绿色荧光蛋白研究进展

来源于海洋多管水母属的绿色荧光蛋白(GFP)基因是目前惟一在细胞内稳定表达,在蓝光或长紫外光的激发下,不需要任何反应底物及其他辅助因子就能发出绿色荧光的新型报告基因,无种属、组织和位置特异性,且能监测基因表达、信号转导、共转染、蛋白运输与定位,以及细胞系谱分类等。GFP对细胞无毒性,且检测方法简单,结果真实可靠,目前在多种原核和真核生物研究中得到广泛的应用。文章就GFP的生化特性、GFP的改进及其在分子生物学研究中的应用潜力进行简要阐述。     

藻红蛋白标记抗鸡IgG荧光抗体的高效制备

藻红蛋白的斯托克位移大,荧光量子产率高,荧光明亮,是一种应用前景广阔的荧光染料.制约藻红蛋白应用的主要因素是分离纯化困难及其成品售价昂贵.通过我们已经建立的藻红蛋白低成本高效制备平台.使其应用于预防兽医学检测成为可能.首次采用适宜摩尔浓度的交联剂SPDP将藻红蛋白与抗鸡IgG抗抗体以摩尔比1:1高效交联,经高效液相色谱法纯化制备出藻红蛋白标记的抗鸡IgG荧光抗抗体.本研究对制备的荧光抗抗体从荧光特性、吸收光谱特性、抗体活性、纯度及稳定性等方面进行了鉴定.结果表明,藻红蛋白标记的抗鸡IgG荧光抗体为电泳纯,荧光明亮,抗体活性高,性质稳定,可用于鸡传染病的间接免疫荧光检测.     

绿色荧光蛋白的研究进展

绿色荧光蛋白（GFP）作为一种新型、方便的报告基因,具有很多理想特性,它灵敏度高, 能在细胞内稳定表达, 不需要添加任何底物或辅助因子, 不使用同位素, 也不需要测定酶的活性等, 已成为目前最优良的标记基因之一。其显著特点是在不加外源物质的情况下,受紫外光激发,就能在原核和真核活细胞中发出绿色荧光,而且荧光性质稳定,对细胞无毒,其特有的生化性质使其在细胞生物学和分子生物学领域有着广泛的应用前景。     

动物遗传标记的研究进展及应用

遗传标记已经从形态标记发展到分子遗传标记。中间经历了细胞标记和生化标记。本文阐述了各个阶段遗传标记的特点、原理、及其应用;总结了各种标记方法的优缺点,阐述了分子遗传标记。由于各种遗传标记的不同优势,在实际应用中应该相互结合相互补充,从各个角度揭示生物的遗传本质,以便更好地培育优良品种,保护生物多样性,保存人类赖以生存的生物源和生态环境。     

绿色荧光蛋白(GFP）在分子遗传学上的研究进展

作为一种新型、方便的报告基因，来自多管水母属的绿色荧光蛋白（GFP）具有很多理想特性。如当受到蓝光或紫外光照射时，能够发出明亮的绿色荧光，且这种荧光不需要外源底物和辅因子，因此，它的表达可用于监测活的生物体中的基因表达和蛋白质定位，在分子生物学中有着广泛的应用前景。     

遗传标记的研究进展

生物化学和分子生物学的快速发展使用于育种的遗传标记经历了不同的发展阶段，本文对不同的遗传标记进行了较详尽的分类和描述。     

利用荧光标记SSR构建火龙果种质资源分子身份证

以145份火龙果种质资源为研究对象,基于从200对EST-SSR引物中筛选出的20对核心引物,通过荧光毛细管电泳技术检测分析扩增产物片段大小,应用基因型编码方法构建火龙果种质资源的分子身份证。结果表明,20对SSR引物共检测到等位基因(Na)117个和带型(基因型)231个,平均每个引物扩增等位基因(Na)5.9个,扩增基因型为11.6个;平均有效等位基因数(Ne)为4.03个;平均多态性信息含量(PIC)为0.688。采用个位数字和小写英文字母对不同带型进行编码,成功构建了145份火龙果种质资源的分子身份证,实现不同种质的有效区分。研究结果提高了种质资源的鉴定和利用效率,同时为火龙果的品种鉴定和植物新品种权保护提供了理论依据和技术参考。     

