丹顶鹤恶臭假单胞菌的分离及生物学特性鉴定

2003年12月某动物园送来了一只病死的丹顶鹤，该鹤病初排稀粪，3～4天后死亡。经过剖检发现肝脏表面有米粒大小的灰白色坏死灶，脾脏略肿大，从十二指肠到泄殖腔均有条索状出血。鹤群出现厌食排稀粪等症状为查明原因作者对病死鹤进行了病原的分离鉴定。     

养殖大鲵恶臭假单胞菌的分离鉴定及药物敏感性分析

为探究重庆某大鲵养殖基地大鲵死亡的原因,对从死亡大鲵的肾脏分离得到的菌株进行形态学观察,生物学特性分析,鲫鱼致病性试验,16S r DNA PCR鉴定,药敏试验和中药试验。结果显示,一株命名为KN-4株基因序列与恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)的同源性为98.9%,对鲫鱼有较强致病性。药物敏感性试验结果显示,KN-4菌株对头孢他啶、丁胺卡那霉素、新霉素、头孢曲松、多黏菌素B均敏感。中药试验结果表明,连翘、苦参、甘草、鱼腥草、黄连、黄芩、老鹤草对分离株KN-4有较强抑菌活性,而板蓝根、蒲公英等7种中药对其无抑菌作用。     

一例雏鸡恶臭假单胞菌的分离鉴定及其药敏分析

本试验从重庆某鸡场发病雏鸡体内分离一株细菌编号为LPCJ-1,进行形态学、生理生化特性检验、细菌自动生化检定仪鉴定,并进行药物敏感型试验。结果表明LPCJ-1在鲜血培养基及普通培养基上生长良好,药物敏感性试验表明LPCJ-1对氧氟沙星、头孢菌素、头孢哌酮、等抗生素极为敏感。     

1株疑似沙门菌的鸡源恶臭假单胞菌的分离鉴定及药敏试验

恶臭假单胞菌是一种广泛存在于环境中的人兽共患条件致病菌,主要引起水生动物疾病,其对禽类的致病性研究目前没有引起关注。本研究从临床上78日龄脚软病鸡的跖趾关节腔中分离出1株病原菌,结合临床症状、细菌培养和血清学凝集反应,前期一直怀疑为沙门菌,通过进一步的微生物质谱检测、生化反应和16S rDNA测序,确定为恶臭假单胞菌。药敏试验结果显示该分离株对头孢曲松、头孢他啶、庆大霉素、丁胺卡那、新霉素、四环素和环丙沙星7种受试抗菌药物敏感,对链霉素、青霉素、呋喃唑酮、磺胺异噁唑、氯霉素、氟苯尼考、林可霉素、红霉素、恩诺沙星、诺氟沙星10种受试抗菌药物均耐药。本研究首例报道从软脚病鸡临床分离到恶臭假单胞菌,对兽医临床鉴别诊断恶臭假单胞菌感染及临床防治用药具有指导意义和参考价值。     

虹鳟荧光假单胞菌的分离鉴定

为鉴定分析出甘肃省永登县某养鳟场疑似爆发赤皮病的病因,通过对发病虹鳟鱼进行临床症状、病理变化的观察,对发病鱼主要器官进行细菌的分离培养,并对分离培养的细菌利用16S rRNA序列分析,对菌株进行鉴定及遗传进化分析。结果表明,成功分离出一株荧光假单胞菌,将其16S rRNA基因序列与GenBank中登录的荧光假单胞菌参考株的16S rRNA基因序列进行比对,同源率达到99%。经MEGA7.0软件分析后,其位于不同的分支上。本研究结果为鳟鱼赤皮病的快速检测和对甘肃永登地区赤皮病的有效防治提供理论依据。     

