堆型艾美球虫3-1E基因在大肠杆菌中的可溶性表达及鉴定

将堆型艾美球虫（E．acervulina）3-1E基因克隆至pET-32a（＋）载体中。转化大肠杆菌BL21，在37℃下，用终浓度为1.0mmol／L的IPTG诱导表达，得到相对分子质量约为38500的重组蛋白。Western blot检测证实，该重组蛋白可以与特异性抗血清结合。在20℃条件下，以终浓度分别为2．0、1．0、0．5mmol／L的IPTG进行诱导．当IPTG终浓度为0．5mmol／L时，以可溶性形式存在的目的蛋白含量最高。     

2种猪源链球菌菌体细胞表面疏水性及体外结合纤连蛋白的检测

采用盐析法测定了马链球菌兽疫亚种ATCC35246株（简称35246）和猪链球菌2型9801株（简称HA9801）的表面疏水性。35246在浓度为1．0mol／L的硫酸铵中2min内析出，HA9801在0．6mol／L的硫酸铵中析出。用不同浓度的人纤连蛋白（Fn）包被ELISA板，采用ELISA方法检测了对数生长后期的35246和HA9801体外结合固定Fn的情况。35246的D415随细菌浓度的升高而增大，而9801的D415与对照相比，经t检验差异不显著（P〉0．05）。采用间接免疫荧光试验，对二者体外结合游离的人Fn的情况进行了检测，结果在2种细菌周围均见绿色荧光。结果表明，二菌均为表面疏水菌；35246株既可结合固定的Fn，又可结合游离的Fn；而HA9801株仅与游离的Fn结合。     

稀释液中添加半胱氨酸对绵羊冷冻精液品质的影响

在绵羊冷冻精液稀释液中添加0mmol／L、2．5mmol／L、5．0mmol／L、7．5mmol／L4个不同梯度的半胱氨酸，通过测定解冻后的精子活率、畸形率、顶体完整率、质膜完整率以及各项酶（SOD、GSH、GSH-PX、CAT和MDA）的活性来确定最适添加量。结果表明，添加5．0mmol／L的半胱氨酸组的精子活率和顶体完整率均极显著高于对照组和其他组（尸〈0．01），而畸形率显著低于对照组和其他试验组（P〈0．05）；各项酶指标中，5．0mmol／L半胱氨酸组SOD和GSH浓度与其余各组间差异不显著（P〉0．05），MDA浓度极显著低于对照组和7．5mmol／L试验组（P〈0．01），CAT和GSH-PX活性极显著或显著高于对照组和其他试验组（P〈0．01，P〈0．05）。说明冷冻稀释液中添加5．0mmol／L的半胱氨酸可有效保护精子免受过氧化物的损害。     

非酯化脂肪酸对体外培养犊牛原代肝细胞中炎性因子表达及其活性的影响

在建立犊牛原代肝细胞体外培养模型的基础上，通过培养液中添加不同浓度的非酯化脂肪酸（Nonesterifiedfatty acids，NEFAs），运用实时荧光定量PCR和ELISA方法，测定NEFAs对肝细胞中炎性因子TNFα、IL-6和IL-1β的mRNA表达及其活性的影响。结果显示，NEFAs作用肝细胞9h后，与对照组相比，高浓度NEFAs（1．8mmol／L）组肝细胞中TNFα、IL-1β的mRNA表达水平显著增加（P〈0．05），IL-6的mRNA表达水平在2．4retool／L时极显著增加（P〈0．01），低浓度NEFAs（0．6、1．2mmol／L）组肝细胞中TNFα、IL-1β和IL-6的mRNA表达水平无显著差异（P〉0．05）；并且TNFα、IL-1G的活性在NEFAs浓度达到1．8、2．4mmol／L显著高于对照组（P〈0．01），且呈剂量依赖性作用，IL-6的活性在在NEFAs浓度达到1．8mmol／L显著高于对照组（P〈0．01），在2．4mmol／L也高于对照组，但差异不显著。结果表明，高浓度NEFAs在-定程度上能引起或加剧奶牛肝细胞炎性反应，可能是导致产后奶牛肝功能炎性损伤主要因素。     

玉树牦牛12项血液生理生化指标的测定

对80头玉树牦牛的12项血液生理生化指标进行了测定。结果为：血红蛋白（Hb）86．41±13．07g／L,红细胞压积（PCV）0．46±0．034L／L,全血钾（BK）34．01±4．57mmol／L,红细胞钾（EK）67．24±9．45mmol／L,血清钾（SK）6．25±1．23mmol／L,血清钠（SNa）141．7±8．15mmol／L,血清总钙（STCa）2．3±0．52mmol／L,血清游离钙（SFCa）0．644-0．38mmol／L,血清结合钙（SBCa）1．63±0．37mmol／L,血清游离钙百分率27．82±7．3％,血清总蛋白87．3±11．3g／L,全血铁28．95±4．37mmol／L。公牦牛与母牦牛组各项指标均无差异显著;成年牦牛与牦牛犊之间除血清总蛋白外,其余各项指标均无显著差异。     

