体pCAT3-p7TP2-p和pGLB-p7TP2-p,转染HepG2细胞,应用CAT表达系统和双荧光素酶系统检测启动子活性。【结果】克隆了预测具有启动子活性的片段,成功构建了pCAT3-p7TP2-p和pGLB-p7TP2-p载体,转染pCAT3-p7TP2-p的HepG2细胞,CAT表达活性是转染pCAT3-Basic细胞的5.98倍;转染pGLB-p7TP2-p的HepG2细胞,双荧光素酶表达活性是转染pGLB细胞的9.67倍。【结论】克隆的p7TP2启动子序列与预测的序列一致,并且具有启动子转录活性。     

海南狗牙花有效部位提取和体外抗肿瘤活性研究

[目的]初步筛查海南狗牙花抗肿瘤活性部位.[方法]采用MTT比色法测定海南狗牙花4种提取物分别对人非小细胞肺癌细胞(A549)和人乳腺癌细胞(MCF-7)体外生长抑制作用.[结果]海南狗牙花4种提取物对2种肿瘤细胞呈现不同的抑制活性,乙酸乙酯提取物的抗肿瘤活性最强,石油醚提取物次之,正丁醇萃取物较弱而萃取后的水层无抗肿瘤活性.[结论]该研究为深入研究海南狗牙花中具有抗肿瘤活性的单体化合物提供科学依据.     

黑莓籽油提取工艺及功能应用研究

采用超声辅助溶剂萃取法制备了黑莓籽油，并采用MTT法研究了该黑莓籽油对宫颈癌细胞(Hela)、肝癌细胞(HepG2)、乳腺癌细胞(MCF-7)、非小细胞肺癌细胞(A549)和人脐静脉表皮细胞(HUVEC)的抑制增殖活性。该制备方法易操作，试验中所需物品无毒，并发现黑莓籽油对上述4种癌细胞的IC₅₀值分别为176.99、172.18、206.50和413.94μg/mL，而对正常细胞(HUVEC)的IC₅₀值>500μg/mL，表明该黑莓籽油抑制Hela细胞、HepG2细胞、MCF-7细胞和A549细胞增殖活性的作用较强，且无毒，为抗癌药的开发提供了新思路，拓宽了在绿色植物中挖掘新油脂原料的来源；并且该黑莓种籽油突破了传统食用油的局限性，是一类具有优良前景的高级保健食用油。     

紫蛇尾皂苷的初步纯化和生物学活性研究

对紫蛇尾Ophiopholis mirabilis皂苷粗提物进行初步纯化,并对所得产物的抑菌活性、抑制α-葡萄糖苷酶活性和细胞毒活性进行了研究。采用AB-8大孔吸附树脂初步纯化紫蛇尾皂苷粗提物,采用香草醛—高氯酸法测定总皂苷含量,采用滤纸片法测定抑菌活性,采用比色法和MTT法分别测定α-葡萄糖苷酶和MCF-7人乳腺癌细胞的抑制率。结果表明:纯化后的紫蛇尾皂苷纯度增加至48.57%;皂苷粗提物及纯化物的抑菌活性表现一致,均对枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis具有明显的抑制作用,且纯化物的抑菌效果略强;皂苷粗提物对α-葡萄糖苷酶的抑制效果明显,大孔树脂95%乙醇洗脱所得纯化物的抑制率达到94.62%;皂苷粗提物及纯化物对MCF-7人乳腺癌细胞均表现出了很强的细胞毒活性,其中大孔树脂60%、75%、95%乙醇洗脱所得纯化物的浓度为300μg/m L时,细胞抑制率均高达97%以上。研究表明,紫蛇尾皂苷粗提物及纯化物均表现出了很强的选择性抑菌活性、α-葡萄糖苷酶抑制活性和对MCF-7人乳腺癌细胞的细胞毒活性,且纯化物的活性增强。     

