固相补体结合反应及间接血凝试验对鼻疽马骡诊断的比较研究

以18匹鼻疽马的病理组织学变化为主要依据,结合常规补体结合反应(CFT)的检查结果,确定了间接血凝试验(IHA)的判定标准,即血清凝集1:800或以上呈现“++”为阳性,1:400呈现“++”为疑似,1:200以下凝集为阴性反应。进而为比较固相补体结合反应(SP—CFT)与IHA检测鼻疽的敏感性,以CFT作对照,对内蒙和吉林两省(区)的1244匹马骤血清进行了检测,CFT、SP—CFT和IHA的阳性率依次为10.8％、16.8％和7.3％,阴性率为84.8％、71.2％和85.4％。用这三种血清学反应检查供作对照的20匹健康马血清及14匹其它6种传染病血清,均未出现影响结果判定的类属反应。1244匹马骡血清中鼻疽菌素试验呈阳性反应的血清540匹份,三种血清学反应阳性率依次为15.9％、30.9％和3.2％,阴性率依次为77.4％、44.8％和35.9％。由上可见,在三种血清学反应中,不论对大面积的鼻疽疫区,还是对鼻疽菌素试验阳性(M~+)马群的检疫,SP—CFT均表现了最高的敏感性,至于IHA的检出率,则较SP—CFT低,但可用于鼻疽的早期诊断,以弥补在此期间补体结合性抗体尚未出现,补体结合反应不能检出的缺陷。     

鼻疽马骡固相补体结合反应与病理组织学关系的研究

为进一步探讨国相补体结合反应检测鼻疽马骡的判定标准的客观程度,扑杀了18匹鼻疽马,经病理组织学检查,均看到了典型的鼻疽病变,以SP-CFT作检测,阳性反应15匹,占83.3％;疑似反应2匹,占11.1％;阴性反应1匹,占5.6％。由上述结果认定,SP—CFT检测并无假阳性反应发生,与病理组织学变化一致,其结果是可信的。     

微孔塑板四唑氮蓝试验对鼻疽马免疫状态的探测

为了寻求适用于马体的四唑氮蓝(NBT)试验方法,进而探测该试验与鼻疽马免疫状态的关系。本实验进行了NBT定性方法的比较和试验条件的筛选,并通过对健马62匹和各种类型鼻疽马88匹的测定以及对7匹鼻疽菌接种马长达9个月的定期检测,初步获得了鼻疽马免疫状态的检测指标,对鼻疽免疫机理的研究提供了新的手段。     

吖啶橙玻微吞噬试验对鼻疽马细胞免疫功能的研究——Ⅱ 鼻疽杆菌人工感染马及不同类型自然感染马的检测结果

本文应用吖啶橙玻片微量吞噬试验对7匹鼻疽杆菌死菌和活菌人工感染马进行了连续检测,无论是死菌接种还是活菌接种,噬菌率(PR％)、噬菌指数(PI)和杀菌指数(BcI)三项指标的变化趋势均一致;对自然感染马79匹(鼻疽马11匹、马来因马17匹,双阴转马51匹)也进行了检测。人工感染马和自然感染马的检测结果与健马正常值相比,三项指标相差均非常显著(P<0.01),从而认为三项指标均可作为观察鼻疽免疫状态的指标。     

马鼻疽弱毒菌苗对马体的免疫试验

应用鼻疽杆菌C67-4060Co(7)兼高温178代和C67-40高温180代两株弱毒菌株,对8匹马进行了免疫试验,其中安全试验组2匹,免疫试验组4匹,对照试验组2匹。安全试验组马经70d左右的观察后,人工迫杀进行病理剖检和组织学检查,均未发现鼻疽性病变,细菌学检查阴性,表明该弱毒菌苗安全性好。免疫试验组马经3个月左右的观察后,以不同剂量强毒菌株攻击,除1匹马出现一侧性鼻漏外,其余马匹均无临床症状,细菌学检查4匹马均为阴性,人工迫杀后经病理学和免疫组织学检查等综合性判定,免疫马有3匹耐过强毒菌的攻击而获得保护。而强毒菌攻击的2匹对照马均发病,经病理剖检和组织学检查均有鼻疽性病变,细菌学检查阳性。     

