地高辛标记核酸探针检测牛粘膜病病毒

本课题建立了地高辛标记核酸探针检测牛病毒性腹泻－粘膜病病毒（ＢＶＤＶ）的诊断方法。根据ＢＶＤＶ基因序列的结构特点,在编码非结构蛋白ｐ１２５高度保守基因区内,设计合成一对特异性引物。以ＰＣＲ技术从ＢＶＤＶ基因重组质粒中扩增出了ＢＶＤＶ特异的、保守的４００ｂｐ核苷酸片段,经纯化后,地高辛标记,制备牛病毒性腹泻病毒的特异性核酸探针。通过检测ＢＶＤＶ细胞培养物、相关病毒及核酸载体和ＢＶＤＶ细胞培养物的总Ｒ     

牛体外胚胎繁殖系统的病毒检测

牛体外胚胎繁殖系统的病毒检测ＡｖｅｒｙＢｅｔａｌ感染病毒性腹泻（ＢＶＤ）病毒的牛主要导致繁殖失能，其中持续感染牛是ＢＶＤＭ主要传染来源，因而，在体外胚胎繁殖过程中，防止偶发的ＢＶＤ病毒意外感染受体是很重要的。如果将ＢＶＤ病毒阳性的胚胎繁殖到ＢＶＤ特异...     

牛病毒性腹泻/粘膜病的研究进展

牛病毒性腹泻／粘膜病（Ｂｏｖｉｎｅｖｉｒａｌ　ｄｉａｒｒｈｅａ／ｍｕｃｏｓａｌ　ｄｉｓｅａｓｅ，ＢＶＤ／ＭＤ），简称牛病毒性腹泻（ＢＶＤ）或牛粘膜病（ＢＭ），是由牛病毒性腹泻／粘膜病病毒（ＢＶＤ／ＭＤＶ）感染牛引起的以发热、粘膜糜烂溃疡、白血胞减少、腹泻、咳嗽及怀孕母牛流产或产出畸形胎儿为主要特征的一种传染病。１９４６年Ｏｌａｆｓｏｎ等首次报道病毒性腹泻病。１９５３年Ｒａｍｓｅｙ和Ｃｈｉｖｅｒ发现粘膜病。１９６１年Ｇｉｌｌｅｓｐｉｅ等研究证明，这两种病毒是有共同抗原性的同种病毒，１９７１年由美国…     

免疫过氧化物酶法快速检测牛病毒性腹泻—粘膜病病毒抗原

用间接免疫过氧化物酶法（ＩＩＰ），对非细胞致病性牛病毒性腹泻－粘膜病（ＢＶＤ－ＭＤ）病毒持续感染的４２头牛血清经牛胎儿肌细胞培养检出了ＢＶＤ－ＭＤ病毒抗原，１００头外观健康牛的血清，经牛胎儿肌细胞培养未检出ＢＶＤ－ＭＤ病毒抗原，该结果与用干扰法获得的结果一致。而且用ＩＩＰ在血沉标黄层涂片中也检出了ＢＶＤ－ＭＤ病毒抗原，用亲和系－生物素过氧化物酶复合物方法在福尔马林固定的组织切片中也检出了ＢＶＤ－Ｍ     

牛病毒性腹泻的研究进展

对牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）分子生物及牛病毒性腹泻（ＢＶＤ）的流行病学、致病机理、临床症状、病理变化、诊断和预防等方面的研究进展进行了综述。     

检测牛病毒性腹泻－粘膜病病毒抗原试剂盒的研制及应用

本研究在双抗体夹心ＥＬＩＳＡ检测牛病毒性腹泻－粘膜病病毒（ＢＶＤ－ＭＤＶ）抗原的基础上，研制了检测ＢＶＤＭＤＶ抗原的试剂盒。经试验证明特异、敏感，４℃保存６个月检测结果稳定；与原方法比较，易于保存及运输，使用方便，为商品化推广应用提供了前提。     

双抗体夹心ELISA检测牛病毒性腹泻病毒的研究

建立了从粪便中检测牛病毒性腹泻（ＢＶＤ）病毒抗原的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ。试验方法的最佳工作条件为，抗体包被量为１００μｇ／孔，酶标抗体的浓度为１：４００。对不同地区牛、羊、鹿粪样检测结果，牛的ＢＶＤＶ感染率为１６．５％￣８９．０％，羊为１４．６％￣８３．３％，鹿为１９．６％￣４４．４％，并且从许多地区的牛、羊同时检测到ＢＶＤＶ，表明本病在国内某些地区存在着严重的感染。     

