一株猪源大肠埃希氏菌卡那霉素耐药基因的研究

提取一株猪源大肠埃希氏菌卡那霉素耐药菌株E.coliBJ96147的质粒DNA进行转化,转化子能稳定表达其全部抗生素抗性,表明E.coliBJ96147对卡那霉素（K）、庆大霉（GM）、链霉素（S）、氯霉素（C）、四环素（Tc)、复方新诺明等六种抗生素的抗性由耐药性R质粒介导;根据已发表的编码卡那霉素抗性的磷酸转移酶[APH（3′）-Ⅱ]钝化酶基因的核苷酸序列,设计合成了一对引物P1和P2,用PVR技术检测其钝化酶基因,结果该引物扩增出了预期的578bp大小的PCR产物,淫限制性内切酶HindⅢ进行酶切分析,发现产物被切成二条带,与预出现的389bp及189bp二条带相符,说明PCR可用于检测猪源大肠埃希氏菌卡霉那素磷酸转移酶[APH（3′）-Ⅱ]钝化酶基因。     

中药复方对猪源多重耐药大肠埃希氏菌的耐药性消除研究

为研究中药复方对多重耐药大肠埃希氏菌的耐药性消除效果,以从仔猪腹泻病例分离的1株多重耐药大肠埃希氏菌为研究对象,测定杨树花-地榆、杨树花-地锦草、杨树花-马齿苋和地榆-马齿苋4个中药复方的最小抑菌浓度,通过扫描电镜和透射电镜观察该菌株在中药复方作用后微观结构的变化,采用影印法和RT-PCR法测定各中药复方对该菌株耐药表...     

猪场源大肠埃希氏菌分离鉴定及耐药性分析

旨在分析新疆某规模化猪场大肠埃希氏菌耐药情况,为其临床治疗提供依据。采集某规模化猪场动物源和环境源样本240份,分离、纯化并鉴定大肠埃希氏菌,采用K-B法对临床常用18种抗菌药物进行药敏试验,同时对相关药物耐药基因进行检测。经分离、纯化、生化鉴定得到大肠埃希氏菌182株。分离菌株药敏试验结果显示,敏感率在头孢噻呋钠为100%、庆大霉素为71.2%、卡那霉素为69.1%、氟苯尼考为68.2%、氨苄西林为64.3%,耐药率在青霉素和四环素为100%、林可霉素为71.3%、阿莫西林为67.6%、复方新诺明为67%、链霉素为58.2%、磺胺甲恶唑为57.3%。分离菌株耐药基因检出率显示,tetB为96.2%、floR为95.5%、tetA为84.1%、aadA为80.8%、aac(6′)-Ib为72.0%、strA为70.9%、qnrS为68.1%、ermC为59.0%、sul3为57.1%、qnrB为53.3%、qnrA为51.6%。结果表明,该猪场大肠埃希氏菌耐药情况严重,并携带多种耐药基因。     

不同地区猪源大肠埃希菌磺胺类药物耐药性研究

对不同地区猪源大肠埃希菌磺胺药物耐药性进行系统性调查研究.对从山东、内蒙古、山西分离到的161株猪源大肠埃希菌测定磺胺药物对其最低抑菌浓度(MIC值),结果表明大肠埃希菌对磺胺药物高度耐药,对磺胺异恶唑(SF)和新诺明(SMZ)的耐药率分别为91.30%和90.06%.同时根据GenBank上已有的二氢叶酸合成酶基因S...     