獭兔源铜绿假单胞菌的分离鉴定及药敏试验

为了确定某獭兔养殖场獭兔发病的主要病原菌,分析该病原菌的耐药性,本试验对青岛市某獭兔养殖场送检的病死兔进行病理剖检,并从肺脏中分离得到1株细菌,随后进行分离菌形态观察、生化试验、细菌16S rRNA基因测序。该株分离菌为革兰阴性杆菌,博检革兰阴性细菌鉴定系统的生化鉴定结果为铜绿假单胞菌,细菌的16S rRNA基因序列经同源性比较,与铜绿假单胞菌同源性为100%。药敏试验结果表明该株分离菌对多种头孢类、喹诺酮类药物高度敏感。细菌分离鉴定和药敏试验结果为临床用药治疗该病提供参考依据。     

鲟源荧光假单胞菌的分离鉴定及药敏特性分析

从患病鲟体内分离到1株细菌,通过形态学观察、生理生化特性鉴定、16SrRNA基因序列分析及系统进化树构建等方法对分离菌种属进行确定,采用纸片扩散法对分离菌进行药物敏感性分析。结果显示:分离菌为革兰阴性杆菌;可分解葡萄糖和木糖,氧化酶和鸟氨酸脱羧酶试验阳性;16SrRNA基因测序分析与荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)同源性大于99%,在系统发育树上与荧光假单胞菌聚为一枝;药敏结果显示,分离菌对氧氟沙星、多西环素、复方新诺明等敏感,对氟苯尼考、卡那霉素、阿莫西林等耐药;人工感染试验结果显示,该菌对小鼠有致病力。本研究为贵州地区鲟细菌性疾病预防及合理用药提供依据。     

黄金蟒口腔炎绿脓假单胞菌的分离鉴定及耐药性分析

为找寻黄金蟒口腔炎的致病原因,对本园饲养患口腔炎黄金蟒的口腔脓性分泌物进行病原菌分离、鉴定和耐药性分析。通过对分离菌的形态学观察、涂片染色镜检、16SrRNA基因序列分析鉴定,表明该病原菌为绿脓假单胞菌。药敏结果显示该分离菌对诺氟沙星、左氟沙星、哌拉西林高度敏感;对阿奇霉素、头孢哌酮、氧氟沙星、头孢曲松、环丙沙星中度敏感;对头孢他啶、头孢克洛、庆大霉素、阿米卡星、阿莫西林、头孢噻肟耐药。根据本次试验结果,选用高敏药很快治愈该患蛇的口腔炎,也可为今后治疗此类疫病提供参考。     

一株门多萨假单胞菌的分离鉴定及药物敏感性分析

试验旨在确定感染黄颡鱼的病原菌并探讨其耐药性。采用细菌培养、生理生化鉴定及16S rDNA序列分析方法进行菌株分离鉴定,运用PCR方法扩增耐药基因,用纸片扩散法对分离菌进行药敏试验。结果显示,分离菌与门多萨假单胞菌基本一致,16S rDNA基因长度为1 442 bp。同源性及系统进化树分析显示,该菌16S rDNA序列与门多萨假单胞菌NK-01同源性为99.6%,亲缘关系最近。综合判定分离菌为门多萨假单胞菌,命名为fsznc-01。耐药基因检测结果显示,分离菌fsznc-01含有β-内酰胺类耐药基因TEM,氨基糖苷类耐药基因aph（3'）-Ⅱa、aac（6）-Ⅰb、aac（3）-Ⅱa及磺胺类耐药基因Sul1和Sul2,未检测出磺胺类耐药基因Sul3。药敏试验结果显示,分离菌fsznc-01对头孢他啶、庆大霉素和哌拉西林等药物敏感,对头孢氨苄、头孢唑林和头孢拉定耐药。本试验结果可为预防门多萨假单胞菌感染导致的鱼类疾病提供参考依据。     

