猪卵巢卵母细胞体外成熟体系研究进展

猪卵母细胞体外成熟培养中存在的问题是如何进一步提高卵母细胞的采集效率、急待解决的问题是成熟率不高和成熟质量差的问题。综合论述了猪体外受精技术所包含的猪卵母细胞体外成熟(IVM)培养和受精卵的体外培养两项密切相关的技术与方法，以及完善现有的成熟体系及成熟过程。     

猪小腔卵泡卵母细胞体外成熟研究

本实验通过与2～6mm猪卵泡卵母细胞相对比，研究了猪2mm以下卵泡卵母细胞的体外成熟。结果如下(1)由2mm以下卵泡获得的小(直径100.29±7.9μm)、中(109.36±3.71μm)和大(118.90±2.46μm)3类卵母细胞培养48h的成熟率分别为0、22.31％和45.45％。(2)2mm以下卵泡卵母细胞的成熟率(52.63％)显著低于2～6mm卵泡卵母细胞的成熟率(80.39％)。(3)以含PFF的培养液培养2mm以下卵泡卵母细胞其成熟率(53.54％)显著高于不含PFF的对照组(22.77％)。(4)在培养的前24h加入PMSG、后24h去除PMSG，其成熟率(41.86％)与含PMSG的培养液连续培养48h的成熟率(50.0％)无显著差异，而显著高于前24h不加PMSG，后24h加入PMSG培养的成熟率(5.41％)；也显著高于以下不含PMSG的培养液连续培养48h的成熟率(3.3％)。     

猪卵母细胞体外成熟培养的主要影响因素

猪卵母细胞的体外成熟是猪体外受精技术的基础环节，随着克隆、转基因等高新生物技术的发展，尤其是猪在人类医学研究和临床中潜在的应用前景，已使该技术成为近年来的研究热点。本文主要就卵母细胞成熟培养的影响因素作一综述，供参考。     

牛卵母细胞体外成熟和体外受精技术

本文综述了十几年来牛的卵母细胞体外受精和体外成熟技术的研究进展，包括精子的体外获能、卵母细胞采集受成熟培养和体外受精、体外受精早期胚胎的培养等环节，并且对影响该技术的王要原因进行了分析，对体外受精在家畜育种中的应用提出了展望。     

猪卵母细胞体外成熟与体外受精的研究

从猪卵巢2～5mm的卵泡中抽取卵母细胞,用含有FCS,BSA-V,PMSG,HCG的TCM-199液和KRB修正液于37-39℃,5%CO_2,5%O_2和90%N_2的湿润环境中成熟培养和体外受精。实验结果表明:培养40小时后,4组卵丘细胞的扩展率分别为82.96%、89.76%、89.54%、85.57%,组间差异不显著(P>0.05)。第一极体放出率分别为16.90%、6.45%、13.64%、18.46%,第2组明显低于其他各组,但不显著(P>0.05)。用体外获能的精子授精,卵裂率分别为25.93%,18.18%,31.03%,27.03%;授精后29、30小时出现2—细胞,44～45小时出现4—细胞,56小时出现8—细胞。     

猪卵母细胞体外成熟的研究

研究了培养时间和激素对猪卵母细胞体外成熟的影响.结果表明:以NCSU-23为基础培养基的成熟培养液对卵母细胞分别培养36h、40h、44h、48h, 在培养44h后,成熟率最高为81.4%; 不同激素培养,成熟培养液培养22h后置于无激素培养液中继续培养22h的成熟率最高;添加性腺激素培养的成熟率显著高于不添加性腺激素的(P<0.05).     

猪卵泡卵母细胞的体外成熟与体外受精

本试验对猪卵泡卵母细胞不同体外成熟培养时间、不同精子获能时间、不同精卵共孵育时间对体外受精的影响进行了研究。结果表明,体外成熟培养44 h左右,精子获能时间在1～2 h之间,精卵共孵育时间在6～8 h之间,受精后卵裂率最高。     

影响猪卵母细胞体外成熟的相关物理性因素

猪的研究是生物新技术中新的热点和经济增长点，猪的体外成熟是体外受精、性别控制、克隆及转基因等许多新技术成功与否的前提和关键，有许多物理方面的因素影响到猪的体外成熟。     

猪卵巢卵母细胞体外成熟研究

细胞经过一系列的生长发育最终形成有受精能力的成熟卵母细胞的过程。IVM技术是随着上世纪动物胚胎体外生产 (IVP)技术的产生和发展而兴旺起来的。利用卵母细胞IVM技术已经先后在牛(1982 )、绵羊 (1985 )、山羊 (1985 )和猪 (1989)上获得试管后代[13] 。现在世界上日本、美国、英国、丹麦、新西兰和澳大利亚等许多发达国家都已成立了专门的动物胚胎体外生产公司。我国IVM的研究起步较晚 ,但发展迅速 ,已先后在小鼠 (1986 )、人 (1985 )、绵羊 (1989)、牛 (1989)、猪 (1990 )上获得了IVP后代[2 ] 。尤其在牛的IVM -IVP的研究上已接…     

猪卵母细胞体外成熟培养的研究进展

猪卵母细胞体外成熟作为一种很重要的胚胎生物技术,具有重要的理论和实际意义。本文综述了猪卵母细胞体外成熟培养的发展历程、体外培养影响因素以及优化策略,为猪卵母细胞成熟培养提供参考依据。     

猪卵泡卵母细胞体外成熟研究现状

猪卵泡卵母细胞体外成熟研究现状孟庆刚李光鹏曹允考（东北农业大学动物科学系１５００３０）１引言随着哺乳动物胚胎工程技术的发展，人们对猪卵母细胞体外成熟的研究也取得了很大的进展。关于猪卵母细胞体外成熟的理论和培养技术也日渐成熟。相信随此项技术的发展，人们...     

