五指山猪与长白猪65 d胎儿组织MRFs家族基因的表达研究

 
以五指山猪和长白猪妊娠65 d胎儿腿部骨骼肌、背部骨骼肌、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肠、胃、脑10种组织为材料,采用qPCR技术,检测和研究MRFs基因家族成员（包括MyoD1、Myf4、Myf5和Mfy6基因）在以上10种组织中的mRNA表达水平及差异。结果表明：（1）MRFs家族成员除肝、肾、肠组织以外,在五指山猪65 d猪胎儿组织中mRNA表达水平均高于长白猪相应组织中的表达水平（P<0.05）;（2）MRFs家族成员表达水平在腿肌和背肌中的表达普遍偏高,其他组织中表达较低（P<0.05）;（3）2个猪种在以上10种组织中MRFs家族mRNA表达水平的高低分布基本一致,其相对表达量顺序为：腿部骨骼肌＞背部骨骼肌＞肝＞肺＞胃＞脾＞脑＞肾＞肠＞心。     

猪骨骼肌发育过程中免疫相关基因的表达分析

为探究猪骨骼肌发育过程中免疫相关基因的表达模式以及相关生物学功能,本研究根据蓝塘猪和长白猪骨骼肌10个发育时期的转录组数据,对各时期免疫相关基因的表达数目和表达量进行分析,鉴定了相邻发育时期之间以及同一时期品种间差异表达的免疫相关基因,并对后者进行功能注释分析。结果表明:在蓝塘猪与长白猪骨骼肌发育过程中存在1 129个表达的免疫相关基因;胚胎期35 d和49 d、胚胎期91 d和生后期2d这2组相邻时期之间的差异表达免疫相关基因数目最多;品种间差异表达免疫相关基因数目则在胚胎期49d以及生后期180d最多,且趋向于在蓝塘猪上调表达,并富集在NIK/NF-κB信号传导、细胞凋亡的负调控等生物学过程中。本研究表明免疫相关基因在猪骨骼肌发育过程中存在表达,长白猪与蓝塘猪骨骼肌生长发育差异可能与NF-κB介导的细胞凋亡有关。     

金华猪和长白猪背最长肌不同肌纤维类型表达差异

为揭示国内外猪种肌纤维组成差异及其对肉质的影响,本实验以肉质优良的地方品种金华猪和肉质欠佳的外来良种长白猪为研究对象,在比较了180 d两猪种胴体性能及肉质差异的基础上,利用荧光定量PCR方法探讨了两猪种背最长肌4种肌球蛋白重链(MyHC)亚型基因(Ⅰ、ⅡA、ⅡX、ⅡB)mR NA表达量在30、90、150、180 d的差异。结果表明:180 d金华猪活体重、瘦肉率、眼肌面积、滴水损失极显著低于长白猪(P<0.01);背膘厚、肌内脂肪含量极显著高于长白猪(P<0.01)。金华猪背最长肌中含有更多的氧化型肌纤维,特别是Ⅰ型肌纤维,酵解型肌纤维特别是ⅡB型肌纤维含量极显著地低于长白猪(P<0.01)。本研究初步揭示了两猪种在生长发育过程中肌纤维组成的品种差异,为进一步通过营养调控肌纤维类型及组成,进而改善肉质提供基础数据。     

汉沽黑猪和北京黑猪肌肉组织学特性的研究

用冰冻切片测定了汉沽黑猪和北京黑猪背最长肌单位面积内肌纤维所占比例、单根肌纤维横截面积和肌纤维密度,并与大约克夏猪和长白猪做对照。结果：单根肌纤维横截面积,北京黑猪小于长白猪和大约克夏猪（Ｐ＞００５）;汉沽黑猪接近于长白猪和大约克夏猪;肌纤维密度北京黑猪大于长白猪和大约主克夏猪（Ｐ＜００５）,汉沽黑猪小于大约克夏猪而与长白猪相近;单位面积内肌纤维所占比例从大到小依次为长白猪、大约克夏猪、汉沽黑猪和北京黑猪。用剪纸称量法测定了它们肌肉肌纤维、结缔组织和脂肪组织所占面积比。结果表明：肌肉结缔组织所占面积比,汉沽黑猪明显小于大约克夏猪和长白猪,北京黑猪小于大约克夏猪和长白猪;肌纤维所占面积比汉沽黑猪明显大于大约克夏猪（Ｐ＜００１）和长白猪（Ｐ＜００５）,北京黑猪大于大约克夏猪和长白猪（Ｐ＞００５）;肌肉脂肪组织所占面积比四个猪种间结果相近。     

