桑葚多糖体外清除自由基活性研究

[目的]研究桑葚多糖体外清除自由基的活性。[方法]采用DPPH法、水杨酸法、邻苯三酚自氧化测定桑葚多糖清除DPPH自由基(DPPH.)、羟自由基(.OH)和超氧负离子自由基(O2-.)的能力。[结果]桑葚多糖对DPPH.、.OH和O2-.均有较好的清除作用,最高清除率分别达到90.01%、76.40%和49.85%。[结论]桑葚多糖体外清除自由基的活性良好。     

核桃蛋白中性蛋白酶水解物的制备及其抗氧化活性研究

[目的]研究制备核桃蛋白水解物的最佳工艺条件及水解物的抗氧化活性。[方法]以核桃蛋白为底物,采用正交试验研究制备其中性蛋白酶水解物的工艺条件,通过测定自由基清除能力研究酶水解物的抗氧化活性。[结果]制备核桃蛋白酶水解物的最优工艺条件为:温度40℃、底物浓度4%、酶浓度4 000 U/g、pH值8.0;核桃蛋白酶水解物的水解度与其对羟自由基(OH.)和超氧阴离子自由基(O2.)的清除能力有关,其水解度为24.2%时对羟自由基(OH.)和超氧阴离子自由基(O2.)的清除率分别为17.0%和52.0%。[结论]采用Sephdex G-25凝胶柱层析对水解度为24.2%的酶水解物进行分离,得到了A、B、C和D 4种肽混合物,其中,肽混合物C的自由基清除能力最大,肽混合物D最小。     

甘草多糖清除自由基活性的研究

本文利用超声-微波协同萃取法提取甘草多糖,并用分光光度法检测甘草多糖对DPPH自由基、羟自由基(.OH)和超氧阴离子自由基(O2-.)的清除能力。结果表明,甘草多糖溶液对DPPH自由基、.OH和O2-.均具有较好的清除作用。     

白芨不同极性提取物的体外抗氧化活性研究

用80%乙醇对白芨进行提取,醇提浸膏依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取。运用羟基自由基(.OH)体系、二苯代苦味基肼自由基(DPPH.)体系对Fe3+进行还原能力试验,分析白芨各提取物的抗氧化活性。结果表明:白芨不同提取物对.OH和DPPH.都有较好的清除作用,其中乙酸乙酯提取物对.OH和DPPH.的清除作用最强,其IC50值分别为0.238 g/mL、0.076 mg/mL;各提取物对Fe3+均有较强的还原能力,乙酸乙酯提取物还原效果最为明显。初步表明白芨具有一定的抗氧化活性,在抗衰老方面有广泛的应用前景。     

榛蘑水溶性多糖的抗氧化活性

为弄清榛蘑(Armillariella mellea)水溶性多糖的体外抗氧化活性,采用Smirnoff水杨酸法和邻苯三酚自氧化法等测定方法,从清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2-·)3个方面研究了A.mellea水溶性多糖的体外抗氧化活性,并与Vc进行了比较.结果表明:A.mellea多糖对3种自由基均有不同程度的清除作用,清除DPPH·和·OH的能力低于阳性对照天然抗氧化剂抗坏血酸,在多糖浓度为2 mg/mL时,对DPPH·的清除率达到97.1％,在浓度为3 mg/mL和5 mg/mL时,对DPPH·的清除率达到100％.A.mellea多糖具有一定的体外抗氧化能力.     

鱼腥草多糖体外抗氧化活性研究

[目的]研究鱼腥草水溶性多糖体外抗氧化活性。[方法]采用水提醇沉法提取鱼腥草多糖;以VC作为阳性对照,通过测定鱼腥的抗氧化体系中均具有良好的抗氧化活性,且与多糖用量成正相关。草多糖的还原能力,清除羟自由基(.OH)、超氧阴离子自由基(O2-.)及亚硝酸盐(NO2-)的能力,评价鱼腥草多糖体外抗氧化活性,并测定鱼腥草多糖的含量。[结果]鱼腥草多糖的平均含量为2.41%;在试验浓度范围内鱼腥草多糖的还原能力与VC相当,对.OH的清除能力不及VC;对O2-.的清除能力随浓度的增加而与VC的清除能力相接近;对NO2-的清除能力比VC强。[结论]鱼腥草多糖在不同     

紫红薯糖蛋白体外抗氧化活性研究

研究紫红薯糖蛋白的体外抗氧化活性。使用水提醇沉方法、Sevage法除游离蛋白,用DEAE-52纤维素层析及SephadexG-75纯化制备糖蛋白。采用超氧阴离子自由基(O-2.)、羟基自由基(·OH)、1,1-二苯基-2-苯肼自由基(DPPH.)清除率测定法及还原力测定法评价紫红薯糖蛋白体外抗氧化活性。糖蛋白在0～640μg/mL内,均具有明显的抗氧化活性,随着质量浓度的增加活性增强;其中在紫红薯糖蛋白的质量浓度为640μg/mL时,对超氧阴离子自由基(O-2.)清除作用达到69.80%;对羟基自由基(.OH)的清除作用达到73.29%。     