细胞外高钙对鸡肾小管上皮细胞活力和NO产生的影响

为探讨一氧化氮（NO）在高钙致鸡痛风中的作用，利用已建立的鸡原代肾小管上皮细胞的体外研究模型，经不同浓度的钙进行处理．通过MTT比色法观察了高钙对细胞活性的影响；采用硝酸还原酶法测定了不同浓度高钙处理原代肾小管上皮细胞后培养上清液中亚硝酸根／硝酸根（NO2^-／NO3^0）的含量（NO的静态氧化形式）。结果表明，分别用4．0mmol／L（试验组Ⅰ），8．0mmol／L（试验组Ⅱ），12．0mmol／L（试验组Ⅲ），16．0mmol／L（试验组Ⅳ）Ca^2＋处理细胞，各时段组的细胞活性与对照组相比均显著降低（P〈0．01），且细胞外钙浓度越高，细胞活性降低越明显。高钙处理细胞24h后．各组培养液中NO的含量较对照组升高不显著；48h后，试验Ⅳ组的NO比对照组显著升高；72h后，各试验组与对照组相比NO的含量均显著升高。这些结果说明，细胞外高钙能够直接损害肾小管上皮细胞，而NO可能在肾小管上皮细胞的损害中起一定的作用。     

人参皂苷Rh2硫酸化衍生物抗炎作用的分子机制

通过构建的细菌脂多糖（LPS）诱导小鼠巨噬细胞（RAW264．7）的体外炎症模型,研究了不同质量浓度人参皂苷Rhz硫酸化衍生物B2（Rh2-B2）对TNF-a、IL-6、IL-1β和IL-10合成的影响,以及对NF-kB信号通路的影响。结果显示,1mg／L和5mg／L的人参皂苷Rh2-B2能显著抑制RAW264．7合成TNF-a、IL-6和IL-18（P〈0．01）,同时显著促进IL-10的合成（P〈0．01）,并且通过显著抑制IkBa的降解而阻止NF-kB／p65易位入核（P〈0．01）。结果表明,人参皂苷Rh2—B2可能通过阻断NF-kB信号通路,抑制LPS诱导的炎性细胞因子的产生,进而发挥其抗炎作用。     

常山提取物和常山乙素对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

为了明确常山提取物和常山乙素的免疫学活性,应用MTT法测定2种药物体外对小鼠脾T、B淋巴细胞增殖的影响。结果显示,常山碱提取物质量浓度达到200mg／L时显著抑制了小鼠脾淋巴细胞的增殖（P〈0．05）;质量浓度在10mg／L时对ConA诱导T淋巴细胞增殖有显著的促进作用（P〈0．05）;质量浓度在10～200mg／L对LPS诱导B淋巴细胞增殖有一定的促进作用（P〉0．05）。常山乙素质量浓度达到0．1mg／L时显著抑制了小鼠脾淋巴细胞的增殖（P〈0．05）;质量浓度在0．001～0．01mg／L时对ConA诱导T淋巴细胞增殖有一定的促进作用（P〉0．05）,质量浓度在0．0001mg／L时具有显著的促进作用（P〈0．05）;质量浓度在0．0001～0．005mg／L对LPS诱导B淋巴细胞增殖有一定的促进作用（P〉0．05）。结果表明,常山提取物和常山乙素具有良好的免疫增强活性,为今后相关研究提供了免疫学参考。     

碱性盐胁迫对芨芨草苗期生长特性的影响

以芨芨草（Achnatherum splendens）为试验材料,分别用浓度为0（CK）、25mmol／L、50mmol／L、75mmol／L、100mmol／L、125mmol／L和150mmol／L的NaHCO,和Na2CO3对其苗期进行胁迫,测定其根长、株高、相对生长率（RGR）和根冠比（R／T）,以确定其耐碱胁迫的生长特性。结果表明：在碱性盐胁迫下,芨芨草的根冠比显著高于对照（P〈0．05）;与NaHCO3相比,在Na2CO3的胁迫下,芨芨草的株高、根长、相对生长率、存活率受到的影响较大。低浓度的NaHCO3对芨芨草的生长有一定的促进作用,Na2CO3却严重抑制了芨芨草的生长。在相同浓度下,Na2CO3对芨芨草的伤害程度大于NaHCO3且对根系的影响更大。     