狐和貉源大肠埃希菌药敏试验及耐药基因检测

为了解秦皇岛昌黎县狐和貉源致病性大肠埃希菌耐药性及耐药基因的情况,以昌黎县分离的15株狐和貉源致病性大肠埃希菌为试验菌株,采用药敏纸片法对抗菌药物进行药敏试验,并对四环素类耐药基因tetA、tetB、tetC、tetD,氨基糖苷类耐药基因strA-strB、aadA1,磺胺类耐药基因sul1、sul2、sul3进行PCR检测。结果显示,15株大肠埃希菌分离菌株对土霉素、多西环素、头孢拉定、新霉素、青霉素、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶的耐药率均为100%;对阿莫西林、庆大霉素、头孢曲松、阿米卡星、大观霉素、链霉素、复方新诺明、氨苄西林、环丙沙星耐药率分别为93.33%、53.33%、33.33%、73.33%、86.66%、86.66%、86.66%、66.67%和66.67%。9种耐药基因tetA、tetB、tetC、tetD、strA-strB、aadA1、sul1、sul2、sul3的检出率分别为0、46.67%、26.67%、13.33%、40%、100%、53.33%、46.67%和53.33%,其中四环素类耐药基因以tetB的检出率最高,氨基糖苷类耐药基因以aadA1的检出率最高,磺胺类耐药基因的检出率相差不大。说明15株狐和貉源大肠埃希菌耐药谱广,耐药性高,耐药基因流行普遍。     

7株羊源大肠埃希氏菌的分离鉴定及相关耐药基因的研究

旨在了解四川某规模化养殖场羊源大肠埃希氏菌的耐药表型及耐药基因的携带情况。收集50份简州大耳羊源小肠内容物,采用细菌学方法对大肠埃希氏菌进行分离鉴定;采用K-B纸片法评价分离菌对常用抗菌药物的敏感性;对细菌携带的β-内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、喹诺酮类耐药基因的携带情况进行分析。结果显示,从50份样本中分离鉴定出7株羊源性大肠埃希氏菌;药敏试验及多重耐药试验结果显示,7株大肠埃希氏菌对阿莫西林表现出全部耐药;对氨苄西林、四环素、链霉素的耐药率分别为42.86%、71.42%和28.57%,且表现了一定的多重耐药性,其中3耐占42.86%。7株分离株对β-内酰胺类bla_TEM-1基因检测的携带率为100.00%,氨基糖苷类rmtB、rmtC、rmtD基因携带率均为14.29%,四环素类Tet(A)、Tet(C)、Tet(D)、Tet(E)、Tet(M)基因携带率分别为71.43%、14.29%、42.86%和42.86%、42.86%,喹诺酮类qnrD、qnrS、oqxA基因携带率分别为57.14%、71.43%和71.43%。研究结果表明,7株羊源大肠埃希氏菌...     

鸡源大肠埃希氏菌流行病学调查及耐药性分析

为了解广东韶关地区鸡源大肠埃希氏菌的流行病学及其耐药性特点,本研究通过2022年对采集自广东韶关地区41个规模养鸡场和28个土鸡散养场的鸡喉头、肛门粪便、病死鸡的肝脏、心血、脾、肠道内容物共737份样品进行细菌分离纯化、病原菌的生化鉴定和药敏试验,研究广东韶关地区鸡源大肠埃希氏菌的流行病学及其耐药性特点。结果显示,541份样品分离到大肠埃希氏菌,检出率73.41%,总体泄殖腔大肠埃希氏菌检出率87.78%,咽喉部大肠埃希氏菌检出率58.24%,死鸡病料大肠埃希氏菌检出率78.38%,规模场大肠埃希氏菌检出率为73.72%,散养场大肠埃希氏菌检出率为73.01%。分离菌株普遍对阿奇霉素、头孢噻肟、阿米卡星、氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星敏感,对青霉素、氨苄西林、链霉素、卡那霉素、四环素、阿莫西林、氟苯尼考、泰乐菌素、林可霉素、克林霉素耐药,多重耐药比高达79.71%。规模场分离菌多重耐药比为97.56%,散养场多重耐药比为53.57%。本研究为广东韶关地区鸡源大肠杆菌病的防控提供了参考。     

多重耐药的肉鸡源大肠埃希氏菌基因组完成图及耐药性分析

为研究2株分离自宁波某养殖场鸡粪样品中的多重耐药大肠埃希氏菌的耐药机制,采用微量肉汤稀释法检测2株菌的耐药表型、全自动生长曲线测定仪测定细菌生长动力,用第3代PacBio RSⅡ进行全基因组测序.结果显示,菌株ECCHD184和ECCWS199对10种以上抗菌药物耐药.多种抗菌药物联合使用对2株菌生长动力影响较小,反映...     

