利用PCR技术检测异性孪生不育母牛

根据异性孪生不育母牛性染色体嵌合体是XX/XY,而正常母牛性染色体型为XX这一现象,研究开发了一种基于PCR技术检测异性孪生不育母牛的方法:利用牛1.715微卫星做内标基因检测样品DNA的质量,在此基础上,检测被检母牛体内是否存在Y染色体特异的Sry基因,如果检测出Sry基因,则判定被检测牛是异性孪生不育母牛,如果没有检测出Sry基因,则判定被检测牛不是异性孪生不育母牛。利用该项技术,可以快速、准确地检测异性孪生不育母牛。     

应用PCR技术检测饲料中的转基因成分

成功地从成品饲料中提取DNA，并采用PCR检测技术从中检出35S启动子，NOS终止子，EPSPS耐除草剂基因和CryLA(b)抗虫基因等转基因成分，同时通过扩增玉米（Zea mays)自身zein蛋白基因及大豆（Glycine max)自身lectin基因的引物和阴阳性对照，阴阳性质控，避免产生假阳性，假阴性结果。该方法已在口岸进口饲料转基因检测中得到初步应用。     

甘蔗宿根矮化病菌PCR检测技术研究

以甘蔗茎组织总DNA为模板,以16S rRNA基因赖氏细菌属(L eif son ia)通用引物为第一轮引物、甘蔗宿根矮化病菌(L eif son ia xy li subsp.xy li,Lxx)亚种特异引物为第二轮引物建立了Lxx巢式PCR检测技术。根据已报道的Lxx巴西分离物基因组全序列(G enB ank登录号AE 016822.1)设计了扩增致病相关基因片段的3个引物对,经多种组合进行了RCR检验,筛选出两个特异性好、灵敏高的引物对,建立了Lxx的多重PCR检测技术。克隆测序表明,PCR产物与巴西分离物基因组相应区段同一率为99%以上,从而证实了上述PCR技术的正确性。检测结果表明,广东样品的阳性率为90%,海南样品的阳性率为60%。     

利用昆虫辐射不育技术防治光肩星天牛的可行性

利用昆虫辐射不育技术防治光肩星天牛的适照时期为羽化后7－10d，适宜的辐照剂量为70－90Gy，剂量率为1.5Gy/min。田间纱笼释放试验表明，释放比为5：1可压低野生虫口数量。利用昆虫不育技术防治光肩星天牛的难点是人工饲养。     

利用实时荧光PCR进行植原体通用检测

本实验意在研究一种能够应用于植原体初筛,并且不易污染,易操作耗时短的通用方法.比较了已报道TaqMan实时荧光PCR与目前最常用巢式PCR在植原体通用检测中的应用.利用12种植原体感染植株及9种健康植物DNA测试了实时荧光PCR的特异性及通用性.所有植原体材料均获得强的荧光信号,为阳性结果,而健康植物DNA及空白对照均为阴性结果.实验结果证明该实时荧光PCR应用于植原体通用检测具有良好的特异性,相对灵敏度比巢式PCR高10倍,耗时短,操作方便,有效避免了PCR产物污染.实时荧光PCR为植原体病害的口岸检疫、田间监测及大量样品的通用检测提供了良好的技术支撑,是一种可能代替目前最常用巢式PCR的方法.     

PCR技术新应用与水产分子生物学研究

本文简述了ＰＣＲ及其新衍生技术（ＤＤＲＴ－ＰＣＲ,ＡＰ－ＰＣＲ,ＡＦＬＰ－ＰＣＲ,ＩＳ－ＰＣＲ）的原理,特点及其在水产分子生物学研究中的应用展望。     

PCR技术在快速检测沙门氏菌中的应用

本文总结了PCR检测沙门氏菌过程中被检目标基因的选择、引物的特异性以及国内外检测沙门氏菌的一些实例,分析了PCR检测沙门氏菌在引物选择上存在的问题,简述了在传统PCR技术基础上发展起来的检测沙门氏菌新方法。     

利用昆虫辐射不育技术防治光肩星天牛的可行性(英文)

利用昆虫辐射不育技术防治光肩星天牛的适照时期为羽化后 7～ 1 0d ,适宜的辐照剂量为 70～ 90Gy,剂量率为 1 5Gy min。田间纱笼释放试验表明 ,释放比为 5∶1可压低野生虫口数量。利用昆虫不育技术防治光肩星天牛的难点是人工饲养     

利用复合PCR方法同时检测三种转基因水稻

我国在转基因水稻研究方面处于国际领先地位,但由于研究材料扩散到商品化生产水稻中而引起的贸易纠纷时有发生。加强转基因水稻检测与监管,从源头控制转基因水稻基因扩散对于保障生物安全、促进米制品贸易有重要意义。本研究针对我国当前转基因水稻监管重点,结合已有相关检测方法标准,针对三种不同转基因水稻：抗虫水稻TT51-1、抗病水稻M12、抗除草剂水稻LLRICE62,以水稻内源基因RBE4为参照基因,建立转基因水稻四重复合PCR检测方法,可在同一反应体系中同时检测鉴定三种转基因水稻品系,检测限可达250个拷贝。利用此方法可快速地定性检测和鉴定转基因水稻TT51、M12、LL RICE62。     