云南小粒咖啡活性成分研究

对云南小粒咖啡中度烘烤的熟咖啡豆进行化学成分研究,并从其提取物中分离得到2个已知的贝壳杉烷型的二萜,通过多种一维和二维谱学方法(HSQD、HMBC、ROESY、COSY),并结合相关参考文献,确定了它们化学结构。其中化合物1为mozambioside(1),化合物2为mascaroside(2)。运用MTT检测法对化合物1和2进行了细胞毒活性筛选,结果显示,这些提取物对HL-60、SMMC-7721、A-549、MCF-7以及SW480细胞有较弱的细胞毒活性。     

一株野生粗毛纤孔菌的分类鉴定及其发酵上清液的抗肿瘤活性

[目的]对一株野生粗毛纤孔菌进行分类学鉴定,并分析其发酵上清液抗肿瘤活性,为粗毛纤孔菌的开发利用及抗肿瘤活性机制研究提供理论依据.[方法]通过形态特性观察、ITS序列分析及系统发育进化树构建等方法对一株野生粗毛纤孔菌(简称IH3菌株)进行分类学鉴定,并利用B16、Hep-3B、Hela、MCF-7、HCT-116和4T16种肿瘤细胞及正常细胞HUVEC分析该菌株发酵上清液的抗肿瘤谱.从石油醚、乙酸乙酯和正丁醇中筛选出萃取抗肿瘤活性物质的最佳有机溶剂,利用液相色谱分离技术分离抗肿瘤活性组分,并利用MTT(四唑盐)法分析活性组分对不同肿瘤细胞的半致死浓度(IC50).[结果]IH3菌株的形态特性与粗毛纤孔菌相似,且其ITS序列与粗毛纤孔菌(MF183947.1)的相似度最高,为98%,鉴定为粗毛纤孔菌.系统发育进化树分析结果也显示,IH3菌株属于纤层孔菌属类群,与3个粗毛纤孔菌菌株的亲缘关系较近.IH3菌株的发酵上清液对不同肿瘤细胞的抑制活性排序为:B16>Hep-3B>Hela>MCF-7>4T1=HCT-116.正丁醇萃取的IH3菌株发酵上清液抗肿瘤活性组分对B16肿瘤细胞的抑制率最高,达80%,说明正丁醇对发酵上清液中抗肿瘤活性组分的萃取效果最佳.利用液相色谱分离方法可有效获得纯度较高的单一抗肿瘤活性组分(WIH3),该活性组分对B16、Hep-3B、Hela和MCF-7肿瘤细胞的半致死浓度(IC50)分别为29.322、37.387、47.029和58.009μg/mL.[结论]IH3菌株被鉴定为粗毛纤孔菌,与已发表的粗毛纤孔菌菌株存在遗传差异,可能为粗毛纤孔菌的新亚种,其发酵上清液具有广谱的抗肿瘤活性.     

两种紫苏水溶性色素物质化学性质的研究

以日本红紫苏及本地紫青紫苏为材料，探讨了2种紫苏的水溶性色素物质的基本化学性质及抗氧化活性等，结果表明，不同种类紫苏的水溶性色素物质的化学性质有较大差别，以紫苏色素对热、光等的稳定性及多酚类物质含量、色素含量、抗氧化活性均高于紫青紫苏、多酚类物质和色素物质的含量与紫苏抗氧化活性之间存在显著的相关关系，证明了多类物质在紫苏抗氧化活性中的作用。     

