大麻SSR标记的开发及指纹图谱的构建

表达序列标签（expressed sequence tags,EST）是开发SSR标记的重要资源.本研究从NCBI中大麻EST数据库中检索到1114个SSR,分布于989条EST序列中,占EST总数的7.66％.其中三、六核苷酸重复基元类型居多,分别占EST-SSR总数的39.84％和34.56％,统计得到三核苷酸重复类型47种,六核苷酸重复类型113种.利用部分EST-SSR序列设计49对SSR引物,其中40对引物有扩增产物,占所设计引物总数的81.63％.进一步用这些引物在24个大麻品种进行多态性检测,29对引物显示多态性,占可扩增引物的72.5％.利用E-7、E-8、E-11、E-18、E-21、E-39及E-48共7对引物构建了24份供试材料的SSR指纹图谱.本研究结果证明了基于大麻EST信息建立SSR标记是一种有效而又可行的方法,并且为这些品种的真伪鉴定和保护提供科学依据.     

利用SNP标记鉴定青稞种质资源

近年来,青稞(Hordeum vulgare var.nudum Hook. f.)育种速度逐步加快,青稞品种的类别和数量日渐增多,形成了丰富的青稞品种资源。然而,在青稞资源的大量引种和品种资源交换过程中,造成了同名异物、同物异名的现象,因而建立高效、准确的青稞品种鉴定技术体系和数据系统迫在眉睫。为基于青稞品种基本信息实现青稞品种的快速和准确鉴定,本研究利用简化基因组(GBS)测序获得的青稞基因组高通量SNP基因分型数据,对314份青稞种质资源进行群体结构分析;根据SNP注释结果,筛选获得位于外显子区的SNP并计算其杂合率和遗传多态性指数;用Genstat的去冗余(IRREDUNDANT)指令通过顺序算法(sequential algorithm)获得能够区分参试青稞种质资源的核心SNP位点组合,并构建DNA指纹图谱,结合参试材料地理来源等基本信息构建青稞品种的分子身份证。结果表明,群体遗传结构分析可将314份参试青稞材料划分为3个类群,类群划分与其材料类型密切相关。从4 954个位于外显子区域的高质量SNP位点中筛选出14个多态性高且能完全区分青稞种质资源的SNP位点,称其为核心SN...     

大豆PRR家族基因KASP标记的开发

伪响应调节因子(Pesudo-Response Regulators,PRRs)基因是植物光周期开花调控途径中的关键基因。本研究根据前期对GmPRR家族基因单倍型的鉴定结果,筛选出在编码区存在变异的5个GmPRR基因,开发出竞争性等位基因特异性PCR(Kompetitive Allele Specific PCR,KASP)分子标记,即GmPRR4-KASP、GmPRR8-KASP、GmPRR10-KASP、GmPRR13-KASP和GmPRR14-KASP。利用上述5个KASP标记对48份不同生育期组的大豆种质进行分型,并与6个环境的大豆开花时间进行关联分析,发现SNP-Chr05:2178871(GmPRR4)、SNP-Chr10:4326635(GmPRR8)、SNP-Chr12:5520945(GmPRR10)和SNP-Chr17:8022010(GmPRR13)等4个位点与大豆开花时间显著关联。本研究开发的KASP标记可应用于大豆开花期性状的分子辅助选择和种质资源鉴定,对促进大豆生态适应性的遗传改良具有一定利用价值。     

工业大麻种衣剂的筛选

用4个大麻专用种衣剂和6个其它作物种衣剂对云南推广使用的工业大麻品种"云麻1号"种子进行包衣,经筛选对比试验,结果表明不同类的种衣剂或药种配比量,对出苗有影响.各种衣剂处理对植株生长及经济性状无不良影响.试验优选出了 3个种衣剂及其相应的药种比 ,红种子大麻种衣剂1# (药种比150)、12%甲硫悬浮液(药种比150)、中国农大大麻种衣剂(药种比180),它们对"云麻1号"安全、有效,有显著保苗和增产作用.     

云南花生种质资源的鉴定与筛选

对云南省搜集保存的２６６份花生种质资源的生育期、植物学特征、生物学特性、主要经济性状和品质性状进行了鉴定和评价,初步筛选出早熟种质７７份、高产种质５２份、高脂肪含量种质６８份、高贮藏性种质２３份、抗叶斑病种质４０份,为我省早熟、高产、优质、耐贮、抗病的花生新品种选育提供了亲本材料。     

花生种质资源耐盐性筛选鉴定初报

对引进的１４８份花生种质资源在芽期和苗期进行了耐盐性筛选鉴定。以１％ＮａＣｌ溶液作发芽试验和苗期鉴定，芽期胺盐害百分率分级。１级和２级均无，３级３份；苗期用耐盐３级３份和４级较优的１份共４份进行试验，表现较好的仅有１份。     