皮棉表面单类异性纤维的高光谱图像检测

皮棉杂质直接影响棉包定级和棉纺织品品质。国内外学者采用机器视觉等技术,能够有效检测着色较深、面积较大和含有荧光物质的部分棉花杂质。但是,针对纤细、浅色、白色和透明杂质检测效果不佳。因此,该文采用高光谱成像系统获取纤细、浅色、白色及透明异性纤维的棉花高光谱图像,异性纤维包括灰色,白色和透明的丙纶丝、黑色人发、黑色和白色的猪毛、黑色或者透明的聚乙烯地膜碎片。采用主成分分析、独立成分分析、双波段比分析和波长合并四种降维方法,对比其异性纤维分割效果,确定最佳预分割图像。随后,采用Sobel算子边界提取和形态学处理分割这些图像,再采用膨胀和收缩等形态学运算分割出目标区域,最后采用面积单值滤波剔除二进制图像中的噪声点和伪目标区域。统计结果,训练和验证集异性纤维的识别准确度分别为73.2%和75.3%,其中,灰色丙纶丝和黑色毛发的识别率超过93%,白色丙纶丝的精确分割大于80%,结果表明,高光谱图像系统可以准确检测部分浅色、白色和黑色纤细的异性纤维,白色纤细毛发和透明的聚乙烯地膜碎片检测效果较差。     

改进稀疏超完备词典方法识别奶牛跛足行为

监测与发现奶牛异常行为是实现疾病早期防控的关键,其中尤以跛足行为发现与识别较为典型,但是当前家畜异常行为识别仍然存在在线性能较差的问题。针对这一问题,该文提出2种改进策略。首先提出一种基于共轭梯度追踪算法的稀疏超完备词典学习算法(conjugate gradient pursuit-KSVD,CGP-KSVD)用于跛足行为特征的语义级描述和表示,即在稀疏编码构建阶段引入共轭梯度追踪算法寻找优化搜索方向,同时避免存储和计算大规模Hessen矩阵带来的计算负载,从而提升稀疏超完备词典学习算法的收敛速度。其次通过时空兴趣点与稠密轨迹图二次提取时空兴趣点相融合实现视频底层特征提取和表示,在保留丰富细节特征信息的基础上减少冗余特征降低计算负载。在1 200个时长10 s的标注视频样本集上测试结果显示:该文提出的算法识别准确率达到100%,识别平均响应时间为0.043 s,对比基于基追踪算法(basis pursuit-KSVD,BP-KSVD)和正交匹配追踪算法(orthogonal matching pursuit-KSVD,OMP-KSVD)稀疏编码序列优化策略算法在识别平均响应时间分别提升1.11和0.199 s,在90 h回放视频和在线测试视频上跛足行为识别准确率分别为93.3%和92.7%,明显优于对比算法。试验结果表明该文提出的跛足行为识别算法框架具有较高的识别准确率和较好的在线响应时间,可以为相关研究工作提供借鉴意义,相关技术可以成为接触式传感器监测及其他技术的必要补充。     

A method to measure the susceptibility of pasture soils to poaching by cattle

Abstract. A new method of measuring susceptibility to poaching is described, based on the concept that poaching is caused by a progressive loss of soil strength during repeated treading in wet weather. Susceptibility was measured by the rate of loss of strength in response to concurrent treading and irrigation at standard rates. The pressures exerted on the ground by a walking dairy cow were simulated by a purpose-built penetrometer, whilst water was applied via a network of plastic pipes fitted with syringe needles. Measurements were performed on four pasture soils having a range of clay contents and compared in relation to a mechanism proposed for the process. The results show susceptibility to be a property not wholly determined by the clay content of the soil, but suggest that it is influenced by bulk density and the strength of the sward, which will van, according to weather and pasture management.     

用巢式和半巢式PCR检测转基因大豆Roundup Ready及其深加工食品*

用从转基因大豆(Glycine max)颗粒中提取的DNA作为模板,经过稀释,形成不同浓度梯度的DNA溶液,然后用巢式和半巢式PCR进行扩增反应。结果表明,巢式和半巢式PCR均可以扩增DNA浓度为10^14g/μL的溶液。用巢式和半巢式PCR对市场的食品原料和深加工食品进行检测,可以从大豆油、酱油、面酱、大豆磷脂、豆腐、豆浆等食品原料和深加工食品的17个品牌的食品中检测出大豆内标基因(housekeeping gene)。其中,2种食品原料和深加工食品的11个品牌的食品中检测出外源基因CaMV35S-CTP4基因片段,说明这些食品中含有转基因大豆成分,占被检测食品的76．5％。用巢式PCR和半巢式PCR检测转基因大豆Roundup Ready和其深加工食品是一种有效的方法。     

