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王继科 《河南畜牧兽医(综合版)》2000,(4)
随着人类基因组计划的实施 ,一个庞大的人类基因数据库即将建成。为了适应这一要求 ,一项新的“后基因组时代”计划———DNA芯片计划便应运而生 ,并于近期在美国率先启动。该计划的核心就是DNA芯片技术。DNA芯片或称基因芯片 ,实际上是一种高密度的寡核苷酸序列。它采用在位组合成化学和微电子芯片的光刻技术原理 ,将大量特定序列的DNA片段(探针)有序地固化在玻片或硅衬底上 ,快速、并行地对DNA进行序列测定和定量分析。DNA芯片在与待测样品DNA作用后 ,即可检测到大量的生命信息。包括基因识别与鉴定 ,基因突变和基… 相似文献
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DNA芯片技术及其应用 总被引:3,自引:0,他引:3
DNA芯片技术是近年来发展起来的一项融微电子、生命科学和物理学为一体的新技术,是基于核酸杂交的理论而研制的。目前广泛应用于DNA测序、基因突变检测、基因表达研究,蛋白组学研究等多个方面,具有广泛的应用前景。 相似文献
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生物芯片是指通过机器人自动打印或光引导化学合成技术在硅片、玻璃、凝胶或尼龙膜上制造的生物分子微阵列。根据分子间特异性相互作用的原理 ,将生命科学领域中不连续的分析过程集成于芯片表面 ,构建微流体生物化学分析系统 ,以实现对细胞、蛋白质、基因及其它生物组分的准确、快速、大信息量的检测。按照芯片上固定的生物分子的不同 ,可以将生物芯片划分为基因芯片或DNA芯片、蛋白质芯片及芯片实验室 (Lab -on -chip)。而从其功能不同的角度 ,生物芯片又可以分为测序芯片、表达芯片和CGH芯片。基因芯片是生物芯片研究中 ,… 相似文献
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吉氏巴贝斯虫cDNA探针的制备及杂交试验 总被引:1,自引:0,他引:1
本实验将-6.6kb的吉氏巴贝斯虫cDNA片段以光照活化法标记光敏生物素,制备成光敏生物素探针。与吉氏巴贝斯虫基因组DNA、伊氏锥虫基因组DNA、犬白细胞DNA的斑点杂交试验表明,该探针可与0.001ng以上量的吉氏巴贝斯虫DNA杂交,而不与任何浓度的伊氏锥虫DNA和犬DNA杂交,具有很高的敏感性和特异性。 相似文献
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蜜蜂线粒体DNA碱变性提取法 总被引:2,自引:0,他引:2
一、前言线粒体DNA(mtDNA)已被广泛应用于动植物群体遗传学和进化生物学的研究中,并为分子系统学提供了有价值的比较生物学的数据,取得了许多非常有意义的结果。有效的mtDNA提取方法,无疑是开展这方面研究的前提。而mtDNA提取实验成功的标志是把染色体DNA(即核DNA)、蛋白质与RNA尽量去除干净,从而获得一定得率和纯度的mtDNA,以满足mtDNA用于限制性片段长度多态性(RFLP)分析中的酶切及聚合酶链式反应(PCR)中酶切、拷贝和连接的需要。本试验用碱变性提取法,CsCl超速离心法和蛋… 相似文献
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精子载体转基因技术的最新研究进展 总被引:6,自引:0,他引:6
用动物精子作为外源DNA载体已成为转基因的主要方法之一,并在多种动物上获得成功,最近,人们对外源DNA与精子结合的分子机理进行深入研究发现:外源DNA可与精子膜上30~35kDa蛋白质特异结合,结合强度受精子膜上MHCII因子的调节。精清中的IF-1因子能抑制精子结合外源DNA,从而维持物咱的遗传稳定性。精子结合外源DNA的量是恒定的,部分DNA能进入精子核内,CD4蛋白具有转运外源DNA进入精子 相似文献
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动物mtDNA遗传研究进展及在育种上的应用 总被引:12,自引:0,他引:12
动物mtDNA遗传研究进展及在育种上的应用魏彩虹(甘肃省畜牧兽医研究所平凉744000)自从Nass(1962)发现线粒体DNA(mtDNA)以来,有关mtDNA的遗传结构、复制、转录、基因表达与调控等方面已积累了丰富的资料。动物的mtDNA是共价闭... 相似文献
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动物线粒体DNA多态性及其在畜牧科学中的应用 总被引:4,自引:0,他引:4
动物线粒体DNA为核外遗传物质,具有广泛的多态性。线粒体DNA多态性可以用来研究家畜的起源、进化和亲缘关系,是分析家畜群体结构的有用遗传标记,也是研究畜禽品种资源的有效工具。线粒体DNA多态性与家畜的生产性能有一定的关系。 相似文献