THBS3基因在长白猪和通城猪不同组织和不同时期骨骼肌中的表达分析

本研究主要探究血小板反应蛋白3 (thrombospondin-3,THBS3)基因在不同组织及不同时期骨骼肌生长发育过程中的表达规律。利用实时荧光定量PCR方法对THBS3基因在长白猪和通城猪中的组织表达谱,以及在胚胎期(33、45、65、70和90 d)和出生后阶段(0、9、30、60、120和160 d)骨骼肌中的差异表达进行了比较分析。结果表明,THBS3基因广泛表达于长白猪和通城猪各个组织器官,除胃和肠中的表达存在差异外,其在两个猪种中的组织表达谱基本一致,在肺脏中表达量最高。THBS3基因在长白猪和通城猪胚胎期骨骼肌中的表达水平均显著高于出生后阶段(P<0.05),但胚胎期骨骼肌中的表达模式在两个猪种间存在一定差异,THBS3基因表达峰值出现在长白猪胚胎期45 d,而其在通城猪中表达峰值出现在胚胎期65 d。结果提示,THBS3基因参与了猪骨骼肌生长发育过程及不同类型猪种骨骼肌生长发育异步性的调控。     

microRNA-155在长白猪和通城猪骨骼肌发育过程中的表达分析

本研究旨在分析miR-155在长白猪(瘦肉型)和通城猪(脂肪型)骨骼肌发育过程中的表达变化,以了解其在猪肌肉发育中的重要作用。选用长白猪和通城猪不同发育时期(胚胎期12个时期,出生后10个时期)骨骼肌为材料,利用Stem-Loop RT-PCR方法检测miR-155的表达变化。此外,本研究还分析了miR-155在成年通城猪各组织的表达。结果,miR-155在长白和通城猪骨骼肌发育过程中差异表达呈现不同的表达模式。在通城猪中,miR-155在小肠和肺中表达量较高,在心脏和胎盘中度表达,而在其他组织中表达较低。结果提示,miR-155可能参与猪肌细胞增殖和分化,从而影响猪骨骼肌发育,与猪肌肉的表型有关。     

长白猪定县猪芦台白猪肌肉组织学特性与肉质关系

用冰冻切片法测定了长白猪、定县猪和芦台白猪背最长肌的肌纤维横截面积、肌纤维密度、单位面积内肌纤维所占比例、肌内结缔组织和肌内脂肪的含量,结果表明：１）肌纤维横截面积以定县猪小,芦台白猪次之,长白猪最大;２）肌纤维密度以定县猪最大,芦台白猪次之,长白猪最小;３）单位面积内肌纤维所占比例以芦台白猪最小,定县猪次之,长白猪最大;４）结缔组织含量以长白猪最少,定县猪次之,芦台白猪最多;５）肌内脂肪含量以定县猪最多,芦台白猪次之,长白猪最少。测定数据经统计学分析表明,定县猪、芦台白猪肌肉组织学特性优于长白猪     

五指山猪与长白猪胴体性状和肉品质的比较研究

本试验对五指山猪和长白猪胴体性状、肉质性状、背最长肌氨基酸和脂肪酸含量进行了分析,旨在探讨五指山猪肉和长白猪肉的肉品质差异。结果表明,长白猪宰前重、胴体直长、胴体斜长、屠宰率、眼肌面积、平均背膘厚及瘦肉率均极显著高于五指山猪(P<0.01);五指山猪肌内脂肪含量极显著高于长白猪(P<0.01),pH、熟肉率、滴水损失和剪切力差异不显著(P>0.05);五指山猪肉的鲜味氨基酸、必需氨基酸、饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸含量均极显著高于长白猪(P<0.01)。因此,五指山猪肉品质优于长白猪。     

深州猪、汉沽黑猪和大约克夏猪肌肉组织学特性的研究

本文对深州猪、汉沽黑猪和大约克夏猪背最长肌的单位面积内肌纤维所占比例、肌纤维横截面积、肌纤维密度以及眼肌面积和瘦肉率进行了研究。结果如下:①深州猪单位面积肌纤维所占比例明显小于汉沽黑猪和大约克夏猪;②深州猪肌纤维横截面积大于汉沽黑猪和大约克夏猪;③深州猪、汉沽黑猪和大约克夏猪的肌纤维密度差异不显著:④眼肌面积和瘦肉率以大约克夏猪为最大,汉沽黑猪次之,深州猪最小。     

