牛卵母细胞体外成熟的研究进展

牛在大多数情况下一胎一仔，自然双胎的概率很小。其根本原因在于：牛的卵巢大多数情况下每次只排1个卵，因而可能有一个胚胎产生，这极大地影响了牛的繁殖性能。而通过牛卵母细胞体外成熟技术能获得较多的卵子，与体外受精技术的相结合，大大提高了牛的繁殖性能，近年来人们对牛卵母细胞体外成熟进行了不断研究，并取得许多新的进展，笔者就此作了综述。     

牛卵母细胞体外成熟的研究进展

牛在大多数情况下是一胎一仔,自然双胎的概率很小。其根本原因在于:牛的卵巢大多数情况下每次只排1个卵,因而只可能有一个胚胎产生,这极大地影响了牛的繁殖性能。而通过牛卵母细胞体外成熟技术能获得较多的卵子,与体外受精技术相结合,大大提高了牛的繁殖性能。近年来人们对牛卵母细胞体外成熟进行了不断研究,并取得许多新的进展,笔者就此作了综述。     

牛卵母细胞体外成熟的研究进展

本文就卵母细胞的来源、培养基的选择、培养温度、气相条件、培养液的体积、添加物、成熟判断的标准对卵母细胞IVM的影响以及存在的问题进行了分析,指出卵母细胞的体外成熟是体外受精技术的重要环节,是决定体外受精成功与否的关键。     

猪卵母细胞体外成熟的研究进展

综述了猪卵母细胞体外成熟的分子机理和影响因素,以期为后续工作奠定基础.     

山羊卵母细胞体外成熟体系研究进展

卵母细胞体外成熟(IVM)是山羊胚胎体外生产的关键步骤,其对山羊体外生产胚胎的数量和质量均具有非常重要的意义。此外,IVM还可以满足胚胎工程技术如体细胞核移植、转基因动物生产对卵母细胞的大量需求。然而,由于山羊卵母细胞体外成熟研究起步较晚,与牛、猪等家畜相比仍然存在不小的差距,存在诸如体外成熟率低、胚胎质量不佳、培养体系可重复性低等问题。因此,分析山羊卵母细胞体外成熟的主要影响因素,提高山羊卵母细胞体外成熟率,建立山羊卵母细胞体外成熟稳定培养体系,就成为了近年来山羊胚胎体外生产的研究重点。论文综合国内外学者近年的相关研究,对可能影响山羊卵母细胞体外成熟效率的各种因素进行了综述分析,同时对山羊卵母细胞体外成熟现存问题进行了分析,以期为建立山羊卵母细胞体外成熟体系提供理论支持。     

哺乳动物卵母细胞的体外成熟

哺乳动物卵母细胞的体外成熟刘红林（南京农业大学动物科技学院，２１００９５）范必勤（江苏省农科院牧医所）１引言哺乳动物卵母细胞移离卵泡环境，在体外能够不依赖激素自发成熟。卵母细胞的成熟过程至少需要经过周围卵丘细胞、卵母细胞核以及核外细胞质等方面的变化。...     

猪卵巢卵母细胞的收集和体外成熟培养

实验对猪卵母细胞的采集和体外成熟培养(IVM)以及培养液进行研究。结果表明，在卵母细胞的采集过程中，机械破碎法平均每个卵巢所获得的A、B级细胞数(7.00，20.50)要显著多于抽吸法(1.48，2.73)(P＜0.05)。但抽吸法中平均每个卵巢所用的时间(1.05min)却显著少于机械破碎法(15.6min)(P＜0.05)。NCSU-23与TCM-199两种培养液对卵母细胞体外成熟率无显著差异(P＞0.05)。添加10μg／LrpGH比20μg／LrpGH更有利于卵母细胞的成熟(71.5％，45.5％)，两者差异显著(P＜0.05)。     

哺乳动物卵母细胞体外成熟的研究进展

<正>1卵母细胞体外成熟的研究现状1935年,Pincus等将从兔卵泡中分离出来的卵母细胞经体外培养,使其继续进行减数分裂,从而达到完全成熟。此后,卵母细胞的体外成熟培养得到了迅速发展。目前,卵母细胞的体外成熟技术己被广泛     