肉鸽铜绿假单胞菌分离与鉴定

从南京某肉鸽养殖场死亡病鸽肝脏中分离到1株细菌,经分离培养、形态染色镜检、生化试验、药敏试验、实验动物致病性试验和16S rDNA基因片段PCR检测及基因测序试验,结果表明,该菌可以在普通营养琼脂和SS琼脂平板上生长,革兰染色镜检为革兰阴性菌,生化试验检测结果鉴定值为1 655,符合铜绿假单胞菌生化特性;药敏试验表明,该菌对磷霉素、环丙沙星和阿米卡星高度敏感,接种小鼠能导致其死亡并分离出同一细菌,16S rDNA基因片段测序后与GenBank中登录的铜绿假单胞菌同源性为99%。综合以上结果鉴定该分离菌为铜绿假单胞菌。     

1株草龟维氏气单胞菌的分离鉴定及药敏谱分析

旨在确定河北昌黎县某花鸟鱼店宠物草龟发病死亡的病因,笔者从发病草龟体内分离纯化出1株优势菌CLW-1,通过解剖观察、细菌分离培养、革兰染色镜检、生化鉴定和16S rDNA基因测序对其分析鉴定,并通过药物敏感性测试检测菌株的耐药性,通过斑马鱼接种试验和毒力基因检测其致病性。结果显示,该菌在血琼脂平板形成湿润、表面光滑、呈β溶血的灰白色菌落,在RS琼脂培养基上长出光滑湿润的黄色菌落;革兰染色镜检为阴性短小球杆菌;16S rDNA基因序列同源性分析表明,分离菌株CLW-1与维氏气单胞菌为同一族,相似性均达99%以上;斑马鱼接种试验结果显示,该菌具有较高的致病力,其LD₅₀为1.26×10⁶CFU;毒力基因扩增结果表明,分离菌株CLW-1具有aerA、Exu、Lip和Ser毒力基因;药敏试验结果显示,分离菌株CLW-1对哌拉西林、头孢唑林和恩诺沙星等敏感;对呋喃唑酮、苯唑西林和红霉素等中敏;对麦迪霉素、克林霉素和万古霉素等耐药。通过试验结果确定此分离菌株CLW-1为维氏气单胞菌,携带毒力基因,具有较高致病力,应用对应的抗生素治疗效果较好,为维氏气单胞菌病的防治奠定基础。     

Isolation,Identification and Drug Sensitivity Test of a Strain of Aeromonas veronii from Chinemys reevesii

To determine the cause of death of Chinemys reevesii in a pet shop in Changli county, Hebei province, a dominant strain CLW-1 was isolated and purified from the diseased Chinemys reevesii. It was analyzed and identified through anatomical observation, bacterial isolation and culture, Gram staining and microscopic examination, biochemical identification and 16S rDNA gene sequencing, the drug resistance of the strain was detected through drug sensitivity test, and its pathogenicity was detected through zebrafish inoculation test and virulence gene experiment. The results showed that the bacteria formed moist, smooth surface, gray colony with β hemolysis on blood agar medium, and grew smooth and moist yellow colony on RS agar medium; Gram staining and microscopic examination showed negative coccidiosis; Homology analysis of 16S rDNA gene sequence showed that the isolated strain CLW-1 belongs to the same group with Aeromonas veronii, and the homology is above 99%; Inoculation test results of zebrafish showed that the strain had high pathogenicity, and its LD₅₀ was 1.26×10⁶ CFU; The virulence gene amplification results showed that the isolated strain CLW-1 had virulence genes of aerA, Exu, Lip and Ser; Drug sensitivity test results showed that the isolated strain CLW-1 was sensitive to piperacillin, cefazolin and enrofloxacin, etc; Susceptibility to furazolidone, oxacillin and erythromycin, etc; Resistance to midecamycin, clindamycin and vancomycin, etc. According to the test results, the isolated strain CLW-1 is confirmed to be Aeromonas veronii, which carries virulence genes and has high pathogenicity, it has great therapeutic effect by applying corresponding antibiotics, thus laying a foundation for the prevention and treatment of Aeromonas veronii.     