工业大麻中4种大麻素脱羧工艺研究

为了探究脱羧过程中温度、时间对大麻二酚、四氢大麻酚、大麻萜酚、次大麻二酚4种大麻素含量的影响,试验检测不同脱羧温度、脱羧时间下4种大麻素脱羧前后含量变化。结果表明,最佳的脱羧温度为120℃,最佳脱羧时间为60 min。大麻二酚酸、四氢大麻酚酸脱羧转化率可以达到98%,大麻萜酚酸转化率为95%,次大麻二酚酸转化率为90%。研究结果为工业大麻中多种大麻素产品开发提供理论依据。     

工业大麻种衣剂的筛选

用4个大麻专用种衣剂扣6个其它作物种衣剂对云南推广使用的工业大麻品种“云麻1号”种子进行包衣，经筛选对比试验，结果表明：不同类的种衣剂或药种配比量，对出苗有影响。各种衣剂处理对植株生长及经济性状无不良影响。试验优选出了3个种衣剂及其相应的药种比，红种子大麻种衣剂1#（药种比1：50）、12％甲硫悬浮液（药种比1：50）、中国农大大麻种衣剂（药种比1：80），它们时“云麻1号”安全、有效，有显著保苗扣增产作用。     

大豆耐盐性种质的分子标记辅助鉴定及其利用研究

大豆耐盐种质的鉴定对于促进大豆耐盐育种具有重要作用。本文利用已获得的大豆耐盐性基因的共显性PCR标记，对选自于国家作物种质库的59份耐盐和盐敏感种质加以鉴定，同时进行了田间耐盐性重复鉴定，并对种质库耐盐性记载结果、田间耐盐性重复鉴定结果与分子标记鉴定结果进行比较，从中选出田间耐盐性重复鉴定结果与分子标记鉴定结果一致的耐盐种质42份，分析了这些种质间的遗传多样性，为大豆处质资源的改良及耐盐遗传育种中的亲本选配提供了理论依据，同时对分子标记应用于种质鉴定和育种实践进行了有益的尝试。     

云南2花生种质资源的鉴定与筛选

对云南省搜集保存的２６６份花生种质资源的生育期、植物学特征、生物学特性、主要经济性状和品质性状进行了鉴定和评价,初步筛选出早熟种质７７份、高产种质５２份、高脂肪含量种质６８份、高贮藏性种质２３份、抗叶斑病咱质４０份,为我省早熟、高产、优质、耐贮、抗病的花生新品种选育提供了亲本材料。     

红麻种质资源遗传多样性和分子鉴定技术研究Ⅰ.红麻AFLP-银染技术和种质资源指纹图谱的构建

通过摸索和优化实验条件,建立了红麻的AFLP-银染实验体系,获得了清晰的红麻种质资源AFLP指纹图谱.通常不同品种的红麻种质资源在形态特征上差异很小,但AFLP-银染技术检测到不同来源和不同品种的在红麻种质资源中存在较大的遗传差异.这一技术对红麻种质资源的鉴定和遗传多样性的检测非常有效.     

玉米抗冷种质资源的筛选与鉴定

以296份玉米自交系为试验材料,通过低温发芽、苗期低温胁迫和生理生化指标的测定,结合田间验证,最终筛选出3个玉米抗冷自交系。开发了3对EST-PCR分子标记,用以区分感冷和抗冷的自交系。     

利用KASP标记检测青海和西藏小麦品种中光周期基因分布

为了解青海和西藏小麦品种中光周期基因的分布情况,采用KASP标记对青海和西藏249份小麦品种光周期基因 Ppd-D1、 Ppd-B1和 Ppd-A1等位变异组成进行检测。结果显示,在 Ppd-B1位点上,237个品种携带光周期不敏感型等位变异 Ppd-B1a(95.18%),12个品种携带光周期敏感型等位变异 Ppd-B1b(4.82%);在 Ppd-A1位点上,233个品种携带光周期不敏感型等位变异 Ppd-A1a(93.57%),16个品种携带光周期敏感型等位变异 Ppd-A1b(6.43%);在 Ppd-D1位点上,221个品种携带光周期不敏感型等位变异 Ppd-D1a(88.76%),28个品种携带光周期敏感型等位变异 Ppd-D1b(11.24%)。光周期不敏感型等位变异 Ppd-B1a和 Ppd-A1a分别在青海和西藏小麦品种光周期反应中占主导地位。西藏和青海小麦品种中共存在6种等位变异组合类型,其中青海小麦品种中存在5种等位变异组合类型,不存在 Ppd-D1a/Ppd-B1b/Ppd-A1a类型,西藏农家品种中存在4种等位变异组合类型,不存在含光周期敏感型等位变异 Ppd-A1b的类型。等位变异组合 Ppd-D1a/Ppd-B1a/Ppd-A1a在青海和西藏小麦品种中分布最广。     