牛卵母细胞体外成熟

卵母细胞体外成熟培养研究主要集中在提高体外成熟卵母细胞支持胚胎发育的能力上。本文主要从成熟机理、卵母细胞的来源、卵母细胞的成熟培养环境及培养时间等方面进行了综述,介绍了目前卵母细胞体外成熟培养的进展情况。     

转录组揭示马卵母细胞体外成熟的重要候选基因

本研究以马GV和体外成熟的MII期卵母细胞为研究样本,进行转录组测序,旨在筛选影响马卵母细胞成熟的关键候选基因。结果表明,马卵母细胞体外成熟率为37.18%;马GV和体外成熟的MII卵母细胞具有不同的mRNA谱,其中9969个mRNA差异显著,进一步的GO和KEGG分析发现,差异表达基因（DEGs）参与了多种可能与卵母细胞减数分裂相关的生物学和信号通路。本研究提供了马卵母细胞体外成熟前后转录组的详细信息,为后续探究关键差异基因对卵母细胞成熟的影响及提高卵母细胞成熟的可行性提供理论依据。     

海狸鼠卵母细胞体外成熟培养初探

实验用ＰＭＳＧ或ＰＭＳＧ＋ＨＣＧ处理或未经激素处理的海狸鼠８只，共获卵巢卵母细胞１３８枚。激素处理对获取卵巢卵母细胞的数量没有影响，而对体外成熟发育至卵丘扩展和半成熟阶段有促进作用。三种不同培养液（Ｗｈｉｔｅｎ＋ＦＣＳ；ＴＣＭ１９９＋ＰＭＳＧ＋ＦＣＳ；ＴＣＭ１９９＋ＨＣＧ＋ＦＣＳ）共培养１２５枚卵母细胞，培养后卵丘扩展率及半成熟率分别为５６．５％，４５．７％，４７．６％和２１．７％，１２．３％，９．５％，以Ｗｈｉｔｅｎ液较高（分别为５６．５％和２１．７％），但只有ＴＣＭ１９９＋ＰＭＳＧ＋ＦＣＳ组有２枚卵母细胞出现第一极体。结果表明海狸鼠卵母细胞与其它啮齿动物的卵母细胞一样，能够在体外培养成熟，完成第一次减数分裂，排出第一极体     

影响猪卵母细胞体外成熟的相关物理性因素

猪的研究是生物新技术中新的热点和经济增长点,猪的体外成熟是体外受精、性别控制、克隆及转基因等许多新技术成功与否的前提和关键,有许多物理方面的因素影响到猪的体外成熟。     

猪卵泡卵母细胞的体外成熟与体外受精

本试验对猪卵泡卵母细胞不同体外成熟培养时间、不同精子获能时间、不同精卵共孵育时间对体外受精的影响进行了研究。结果表明,体外成熟培养44 h左右,精子获能时间在1～2 h之间,精卵共孵育时间在6～8 h之间,受精后卵裂率最高。     

小鼠卵细胞体外成熟培养及孤雌激活

[目的]利用小鼠卵母细胞体外成熟培养及3种激活方法（乙醇激活、氯化锶激活、乙醇-氯化锶激活）对小鼠卵母细胞进行了孤雌激活研究。[方法]小鼠经注射孕马血清促性腺激素（PMSG）48h后,摘取卵巢获得3级未成熟卵母细胞．在成熟培养液（M199100mL＋丙酮酸钠2．2mg＋抗100IU／mL＋LH2IU／mL＋FCS10％）中对小鼠未成熟卵细胞进行体外成熟培养,获得的成熟卵母细胞分别在乙醇、氯化锶、乙醇一氯化锶不同激活剂中激活,[结果]A级卵母细胞成熟率为79％．B级卵母细胞成熟率为70％,C级卵母细胞成熟率为55％。A级卵母细胞使用氯化锶激活率可达80．0％,为最佳方法。[结论]A级卵母细胞成熟培养效果最好。孤雌激活氯化锶激活效果高于乙醇．．     

绵羊卵泡卵体外成熟的研究

本研究主要探讨了不同激素、卵母细胞形态及入培前时间对绵羊卵泡卵体外成熟效果的影响.结果表明:卵母细胞在添加FSH LH(均为10IU/mL)、HCG(4IU/mL)及不加激素的m—TCM199 10％FCS(V/V)培养液中培养24h后,达到中期Ⅱ的卵母细胞比例分别为87.68％、96.00％和42.11％;卵母细胞的形态是影响其成熟的重要因素,A、B、C三级卵培养24h后的成熟率分别为91.77％、57.10％和25.84％,入培前时间间隔为2、4、8h时,其成熟率分别为80.24％、77.42％和 77.83％,相互间差异不显著(P>0.05).     