竹鼠源绿色气球菌的分离鉴定及耐药性分析

为了查明造成贵州某竹鼠养殖场竹鼠死亡病因,本研究从送检竹鼠体内分离到1株细菌（GZ-S1）,通过形态学观察、生化试验、16S rRNA基因序列分析、药敏试验及耐药基因检测、细菌致病性试验等方法对该分离菌进行鉴定。结果显示,该分离菌在鲜血琼脂平板上长出凸起、表面光滑、白色、呈α-溶血的革兰氏阳性球菌;生化试验显示该分离菌对蔗糖、果糖、葡萄糖、硝酸盐还原试验、靛基质试验、枸橼酸盐试验等均为阳性,半乳糖、甘露糖、硫化氢试验、VP试验、MR试验、赖氨酸脱羧酶接触试验等均为阴性;经16S rRNA基因测序及BLAST比对、系统进化树分析发现,分离菌株GZ-S1与气球菌菌株201707CJKOP-Y31（MG593595.1）、绿色气球菌菌株Mnlv2（GQ246745.1）等12株参考菌株在同一分支上。细菌药敏试验结果显示,分离菌株对苯唑西林、羧苄西林、头孢曲松3种药物敏感;对阿莫西林、氧氟沙星、复方新诺明、磺胺异噁唑、多黏菌素B、氟苯尼考、头孢拉定7种药物中敏;对恩诺沙星、卡那霉素、妥布霉素、新霉素、多西环素、四环素6种药物耐药。耐药基因检测结果显示,该分离菌株携带5种耐药基因：tetA（1 031 bp）、tetB（513 bp）、tetD（326 bp）、aadd（146 bp）、aac（6'）Ⅰb（655 bp）,与药敏表现型相符。人工感染试验结果显示,该分离菌有致病力。本研究对某竹鼠养殖场竹鼠发病的原因作出了准确诊断,为该养殖场细菌性竹鼠病的预防和合理用药提供参考。     

Isolation,Identification and Drug Susceptibility Test of Pseudomonas aeruginosa in Chickens

In order to detect the main bacterial pathogens and analyze the drug resistance for providing therapeutical guidance for drug administration,4 stains were isolated from death chickens of a breeding chicken farm in Qinhuangdao area.All 4 isolates were identified by morphological characteristics,biochemical test,immunofluorescent staining,amplification of 16S rRNA genes by PCR,sequence analysis and drug susceptibility test.The results showed that all 4 isolates were gram-negative,bacillus brevis with green fluorescent,and the sequence of 16S rRNA gene of isolates were analyzed and test results showed that specific amplified band was consistent with the expected size.The isolated bacteria were identified to be Pseudomonas aeruginosa.Results of drug susceptibility test indicated that the bacterial isolates were highly sensitive to gentamycin,amikacin,spectinomycin,ceftazidine,ceftriaxone,levofloxacin,enrofloxacin,florfenicol,polymyxin B and fosfomycin,intermidiate sensitive to tetracycline and doxycyclin,resistant to neomycin,cefotaxime,cephalothin,amoxicillin,ampicillin,erythromycin,trimethoprim-sulfamethoxazole and oxygen sulfamethoxazole isoxazole.The results suggested that the resistances of Pseudomonas aeruginosa isolates to commonly used antibiotics were serious.So antibiotics should be reasonably selected based on the result of drug susceptibility test in this farm.     