驽巴贝西虫补反抗原的制造及应用研究

本文报道了用驽巴贝西虫接种摘脾驴、马制备补反抗原的方法及0.25％皂素液、康氏液在该抗原制造中的优异作用。应用该抗原做补反试验,对人工感染驽巴西虫病马5/6阳性、1/6疑似;对自然感染病马15/15阳性;对155匹健马及124匹类症马均为阴性;对疫区有症状无虫体的马16.7％阳性;无症状、无虫体的假定健康马 15.5％阳性;非疫区的 31匹健马全为阴性,表明本抗原的特异性强,检出率高,具有一定的临床应用价值。     

两种补体结合反应对马来因阳性马骡血清抗体检测的比较

本文对鼻疽固相补体结合反应的条件进行了筛选,建立了术式。通过对417匹马来因点眼阳性马骡血清抗体检测证明,建立的固相补反的敏感性高,其阳性反应占29.5％,疑似反应占23％,阴性反应占47.5％;而常规补体结合反应则分别为14.7％、3.8％、81.5％。对10匹其它传染病血清和20匹马来因点眼呈阴性的健康马血清检测结果,除类鼻疽血清外,均呈阴性反应,证明固相补反具有一定的特异性。     

应用间接ELISA方法检测马鼻疽抗体

为了验证间接ELISA方法检测马鼻疽抗体的可行性,在东莞市4个马场采集马血清,应用间接ELISA方法进行检测,同时对这些马匹进行鼻疽菌素滴眼反应检疫。结果为间接ELISA阳性对照血清和阴性对照血清结果均成立,采集51份马血清马鼻疽抗体均为阴性,鼻疽菌素滴眼反应检疫结果均为阴性。结果表明,应用间接ELISA方法检测马鼻疽抗体可行,东莞市的马匹未发现有马鼻疽的感染。     

鼻疽免疫机理的研究

本试验以鼻疽常规检疫法为基础,采用多种新型体液免疫和细胞免疫检测法,结合病理组织学及临床血液学检查,通过定期检测健马、各种类型鼻疽马与鼻疽强毒菌人工接种感染马,对鼻疽免疫机理进行了研究。试验结果:首先,建立了用于马鼻疽的三种体液免疫检测法和四种细胞免疫试验法;第二,代表保护性免疫检测法的NBT,在检测鼻疽免疫功能上获得了明显的效果;第三,证明了鼻疽体液抗体无杀鼻疽菌的特异功能;第四,阐明了死菌抗原与活菌抗原的免疫机理;第五,证购了鼻疽杆菌属胞内寄生菌,鼻疽免疫马的保护性反应以细胞免疫为主,马来因马及马来因与补体结合反应双阴转马有显著的免疫功能。综合上述试验结果,提出了鼻疽免疫机理的分型规律,即体液免疫属Ⅰ型,细胞免疫属Ⅱ型,外周血白细胞分类计数的变化亦属Ⅱ型。以上试验所获,突破了多年来鼻疽研究的岑寂局面,为今后鼻疽的研究指出了方向,提供了新的资料。     

间接荧光抗体试验诊断马骡伊氏锥虫病的研究

以人工感染伊氏锥虫的小鼠血液涂片为抗原,建立了IFA试验检测马骡伊氏锥虫抗体的方法,并对伊氏锥虫病马、同群马、健康马、非伊氏锥虫病马血清作了检测。伊氏锥虫病马和无症状同群马的抗体阳性率分别为97％(33/34)和12％(18/150);25匹健康马血清伊氏锥虫抗体均为阴性;84份非伊氏锥虫病马血清的IFA试验均为阴性,未出现交叉反应。多数病马发病一周内的血清IFA试验即为阳性。3匹病马血清抗体消长动态观察结果表明,病马于治疗后110天,血清IFA试验仍为阳性。本试验表明,IFA试验检测马骡伊氏锥虫抗体,敏感性高、特异性强,对无症状的感染马也能检出,可用于本病的早期诊断和血清流行病学调查。