基于种特异性COI标记的西花蓟马温室品系和羽扇豆品系一步双重快速鉴定技术

【背景】西花蓟马（Frankliniella occidentalis）是世界性农业和园艺作物害虫,也是我国重要的对外对内检疫对象。西花蓟马具有两个品系,即温室品系（greenhouse race,GR）和羽扇豆品系（lupin race,LR）,二者在寄主范围、抗药性、生存环境等方面均具有明显差异,但外部形态相似,无法准确鉴别。【目的】以西花蓟马温室品系和羽扇豆品系为靶标,以田间常见的其他14种蓟马为参照,采用基于线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚基I（mitochondrial DNA cytochrome c oxidase subunit I,mtDNA COI）基因的种特异性（species-specific COI,SS-COI）PCR法,研究一步双重品系快速检测技术。【方法】采用mtDNA COI基因通用引物获得西花蓟马温室品系和羽扇豆品系以及其他常见蓟马的COI序列,根据测序结果以及数据库已公开数据,设计筛选获得可同时扩增两个品系的特异性组合引物（TF6/GR32/LR12）,其中TF6为品系通用上游引物,GR32为温室品系特异性下游引物,LR12为羽扇豆品系特异性下游引物,其扩增片段大小分别为温室品系362 bp、羽扇豆品系541 bp;对组合引物比例和退火温度进行优化;同时,对组合引物的种/品系特异性和灵敏性/检测阈值进行检验。【结果】当组合引物TF6/GR32/LR12比例为1.0/0.2/0.8、退火温度为44℃时,扩增效果最好。种/品系特异性检测结果证实,该检测技术仅对西花蓟马温室品系和羽扇豆品系具有扩增能力,对田间常见的其他14种蓟马包括花蓟马（Frankliniella intonsa）、禾花蓟马（Frankliniella tenuicornis）、黄胸蓟马（Thrips hawaiiensis）、大蓟马（Thrips major）、棕榈蓟马（Thrips palmi）、烟蓟马（Thrips tabaci）、普通大蓟马（Megalurothrips usitatus）、豆喙蓟马（Mycterothrips glycines）、草木樨近绢蓟马（Sussericothrips melilotus）、蔗腹齿蓟马（Fulmekiola serrata）、稻简管蓟马（Haplothrips aculeatus）、榕端宽管蓟马（Mesothrips jordani）、榕母管蓟马（Gynaikothrips ficorum）和横纹蓟马（Aeolothrips fasciatus）等不具有扩增能力。灵敏性检测结果显示,该组合引物不仅对单一品系或混合品系的成虫具有良好的扩增效果,对单粒卵、1龄和2龄幼虫以及预蛹和蛹均具有同样的扩增效能;对温室品系的最低检测阈值为35.90 pg·μL ^-1,相当于1/10 240头雌成虫,对羽扇豆品系的最低检测阈值为146.95 pg·μL ^-1,相当于1/2 560头雌成虫;同时,对来自不同地域的同一品系不同单倍型的成虫亦具有良好的扩增效能。【结论】建立的技术体系完全可以用于西花蓟马品系的快速鉴定及检疫监管,对有效阻截其进一步传播扩散及靶向防控措施制定意义重大。     

3种杀虫剂防治西花蓟马田间效果分析

田间测定了5种浓度的2.5%菜喜悬浮剂、百佳EC、18%杀虫双水剂对西花蓟马的防治效果,结果表明:菜喜、杀虫双和百佳一次药后10 d内最高防效分别达到96.14%、97.18%和96.65%。     

中华草蛉3龄幼虫对西花蓟马的捕食作用

室内观察测定了中华草蛉3龄幼虫对西花蓟马的捕食功能反应和搜寻效应。结果表明,26℃条件下该捕食功能反应符合HollingⅡ型方程。随着猎物密度的增加,中华草蛉3龄幼虫对西花蓟马成虫、若虫的捕食量增加,搜寻效应降低,捕食上限分别为625.0头/d和714.3头/d。     

西花蓟马对寄主不同部位的选择性

为明确寄主植物不同部位对西花蓟马选择性的影响,本文研究了西花蓟马对黄瓜不同部位叶片的着虫数及西花蓟马对辣椒不同部位粗提取液的趋性。结果表明,西花蓟马雌成虫对黄瓜寄主不同部位有着明显的寄主选择性,对于中上部位叶片的选择要明显大于下部叶片;西花蓟马对于辣椒花和上部叶片粗提取液的选择性要明显强于中下部叶片,其中对于花的趋性最强。     

东亚小花蝽成虫对西花蓟马的捕食功能反应与搜寻效应

室内测定了东亚小花蝽成虫对西花蓟马的捕食功能反应与搜寻效应。结果表明,供试温度下,东亚小花蝽成虫的捕食功能反应符合Holling Ⅱ型方程,对西花蓟马若虫、成虫的捕食量随着猎物密度的增加而增加,搜寻效应随着猎物密度的增加而降低,捕食上限分别为163．9头／d和51．3头／d。     