鸡源绿脓杆菌的分离鉴定及药敏试验

为确诊引起秦皇岛某鸡场细菌性疾病的主要病原菌,分析其耐药情况,为临床用药和治疗提供依据,本试验对送检的病死鸡肝脏中分离得到的4株菌进行形态特征观察、生化鉴定、免疫荧光染色观察、细菌16S rRNA基因PCR扩增与测序分析及药敏试验.结果显示,4株分离菌均为革兰氏阴性、带绿色荧光的短杆菌,PCR扩增出的特异性条带与预期大小相吻合,确定为绿脓杆菌.药敏试验结果显示,分离株对庆大霉素、阿米卡星、大观霉素、头孢他啶、头孢曲松、左氧氟沙星、恩诺沙星、氟苯尼考、多黏菌素B和磷霉素高度敏感,对四环素和强力霉素中度敏感,而对新霉素、头孢噻肟、头孢噻吩、阿莫西林、氨苄西林、红霉素、复方新诺明和磺胺甲氧异唑耐药.提示,该分离菌对常用抗生素耐药情况严重,养殖场应根据药敏试验结果选择敏感药物进行合理用药.     

圆眼燕鱼哈维弧菌的分离鉴定及药敏试验

从患病圆眼燕鱼(Platax orbicularis)体内分离到一批形态一致的优势菌株,通过细菌鉴定并检测其药物敏感性,以期为圆眼燕鱼的疾病防治提供参考。对分离菌株进行形态观察、生理生化试验以及16S rRNA基因序列分析,结果显示该菌株与弧菌表型特征一致,16SrRNA与GenBank中哈维弧菌(Vibrio harveyi)的同源性高达99%,在系统进化树中与哈维弧菌(KU245727)聚为一分支,结合该菌的生理生化特征和基因序列分析,鉴定该优势菌株为哈维弧菌。药敏试验结果显示,该分离菌对头孢噻肟、强力霉素、恩诺沙星、萘啶酸、卡那霉素、妥布霉素、氯霉素、复方新诺明等14种药物敏感,对阿莫西林、青霉素G、乙酰螺旋霉素、杆菌肽、多黏菌素B、利福平、红霉素和磺胺异恶唑等8种药物表现为耐药。采用PCR方法检测该菌株携带TEM、Sul2、ANT(3′′)-1耐药基因。研究结果可为哈维弧菌的鉴定及圆眼燕鱼的疾病诊治提供参考。     

乳房炎牛乳中少动鞘氨醇单胞菌的分离鉴定和药敏试验

为了对陕西省某奶牛养殖场出现乳房炎的病例进行确诊,无菌采集患病奶牛的乳汁对其进行细菌分离、培养特性观察、生化试验、16S rRNA基因测序、动物致病性试验以及药敏试验。结果表明,分离到的细菌,其培养特性和生化试验结果与少动鞘氨醇单胞菌相吻合;16S rRNA基因测序结果与少动鞘氨醇单胞菌的同源性为98%;小鼠致病性试验表明该菌株有致病性;药敏试验结果表明,该菌对环丙沙星、诺氟沙星、复方新诺明等耐药,对多黏菌素、阿米卡星、亚胺培南、庆大霉素、头孢曲松等敏感。     

眼镜蛇缓慢葡萄球菌的分离鉴定与药敏试验

对广西南宁市某眼镜蛇养殖场送检的患病眼镜蛇进行病理剖检及病原菌分离鉴定,根据临床发病症状、病理变化、病理组织学检查、病原分离鉴定及致病力试验结果,确诊为缓慢葡萄球菌感染.该分离菌对小鼠有一定的致病性;药敏试验结果显示,分离菌对阿莫西林钠舒巴坦钠、头孢哌酮钠舒巴坦钠、氨苄西林钠、阿莫西林钠、苯唑西林钠、哌拉西林钠、阿米卡星敏感,对头孢曲松钠、氧氟沙星、利福平中介,对链霉素、林可霉素、磺胺间甲氧嘧啶、氟苯尼考、土霉素、诺氟沙星耐药.选择敏感抗生素阿莫西林钠舒巴坦钠添加在水和料中预防发病,患病眼镜蛇肌肉注射头孢哌酮钠舒巴坦钠,46条病蛇经一个疗程治疗,仅5条死亡,效果显著,蛇群无新病例发生,1周后逐渐恢复采食.