独一味多糖抗氧化活性研究

为考察独一味多糖的抗氧化活性,用分光光度法测定多糖含量,以Vc为对照测定独一味多糖的总还原力,以Fenton法和邻苯三酚自氧化法测定独一味多糖对.OH和O2.-的清除能力。结果表明,独一味多糖含量为45.1 mg/g时具有较强的还原能力和清除.OH及O2.-的能力;在1.25～20 mg/mL浓度范围内,对Fe3+的还原能力ED50为2.43 mg/mL,对.OH和O2.-的清除能力ED50分别为6.93 mg/mL和5.95 mg/mL,呈剂量依赖性。独一味多糖作为一种自由基清除剂极具开发潜力。     

牡蛎水提物抗氧化性研究

以湛江牡蛎为原料,对其水提物抗氧化性进行研究。还原能力测定结果表明,牡蛎水提物具备一定还原能力,但远低于VC,1.08 mg牡蛎水提物的还原能力仅相当于28.8μg Vc。通过对DPPH·、·OH及·O2-等3种自由基清除能力的测定,考察了牡蛎水提物的抗氧化性,结果显示:8 mg/m L牡蛎水提物溶液的DPPH·清除率为90.63%,牡蛎水提物清除DPPH·的能力强于VE;0.6 mg/m L牡蛎水提物的·OH清除率为77.23%,牡蛎水提物清除·OH的能力低于硫脲;高浓度的牡蛎水提物可较好地清除·O2-。另外,测得牡蛎水提物中短肽占总蛋白含量的50.09%,高含量的短肽可能是牡蛎水提物具备抗氧化活性的主要原因。     

香附黄酮的体外抗氧化活性研究

[目的]对香附黄酮的抗氧化作用进行研究。[方法]以浓度95%乙醇为溶剂,水浴回流提取香附中的黄酮,然后采用比色法测定香附黄酮对DPPH.、.OH和O2-.3种自由基的清除作用以及还原能力。[结果]香附黄酮对3种自由基都有明显的清除作用,清除能力大小顺序为DPPH.>.OH>O2-.;清除率与浓度存在明显的量效关系,当黄酮浓度为0.4 mg/L时,其对O2-.的清除率为25.5%,DPPH.的为67.0%,.OH的为28.5%;还原Fe3+能力随黄酮的浓度增加而增强。[结论]香附黄酮具有较强的抗氧化活性。     

不同蛋白酶水解鹿鞭制备活性肽的比较研究

[目的]研究制备鹿鞭活性肽的最佳蛋白酶。[方法]选用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶和胰蛋白酶分别在最适条件下水解鹿鞭,以水解物鹿鞭活性肽的水解度(DH)及其对还原能力、抑制硫代巴比妥酸(TBARS)的作用和清除DPPH自由基作用的影响为指标,优选出最佳水解蛋白酶。[结果]碱性蛋白酶水解鹿鞭产物鹿鞭活性肽的水解度、还原能力、对卵磷脂脂质氧化的抑制作用和DPPH自由基的清除率都为最高。[结论]碱性蛋白酶水解鹿鞭产物鹿鞭活性肽具有很好的抗氧化性。     

牡蛎抗氧化活性肽的酶解工艺研究

以木瓜蛋白酶和中性蛋白酶为工具酶,利用正交试验法确定了木瓜蛋白酶和中性蛋白酶酶解制备牡蛎抗氧化活性肽的最佳酶解工艺。结果表明：当时间为150min、酶用量为6％、温度为45℃、pH为7．0时,木瓜蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强;当时间为110min、酶用量为3％、温度为65℃、pH为6．0时,中性蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强。用SephadexG-15葡聚糖凝胶柱层析分析的结果表明,木瓜蛋白酶酶解液中最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1191和826左右,中性蛋白酶酶解液最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1074和735左右,其抗氧化活性峰值与蛋白肽在280nm下的吸收峰值分别相吻合。     

豇豆籽肽的制备及抗氧化活性研究

[目的]采用酶法制备豇豆籽蛋白肽,并探讨其抗氧化活性。[方法]先用碱提酸沉法制备豇豆籽蛋白,然后分别用碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解制备豇豆籽肽,后者脱盐后进行DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子清除活性分析。[结果]碱性蛋白酶水解能力强于木瓜蛋白酶,2种酶水解后的豇豆籽肽对3种自由基均具有较好的清除活性。在相应浓度范围内,对DPPH自由基最大清除率分别为63.92%(碱性蛋白酶)和63.06%(木瓜蛋白酶),半数抑制浓度IC50分别为3.20和3.28 mg/ml;对羟基自由基最大清除率分别为87.66%(碱性蛋白酶)和85.88%(木瓜蛋白酶),相应IC50分别为4.21和4.89 mg/ml;对超氧阴离子自由基的最大清除率64.06%(碱性蛋白酶)和47.92%(木瓜蛋白酶)。[结论]研究可为豇豆籽蛋白肽的深度开发和综合利用提供一定的理论基础。     

