HPLC法测定猪血浆中金霉素的残留量

采用高效液相色谱法(HPLC)测定猪血浆中的CTC残留量。试验采用AgilentHP1100系统,Agilent ODSC18(150 mm×4.6×5)柱,流动相选用乙腈—0.01 mol/L草酸(3+2);检测波长为372 nm;进样量:50μL;柱温:室温。血浆样品经草酸提取后,过C18柱净化,该方法样品前处理简单,药物的线性关系好,相关系数达0.999 89。检测限为0.05μg/mL,平均回收率在75%以上,变异系数均<6.6%。该法前处理简便、灵敏度高、结果准确、可靠。     

新城疫病毒单克隆抗体研究Ⅲ酶标单克隆抗体ELISA夹心法检测鸡新城疫病毒抗原

应用双抗体ELISA夹心法检测禽类新城疫病毒(NDV)抗原,用单克隆抗体或多克隆抗体包被固相载体,将活化的40孔板作为捕捉待检新城疫病毒抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)与单克隆抗体的结合物作为示踪抗体,比较了单克隆抗体和多克隆抗体的捕捉效率.结果表明,NDV单抗2C₁₂、4H₁₀优于血清IgG,同时确定了双抗体ELISA夹心法对不同日龄健康鸡组织产生背景反应的O.D.值基本参数,以X+2SD为判定阈值.捕捉抗体2C₁₂、4H₁₀的工作浓度为500～400μg/ml;示踪抗体2C₁₂、4H₁₀的工作浓度为1:3000～1:2000,ELISA夹心法的灵敏度可达4μgNDV蛋白/ml;对NDV不同毒株感染鸡各脏器的NDV检出率为:肾100%、肺90%.证明用双抗体ELISA夹心法检测鸡新城疫病毒抗原特异,敏感,是禽类新城疫病毒检测的新途径.     

NO对百草枯胁迫下玉米胚根氧化损伤的效应

 比较不同浓度百草枯(即甲基紫精,MV)、外源NO供体硝普钠(SNP)处理以及SNP和MV交互处理条件下玉米胚根活性氧代谢的变化。结果表明:分别用50,100,150μmol/L的MV溶液处理萌发玉米,MV浓度50μmol/L是诱导玉米胚根活性氧“迸发”的适宜浓度,选择 50μmol/L MV与SNP进行交互处理。不同浓度SNP处理玉米胚根时,其CAT,SOD,POD活性呈现“降升降”的变化趋势。低浓度SNP处理使H₂O₂含量减少、O₂^-生速率降低,高浓度SNP则促进其累积,表明低浓度SNP处理有缓减活性氧形成的作用。50μmol/L MV与不同浓度SNP交互处理萌发玉米,其CAT,POD,SOD活性增强,H₂O₂,MDA含量和O₂^-生速率降低,且O₂^-产生速率与SOD活性变化、CAT活性变化与H₂O₂含量变化存在一定的相关性,表明一定浓度的SNP具有抵御MV氧化胁迫的作用。证实了NO对百草枯胁迫下玉米胚根的氧化胁迫具有明显的缓解作用。     

多拉菌素在犬体内药代动力学研究

 采用RP-HPLC法荧光监测器测定单剂量皮下注射多拉菌素［300μg/（kg BW）］）后，犬体内不同时间点的血浆药物浓度。血浆药物浓度-时间数据采用3P97药动软件分析。结果表明，本试验条件下血浆中药物添加浓度在0.1～100 ng/mL范围内与峰面积呈良好线性关系，检测限为0.5 ng/mL。不同浓度水平的日内日间变异系数分别小于3%和4%，各浓度的平均回收率均大于90%。给药后血药浓度－时间数据符合一级吸收一室开放模型，主要药物动力学参数为：t_1/2ka为（0.58±0.13）d，t_1/2β为（4.78±0.31）d，T_max为（2.00±0.29）d，C_max为（20.29±2.04）ng/mL，AUC为（187.43±24.99）（ng·d）/mL。提示多拉菌素在犬体内血药浓度维持的时间长，消除缓慢，且根据其半衰期判断，多拉菌素属于慢性消除药物。     

牛奶中克林霉素残留量的反相高效液相色谱测定方法

目的:研究建立牛奶中克林霉素残留量的反相高效液相色谱测定方法。方法:样品用水相提取,离心分离,经C18固相萃取柱净化,在205nm波长下用二极管矩阵检测器检测。色谱柱为Agilent ZORBOX SBC18柱(4.6mm×250mm,5μm),以0.025mol/L磷酸二氢铵溶液∶甲醇(55∶45,V/V)为流动相,流速1.0mL/m in。结果:克林霉素浓度在1.0~10.0μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为80.3%~93.9%,变异系数为1.23%~3.47%,最低检测限为0.5μg/mL。结论:本方法简便、快速、准确。     