无卵丘的水牛卵母细胞体外成熟方法的初步探讨

主要探讨无卵丘水牛卵母细胞体外成熟的可行性,以便为研究卵母细胞成熟机理提供模型。无卵丘的水牛卵母细胞随机分为5组,然后分别进行直接成熟培养（M1）,与卵丘细胞单层共培养（M2）,用未扩展的卵丘细胞块包围培养（M3）,与扩展的卵丘细胞团共培养（M4）和用卵巢组织包围培养（M5）。无卵丘的水牛卵母细胞体外成熟培养24 h后检查第一极体（PB1）排出率,随后对这些卵母细胞进行孤雌激活,评定其成熟质量。结果发现,M4组的第一极体排出率明显高于M1组和M5组,其它各组间没有显著差异（P〉0.05）;M5组的孤雌激活卵裂率显著低于M1组和M4组（P〈0.05）,而与M2组和M3组没有显著差异（P〉0.05）,但M3和M4两组的囊胚发育率显著高于M1组和M5组（P〈0.05）。这些研究结果表明：（1）未扩展卵丘细胞包围法和扩展卵丘细胞团支撑法可促进无卵丘水牛卵母细胞的体外成熟,但与卵丘细胞单层共培养没有作用;（2）卵巢组织包围培养不利于水牛卵母细胞的体外成熟。     

昆明小鼠卵母细胞体外成熟培养条件优化

对不同的培养液（M199、mDPBS、TYH）和培养液添加物对小鼠C级卵母细胞体外发育和成熟的影响进行了研究。结果表明,mDPBS培养液的培养效果（GVBD：19．8％,PBI：12．3％）好于（P〈0．05）M199培养液（GVBD：13．3％,PBI：8．9％）和TYH培养液（GVBD：12．3％,PBI：7．4％）;mDPBS中添加丙酮酸钠和FCS（GVBD：100％,PBI：86．3％）明显优于（P〈0.01）单纯添加丙酮酸钠（GVBD：42．9％,PBI：23．8％）,也明显优于（P〈0．01）添加丙酮酸钠＋BSA（GVBD：63．2％,PBI：53．8％）;就A、B和C级3种卵母细胞相比,C级卵母细胞的成熟发育最佳,GVBD的发生率为100．0％,PBI的排出率为86．2％。     

促黄体素对牛卵母细胞体外核成熟的影响

为了研究促黄体素(luteinizing hormone,LH)在牛卵母细胞成熟培养体系中的时间依从性,试验通过向牛卵母细胞体外成熟培养的不同时间段添加LH来观察其核成熟的情况。首先用无LH的基础成熟液I和添加LH的成熟液Ⅱ分别培养,在成熟的不同时间点(3、6、9h)用醋酸地衣红染色观察各自的生发泡破裂率。然后在体外成熟培养的不同时间段(0～3、0～6、0～9、0～24h)添加LH,24h后统计各自的第一极体率。结果表明,添加LH组在6h的生发泡破裂率显著低于对照1组(P0.05),24h添加LH组的第一极体率显著高于对照2组(P0.05)。因此,添加LH能延迟牛卵母细胞的核成熟,成熟培养中24h全程添加LH较不添加组能显著提高核成熟率。     

貉卵母细胞体外成熟的研究

采用不同生理期的貉（Ｒａｃｏｏｎ ＤＯＧ）卵巢卵母细胞,用两种不同培养基进行培养,观察其扩展率和生发泡破裂（ＧＶＢＤ）率。结果表明在培养２４￣３６ｈ之间为发育的高峰期,而３６ｈ后其发育率均不再显著的增加,同时表现出含ＨＣＧ的培养基其ＣＯＣ扩展率和ＧＶＢＤ率,显著高于无ＨＣＧ组。而繁殖期与非繁殖期其发育效果有显著的差异。