水稻半胱氨酸蛋白酶OsCP2的特征分析及其原核表达与纯化

半胱氨酸蛋白酶是植物体中重要的蛋白水解酶,广泛参与种子萌发、幼苗发育、胁迫响应和组织分化衰老等生理过程.我们对水稻中半胱氨酸蛋白酶基因OsCF2 (Oryza sativa cysteine protease 2)序列进行分析.该基因cDNA全长2 279 bp,由2个外显子和1个内含子组成;包含1个1 089 bp的开放读码框,编码1个含362个氨基酸残基的蛋白,在蛋白氨基端有-36个氨基酸组成的信号肽.生物信息学分析表明,OsCP2与大麦半胱氨酸蛋白酶HvCP同源性最高,同属木瓜蛋白酶亚家族.另外,我们构建了pET32a/CP2原核.表达载体,通过转化大肠杆菌BL21DE3,成功表达了OsCP2重组蛋白.分子量约为58kD;通过纯化包涵体获得了纯度高达90%以上的重组OsCP2蛋白,这为进一步研究该基因的功能提供了基础.     

米糠蛋白抗氧化肽的制备及初步分离

试验以米糠蛋白为原料,制备米糠蛋白抗氧化肽。以DPPH自由基清除率为指标,采用正交试验,优化碱性蛋白酶酶解米糠蛋白制备抗氧化肽的工艺条件;采用超滤、SephadesG-25柱层析分离纯化米糠蛋白抗氧化肽。试验结果表明,制备米糠蛋白抗氧化肽的最优工艺条件为：酶解温度45℃,pH9．0,时间60rain,米糠蛋白底物浓度3％,碱性蛋白酶加酶量3000U·g-1。在米糠蛋白酶解产物中,Mrs〈5KDa组分的抗氧化活性最强,其对DPPH自由基清除率为68．7％。通过SephadexG-25凝胶层析柱进一步分离得到4个混合组分,混合组分Ⅱ活性最强,其DPPH自由基清除率为75．83％。     

中性蛋白酶与超声波结合分离稻米淀粉及其黏滞性研究

用中性蛋白酶与超声波结合提取稻米淀粉,并用快速黏度分析仪测定稻米淀粉的黏滞性。结果显示,用中性蛋白酶提取稻米淀粉时,稻米淀粉的提取率为62.3%～73.8%,淀粉中蛋白质含量为3.74%～4.88%;蛋白酶与超声波结合时稻米淀粉的提取率为72.1%～77.2%,蛋白质含量为0.68%～1.30%,破损淀粉含量显著降低,两者结合的最佳条件是酶先作用3h,再50%超声波作用40min。中性蛋白酶与超声波结合处理所得淀粉的黏滞谱中,峰值黏度、消减值和最终黏度都比单独酶解所得淀粉的高,而崩解值降低;与碱处理淀粉比,也是峰值黏度、消减值和最终黏度升高,崩解值降低,这说明超声波作用没有破坏淀粉性质。中性蛋白酶与超声波结合是提取稻米淀粉的有效方法。     

淡水小龙虾下脚料酶解制备抗氧化肽的工艺研究

[目的]研究以淡水小龙虾下脚料为原料酶解制备龙虾抗氧化肽的工艺。[方法]以酶水解产物清除羟自由基能力为指标,采用单因素和响应面试验考察了制备淡水小龙虾抗氧化肽的最佳蛋白酶种类及其酶解工艺。[结果]碱性蛋白酶是制备淡水小龙虾抗氧化肽的优选蛋白酶;最佳酶解工艺条件为：料液比1.0∶1.0（g∶ml）、酶解温度59℃、pH 8.9、加酶量2 000 U/g,水解时间3 h。[结论]此工艺所得酶解液对羟自由基的清除效果最好,清除率为74.66%。     

不同蛋白酶处理对北方黄酒沉淀的影响及沉淀成分的初探

本文以北方黄酒为对象,探究酶对北方黄酒沉淀含量的影响,结果表明:酶的作用条件为酸性蛋白酶添加10000 U/g蛋白质、作用温度50 ℃、作用时间24 h,北方黄酒中蛋白质含量由0.79 mg/mL降至0.66 mg/mL,仅降低16.46%左右,未达到理想效果.为找到原因,利用化学分析方法和 中红外光谱技术分析了北方黄酒沉淀成分,结果发现:沉淀中蛋白质仅占总成分的3.5%,表明蛋白质不是沉淀的主要物质,另外首次发现了北方黄酒沉淀中两种成分:果胶和木质素,分别占总成分的6.03%、24.80%,这对解决北方黄酒沉淀奠定了基础.     

制备大豆抗氧化肽用酶的筛选

文章研究了由碱性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶等蛋白酶水解制备的大豆抗氧化肽的水解度和AOV值。结果表明,大豆抗氧化肽的AOV值大小和水解度的大小与酶的种类有关,以AOV值为指标,筛选出碱性蛋白酶为最佳用酶。