蕨麻多糖对小鼠淋巴细胞增殖和一氧化氮分泌的影响

为探讨蕨麻多糖（Potentilla anserine polysaccharide，PAP）免疫调节的作用机理，观察了PAP对小鼠脾淋巴细胞体外增殖和分泌一氧化氮的影响。结果显示，50mg／L PAP配合ConA或LPS（lipopolysaccharide，脂多糖）能使小鼠脾淋巴细胞在体外显著增殖（P〈0．05）；100、200及400mg／L PAP配合ConA或LPS可使小鼠脾淋巴细胞在体外极显著增殖（P〈0．01）；与对照组相比，PAP以不同浓度（50～400mg／L）处理小鼠脾淋巴细胞后一氧化氮分泌量均显著升高（P〈0．05）。试验结果表明，蕨麻多糖能明显促进体外培养的小鼠脾淋巴细胞增殖和分泌一氧化氮，与ConA或LPS有协同作用。     

海北州黑白花奶牛和黄牛唾液钠、钾含量的测定

对青海省海北州西海镇的30头黑白花奶牛和20头黄牛的唾液钠、钾含量进行了测定。结果表明：（1）黑白花奶牛唾钠为98．63mmol/L，唾液钾为16．87mmol／L, 钠／钾之比为6．68／1；（2）黄牛唾液钠为121．6mmol/L，唾液钾为16．41mmol/L，黄／钾之比为10．97／1；（3）黑白花奶牛和黄牛的唾液钠含量之间有显著性差异（P＜0．05）。     

应用半定量RT-PCR方法测定围产期奶牛肝PEPCK-C mRNA的丰度

建立了奶牛肝PEPCK-CmRNA丰度的半定量RT-PCR检测方法，其优化的PCR反应条件（25pL）为：57C退火、2．4mmol／L Mg^2＋、26～28个循环数、cDNA不小于2．6mg／L、2：1的PEPCK-C／β-actin引物比。同时，应用该方法检测了围产期奶牛肝中PEPCK-CmRNA丰度，结果显示：产前低血糖奶牛肝PEPCK-C mRNA丰度显著低于对照组，但是产后却高于对照组。围产期奶牛血糖水平与肝PEPCK-C mRNA丰度之间的相关系数，对照组为0．68（P=0．14），低血糖组为0．82（P=0．047）。因此，围产期奶牛肝PEPCK-CmRNA丰度对奶牛血糖浓度具有调节作用，低血糖奶牛表现得更为明显。     

祁连马鹿血清生化指标的测定

对祁连县养鹿场围栏放牧的37～4O头马鹿的12项血清生化指标进行了测定,结果为：K 5．35±0．64mmol／L,Na 140．19±4．47mmol／L,Ca 2．36±0．19mmol／L,P2．45±0．42mmol／L,Cˉ101．48±5.54mmol／L,总蛋白86.24±5.49g／L,白蛋白55.20±5.63g/L,球蛋白31.04±4．57g／L,A／G1．83±0．36,血清蛋白质组分（％）：A63．99±4.85,α13.03±1.18,α26.38±1·40,β10．43±2,02、γ16．17±3．21,GPT282．9±68.8nmol·s－1/L,GOT617．6±247．7nmol·s－1/L。公鹿与母鹿的各项指标无显著差异（P＞0．05）。     

牛乳中五种无机元素含量测定

对西宁奶牛场34头荷斯坦奶牛乳中钾、钠、氯、总钙、总磷、无机磷、结合磷的含量进行了测定,结果为：钾,34．49±8．42（mmol／L）;钠,37．61±26．88（mmol／L）;氯,35．18±11．72（mmol／L）;总钙,26．25±4．72（mmol／L）;总磷,25．58±6．00（mmol／L）;无机磷,16．62±3．15（mmol／L）;结合磷,9．11±5．00（mmol／L）。总磷中无机磷占65％,结合磷占35％。     

p38介导β-羟丁酸对原代培养犊牛肝细胞凋亡的影响

本试验旨在探讨β-羟丁酸（BHBA）对体外原代培养犊牛肝细胞凋亡的影响以及p38MAPK在其中的调控作用。选择培养72h的肝细胞,添加不同浓度的BHBA（0、0．6、1．2、2．4mmol／L）,培养9h,每个浓度3个重复。另外选取细胞,p38MAPK抑制剂SB203580（10pmol／L）预处理1h后,添加BHBA,使其终浓度为2．4retool／L;PI／An—nexinV—FITC双染,运用荧光显微镜观察肝细胞凋亡情况;ELISA法检测p38的活性;实时荧光定量PCR方法检测p38、Caspase-3、Caspase9、bcl2基因的mRNA表达水平。结果表明,与对照组相比,1．2和2．4mmol／I—BHBA组的肝细胞凋亡明显增加;p38酶活性明显升高;p38、caspase-3和caspase-9基因mRNA表达水平均显著增加（P〈0．01）。bcl2基因mRNA表达水平显著降低（P〈0．05）;添加p38抑制剂后,caspase-3和caspase-9基因mRNA表达水平显著降低（P〈0．01）,bcl-2基因mRNA表达水平显著增加（P〈O．05）。高浓度的BHBA可以诱导体外原代培养犊牛肝细胞凋亡,p38在BHBA诱导的细胞凋亡中发挥重要作用。     