应用荧光定量PCR方法研究RPL29基因在通城猪和长白猪不同时期胚胎骨骼肌中的表达

为了研究蛋白合成相关基因RPL29在骨骼肌发育中的作用,采用SYBRGreen染料建立该基因的实时荧光定量PCR（QPCR）分析方法,并分析该基因在猪胚胎骨骼肌中的表达变化。以不同浓度稀释样本为标准品,建立标准曲线方程：y=-3.303X＋43．077（决定系数R^2=0．999）。分析表明：该方法具有较大的检验范围（PCR扩增Q值13～35）,很好的扩增效率为100％,熔解曲线显示产物特异的单峰,其Tm值为86．5℃。本研究以H3F3A基因为内参,用所建立的实时定量PCR方法,分析RPL29在妊娠33、65和90d的通城猪和长白猪胚胎骨骼肌中的表达变化。研究发现：RPL29基因在通城猪和长白猪胚胎骨骼肌发育过程中分别呈现下调和上调表达模式;妊娠33d时,通城猪中的表达水平高于长白,而妊娠90d时在长白猪中高表达;妊娠65d时两品种间无显著差异。结果显示RPL29基因可能与猪骨骼肌的生长发育有关,并可能影响产肉性状。     

3个地方品种猪血液生化指标分析

为了解中国地方猪种的血液生化指标,试验用Monarch660全自动生化分析仪检测了通城猪、陆川猪和宁乡猪3个地方猪种24项血液生化指标,统计结果表明,3个品种间有6项指标差异极显著(P＜0.01),通城猪和宁乡猪间有4项指标差异不显著(P＞0.05),陆川猪和宁乡猪间有3项指标差异不显著(P＞0.05)。通过3个地方猪品种间同一指标的比较,以及与人参考值、中国小型猪品种、其他地方猪品种和国外引进猪品种比较,为中国地方猪品种资源的合理保护和利用提供科学依据。     

中国实验用小型猪种群血液生理指标分析

用全自动血液分析仪检测了五指山小型猪近交系、贵州小型猪和广西巴马小型猪封闭群18个血液生理指标，统计分析结果显示3个品种间无差异的指标仅有1项，差异极显著（P＜0.01）的指标有6项；这18项指标在上述3个品种中的变异系数平均值依次为0.243、0.19和0.182。通过3个小型猪品种间比较，以及与人类参考值、国外著名的哥廷根小型猪、地方猪品种和引进大型猪品种比较，为小型猪用于人类医学研究应用提供参考。     

猪的生物学特性及其在工厂化生产中的利用

本文论述了猪的繁殖、生长发育、采食、感觉、感温、群居、生活栖息习性及其在养猪工厂化生产中的利用方向和方法，对发展猪的工厂化生产，提高工厂化养猪水平具有一定的指导意义。     

3个中国实验用小型猪品种血液生化指标分析

用全自动生化分析仪检测了五指山小型猪近交系、贵州小型猪和广西巴马小型猪封闭群25个血液生化指标，统计分析结果显示，3个品种间无差异的指标有1项，差异极显著（P＜0.01）的指标有7项；3个品种中所有指标的变异系数平均值依次为：0.18、0.21和0.17。通过3个小型猪品种间同一指标的比较，以及与人类参考值、国外著名的哥廷根小型猪、地方猪品种和引进大型猪品种比较，为小型猪用于人类医学研究应用提供参考。     

江苏省规模化猪场蠕虫感染情况调查

为了解江苏省规模化猪场蠕虫的感染情况，笔者从徐州、泰州、宿迁、盐城、扬州和南通6个地区的12个规模化养猪场随机采集937份粪便样品，采用离心沉淀法、饱和氯化钠漂浮法和饱和硫酸镁漂浮法对粪便样品进行了检查。结果显示，在12个养殖场均发现寄生虫感染，粪便样品中蠕虫虫卵的检出率为7.6%。徐州地区的两个猪场感染率最高，合计达20.7%；泰州地区的两个猪场感染率最低，仅有1.7%。宿迁、盐城、扬州和南通地区的调查猪场感染率分别为6.5%、8.2%、5.4%和5.4%。调查显示，感染虫种包括蛔虫、鞭虫、后圆线虫、食道口线虫和类圆线虫，其中蛔虫和食道口线虫的感染率较高，分别为5.2%和3.6%。徐州、宿迁、盐城、扬州和南通5个地区的猪场内存在蛔虫和鞭虫、蛔虫和食道口线虫，以及蛔虫和后圆线虫混合感染的情况。经比较发现，妊娠母猪和哺乳母猪的肠道寄生虫感染率高于其他生产阶段，仔猪感染率最低。检查中未见绦虫、吸虫和棘头虫等虫卵。本研究结果表明，江苏地区的规模化猪场普遍存在线虫感染的情况，蛔虫、食道口线虫和鞭虫感染强度较高，定期驱虫有助于规模化猪场线虫病的防控。     

