科学家发现了控制禽流感病毒增殖的关键步骤

要点:1.发现了激活禽流感病毒自我增殖的蛋白质;2.发现了识别人体细胞受体的基因变异;3.上述两个发现为开发预防禽流感的疫苗和药物铺平了道路。     

日发现抑制禽流感病毒增殖物质

日本一项研究证实，裙带菜孢子叶所含的一种物质具备抑制禽流感病毒增殖的功效。     

连翘有效成分对炎症模型的作用

目的:研究连翘提取物对细胞炎症模型的抗炎作用。方法:将连翘提取物按不同浓度作用于细胞炎症模型,观察细胞的形态变化,利用MTT法测定各孔的光吸收值。结果:连翘苷和连翘黄酮对照组细胞形态镜检观察未见明显变化,OD值略比空白对照组低;黄酮对照组细胞几乎全部破碎;不同浓度的大肠杆菌对照组细胞破裂、聚集成团,作用显著(P<0.05),且随着浓度的升高,对细胞形态的改变愈加显著。结论:连翘提取物对炎性细胞有不同程度保护,与同浓度菌液对照组相比,保护作用显著(P<0.05),在100μL浓度菌液中保护作用尤甚,具有一定的抗炎作用。     

日本发现抑制禽流感病毒增殖物质

日本一项研究证实,裙带菜孢子叶所含的一种物质具备抑制禽流感病毒增殖的功效。据《日经产业新闻》22日报道,富山大学教授林利光等研究人员确认,抑制禽流感病毒增殖的这种     

日发现抑制禽流感病毒增殖物质

日本一项研究证实,裙带菜孢子叶所含的一种物质具备抑制禽流感病毒增殖的功效。据《日经产业新闻》22日报道,富山大学教授林利光等研究人员确认,抑制禽流感病毒增殖的这种物质名为“裙带菜孢子叶褐藻素”。褐藻素是褐藻类植物包含的硫酸化多糖类物质的总称。     

禽网状内皮组织增殖病病毒对禽流感疫苗免疫效果的影响

为研究禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)对禽流感病毒(AIV)疫苗免疫效果的影响,本研究将1日龄SPF鸡经腹腔感染REV HLJR0901株后,分别于10日龄免疫重组AIV灭活疫苗(H5N1亚型,Re-6)、禽流感-新城疫重组二联活疫苗(r LH5-6)及10日龄和24日龄两次免疫r LH5-6疫苗,并设未感染REV的免疫对照组,于免疫后检测血清HI抗体,并采用H5N1亚型高致病性AIV攻毒。结果显示:实验鸡感染REV后HI抗体滴度均低于相应的未感染REV的免疫对照组。感染REV后,免疫一次Re-6灭活疫苗、r LH5-6活疫苗及两次r LH5-6活疫苗的实验鸡攻毒后的存活率分别为70%、60%及80%,排毒鸡数分别为4/10、4/10及3/10;未感染REV的免疫鸡均不发病、不死亡、不排毒;空白对照组实验鸡攻毒后3 d内全部死亡并且排毒。本研究表明,REV对AIV灭活疫苗和活疫苗均具有明显的免疫抑制作用,加强免疫r LH5-6疫苗可以部分减轻该抑制作用。     

禽流感病毒的分布及灭活

尽管禽流感疫情已基本得到控制,但禽流感的预防仍不可忽视。如何把住禽流感从口入关,这就需要我们对禽流感病毒的特性、体内外分布及灭活条件有所了解。本文将就这些问题作一简单介绍。1禽流感病毒的体外分布及灭活     

禽流感病毒血凝素基因在大肠杆菌中的表达

采用RT-PCR技术扩增禽流感病毒HAI基因,将HAI结构基因克隆于pGEX-T载体上,测序结果表明插入的片段为HAI目的基因.切下目的基因HAI,重组到含有谷胱甘肽(GST)的融合蛋白原核表达载体PGEX-4T-2,获得的重组质粒经PCR、酶切以及序列分析鉴定,表明HAI基因插入的位置、大小和读码框架均正确.证明成功构建了融合表达载体pGEX-HAI.构建好的重组质粒,经1 mmol/LIPTG诱导,在大肠杆菌BL21中得到了大量表达,经过4 h表达量既达到高峰.融合蛋白GST-HAI的分子量为62KD,以包涵体形式存在.Western-Blot分析表明,融合蛋白能够与H5亚型AIV阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性.     