猪源大肠埃希氏菌耐药性观察

大肠埃希氏菌是一种容易产生耐药性的细菌 ,用药不当 ,可导致治疗上的失败。 1 999年 4～ 6月 ,在为西宁地区某猪场进行仔猪黄痢的诊治时 ,从 1 2 7头母猪、种公猪、仔猪直肠中分得 92株大肠埃希氏菌 ,为了掌握该猪场大肠埃希氏菌的耐药情况 ,指导临床用药 ,曾随机抽取 8株致病菌株 ,用纸片扩散法做了药敏试验 ,现将结果报告如下。1　材料与方法1 .1　菌株致病性大肠埃希氏菌试验菌株 ,来自该猪场的三栋猪舍 ,共 8株 ;其中二栋生产母猪舍各 2株 (Ｄ2 3、Ｄ2 5、Ｄ4 1 1、Ｄ4 2 1 ) ,分娩母猪舍的母猪 2株 (Ｄ71 3、Ｄ71 5)、仔猪 2株 (Ｄ70…     

丹顶鹤源大肠杆菌耐药性的检测与分析

对扎龙自然保护区丹顶鹤源大肠杆菌进行分离培养,开展大肠杆菌耐药性调查。采用纸片扩散法测定各分离菌株对17种抗微生物药的敏感性。结果表明:丹顶鹤源大肠杆菌分离株对各抗微生物药的敏感性不同。受试菌株对氨苄西林、头孢噻吩的耐药率分别为57.5%、47.5%,对氟苯尼考、氨曲南、阿莫西林/棒酸均敏感。     

胶东地区耐药猪源大肠杆菌Ⅰ型整合子-基因盒流行状况分析

在胶东地区119株多重耐药大肠杆菌中,共92株菌有I型整合子整合酶基因,检出率达77.31%。92株I型整合子携带大肠杆菌共扩增出7类不同大小的基因盒插入区片段,大小分别为1008bp、1318bp、1586bp、1663bp、1913bp、1945bp、3149bp,其中以大小为1008bp的插入区片段的检出率最高,为31.67%。而检出率最低的为长度为1318bp的基因盒插入区。将基因盒插入区扩增片段的测序结果与Genebank中的相关序列进行比对,得出Ⅰ型整合子携带的耐药基因盒种类分别为aadA1、aadA2、aadA5、aadA22、aadB、dfrA1、dfrA12、dfrA17、dfrA27、lnuF、cmLA6、aar-3、orfF分别编码对相应药物的耐药性。     

虎源大肠杆菌耐药性的检测与分析

对黑龙江省哈尔滨市东北虎林园虎源大肠杆菌进行分离培养,开展大肠杆菌耐药性调查。采用纸片扩散法测定各分离菌株对14种抗生素的敏感性,结果表明:虎源大肠杆菌各分离株对各抗生素的敏感性不同。对氨苄西林高度耐药,耐药率为100%;对四环素、复方新诺明的耐药率也均在80%以上;对氨曲南、阿莫西林/克拉维酸钾敏感率为70%以上。     