Determination of deltamethrin in cattle dipping baths by high-performance liquid chromatography

Deltamethrin (S)-alpha-cyano-3-phenoxybenzyl) (1R,3R)-3-(2, 2-dibromovinyl)-2,2-dimethylcyclopropane-1-carboxylate is classified as a pyrethroid pesticide that is largely used as an acaricide and scabicide. For bovines, especially, the treatment is done with the aid of dipping baths of the pyrethroid solution. Analytical control of the concentration of deltamethrin in these baths must be done periodically in order to guarantee treatment efficacy. In the proposed procedure, the sample is prepared by centrifugation followed by filtration and measurement by high-performance liquid chromatography (HPLC) with spectrophotometric detection at 275 nm. Separation is done in a Nucleosil C-18 column with acetonitrile-water as the mobile phase. A calibration curve was constructed with external standards, and a detection limit of 0.2 mg L(-)(1) was obtained. In the samples analyzed, only ca. 20% of the total deltamethrin content was found in the solution. The results obtained demonstrate the potential of the described procedure for the determination of deltamethrin in animal baths.     

应用重组PCR技术构建植物基因RNA干扰的结构

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是近年来生物学领域研究的热点之一,本研究应用改进的重组PCR技术构建大豆脂肪氧化酶基因及玉米淀粉分支酶基因的RNA干扰构件,以探索一条简便快捷,适应范围广范的植物基因RNAi结构构建方法.     

利用相关矩阵法优化光谱指数的冬油菜氮素营养诊断

近年来高光谱技术由于无损和高效等优点成为了现代精准农业发展的必要手段方法。为实现冬油菜无损、快速的氮素盈亏诊断,该研究以连续两年(2022—2023年)不同覆盖及施氮处理下冬油菜蕾薹期采集的90份植物样品(地上部生物量和植株氮浓度)和高光谱实测数据为数据源,根据原始光谱和一阶微分(first-order differential,FD)光谱与氮营养指数(nitrogen nutrition index,NNI)的相关系数计算了8种(共16个)典型的光谱指数,随后利用相关矩阵法提取最佳光谱组合,并根据与NNI相关系数的计算结果筛选最优光谱指数,最后将最优光谱指数分为3组模型输入变量,分别采用支持向量机(support vector machine,SVM)、随机森林(random forest,RF)、极限学习机(extreme learning machine,ELM)和反向神经网络(back propagation neural network,BPNN)构建冬油菜蕾薹期NNI估算模型。结果表明一阶微分光谱指数与NNI的相关系数均大于原始光谱指数,3个组合选择的光谱指数与NNI的相关...     

基于热成像技术的牛舍围护结构传热阻测试方法

针对传统的接触式传热阻测试方法对测试场合要求高、操作复杂、操作时间相对较长等难以应用于环境较为恶劣的畜禽舍问题,该文引入热成像技术,开展了黑龙江地区2种不同类型牛舍的围护结构热特性参数现场测试,获得了基于热成像法和传统接触式测试法下牛舍墙体、屋面、门窗的特征温度值。在此基础上,计算了牛舍围护结构材料的传热阻,并与相应建筑材料的传热阻理论计算值进行了对比分析。结果表明,对于墙体、屋面等围护结构,2种方法所获得的传热阻测试值与理论计算值的偏差小于15%;对于围护结构窗体和门,2种方法所获得的传热阻测试值与理论计算值的偏差在20%~30%之间;虽然热成像法和接触式测试法现场实测值与理论计算值之间都存在偏差,但因现场测试能综合材料老化、脱落、受潮和施工质量等实际情况,相对而言实测值的可信度更高;但综合考虑2种方法,热成像法的操作简单、便捷,可以很好地用于畜禽舍围护结构的热工性能评价。     

稻瘟病菌交配型PCR鉴定体系的建立

交配型分析可以用来评价真菌的群体遗传多样性。根据稻瘟病菌(Magnaporthe grisea）交配型基因MAT1-1和MAT1-2全序列设计2对特异引物，并摸索了适宜的PCR反应条件，即95℃变性5min，接着94℃变性30s，54℃退火30s，72℃延伸1min，循环30次，最后72℃延伸7min，建立了稻瘟病菌交配型PCR鉴定体系。以10个已知交配型的标准菌株基因组DNA为模板，结果PCR测得的交配型与其已知的交配型一致。进一步用采自福建田间的150个稻瘟病菌菌株与GUY11／KA3对峙培养，并以PCR方法测定其交配型，结果123个可育菌株中用两种方法所测交配型95．1％相吻合，而27个不育菌株经PCR检测交配型为MAT1-1的菌株有7个，交配型为MAT1-2的菌株有20个。说明PCR方法可较准确地检测稻瘟病菌菌株的交配型，特别是可以测不育菌株的交配型。