猪感染牛病毒性腹泻病毒的研究进展

本文就猪感染牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）的发生,临床症状与病理变化,猪感染ＢＶＤＶ的传染来源以及猪感染ＢＶＤＶ和猪瘟病毒的鉴别诊断等方法作了综述性介绍。     

牛胎儿组织中牛病毒性腹泻病毒50kDa假定受体的表达

牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）引起的疾病，统称为牛病毒性腹泻。ＢＶＤＶ是一种普遍存在的病毒，控制ＢＶＤＶ失败的原因之一是缺乏有关感染分子机制方面的资料，其中包括病毒－细胞间的相互作用。病毒和敏感细胞间的相互作用是病毒致病机制的一个重要因素。病毒－细胞相互作用的第一步是病毒吸附于宿主细胞的受体，这种相互作用通常决定了病毒的宿主范围。现已确定的病毒受体是细胞膜的正常组成成分，并经常起着生理学配基受体的功能。碳水化合物、脂类和蛋白质分子都能作为病毒的受体，多瘤病毒和正粘病毒结合于糖蛋白和糖酯的唾液酸－低…     

BVD-MDV细胞毒的快速粗提

采用聚乙二醇（ＰＥＧ２００００）沉淀法提取了２批牛病毒性腹泻－粘膜病病毒（ＢＶＤ－ＭＤＶ）细胞毒。经毒价及ＯＤ值测定，浓缩病毒较之浓缩前毒力明显增强，病毒含量及纯度均有较大提高。将其作为检测抗原及免疫抗原，应用到ＢＶＤ－ＭＤＶ单克隆抗体的研制中，效果均较理想。试验证明，该方法具有简便、省时、费用低，实用等优点，适合基层推广应用     

BVD—MDV细胞毒的快速粗提

采用聚乙二醇（ＰＥＧ２００００）沉淀法提取了２批牛病毒性腹泻－粘膜病病毒（ＢＶＤ－ＭＤＶ）细胞毒，经毒价及ＯＤ值测定，浓缩病毒较之浓缩毒力明显增强，病毒含量及纯度均有较大提高，将其作为检测抗原及免疫抗原，应用以ＢＶＤ－ＭＤＶ单克隆抗体的研制中，效果均较理想，试验证明，该方法具有简便，省时，费用低，实用等优点，适合基层推广应用。     

用ELISA检测牛血清中的牛病毒性腹泻病毒抗体

一般均用血清中和（ＳＮ）试验和间接免疫荧光（１１Ｆ）试验检测牛血清中的抗牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）抗体，本文用ＳＮ和１１Ｆ敏感性相当的ＥＬＩＳＡ检测ＢＶＤＶ抗体，共测定４７２份牛血清，有７９．２％为阳性。ＥＳＩＳＡ与ＳＮ呈正相关，表明ＥＬＩＳＡ可用于ＢＶＤＶ的常规诊断。     

牛病毒性腹泻病毒野毒株的分离鉴定

牛病毒性腹泻病毒 (ＢＶＤＶ)属于黄病毒科瘟疫病毒属 (Ｐｅｓｔｉｖｉｒｕｓ) [2 ] ,是一种重要的动物病毒。它不仅是牛病毒性腹泻的重要病原 ,也是青海、内蒙古和新疆地区羔羊腹泻的重要病原之一。自 80年代初在国内发现该病并分离到病原以来 ,已有 15个省、市、自治区陆续查出该病的抗体和分离到病原。王治才等[3] 对新疆 7个地区的羔羊腹泻作了ＢＶＤＶ感染调查 ,平均阳性率为 73.6%。笔者在从事ＢＶＤＶ单克隆抗体研制过程中 ,先后分离到 2株ＢＶＤＶ野毒株 ,现将结果报道如下。1　材料和方法1.1　ＭＤＢＫ细胞　中国科学院上海细胞所…     