鹅大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

为了对鹅大肠杆菌的临床治疗提供指导并为制备大肠杆菌自家灭活疫苗奠定基础,采集疑似病例的病料,用麦康凯培养基分离细菌,对分离的细菌进行形态学鉴定、生化鉴定、血清型鉴定、致病性试验及药敏试验。结果显示,所分离到的菌落呈粉红色、光滑湿润、边缘整齐;革兰氏染色为阴性小杆菌,两端钝圆,多单个存在;共鉴定出15株大肠杆菌,其中4株O₃₅型,3株O₇₈型,3株O₂₆型,2株O₇型,1株O₁₀₉型,1株O₁₄₁型,1株O₂型;动物试验表明所鉴定的菌株对小鼠和雏鹅均有较高的致死率;体外抑菌试验结果发现强力霉素、阿莫西林对该场的鹅致病性大肠杆菌具有较强的抑制作用。本研究为有效防制鹅大肠杆菌病提供了理论依据,对于控制规模化鹅场大肠杆菌等细菌性疾病具有重要的应用价值。     

乌鲁木齐市宠物猫源大肠杆菌耐药性及耐药基因检测

为了解宠物猫源大肠杆菌对临床常用抗菌药物的耐药性及其耐药基因携带情况,在乌鲁木齐市多家宠物医院采集宠物猫肛拭子样品59份进行大肠杆菌的分离鉴定,通过琼脂稀释法测定10种抗菌药物的最小抑菌浓度,利用PCR方法检测13种耐药基因。结果:分离鉴定出大肠杆菌47株,分离率79.7%(47/59)。分离菌对四环素(TET)(83.0%)、阿莫西林-克拉维酸(A/C)(66.0%)和磺胺异噁唑(FIS)(66.0%)耐药情况严重;对头孢他啶(TAZ)、头孢曲松(CRO)、恩诺沙星(EN)、庆大霉素(GEN)耐药率在38.3%～48.9%;对环丙沙星(CIP)、阿米卡星(AMK)敏感性较好,未检出亚胺培南耐药菌株。菌株多药耐药分布在5～8耐,占比59.6%,耐药表型以1耐TET和6耐A/C+GEN+CRO+TAZ+TET+FIS为主。共检出ant(3″)-Ia、aac(6′)-Ib、bla_TEM、bla_CTX-M、qnrS、tetA、tetB、tetM、sulⅠ、sulⅡ10种耐药基因,检出率分布在8.5%～57.4%,未检出耐药基因oqxB、bla     

长春地区猪源大肠杆菌的分离鉴定和耐药性分析

为了解吉林省长春地区猪源大肠杆菌的耐药情况,于2013年采集318份猪源样品,分离鉴定大肠杆菌275株。以氨苄西林、头孢噻肟等15种药物进行了药物敏感性实验,多重 PCR 方法进行系统进化分群。结果表明,大肠杆菌分离株对四环素、氨苄西林和磺胺甲基异恶唑耐药最严重（83.63%、52.72%、51.27%）,全部菌株对美洛培南、多粘菌素敏感,其中176 株菌表现为对3类以上抗生素的多重耐药（64.00%）。从仔猪腹泻样品分离大肠杆菌对β-内酰胺类抗生素、喹诺酮类抗生素、四环素、氯霉素及磺胺甲基异恶唑的耐药率显著高于健康猪和猪肉样品分离株的耐药率。大肠杆菌分离株主要为 A 群和 B1群。研究获得了吉林长春地区猪源大肠杆菌耐药性的基本流行病学数据,为指导养殖业的临床用药及耐药性监测提供了依据。     