RP-HPLC法测定鸡血浆中头孢拉定浓度

鸡血浆样品用甲醇沉淀蛋白后,过DikmacC18柱(100mm×4.6mm,5μm),柱温:室温;流动相:甲醇-0.02mol/L乙酸胺缓冲液(28∶72),pH4.9;流速:1.0mL/min;检测波长:254nm;检测器:紫外检测器;进样量:10μL。结果表明,检测线性范围为0.5～32.0μg/mL(r=0.9999);最低检测浓度为0.25μg/mL;回收率分别为92.5%、96.4%、98.9%;日内和日间变异系数均小于5%。该方法操作简便、灵敏、重现性好,适用于头孢拉定的临床药代动力学研究。     

版纳斗鸡血液免疫指标的测定

 检测了60日龄和547日龄云南西双版纳斗鸡的IgG,IgM,IgA,C₃,C₄,E玫瑰花环、E总花环等常规血液生化指标。结果表明：60日龄雄性斗鸡的IgG,IgM含量分别比雌性斗鸡高6.3%和10.7%, IgA含量却明显低于雌性斗鸡;C₃,C₄含量分别比雌性斗鸡高14.6%和17.5%;活性E花环和总E花环分别比雌性斗鸡高40.6%和63.1%,差异显著（P≤0.05）。547日龄雄性斗鸡的IgM含量比雌性斗鸡高33.1%,差异显著（P≤0.05）,而IgG,IgA含量却无明显差异（P≥0.05）;雌性斗鸡的C₃,C₄含量分别比雄性斗鸡高43.6%和36.8%;雄性斗鸡的活性E花环和总E花环分别比雌性斗鸡高62.7%和43.1%,差异明显（P≤0.05）。雄性斗鸡的体液免疫、细胞免疫水平、补体含量均明显比雌性斗鸡要高。雄性斗鸡Ig G,Ig A,Ig M含量在60日龄和547日龄均无明显差异（P≥0.05）;而547日龄的C₃,C₄含量、E活性花环、E总花环与60日龄比较有上升趋势;雌性斗鸡 C₃,IgG,IgM含量在547日龄与60日龄比较有下降趋势;而IgA则比60日龄上升57.7%;C₄含量、E活性花环率均有所上升,差异显著（P≤0.05）。     

改进的QuEChERS-LC/MS/MS法快速检测蔬菜中7种农药残留

研究建立了蔬菜中农药多残留的快速检测QuEChERS-LC/MS/MS方法,优化了实验方案,样品以0.1%乙酸的乙腈(V/V)作为溶剂,Agilent Bond Elut提取试剂盒对样品进行1 min提取后,用C18和Agilent Bond Elut净化试剂盒净化。结果表明:7种农药的平均回收率为72%～127%,相对标准偏差为1.3%～16.3%,检出限为0.004～0.022 mg·kg^-1。该方法减少了溶剂用量,缩短了检测时间,每个样品溶剂用量仅为20 mL,每个样品的前处理费用大约为30元,一个实验人员每日可以处理50～60个蔬菜样品,真正实现农残的快速、简便、廉价、有效、灵敏、安全检测。     

高效液相色谱法测定噻虫嗪和功夫菊酯有效成分含量的研究

[目的]建立高效液相色谱法测定农药复配杀虫剂噻虫嗪和功夫菊酯有效成分含量.[方法]测定噻虫嗪采用Agilent ZORBAX Extend-C18色谱柱(250.0 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1％磷酸(30:70,V/V)为流动相,流速0.8～1.5 mL/min,检测波长230 nm,柱温25℃,进样量为5μL,外标法定量;测定功夫菊酯采用Agilent RX-SIL色谱柱(250.0 mm×4.6 mm,5μm),以正己烷-四氢呋喃(990:10,V/V)为流动相,流速0.8～1.5 mL/min,检测波长278 nm,柱温25℃,进样量10μL,外标法定量.[结果]样品精密度良好,48 h内稳定,样品中噻虫嗪质量浓度均大于141 g/L,功夫菊酯质量浓度均大于106 g/L,检测结果与生产车间按配方投料的结果一致.[结论]所建立的方法简便、快速、准确,可用于复配杀虫剂农药噻虫嗪和功夫菊酯有效成分的测定.     