干扰素对鸡胚内H9N2亚型禽流感病毒滴度的影响

为探讨干扰素在动物上的运用,笔者利用H9N2亚型禽流感病毒与不同剂量干扰素（IFN）一起接种鸡胚,运用HA方法测定病毒效价,研究了干扰素干扰H9N2亚型禽流感病毒在鸡胚内增殖的情况,试验结果表明,高中低剂量干扰素都有抑制病毒增殖的作用,而3个试验组之间没有明显差异（P>0.05）。但是在一定的时间内,高剂量组干扰素与中低剂量组相比能够明显的抑制病毒增殖,表明高剂量组干扰素在一定时间内抑制H9N2禽流感病毒的作用比较明显,这在生产中有一定的应用价值。     

禽流感病原学研究进展简

禽流感（avianinfluenza,AI）是由A型禽流感病毒（avianinfluenzavirus,AIV）引起的一种禽类的感染疾病综合征。本文通过对禽流感病毒的结构和分子生物学特征等的描述,为H5N1禽流感病毒致病机理的认识及临床诊断提供帮助。     

H9亚型禽流感病毒对MDCK细胞增殖及其培养基过氧化氢含量的影响

为了探讨H9亚型禽流感病毒对MDCK细胞增殖及其培养基过氧化氢含量的影响,将不同剂量的H9亚型禽流感病毒接种MDCK细胞单层,吸附1.5h后弃去再加入新的DMEM维持液,每隔12h取上清液测定HA滴度、乳酸脱氢酶(LDH)活力以及过氧化氢(H2O2)含量。同时,本试验采用MTT法测定不同剂量病毒接种对MDCK细胞增殖的影响。结果表明,以10-3EID50、10-4EID50病毒剂量接种细胞后,病毒HA滴度分别在36h和48h达到滴度最大值(9log2)以及LHD活力的最大值,上清液中H2O2含量在48h时显著(P<0.05)高于空白对照组和低剂量病毒接种组;接种病毒后36h以内对MDCK细胞生长具有显著地(P<0.05)促进作用,之后会显著(P<0.05)抑制细胞的增殖。综上所述,H9亚型禽流感病毒能在前期促进MDCK细胞的增殖,随着病毒增殖对细胞损伤加大,LDH漏出量增加,促凋亡因子H2O2参与介导了这一过程。     

禽流感病毒血凝素与核蛋白在重组禽痘病毒中的共表达

为克服禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)仅诱导机体产生亚型特异性免疫应答的不足,本研究拟将病毒核蛋白(NP)基因与HA基因在重组禽痘病毒中实现共表达。首先构建转移载体,从测序质粒pUCNP中切下目的基因克隆到载体pSY538早晚期启动子LP2EP2的下游,再将含有禽痘病毒早晚期启动子LP2EP2的NP基因片段亚克隆到已有的AIVHA基因重组禽痘病毒转移载体中,即得到同时含有HA和NP两种基因的重组转移载体pSY(HA NP)。将转移载体脂质体转染已感染禽痘病毒亲本株S-FPV-017的鸡胚成纤维细胞。根据报告基因β-半乳糖苷酶(LacZ)基因的表达,蓝白斑法筛选重组病毒,经数轮蚀斑纯化,PCR鉴定及West-ern-blot分析,结果表明所获得的重组病毒能高效表达AIVHA及NP两种蛋白。此研究为进一步研制更为有效的禽流感基因工程活病毒载体疫苗奠定了基础。     

禽流感病毒分子生物学研究进展

禽流感 ( Avian Influenza,AI)是严重危害畜牧业和人类健康的一种传染性疾病 ,该病以引起禽类的呼吸系统以及全身性败血症为特征。多年来在世界上许多国家和地区都发生过此病 ,危害严重 ,经济损失巨大。世界各国都非常重视 ,对其进行了大量研究工作。现在从基因组、毒力及其变异、病毒蛋白、基因疫苗等角度对禽流感病毒的分子生物学研究进行综述。     

禽流感病毒M2基因在原核系统中表达及其抗原性分析

M2蛋白是禽流感病毒的跨膜蛋白，该结构蛋白具有潜在的抗原性，是禽流感病毒的3种表面抗原之一，在机体内不仅能刺激产生抗体，而且能引起CTL反应。由于其氨基酸序列高度保守，因此以M2蛋白作为抗原，可对不同亚型的禽流感毒产生一定的保护性免疫。     