广西某地区猪源大肠杆菌耐药性及部分菌株耐药基因调查

试验旨在探究广西某地区猪源大肠杆菌的耐药性及部分菌株所含耐药基因情况,为预防及治疗动物性大肠杆菌类疾病提供参考。采用麦康凯琼脂培养基及伊红美蓝琼脂培养基初步鉴定、显微镜镜检、分子生物学16S rRNA鉴定、药物敏感性二倍肉汤微量稀释法等方法进行大肠杆菌的分离鉴定,并结合PCR相关技术对部分菌株的三十余种耐药基因进行检测。结果显示,从广西某地区采集的猪源病料中共分离得到65株猪源大肠杆菌,其均为多重耐药大肠杆菌且多集中于六重耐药与七重耐药。按所耐抗菌药物的种类分析发现其对β-内酰胺类、磺胺类、大环内酯类药物具有较高耐药性,耐药率分别98.46%、90.77%及84.62%,进一步分析发现其主要是对头孢噻呋钠、阿莫西林、磺胺间甲氧嘧啶、阿奇霉素等抗菌药物具有较高耐药性,对美罗培南、阿米卡星、黏杆菌素较为敏感。对部分菌株所含耐药基因进行整理发现,其多含有四环素类（tetA、tetM）、β-内酰胺类（CTX-m-u）及磺胺类（Sul2）耐药基因。综上所述发现广西地区猪源大肠杆菌耐药性情况较为严重,所含耐药基因也相对较多,因此在实际生产中需采用联合用药等相关措施进行疾病治疗以达到快速高效治疗疾病的目的。     

Resistance Analysis and Genotype Detection of ESBLs-producing Swine E.coli Strains in Parts of Guizhou Province

To find out the drug resistance and the distribution and prevalence of ESBLs genotypes of E.coli strains on scale pig farms in Guizhou, the antimicrobial susceptibility of 164 E.coli strains were determined.And the genotype of ESBLs was identified and determined by CLSI standard method, DNA was amplified and the 4 genotypes of drug resistance plasmid of ESBLs were analyzed by PCR.The results showed that the drug resistance rates of 164 E.coli strains to ten kinds of antimicrobial agents were ceftiofur 93.29%, ampicillin 87.19%, tetracycline 86.59%, gentamicin 81.10%, streptomycin 53.66%, polymyxin 51.83%, ciprofloxacin 53.05%, kanamycin 47.56%, chlortetracycline 34.76% and florfenicol 21.95%, respectively, and most of them were multiple drug resistance strains, during which there were 137 strains ESBLs positive, detection rate was 83.54%, and the detection rates of 4 regions were different.The detection rates of TEM, CTX-M-1, SHV and OXA-1 genes of 137 ESBLs-producing E.coli strains were 90.51%, 70.07%, 51.82% and 43.07%, respectively.And the detection rates were various in 4 regions.The results showed that the drug resistance of E.coli strains from scale pig farms was serious in Guizhou, and the detection rate of ESBLs strains was very high, the drug resistance gene detection rate was extremely high, and most drug resistance strains were the composite genotype drug resistant.To prevent and cure colibacillosis in veterinary clinic effectively, we should reinforce monitoring and studying about the ESBLs-producing drug resistance bacteria.     

贵州部分地区猪源大肠杆菌耐药性分析及ESBLs基因型检测

为了解贵州地区规模养猪场大肠杆菌菌株耐药情况和ESBLs基因型的流行情况,试验采用CLSI推荐的方法对采自贵州省4个地区规模养猪场的164株大肠杆菌进行药物敏感性试验和产ESBLs菌的检测,并用PCR方法对TEM、SHV、OXA-1和CTX-M-1 4种常见ESBLs基因进行检测。结果显示,164株大肠杆菌对10种常用抗菌药物耐药率分别是头孢噻呋93.29%、氨苄西林87.19%、四环素86.59%、庆大霉素81.10%、链霉素53.66%、多黏菌素51.83%、环丙沙星53.05%、卡那霉素47.56%、金霉素34.76%和氟苯尼考21.95%,且大多为多重耐药,其中检测出ESBLs阳性菌株137株,阳性率为83.54%,各个地区的检出率不同;137株产ESBLs大肠杆菌中,TEM、SHV、OXA-1和CTX-M-1基因的检出率分别为90.51%、70.07%、51.82%和43.07%,且多为复合基因型耐药菌株,各地区的各种基因检出率不同。试验结果表明,贵州部分地区的猪源大肠杆菌耐药现象严重,ESBLs菌株的检出率很高,耐药基因的检出率也极高,且多为复合基因型耐药菌株,应加强当地产酶耐药菌的监测和研究,有效防制此类细菌引发的疾病。