高粱抗病虫优异种质资源鉴定与筛选研究

1996～2000年,在田间采用人工接菌法进行高粱抗病性鉴定和利用田间自然发生的害虫种群与人工辅助接虫相结合的方法进行高粱抗虫性鉴定,对l282份高粱种质资源进行了高粱丝黑穗病、高粱靶斑病、高粱蚜虫和玉米螟等4种病虫害的抗性同步鉴定。划清了被鉴定资源对不同病虫害的抗性等级,筛选出兼抗2种病虫害的双抗性资源93份,兼抗3种病虫害的多抗性资源9份。这些抗病虫特性优异高粱资源,对于我国高粱抗病虫育种和选育多抗性品种具有重要的利用价值。     

三峡库区瓠瓜种质资源考察和鉴定

在三峡库区的云阳,涪陵等１０县市作物种质资源考察中,收集到２９份瓠瓜种质资源,后在成都进行了田间种植鉴定。三峡库区瓠瓜种质资源类型齐全,品种较为丰富。介绍了可供其他地区利用的３人瓠瓜品种。     

江西新引进棉花种质资源的鉴定与筛选

为有效利用引进的棉花种质资源,2009～2010年对近年从国内外棉花研究机构引进的种质资源51份进行了生育期性状、产量性状、纤维品质及抗棉铃虫性鉴定。结果表明：该批材料类型较丰富,生育期大部分属于中熟偏晚型,单株结铃数变幅较大,单铃重整体表现一般,大部分在5.5 g以下,衣分均较高,抗虫性整体表现也一般;纤维品质整体表现为中等偏上,纤维整齐度较好,马克隆值偏高,伸长率中等,纤维长度和比强度整体较好。该批材料中有强结铃性材料3份,高衣分材料18份,长纤维材料2份,高比强度材料6份,大铃材料2份,高抗虫材料4     

十字花科根肿病抗性种质资源初步筛选与鉴定

近年来根肿病爆发式蔓延,对十字花科作物生产造成了严重威胁,以油菜为例,据不完全统计至2022年底全国发病已超133万公顷。培育抗病品种是阻止根肿病快速蔓延最经济有效的方式,而目前使用的抗性位点只有PbBa8.1和CRb,面对不同地区复杂多样的根肿菌和随时产生的新的变异类型,需要不断更新抗性种质资源。本研究通过接菌鉴定筛选了14份抗根肿病大白菜,根据已有的抗性位点相关标记鉴定发现DG117、ZS105、SG01、SR06、JQ07五份大白菜中不含CRb位点,且抗性强于华双5R/华油杂5R;含有CRb位点的KL02对Pb XM（新民菌）的抗性表现强于现有材料409R,可能含有新的优异抗性位点。以上材料可作为新的根肿病抗性资源应用于甘蓝型油菜的抗根肿病新品种选育,为现有抗性资源做出补充。     

咖啡种质资源DNA指纹图谱的构建

选用4份咖啡种质资源为材料,对S1-S100共100个RAPD引物进行筛选,选出多态性好的引物10个。利用这10个RAPD引物对28份咖啡资源进行扩增,共获得86条带,平均每个RAPD引物扩增出8.6条带,多态性谱带74条,多态性条带比率为86.0%。结果表明：供试咖啡种质资源遗传多样性较丰富;10个多态性好的RAPD引物中S8的鉴别效率最高,能将全部供试材料全部区分开,通过整合软件录入如所属种类、种质名称、采样地点、引物、RAPD-PCR 扩增数据以及电泳图片等相关信息,形成指纹图谱二维编码,构成咖啡种质资源的DNA指纹图谱,为咖啡种质资源品种权益保护及分子身份证构建奠定了基础。     

大麻RAPD分子标记的引物筛选

利用RAPD分析技术对野生型大麻Ym43及栽培品种大麻Ym36的基因组DNA进行分析,优化了大麻总DNA的提取方法和PCR扩增条件,从Operon公司的OP系列280个随机引物中筛选出42个扩增效果良好的引物,为以后RAPD技术应用于大麻的遗传研究奠定了基础。     

红麻种质资源遗传多样性和分子鉴定技术研究——Ⅱ．红麻种质资源的遗传多样性和亲缘关系的AFLP分析

用扩增性酶切片段长度多态性(AFLP)分析了来源于世界不同国家地域的23份红麻种质资源和2份红麻近缘种玫瑰茄资源。用选取的6对引物组合获得了505条AFLP分子标记。结果认为AFLP分析是红麻品种鉴定和遗传关系检潮的非常有效的手段，同时根据AFLP分子标记检测到的红麻与玫瑰茄之闻的遗传差异支持了它们在分类学上的独立性。红麻种质资源的AFLP分析结果支持了红麻起源于非洲的假设，并证实了栽培红麻首先被引到亚洲．并进一步被传播到中北美洲。