庭院生态养猪新技术

本文介绍了庭院生态养殖的基本内涵，猪舍的构造特点，建筑布局及其应注意的问题，并预测了庭院生态养猪在我国的发展前景。     

用生物经济模型对我国不同类型猪场的模拟研究——模型的构建和初步结果

根据我国当前养猪生产繁育体系,将我国集约化养猪生产概括为5类典型猪场,并利用农场模型的方法,构建了不同类型猪场的生物经济模型,并考虑了模型的生物学效率。模拟的600头母猪的商品猪场、猪苗场、杂种扩繁场、杜洛克育种场和长白（或大约克）育种场每年总利润分别为56.01、12.99、100.53、134.09和164.10万元,净能利用效率分别为27.69、32.98、28.25、28.32和28.48 MJ/kg。模型还输出了不同类型猪场的成本结构、收入组成和生产综合指标。对模型的敏感度分析表明,模型对不同市场形势、生产水平和管理措施变化的反应是灵敏的。     

黑龙江省猪完整繁育体系猪群结构优化的研究

本文以黑龙江省猪品种资源构成、养猪生产具体条件及过去杂交试验等为基础，拟定了二元、回交和三元杂交方案．在系统分析的基础上，运用线性规划模型优化了不同杂交方案下不同品种组合的猪完整繁育体系内猪群结构．得出，不同杂交方案下猪完整繁育体系各阶层母猪群的最优数量结构呈金字塔形．     

中国2个地方品系猪SLA-3原核表达载体构建及表达

为构建中国地方品系荷包猪及莱芜黑猪SLA-3(命名为SLA-3-HB和SLA-3-LW)原核表达载体及表达目的蛋白,试验通过PCR扩增获得SLA-3胞外区基因,并克隆至pMD19-T Simple载体,转化大肠杆菌Top10感受态细胞,酶切及测序筛选阳性重组质粒;重组质粒经酶切回收,目的片段进一步连接pET-21a(+)表达载体,并转化大肠杆菌BL21感受态细胞,IPTG诱导目的基因的表达;SDS-PAGE检测目的蛋白。结果显示,PCR成功扩增SLA-3-HB及SLA-3-LW胞外区,大小约850 bp,目的基因成功克隆至pMD19-T Simple载体,并筛选序列正确的阳性重组质粒。进一步研究证实,SLA-3-HB及SLA-3-LW成功连接到表达载体pET-21a(+),插入片段长度均为831 bp。经诱导后,SLA-3-HB及SLA-3-LW均成功表达,表达蛋白大小为31 ku,相对表达含量达到40%。本研究成功构建了中国地方品系荷包猪及莱芜黑猪SLA-3原核表达载体,为进一步研究其结构和功能奠定基础。     

Analysis of the Cecum Microbial Diversity of Different Pig Breeds by Illumina Amplicon Sequencing of 16S rDNA Tag

To study the diversity and composition of the bacterial community from cecum samples from Yacha pig, Qingyu pig and Wujin pig, the investigation was designed to reveal mechanism of roughage resistance. Illumina amplicon sequencing of 16S rDNA Tag was used to analyze the cecum microbial diversity of Yacha pig, Qingyu pig and Wujin pig at 90 kg liveweight. The results indicated that the core flora of the three breeds were Bacteroidetes and Firmicutes at the phylum level and Prevotella and Bacteroides at the genus level. Meanwhile bacteria associated with cellulose decomposition were found in all three breeds, in which the number of Fibrobacter and Clostridium in Yacha pig were significantly higher than that in Qingyu pig and Wujin pig (P<0.05),and the number of Prevotella in Yacha pig was significantly higher than that in Wujin pig (P<0.05). The number of Bacteroides in Qingyu pig was significantly higher than that in Yacha pig (P<0.05).The number of Spirochaetes in Qingyu pig was significantly higher than that in Wujin pig (P<0.05). It could conclud that the composition of the cecum bacteria community was similar in above pig breeds, but there were significant differences in distribution and quantity. According to analysis of microbial related to cellulose digestibility, Yacha pig was the strongest among the three breeds, followed by the Qingyu pig and Wujin pig.