西方许旺酵母菌及其双加氧酶在烟草增香中的应用

采用响应面试验研究了西方许旺酵母菌(Schwanniomyces occidentalis)及其双加氧酶在烟草增香中的应用情况。结果表明,西方许旺酵母发酵烟叶生成香气物质的最优条件为温度27.8℃,水分含量52%,发酵时间7 d,此时烟叶中β-紫罗兰酮含量为2.03μg/g。生物转化类胡萝卜素生成香气物质的双加氧酶添加量为2.0%,35℃条件下,酶解15 h,烟叶中β-紫罗兰酮含量增加31.5%。处理后的烟叶香气质和香气量均有所增加,感官质量明显改善。     

3种茄科类作物花期西花蓟马种群调查

对3种茄科类作物(番茄、辣椒、茄子)花期西花蓟马的种群动态进行了调查。结果表明,西花蓟马成虫在3种作物开花初期数量较多,若虫数量在整个花期变化不明显。番茄花上成虫量最多为5.6只/朵,若虫量最多为1.4只/朵;辣椒花上成虫量最多为7.8只/朵,若虫量最多为1.4只/朵;茄子花上成虫量最多为13只/朵,若虫量最多为2.6只/朵。     

湖南外来入侵害虫西花蓟马初步调查

于2008年对湖南省涟源市枫坪镇和杨市镇的7种蔬菜、5种花卉进行调查。经室内鉴定,发现了常见的9种蓟马,分属于2科4属。蓟马科（Thripidae）花蓟马属（Frankliniella）2种：分别为西花蓟马（F.occidentalis）和花蓟马（F.intonsa）;蓟马属（Thrips）5种,分别为黄蓟马（T.flavus）、八节黄蓟马（T.flavidulus）、黄胸蓟马（T.hawaiiensis）、烟蓟马（T.tabaci）、棕榈蓟马（T.palmi）;小头蓟马属（Micro-cephalothrips）1种,为腹小头蓟马（M.abdominalis）。管蓟马科（Phlaeothripidae）简管蓟马属（Haplothrips）1种,为华简管蓟马（H.chinen-sis）。优势种为花蓟马（F.intonsa）,在12种寄主植物上均有发现,比例为76.60%。在蔷薇和菊科杂草上,首次发现西花蓟马（F.occi-dentalis）,比例分别为4.48%和5.56%。     

北美悬铃木组培快繁技术的研究

[目的]对悬铃木的组织培养进行研究,为实现其优良品系的大量繁殖和保存提供指导方法。[方法]以4个优良家系的悬铃木单株为试验材料,探讨其在不同培养基上的增殖情况,筛选出各自适合的增殖培养基。[结果]在芽增殖上,4个无性系间、培养基间及无性系与培养基间的交互作用均存在极显著差异。通过对增殖培养的方差分析及多重比较,筛选出了SX4、SX12、SJ28和DY18 4个无性系的最适增殖培养基分别为A4、A2、A2和A4,其中以SX4的增殖效果最好。[结论]该研究结果为悬铃木的组培提供了指导方法,为其进一步深入研究提供了材料基础。     

贵州省蔬菜蓟马的种类、分布及综合防治

对贵州省主要蔬菜种植地区的蓟马进行了调查,发现危害蔬菜的蓟马有18种,其中发生广并且危害严重的有8种,对这8种危害严重的蓟马进行了描述,并概述了其综合防治方法。新入侵的检疫害虫西花蓟马[Frankliniella occidentalis（Pergande）]在贵阳地区已呈广泛分布状态,其发展动向值得高度关注。     

虫瘟霉属真菌中国一新纪录种--西虫瘟霉的分离和鉴定

从福建省邵武市的桃蚜上分离出1株病原真菌,通过形态学鉴定为西虫瘟霉Zoophthora occidentalis。其初生分生孢子长椭圆形,有明显的孢领,大小为（23.4～31.2）μm×（7.8～10.9）μm,L/D＝2.4～3.8。次生分生孢子与初生分生孢子同形,大小为（15.6～25.4）μm×（7.8～10.4）μm,L/D＝2.46～4.08。毛管孢子大小为（20.8～29.9）μm×（6.0～10.4）μm,L/D＝2.4～3.6,柄长36.4～104.0μm。菌丝直径6.5～8.8μm。休眠孢子表面光滑,无色透明,直径23.9～29.9μm。用“孢子浴”方法将该菌对桃蚜接种,结果显示接种后第4d为死亡高峰期,最终累计死亡率5.4％～95.7％,因剂量而异。经时间-剂量-死亡率模型分析,测得接种4d后LD50低于10个孢子·mm-2,表明该菌株对桃蚜具有较强的毒力。     

一球悬铃木优良家系的评选

对1999年引自美国的12个种源47个一球悬铃木半同胞家系子代进行了综合评定,在5个试验点分别筛选出了适应性强的优良家系.虽然对4、5年生的一球悬铃木进行选择的结果不尽相同,但诸如松江点的10、16,镇江点29、36等5个试验点的21个优良家系表现是相对稳定的,而14和36号家系则适应范围更广.5个试验点的优良家系多来...     