橡子壳色素抗氧化活性研究

本研究以常见的抗氧化剂Vc为对照,对橡子壳色素主要成分和体内外抗氧化活性进行了研究分析。结果表明,橡子壳色素中含丰富的多酚类和黄酮类物质,其中总多酚含量达到27.8%,总黄酮含量8.6%。体外抗氧化实验结果表明,橡子壳色素对DPPH·的清除能力和对Fe3+的还原能力均与其质量浓度呈正相关,其中对DPPH·清除率的半数有效剂量(IC₅₀=10 μg/mL)大于Vc组(IC₅₀=5 μg/mL),当橡子壳色素质量浓度在40 μg/mL时达到了Vc的清除能力;当橡子壳色素质量浓度为1 mg/mL时,橡子壳色素还原能力(A_{710 nm}为0.98)接近Vc的还原能力(A_{710 nm}为1.17)。体内抗氧化实验采用对除空白组外的各组实施60Coγ照射进行氧化损伤实验,分析各组的抗氧化能力。结果表明,模型组小鼠体质量和各器官质量与空白组相比显著下降(P＜0.05),并且辐照的各组小鼠都出现了食欲不振、精神萎靡等不良现象,表明氧化应激模型建立成功;橡子壳色素组的小鼠器官质量显著高于模型组(P＜0.05),低于空白组但无显著差异(P＞0.05),该结果表明橡子壳色素对经60Coγ射线照射的小鼠器官有一定的修复作用。实验小鼠血清中的抗氧化性相关酶以及氧化产物的测定结果进一步表明,橡子壳色素低、中、高剂量组均能显著提高小鼠血清中SOD和CAT的活性,并且显著降低MAD含量(P＜0.05),其中100 mg/(kg·d)剂量组橡子壳色素的作用效果最好,与同质量浓度Vc作用效果相当。橡子壳色素具有较好的体内和体外抗氧化活性,并且体内100 mg/(kg·d)剂量的橡子壳色素与同剂量下Vc的抗氧化效果相当,作为天然抗氧剂具有较好的应用前景。      

生地黄色素的抑菌活性研究

［目的］对生地黄色素的抑菌活性进行研究。［方法］以生地黄为原料,乙醇为萃取剂提取生地黄色素,利用平板打孔法和连续二倍稀释法分别考察生地黄色素对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、产朊假丝酵母和黑曲霉的抑菌活性及最低抑菌浓度。［结果］生地黄色素对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均有一定的抑菌活性,最低抑菌浓度分别为0.0625、0.0312、0.0312g/ml,对酿酒酵母和产朊假丝酵母没有抑菌作用,对黑曲霉的生长有着复杂的影响。［结论］生地黄色素在作为活性天然色素方面具有一定的开发利用价值。     

核桃壳内源抑制物质活性的初步研究

对核桃壳内源抑制物质活性进行了研究,结果表明,核桃壳中含有一定活性的内源抑制物质,其提取液对小麦、黄瓜种子萌发和幼苗生长有明显的抑制作用,抑制作用随着提取液浓度的增大而增强。抑制物质中有易溶于水的成分,也有易溶于乙醚的成分,且水溶性物质对种子萌发和幼苗生长的抑制作用更强。溶于乙醚的抑制物质纸层析分离后在Rf0.1区段对黄瓜种子萌发和幼根生长的抑制活性最强,Rf0.8区段对幼芽生长抑制活性最强;溶于水的抑制物质纸层析分离后Rf0.8区段对黄瓜种子萌发抑制活性最强,Rf1.0、Rf0.3区段分别对幼芽和幼根生长抑制活性最强。 西北林学院学报21卷第3期贾彩霞等核桃壳内源抑制物质活性的初步研究     

The Herbicidal Activity of Mutant Isolates from Botrytis cinerea

Fifteen mutant isolates were obtained by ultraviolet mutation from parent isolate Botrytis cinerea BC-4. Among them three mutant isolates, BC4-1, BC4-2, and BC4-15, showed strong herbicidal activity. BC4-1 showed maximum herbicidal activity for inhibition of germination and growth of Digitaria sanguinalis L. and Arnaranthus retroflexus L. The results also showed that herbicidal activity was influenced by differing pH of PD media, with pH value of 4.0 being the optimum. The crude toxin was extracted using chloroform, petroleum ether, and ethyl acetate, respectively, and the ethyl acetate extracts showed the strongest inhibitory activity on the germination and growth of D. sanguinalis L. and A. retroflexus L. Using HPLC, one fraction with an absorption peak at 271 nm was separated from the crude toxin. This fraction could strongly inhibit the growth of D. sanguinalis L. at a concentration of 100 mg L^-1 and could completely inhibit the seed germination of D. sanguinalis L. and A. retroflexus L. at a concentration of 50 mg L^-1 .     