正交试验设计优化离子色谱法测定硫氰酸钠淋洗液浓度

以背景电导、色谱柱压力、保留时间、峰高和峰面积为指标,优选硫氰酸钠淋洗液测定浓度。采用L93^4正交试验设计,优化出最佳淋洗液浓度为5．0mmol／L Na2CO3＋1．0mmol／L NaHCO3＋15％丙酮。结果表明可有效地缩短分离时间,为离子色谱法应用到测定乳制品中硫氰酸钠含量提供了客观试验数据和技术保障。     

不同季节肉用种公牛精液品质与生理常值、血清及精清生化指标相关关系研究

以利木赞和夏洛来种公牛为试验牛，研究不同季节对其精液品质、冻精产量、生理常值、血清及精清生化指标的影响。结果表明：（1）与其它季节相比，夏季肉用种公牛的原精活力、冻精活力、活精于百分数、顶体完整率均显著降低，而精于畸形率显著升高（P〈0．05）。精子密度以秋季最低。（2）冻精产量夏季处于最低水平，平均每月仅为7388支。（3）夏季肉用种公牛的血清LH、睾酮、T3、皮质醇的含量分别为48．12、4．15、1．11、4．89ng／L，显著低于春、秋、冬季（P〈0．01）。（4）夏季肉用种公牛血清钠、钾、钙、镁均处于最低水平，显著低于其它季节（P〈0．01）。（5）夏季肉用种公牛精清睾酮水平明显下降，显著低于春季、秋季和冬季。（6）精清钠、钾、钙夏季含量最低，分别为83．12mmol／L、18，77mmol／L和4．63mmol／L；精清镁含量由春季至秋季呈显著下降趋势；精清磷含量夏季最高，为4．65mmol／L，显著高于春季、秋季和冬季。（7）肉用种公牛精清ALP夏季含量为1784．3U／L，显著高于春、秋两季，但低于冬季。（8）精清睾酮与精液品质各指标存在显著相关；血清生化指标与精清生化指标存在显著相关；直肠温度、呼吸频率与精液品质及血清生化指标存在显著相关性，与精清生化指标相关性不大。     

外源 Si 对盐胁迫下甘草幼苗形态及生理指标的影响

为深入了解 Si 对盐胁迫下甘草幼苗的影响,本实验采用培养皿滤纸床进行发芽试验,以乌拉尔甘草幼苗为试验材料,在两种浓度 NaCl 溶液胁迫下设置不同浓度的硅溶液对甘草幼苗进行处理,通过测定幼苗形态（胚根、胚芽）及生理（质膜相对透性、丙二醛和过氧化物酶）指标,以探讨在盐胁迫下外源硅对甘草幼苗形态及生理指标的影响。结果表明,在 NaCl 胁迫下,加入硅（Si）溶液后可以有效增加幼苗胚芽和胚根的长度及重量。在低盐（100 mmol／L）胁迫下,Si 浓度为0．4 mmol／L 时对胚根生长的促进最强;在高盐（200 mmol／L）胁迫下,Si 浓度为0．8 mmol／L 时对胚根生长的促进作用最强。外源 Si 也不同程度提高了过氧化物酶活性、渗透调节物质脯氨酸含量,以及丙二醛含量和质膜相对透性。由此可见,在盐胁迫条件下,加入适宜浓度的外源硅,可以通过保持一定的抗渗透胁迫能力和清除活性氧的能力,进而保持膜的稳定,来缓解盐胁迫对甘草幼苗生长的抑制作用。     

柴达木改良绒山羊红细胞钾型的研究

采用火焰光度法对94只柴达木改良绒山羊的红细胞钾型进行了调查研究。结果发现：（1）柴达木改良绒山羊红细胞钾浓度存在多态性，有高钾和低钾两种表型，以高钾型为优势表型（79．79％）；（2）高钾型山羊的红细胞钾浓度在37－83.2mmol/L之间，低钾型的在16－28．8mmol/L之间；（3）K^L和K^h等位基因频率分别为0．1068和0．8932，基因杂合度为0．1782。     

出血性大肠杆菌噬菌体933W的分离鉴定和保存

采用双层琼脂平板法从EHEC 0157 EDL933基因组中诱导分离出了编码志贺毒素的噬菌体933W，并利用PCR技术对其进行了鉴定。对933W的不同保存方法进行比较，结果表明，将噬菌体933W置于SM溶液中加入CaCl2、lgCl2至终浓度10mmol／L，明胶浓度至0．1％（W／V）并于4℃冷藏是保存933W较好的方法。