从幼鹿顽固性腹泻病料中检出牛病毒性腹泻——粘膜病病毒

应用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ对长春、前郭、伊通、双阳等地区送检的２８份幼鹿顽固性腹泻病料进行了牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）检测。应用电镜对部分ＥＬＩＳＡ阳性和阴性样品进行负染观察,结果６份阳性样品中均见有ＢＶＤＶ粒子,４份阳性样品未观察到ＢＶＤＶ粒子。结果表明,ＢＶＤＶ可能是引起幼鹿顽固性腹泻的重要病因。     

牛病毒性腹泻病毒的基因分型

根据病毒基因组５＇端非翻译区（ＵＴＲ）的序列比较将牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）分成两组。种系发生分析说明ＢＶＤＶ－１和ＢＶＤＶ－Ⅱ组互有不同，根据５＇端非翻译区和编码ｐ＾１２６多肽的基因区，设计了用ＰＣＲ鉴别ＢＶＤＶ－Ｉ和ＢＶＤＶ－Ⅱ。用该试验，１４０株ＢＶＤＶ毒株中有７６株被鉴定为ＢＶＤＶ－Ⅱ，并注意到ＢＶＤＶ－Ｉ和ＢＶＤＶ－Ⅱ之间的抗原性和病原性差别，ＢＶＤＶ－Ｉ普遍用于疫苗生产、诊断试验和研     

牛病毒性腹泻病毒的分子生物学进展

牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）可引起临床感染和某些疾病，包括繁殖障碍、呼吸综合症、先天性缺陷、肠炎、持续感染（ＰＩ）和粘膜病（ＭＤ）〔１，２〕。本文阐述ＢＶＤＶ的生物学特征、基因组、编码蛋白及ＭＤ致病的分子机制。１ＢＶＤＶ生物学特征１．１ＢＶＤＶ分类位...     

检测牛病毒性腹泻——粘膜病病毒抗原试剂盒的研制及应用

本研究在双抗体夹心ＥＬＩＳＡ检测牛病毒性腹泻－粘膜病病毒抗原的基础上，研制了检测ＢＶＤＭＤＶ抗原的试剂盒。经试验证明特异、敏感。４℃保存６个月检测结果稳定，与原方法比较，易于保存及运输，使用方便，为商品化推广应用提供了前提。     

用琼脂扩散试验检测牛血清BVD／MD抗体

用琼脂扩散试验检测牛血清ＢＶＤ／ＭＤ抗体陈茂盛，寇改霞（西安动植物检疫局，陕西７１００６８）牛病毒性腹泻一粘膜病（ＢＶＤ／ＭＤ）是世界各养牛发达国家中危害养牛业的主要传染病。利用中和试验检测血清抗体是进行牛群ＢＶＤ／ＭＤ流行病学调查的公认手段。琼脂扩...     

牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体：野外分离株和猪瘟病毒株…

用牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）单克隆抗体检查了大量北美ＢＶＤＶ分离株和血清学相关的瘟病毒属中的猪瘟病毒（ＨＣＶ）。结果，没有一种ＢＶＤＶ单克隆抗体能与所有ＢＶＤＶ分离株发生反应，交叉反应性最强的单克隆抗体为抗Ｐ８０／Ｐ１２５抗体，这种抗体与１７５／１８０株北美分离株发生阳性反应（９６％）、抗ｇｐ５３单克隆抗体与少数分离株的交叉反应性也较高（９４％）。７株单克隆抗体中至少有１株能与所有ＢＶＤＶ分离株     

牦牛病毒性腹泻—粘膜病病毒的分离及鉴定

一九八三年从四川某地区一牦牛分离到牛病毒性腹泻－粘膜病（ＢＶＤ／ＭＤ）病毒，定名为牦牛Ⅰ号毒株。该病毒可在牛肾或牛睾丸原代细胞上繁殖继代，但均不产生可见病变（ＣＰＥ），用荧光抗体染色检查，可见到ＢＶＤ／ＭＤ特异性荧光，其滴度在１Ｏ￣（－３）－１０￣（－５）之间。用细胞培养第１５代病毒做系列试验表明，该病毒为ＲＮＡ病毒，对乙醚敏感，不耐酸，对胰蛋白酶有一定抗力；回归黄牛，血清中和抗体呈ＢＶＤ／ＭＤ阳性。