绿色荧光蛋白技术在益生菌研究中的应用前景

畜禽生产中,抗生素的不合理使用在畜禽产品中极易形成抗生素残留超标的安全隐患,不仅威胁人类健康,也制约着养殖业的可持续发展。益生菌正是在这种情况下作为抗生素的有效替代品应用于动物饲料中。但是,有关益生菌制剂发挥益生作用的机理还不是很清楚,而通过现代生物技术对有益菌株进行遗传标记,是研究和阐明其在动物体内作用机理的重要技术手段和有效途径之一。绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）作为新的报告系统,已开始逐渐应用于饲用微生物的动态监测和作用机理研究中,且已表现出良好的应用前景。     

荧光蛋白的研究进展与应用

绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)于1962年被发现,由于它可以发出稳定的荧光,不具有物种专一性,且易于在细胞内表达,已作为标记物广泛地应用于生命科学领域。本文对荧光蛋白的发现、作用机理及其应用进展进行了综述。最后,本文阐述了GFP在动物营养相关领域的研究和应用。     

蜜蜂遗传标记研究进展

遗传学将可识别的等位基因称为遗传标记。传统的遗传学研究和育种工作主要是借助形态学、细胞学和生理生化指标等遗传标记来进行的。就蜜蜂而言，多数遗传标记是根据生物学性状的形成而进行判别，检测时基本要以活体形式，如蜜蜂的抗病基因是以人工饲养的蜂群抗病力强弱为标记，抗螨     

绿色荧光蛋白基因标记嗜水气单胞菌的研究

嗜水气单胞菌广泛存在于水体环境中,可引起人和动物发病,尤其是引起鱼类的败血症。本文构建了pWSK129-gfp重组载体,并分别导入到嗜水气单胞菌强毒株J-1和无毒株4332中。在荧光显微镜下观察,菌体呈现绿色荧光。稳定性试验表明,Ah4332GFP传至70代,质粒稳定率可达100%;而AhJ-1GFP在同样条件下培养10代后,质粒的稳定率仅为15.1%。绿色荧光蛋白基因的导入为研究嗜水气单胞菌与宿主的相互关系提供了一种简单而直观的方法。     

山羊TLR2绿色荧光蛋白融合载体的构建

为了构建在哺乳动物细胞中表达的山羊TLR2绿色荧光蛋白融合载体,试验根据克隆到T载体上的山羊TLR2测序结果,设计1对不含终止子的引物,将山羊TLR2 PCR产物连接到pEGFP-N1载体上,用磷酸钙法转染293T细胞,并在荧光显微镜下观察。结果表明:重组质粒经酶切和测序鉴定正确,且在293T细胞中表达;融合蛋白发出绿色荧光,表明TLR2-EGFP主要分布在细胞膜上。说明试验成功地构建了pEGFP-TLR2-N1绿色荧光蛋白融合载体。     

表达增强绿色荧光蛋白重组水疱性口炎病毒印第安纳株的构建

通过负链RNA病毒反向遗传操作技术,成功救获了表达增强绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的重组印地安纳株水疱性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus Indiana serotype)、救获的重组病毒保持了野生型VSV高滴度生长特性,细胞连续传代10次仍保持GFP的稳定表达及生物学特性不变。本研究为VSV作为新型重组活病毒载体疫苗和肿瘤治疗载体研制及基础病毒学相关研究提供了理想的技术平台。     

柞蚕育种研究进程及展望

柞蚕育种研究及新品种选育工作取得了很大进步,在柞蚕生产发展中发挥了重要作用。概述了柞蚕育种研究进程及分子生物学技术在柞蚕种质资源方面的研究进展,阐述了柞蚕育种今后重点研究的方向及内容。     

秦川牛分子标记研究进展

秦川牛作为中国地方良种黄牛之一,具有独特的遗传性能.本文从秦川牛的分子群体遗传特征及起源、进化、经济性状、分子遗传标记及相关功能基因多态性等方面对其研究进展进行了综述,同时指出了秦川牛分子育种的前景及目前存在问题.     

猪链球菌检测方法的研究进展

猪链球菌是一种重要的人畜共患病病原,对猪链球菌进行快速而特异性地检测,具有重要的流行病学意义和临床应用价值。文章分别对猪链球菌免疫学检测方法与分子生物学检测方法进行了阐述,并对未来的研究方向进行了展望。     

饲料中总砷的测定--原子荧光光谱法

采用原子荧光光谱法测定饲料中总砷的含量,仪器的参数为:灯电流80mA;负高压320V;积分时间3s;泵速60r/min;主气650mL/min;辅气800mL/min。方法的线性范围为0～25ng/mL,r=0.9999,平均回收率达97.8%。与国标法试验对比,两方法相对偏差在0.5%～4.4%之间。本方法具有灵敏度高、检出限低、操作简便、省时、快捷的特点。