猪卵母细胞体外成熟的研究进展

综述了猪卵母细胞体外成熟的分子机理和影响因素,以期为后续工作奠定基础.     

猪卵母细胞体外成熟中膜电位与成熟关系的研究

本文应用细胞内微电极技术，分析测试了不同类别的猪卵母细胞，在体外成熟中不同时期的膜电位。结果表明，在体外成熟培养前，Ａ类和Ｂ类未成熟卵母细胞的膜电位为较小的负值（－８．９７＋０．５，－１．５５±０．６ｍＶ），Ｃ类则为较小的正值（＋２．４０±０．３ｍＶ）。成熟培养后，卵母细胞首先发生超极化，随着培养时间的延长，卵母细胞膜去极化并极性转化为正值。成熟卵母细胞的膜电位为正值（＋２６．５０±１．０ｍＶ）。本文还讨论了猪卵母细胞可能的体外成熟机理。     

猪卵巢卵母细胞的收集和体外成熟培养

实验对猪卵母细胞的采集和体外成熟培养(IVM)以及培养液进行研究。结果表明，在卵母细胞的采集过程中，机械破碎法平均每个卵巢所获得的A、B级细胞数(7.00，20.50)要显著多于抽吸法(1.48，2.73)(P＜0.05)。但抽吸法中平均每个卵巢所用的时间(1.05min)却显著少于机械破碎法(15.6min)(P＜0.05)。NCSU-23与TCM-199两种培养液对卵母细胞体外成熟率无显著差异(P＞0.05)。添加10μg／LrpGH比20μg／LrpGH更有利于卵母细胞的成熟(71.5％，45.5％)，两者差异显著(P＜0.05)。     

屠宰牛卵母细胞体外成熟和体外受精研究

对采集到的卵巢采取抽吸法、割破法回收卵母细胞,割破法得到的A级卵母细胞显著高于抽吸法。把有黄体和无黄体的卵巢卵母细胞进行培养比较,无黄体的卵巢卵母细胞的成熟率为84．33％,显著高于有黄体卵巢卵母细胞的74．32％。本试验中卵泡卵母细胞和深层卵母细胞体外成熟率均能达到75％以上．卵巢表面卵泡卵母细胞的卵裂率为54．76％,高于深层卵母细胞的卵裂率,但二者无显著差异。IVM时添加卵丘细胞、IVC时添加输卵管上皮细胞是比较理想的培养系统。     

半胱氨酸对猪卵母细胞体外成熟、体外受精及GSH水平的影响

体外受精技术也称胚胎生产技术（invitro production,IVP）,包括卵母细胞的体外成熟、精子的获能、卵子的体外受精和受精卵的体外培养等几个连续的过程。半胱氨酸是GSH的前体物质,在牛体外胚胎生产过程中疏基复合物能增加细胞内GSH的合成,在受精和胚胎的开始阶段保持高浓度GSH可以增加发育率。试验的目的是评价半胱氨酸对猪卵母细胞的成熟率、受精率及成熟培养时期卵母细胞内GSH水平的影响,现报道如下。     

影响猪卵母细胞体外成熟的因素

猪卵母细胞体外成熟培养为胚胎体外生产、体细胞克隆等研究领域提供了大量廉价实验材料。本文就影响猪卵母细胞体外成熟的因素及其研究进展作简要综述。     

猪卵巢卵母细胞的体外成熟及体外受精

从屠宰猪的狼巢卵包中抽取卵母细胞，在ＣＯ２培养箱中成功地进行了卵母细胞体对成熟和体外受精试验。在５％ＣＯ２和９５％空气的湿润条件下把带有卵丘细胞２的卵母细胞在ＴＣＭ－１９９＋ＰＭＳＧ＋ｅｓｔ．ｒａｄｉｏｌ－１７．     

影响哺乳动物卵母细胞体外成熟的主要因素

卵母细胞体外成熟培养技术是哺乳动物体外受精技术的重要环节之一,是应用促性腺激素和类固醇激素在体外模拟卵泡的环境,进而诱发卵母细胞成熟的一项生物技术。主要影响因素如下:1卵母细胞类型在卵母细胞体外成熟研究中,一般根据卵母细胞周围包绕卵丘细胞的情况,分为四种类型,A类:由致密多层卵丘细胞包裹的卵母细胞;B类:卵丘细胞层不完全的卵母细胞;C类:完全裸露的卵子;D类:卵丘细胞呈蜘蛛网状附着的卵母细胞。即包绕三层以上紧密卵丘细胞的卵母细胞为第一类;三层以下的为第二类;卵丘细胞扩展而疏松,卵母细胞卵质无斑块的为第三类;无卵丘细…