蜡蚧轮枝菌昆明菌株（KM9803）对几种蚜虫的室内毒力测定

 蜡蚧轮枝菌昆明菌株（KM9803）对3种供试蚜虫都有较强的致病力。将3种蚜虫的无翅成蚜用1.0×10⁴～1.0×10⁸分生孢子/mL悬浮液处理后，测得该菌株分生孢子对3种蚜虫的致死中浓度LC₅₀ 分别是3.75×10⁴孢子/mL（桃蚜Myzus persicae）,2.74×10⁴孢子/mL（白尾红蚜Uroleucon formosanum）和0.68×10⁴孢子/mL（麦无网蚜Acythosiphon dirhodum）；但芽生孢子对桃蚜的毒力却较强（LC₅₀ 1.87×10⁴孢子/ml）。当用1.0×10⁸孢子/mL浓度的分生孢子悬浮液处理时，对3种蚜虫的致死中时间LT₅₀分别是4.7d(白尾红蚜),3.6d(桃蚜)和3.6d(麦无网蚜)；而用1.0×10⁵孢子/mL浓度的分生孢子悬浮液处理时，LT₅₀分别为6.7d(白尾红蚜),6.0d(桃蚜)和4.9d(麦无网蚜)。     

杂交改良对撒坝猪肌肉品质的影响——肌肉化学成分分析

 选用24kg左右的去势撒坝猪及其约长撒三元杂交猪各7头，根据基因型分成2组, 按活重变化分为3个试验期 （前期20～35kg，中期35～60kg和后期60～90kg），在同一试验期内饲喂同样的日粮进行饲养试验，当活重达90kg进行屠宰试验，研究杂交改良对云南省本地猪种撒坝猪肌肉化学成分的影响。撒坝猪通过杂交改良后，生长速度和瘦肉率显著提高，但其肉品质均有不同程度的下降。杂交后代鲜肉的总氨基酸含量有降低的趋势，但统计学差异不显著（P＞0.05）；撒坝猪鲜肉的赖氨酸含量显著地比杂交猪的高（P＜0.05），在干肉样中，二者的差异不显著（P＞0.05）；然而，撒坝猪的组氨酸含量在鲜样和干样中都显著地比杂交猪的高（P＜0.01）。肌肉中脂肪酸的测定结果显示，撒坝猪肌肉中的油酸（C_18∶1）和亚麻酸（C_18∶3）的含量显著地比杂交猪的高（P＜0.05）；尽管统计学的差异不显著，撒坝猪肌肉中的豆酸蔻（C_14∶1）, 和棕榈油酸（C_16∶1）显示了比杂交猪的高趋势（P＞0.05）；然而，杂交猪肌肉中亚油酸 （C_18∶2）的含量显著地比撒坝猪中的高（P＜0.05）；两个组的棕榈酸（C_16∶0），硬脂酸（C_18∶0） 和花生酸（C_20∶0）含量相同（P＞0.05）。     

HPLC法测定野生蔬菜中维生素C的含量

[目的]应用反相高效液相色谱法对江苏地区5种野生蔬菜中维生素C含量进行测定。[方法]反相高效液相色谱测定条件为：色谱柱Agilent Zobax C-8（5μm,4.6 mm×150.0 mm）;流动相0.1%草酸-水;流速0.8 ml/min;检测波长251 nm。[结果]维生素C在浓度为50～750μg/ml范围内线性良好,R2=0.999 4,回收率为99.5%～101.8%,RSD=1.07%。该法操作简便,结果准确。对5种蔬菜的维生素C含量测定结果表明,荠菜和芦蒿中的维生素C含量较高,分别为50.9和46.5 mg/100 g;菊花脑中维生素C含量最低,为18.6 mg/100 g。[结论]该研究结果为科学开发利用野菜资源提供了一定的理论依据。     

HPLC Analysis of α-lactalbumin and β-lactoglobulin in Bovine Milk with C4 and C18 Column

Reversed-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) method with C4 column and C18 column for analyzing β-lactoglobulin and α-lactalbumin in bovine milk was developed and the performance and...     

有机酸对粉红女士苹果防褐变的效果研究

研究了没食子酸、植酸、草酸、柠檬酸对粉红女士苹果多酚氧化酶(PPO)的效应,揭示其抑制机制,并在此基础上研究有机酸在鲜榨苹果汁和贮藏过程中防褐变的效果,筛选出安全高效的酶促褐变抑制剂。结果表明,单一有机酸抑制PPO活性的能力表现为:0.2500μmol/L草酸>0.2000μmol/L植酸>0.2000μmol/L柠檬酸,抑制率分别为94.30%、93.08%、81.31%,均表现出一定的浓度依赖性,对PPO均有不可逆的抑制效应。此外,没食子酸对PPO的抑制作用属于可逆过程。0.2000μmol/L植酸和0.2500μmol/L草酸能较好地抑制鲜榨苹果汁的褐变,抑制率分别为87.39%和85.31%;0.5000μmol/L柠檬酸抑制鲜榨苹果汁褐变的能力较弱,抑制率仅为45.15%。单一有机酸对常温下贮藏90d的苹果汁防褐变效果较差。0.3000μmol/L植酸联合0.3000μmol/L草酸、0.5000μmol/L柠檬酸,能较好地抑制鲜榨及贮藏过程中苹果汁的褐变,抑制率分别达到93.19%和90.52%。     