Antioxidant Activity of Pigment Extracted from Green-Wheat-Bran

The anthocyanin pigment extracted from green-wheat-bran was studied to identify its antioxidant activity.The antioxidant activities of the pigment were evaluated by anti-lipid peroxidation,total antioxidant activity （TAA）,superoxide anion radical scavenging activity （SARSA）,active oxygen scavenging activity （AOSA）,and DPPH （1,1-diphenyl-2 picrylhydrazyl free radical） radical scavenging activity.The results showed that the pigment had higher antioxidant activity and TAA,SARSA,AOSA and DPPH.scavenging activities at a certain concentration than Vc （antiscorbutic vitamin,vitamin C）,and the capacity increased with the increase of pigment concentration.Its TAA was 51.06 U mL-1,1.73 times of Vc,and SARSA 18 025.21 U mL-1,2.26% higher than Vc,and AOSA 3 776.31 U mL-1,1.24 times of Vc.As to the DPPH.scavenging activity of the pigment,there was a trend that higher concentration performed higher activity significantly improved with the company of Vc.The pigment showed significant antioxidant activities evaluated by different assays.Results will provide a better understanding on antioxidant activity of green wheat and allow the screening or breeding of green wheat varieties with higher antioxidant activity for food processing.     

Antifungal, Insecticidal and Herbicidal Properties of Volatile Components from Paenibacillus polymyxa Strain BMP-11

The volatiles produced by Paenibacillus polymyxa strain BMP-11 which was isolated from the rhizosphere soil of cucumber in a greenhouse were analyzed by SPME-GC-MS. Based on the preliminary test, three kinds of purchased commercial products 1-octen-3-ol, benzothiazole and citronellol were chosen to give further assessment of their bioactivity.Antifungal bioassays in sealed dishes revealed that those three compounds strongly inhibited the mycelia growth of the eight pathogens at a low treatment dosage and induced the mycelial morphological abnormalities. During the experiment,we even found that citronellol completely prevented the pigment production of the tested fungus, Fusarium oxysporum,however, 1-octen-3-ol and benzothiazole had slight effect. The germination was inhibited to different degrees when spores of Botrytis cinerea exposed to these compounds for 24 h in water agar plate. Furthermore, fumigation results showed that 1-octen-3-ol and benzothiazole had strong toxicity against Tribolium castaneum, LC50 was 16.76 and 3.50 mg L-1, respectively. The fumigation activity was also found similar to the positive control, 1,3-dichloropropene (LC50=10.13mg L-1). Results of herbicidal assays showed that tested compounds had inhibitory effects on the seed germination and seedling growth of Amaranthus retroflexus, Echinochloa crusgalli and Chenopodium album. Findings of the present study suggested that the antifungal, insecticidal and herbicidal properties of the components were contained in volatiles.These agents or even their derivatives may have a potential to be used as fungicide, insecticide as well as herbicide.     

水分胁迫对紫叶李叶片色素含量与PAL活性的影响

以彩叶植物紫叶李为试验材料,研究了水分胁迫对紫叶李叶片中色素含量和苯丙氨酸裂解酶(PAL)活性的影响。结果表明:随着水分胁迫程度的加重,叶片叶绿素a、叶绿素b及总叶绿素、类胡萝卜素含量下降,叶绿素a与b比值明显上升,叶绿素与类胡萝卜素比值下降,花青素与叶绿素比值增加;PAL活性和花青素含量上升。水分胁迫对叶绿素b的伤害大于叶绿素a,花青素与叶绿素比值的上升是导致叶片显色更加明显的主要原因。     

毛蚶中天然牛磺酸的提取和活性研究

[目的]提取和纯化毛蚶(Scapharca subcrenata)中的天然牛磺酸,并对其活性进行研究。[方法]采用薄层色谱法(TLC)对提取的牛磺酸纯度进行分析,并对其结构用红外光谱(IR)和核磁共振波谱(NMR)进行鉴定,然后对其细胞毒活性进行检测。[结果]毛蚶富含牛磺酸,对人白血病细胞HL-60、肝癌细胞SMMC-7721、肺癌细胞A-549、乳腺癌细胞MCF-7和结肠癌细胞SW480没有明显的细胞毒活性。[结论]该研究为天然牛磺酸的开发和利用提供了依据。