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本研究以质粒pGEM-7Zf(+)为载体,对我国北方和南方疫区伊氏锥虫动基体株的kDNA小环进行了克隆,并以其中之pTK011-C_1为探针对不同地理区的动基体株和无动基体株的不同DNA进行杂交,结果表明,我国北、南两大疫区动基体株的kDNA小环大小均约为1kb,且均属A型,pTK011·C_1只与动基体株的kDNA及tDNA杂交,不与其nDNA杂交,也不与无动基体株的任何DNA及黄牛白细胞DNA杂交。说明具有特异性,可以用于诊断。tDNA的杂交信号与kDNA相当,诊断中可以代替kNDA作为检测对象。 相似文献
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DNA芯片技术是近年来发展起来的一项融微电子、生命科学和物理学为一体的新技术,是基于核酸杂交的理论而研制的.目前广泛应用于DNA测序、基因突变检测、基因表达研究、蛋白组学研究等多个方面,具有广泛的应用前景. 相似文献
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蜜蜂线粒体DNA(mtDNA)研究进展王瑞武董捷乔广辉(中国农科院蜜蜂研究所,北京100093)线粒体是细胞中进行能量代谢的重要细胞器。线粒体DNA(mitochondrialDNA,mtDNA)是线粒体中的遗传物质。长期以来,人们对mtDNA的结... 相似文献
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用异硫氰酸胍/盐酸胍法从人肝组织中提取RNA,通过Oligo(dT)纤维柱分离出mRNA。以mRNA为模板,含NotⅠ接头的Oligo(dT)为引物,在逆转录酶SuperScriptⅡRT催化下合成单链cDNA(sscDNA),再在E.coliDNA聚合酶Ⅰ与RNaseH和DNALigase共同作用下,scDNA拷贝成双链cDNA(dscDNA)。经放射自显影测定,合成有全长cDNA片段。平末端dscDNA与SalⅠ接头连接,NotⅠ酶切后,通过过柱取掉小于500bp的cDNA片段,大片段cDNA与载体pSPORT1连接,转化受体菌DH5α,经稀释测定出含有重组子的文库大小为3.3×106。该文库适合于筛选低丰度mRNA的cDNA克隆。 相似文献
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限制性内切酶片段长度多态性有几个绵羊品种中的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
本文利用羊的促卵泡激素(FSH)cDNA,胸腺基因组DNA及卵泡抑止素cDNA等3种探针与泰国长尾羊,咯麦隆羊及它们F1代杂种的基因组DNA进行分子杂交,结果在EcoRI,HindⅢ和TaqⅠ酶切的DNA片段与FSH cDNA杂交的图谱上,可观察到RFLP的存在,并可根据某些特殊区带的存在与否区别两个不同种的羊。用EcoRⅠ酶切的DNA片段与胸腺基因组DNA探针杂交,也发现了RFLP,而其它3种酶 相似文献
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限制性内切酶片段长度多态性在几个绵羊品种中的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本文利用羊的促卵泡激素(FSH)cDNA,胸腺(Thymus)基因组DNA及卵泡抑止素(Follistatin)cDNA等3种探针与泰国长尾羊,喀麦隆羊(Cameroon)及它们F1代杂种的基因组DNA进行分子杂交,结果在EcoRI,HindⅢ和TaqⅠ酶切的DNA片段与FSHcDNA杂交的图谱上,可观察到RFLP的存在,并可根据某些特殊区带的存在与否区别两个不同种的羊。用EcoRI酶切的DNA片段与胸腺基因组DNA探针杂交,也发现了RFLP,而其它3种酶的酶切片段与此探针杂交,个体间的图谱是一致的。利用本实验所采用的4种限制性内切酶,在所测定品种及杂交种的卵泡抑止素位点没有发现变异。 相似文献
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应用核酸杂交技术检测畜禽衣原体病的研究 总被引:1,自引:1,他引:1
从纯化山羊流产衣原体颗粒提取DNA,用DNA限制性内切酶切割,进行酶切图谱分析,与文献报道的图谱对比,证实确系纯的衣原体DNA制品。将衣原体DNA用光敏生物素标记,制成核酸探针,用斑点杂交法检测衣原体核酸,灵敏度可达10pg。又用重组克隆技术将衣原体DNA片段克隆于大肠杆菌质粒载体上,筛选出衣原体特异的DNA片段制成光生物素探针,可以同样有交效地检测衣原体核酸。用光生物素衣原体探针检测了山羊、绵羊、豚鼠、小白鼠、鸡胚等的衣原体感染病料,结果准确。与间接血凝法检测衣原体感染做了对比试验,证明核酸杂交法检测衣原体病更为灵敏和特异 相似文献