盐酸酸化─蒸馏─离子色谱法测定香菇亚硫酸盐含量研究

建立了盐酸酸化─蒸馏─离子色谱法测定香菇中亚硫酸盐含量的分析方法。香菇在盐酸(体积比1∶3)介质中水蒸汽蒸馏进行提取净化,采用ASRS4型阴离子抑制离子色谱检测,色谱柱为AS18(250 mm×4 mm)不锈钢柱,柱温30℃,23mmol/L KOH溶液作为流动相;流速1.0 mL/min,进样量25μL,电导检测器温度35℃;外标法定量。试验证明,该方法检测线性范围5~50μg/mL,相关系数r=0.9998,最低检出量为2.0×10-9g(S/N=3),最低检出浓度为1.6 mg/kg,香菇中亚硫酸盐添加回收率85.6%~104%,相对标准偏差1.8%~3.4%。该方法能够满足香菇亚硫酸盐质量安全控制要求。     

筛选敏感昆虫检测拟除虫菊酯类农药残留*

 选取拟除虫菊酯类农药中有代表性农药,对长期室内饲养的家蝇、果蝇、马铃薯块茎蛾、米象及黄粉虫等进行毒力测定,筛选出相对敏感昆虫用于检测拟除虫菊酯类农药残留,并通过色谱法对其检测结果进行评价。结果显示:家蝇对拟除虫菊酯类最敏感(溴氰菊酯LC₅₀=0.08487μg/mL,氰戊菊酯LC₅₀=5.5602μg/mL),其检测灵敏度可与色谱相媲美。     

反相高效液相色谱法测定刺五加中2种三萜酸的含量

采用超声技术提取中药刺五加中的乌索酸和齐墩果酸,并建立HPLC-PAD法测定了乌索酸和齐墩果酸的含量。色谱柱为Nova-Pak C18(3.9 mm×300 mm,4μm),流动相为甲醇∶水(体积比,88∶12),流速为0.8 ml/min,二极管阵列检测器检测,检测波长210 nm,柱温25℃。乌索酸线性范围为0.136~1.224μg,线性回归系数为0.999 5;齐墩果酸线性范围为0.052~0.468μg,线性回归系数为0.999 4。样品中乌索酸的平均回收率为98.1%,RSD为1.1%(n=5);齐墩果酸的平均回收率为97.5%,RSD为1.0%(n=5)。该方法操作简便,结果准确、可靠,可用于刺五加中乌索酸和齐墩果酸含量的测定分析。     

草酸胁迫对甘蓝型油菜抗性相关蛋白含量和酶活性的影响

[目的]研究草酸胁迫对甘蓝型油菜抗性相关蛋白含量和酶活性的影响,初步揭示草酸毒素对甘蓝型油菜致病性的生理生化机制,为油菜抗菌核病资源的初筛提供一种更方便、快速的方法.[方法]以草酸溶液对苗期甘蓝型油菜材料GH01进行浸根处理,设置3个浓度（清水对照、1和2 mmol/L草酸溶液）、7个胁迫处理时间点（0、6、12、24、36、48和60h）,分别测定油菜叶片中可溶性物质含量和抗性相关蛋白酶酶活性.[结果]草酸溶液胁迫下,随着胁迫时间增加,油菜叶片中可溶性蛋白和可溶性总糖含量不断增加,而抗性相关酶均呈先升后降趋势,酶活力曲线呈现“峰状”.其中,2 mmol/L草酸溶液胁迫下,SOD、PPO、POD和MDA含量分别在48、24、60和36 h达最大值,分别为359.66 U/g、257.50 U/g·min、44.94 U/g· min和72.86 μmol/L;在1 mmol/L草酸溶液胁迫下,SOD、PPO、POD和MDA含量分别在48、24、36和24 h达最大值,分别为302.17 U/g、215.00 U/g·min、24.01 U/g· min和75.75 μmol/L.[结论]可利用草酸对甘蓝型油菜抗菌核病性进行初步鉴定,草酸溶液浓度以2 mmol/L为宜,其SOD、PPO、POD活性和MDA含量分别在处理48、24、60和36 h时达最高水平.     

高效液相色谱法检测鸡蛋中3种四环素类抗生素

建立了高效液相色谱分析法测定鸡蛋中四环素类抗生素的方法。采用色谱柱为C1(85μm,250mm×4.6mmi.d.)固相萃取小柱,流动相为乙腈/乙酸水溶液(pH值2.5)=35/65(V/V),流速1.0ml/min,检测波长为358nm,同时测定3种抗生素。该方法的最低检出浓度分别为:土霉素0.25μg/ml,金霉素0.11μg/ml,四环素0.52μg/ml,样品中土霉素、金霉素、四环素含量的相对标准偏差(RSD)分别为1.94%、1.20%、0.84%。