禽流感H9亚型病毒WD株毒种的纯化研究

采用鸡胚终点稀释法并结合ND抗血清中和法对禽流感H9亚型病毒WD株毒种进行了纯化。将纯化的WD株毒种在SPF鸡胚连续传12代，对各代次毒种进行了毒价测定，选择一定代次的毒种进行了免疫原性试验及外源病毒检验。结果表明，WD株在鸡胚中连续传12代，其HA价稳定在1：512—1：1024，毒价在10^7.0-10^8.3 EID50／0．1mL；不同代次毒种不含外源病毒，免疫原性均符合要求。由此可见，毒种的纯化方法是有效的，将WD株毒种限制在12代内是可行的，并建立了该毒种的种子批。     

Optimization of Proliferation Parameter of H1N1 Influenza Virus in Chicken Embryo

In order to study the best propagation parameters of H1N1 subtype influenza virus in chicken embryo,this study was conducted to research the effects of egg selection and preservation before hatching and hatching parameters setting on production of H1N1 subtype influenza virus.In the egg selection and preservation,we mainly investigated the egg weight,egg shape index,storage period,disinfection time and method and other factors,the results showed that egg weight of 55 to 65 g,egg shape index of 1.30 to 1.35,egg storage period of 1 to 4 d,storage temperature of 16 to 18 ℃,humidity of 70% to 80%,during storage period,eggs formaldehyde fumigation time 30 min,we could provide the best eggs for H1N1 subtype influenza vaccine production.The effect of hatching parameters on production of H1N1 subtype influenza virus,this experiment mainly investigaed incubation temperature,humidity,times of turning over eggs,aeration and other parameters,the results showed that in the production of H1N1 subtype influenza virus,the optimal parameter set to hatch:temperature 1 to 7 d was 38.2 ℃,8 to 9 d was 38.0 ℃,10 d was 37.8 ℃;Humidity was 65% to 70% from 1 to 10 d;Turning over eggs frequency was 1 times/2 h,before and after each dip 45°;1 to 5 d aeration set to 4,6 to 10 d set to 5.The results provided quality chicken hatchery technology for H1N1 subtype influenza vaccine production in order to ensure the quality and yield of allantoic fluid.     

H1N1亚型流感病毒鸡胚增殖参数的优化

为了研究最佳的H1N1亚型流感病毒鸡胚增殖参数,本试验进行了孵化前种蛋的选择与保存、鸡胚孵化中各参数设定等因素对H1N1亚型流感病毒产毒量影响的研究。其中种蛋的选择与保存,主要考察了蛋重、蛋形指数、保存期、消毒时间及方法等因素,结果显示,蛋重为55~65 g,蛋形指数为1.30~1.35,种蛋保存期为1~4 d,保存温度为16~18 ℃,保存湿度为70%~80%,保存期种蛋的甲醛熏蒸消毒时间为30 min时,可以为H1N1亚型流感疫苗生产提供最佳的种蛋。孵化过程中孵化参数对H1N1亚型流感病毒产毒量的影响,本试验主要将孵化温度、湿度、翻蛋、通风等参数作为研究对象,结果显示在生产H1N1亚型流感疫苗时,最佳孵化参数设定为:温度1~7 d为38.2 ℃、8~9 d为38.0 ℃、10 d为37.8 ℃,湿度1~10 d为65%~70%,翻蛋频率为1次/2 h,前后倾角各为45°,通风风门设定为1~5 d为4、6~10 d为5。本试验结果为H1N1亚型流感疫苗生产提供优质的鸡胚孵化技术,确保鸡胚尿囊液的质量和收获量。     

禽流感病毒番鸭分离株对不同禽类致病性的研究

将禽流感病毒番鸭分离株ZM的感染性鸡胚尿囊液静脉或肌肉接种不同禽类,同时设鸡源JC株对照,以了解毒株的致病特点。结果显示ZM株与同期分离JC株致病能力相当,两毒株均对鸡、鹅、番鸭、鹌鹑和鹧鸪显示了很强的致病能力,致死率50％-100％,死亡禽类的肝、肾、肺、脾、胰腺等多个组织器官均存在严重的损伤。鸽子,肉鸭和绍鸭(除zM株致死一只绍鸭外)均未发生死亡,外观健康。