烟草植株不同部位上西花蓟马的动态分布调查

对烟草植株不同部位的西花蓟马动态分布进行了调查,结果表明,西花蓟马高峰期发生在花期的前期,平均为14.8头/朵;叶片正面虫量多于背面虫量,正面虫量平均为3.7头/片,背面虫量平均为2头/片;植株中下部叶片上的虫量多于上部叶片上虫量,上部、中部、下部叶片上的虫量分别为2.7、3.1、3.6头/片。     

球孢白僵菌MZ060812菌株对西花蓟马的致病性研究

【目的】明确球孢白僵菌MZ060812菌株对西花蓟马的致病性,为该菌株在农业害虫防治中的开发应用及后续研究奠定基础。【方法】采用浸渍法,测定球孢白僵菌MZ060812菌株不同孢子浓度对西花蓟马成虫和若虫的致病性。【结果】在3.0×105～3.0×108mL-1浓度下,球孢白僵菌MZ060812菌株对西花蓟马成虫的致死中时间(LT50)值分别为9.61,6.63,5.57和4.49d;致死中浓度(LC50)分别为3.307×108、1.528×107、4.030×106和5.839×105mL-1。对若虫的LT50值分别为8.51,6.81,5.00和4.02d;LC50分别为2.352×107、4.933×106、2.151×106和5.068×106mL-1。【结论】球孢白僵菌MZ060812菌株对西花蓟马有较好的防治效果。     

西花蓟马的寄主、危害及防治措施

西花蓟马(Frankliniella occidentalis Pergande)是我国新近发现的外来有害生物,是全世界已知的4 500种蓟马中最为凶险的农林害虫之一.概括了国内外西花蓟马的寄主范围,描述了西花蓟马的危害特点,并讨论了西花蓟马的防治措施及手段,为西花蓟马的有效可持续防控提供重要的参考.     

西花蓟马和花蓟马在辣椒上的种群动态

为了明确种间竞争对西花蓟马和花蓟马种群数量增长的影响,研究了西花蓟马和花蓟马单种种群和两种蓟马混合种群在辣椒上的数量动态。结果表明:单种种群中花蓟马的增长速度大于西花蓟马;两种蓟马混合种群中,西花蓟马的种群增长速度大于花蓟马。说明,西花蓟马的种群增长受种间竞争影响较小,而花蓟马种群的增长受到的抑制作用较大,两种蓟马的种间竞争中,西花蓟马具有更强的竞争能力。     

重要外来入侵害虫西花蓟马在吉林省部分地区的首次发现

记述了外来入侵害虫西花蓟马在吉林省的首次发现,并对玻片的制作方法和西花蓟马形态特征进行了描述,对该虫在吉林省的发生和分布进行了记述。     

西花蓟马(Frankliniella occidental)在白三叶草上的空间分布

利用5种聚集度指标和线性回归方程对西花蓟马在白三叶草上的空间分布型进行研究。结果表明:西花蓟马在白三叶草上的空间分布型为聚集分布,其分布的基本成分是个体群,个体间相互吸引,这种聚集主要由环境引起。运用Iwao的m*-m直线回归方程建立了理论抽样数模型,田间理论抽样数可用N=1/D2(1.3533/m+1.964)进行估计。     

印楝制剂对西花蓟马的忌避作用

[目的]为更好的防治西花蓟马。[方法]分别用不同浓度的印楝乳油(0.3%)和印楝素(62.73%)对西花蓟马作室内和田间试验,研究不同印楝制剂对西花蓟马的忌避活性。[结果]2种药剂均对西花蓟马成虫有一定的忌避作用,随浓度的提高忌避率增大,都是选择性忌避效果好于非选择性忌避效果。选择性忌避试验中,12 mg/L的印楝乳油和印楝素忌避率都是在48 h时最高,分别为63.93%、64.52%。田间试验表明印楝乳油比印楝素的忌避效果要好,忌避率都是施药后第1天最大,第3天有所下降,第5天和第7天又升高,12 mg/L的印楝乳油和印楝素在第1天的忌避率分别为70.63%、58.33%。[结论]印楝制剂对西花蓟马均表现一定的忌避作用,印楝乳油比印楝素忌避效果好。     

寄主植物对西花蓟马的抗性研究概况*

 西花蓟马 (Frankliniella occidentalis) 属缨翅目(Thysanoptera)蓟马科 (Thripidae) 昆虫。原产于北美洲,目前已成为一种具有严重危害的世界性的大田和温室作物害虫。西花蓟马不仅能通过直接取食对寄主植物造成危害,还能传播多种 Tospoviruses 属的病毒,对寄主植物造成间接危害,对其的防治一直是世界各国植保工作者研究的重要课题。本文主要论述了当前寄主植物对西花蓟马抗性研究方面的最新进展。