高寒地区燕麦根际联合固氮菌研究Ⅱ固氮菌的溶磷性和分泌植物生长素特性测定

对分离自高寒地区燕麦根际的8株联合固氮菌株溶磷性和分泌植物生长素特性进行了测定,结果表明,菌株Azotobacter sp.ChO4、Azotobacter sp.ChO5和Azospirillus lipoferum ChO6具有溶磷能力,但溶磷强度差异较大 (83.8～103.5 μg/mL),Azospirillus lipoferum ChO6溶磷能力较Azotobacter sp.ChO5和Azotobacter sp.ChO4强;8株菌株均具有分泌植物生长素特性,但能力差异较大 (2.16～17.31 μg/mL),只有Pseudomonas sp.ChO3和Azospirillus lipoferum ChO6分泌IAA的浓度较高(大于10 μg/mL).研究认为,菌株Pseudomonas sp.ChO3、Azotobacter sp.ChO4、Azotobacter sp.ChO5、Azospirillus lipoferum ChO6和Azospirillus brasilense ChO8等在燕麦菌肥研制方面具有较大的开发潜力.     

固氮菌对燕麦不同生育期促生作用的研究

研究了固氮菌对兰州地区燕麦不同生育期的促生作用。结果表明,假单胞菌属Pseudomonas sp. N4,动胶杆菌属Zoogloea sp. W6,生脂固氮螺菌Azospirillus lipoferum C6,固氮菌属Azotobacter sp. O5和Azotobacter sp. W5对燕麦有促生作用。拔节期,接种固氮菌后燕麦株高增加0.73%~12.11%,叶绿素增加1.14%~39.43%,地上植物量增加21.45%~43.55%,地下植物量增加51.85%~130.86%,根冠比增加7.7%~76.9%,总植物量增加2.00%~45.36%,粗蛋白增加3.02%~25.57%;半量化肥 固氮菌处理的株高增加1.96%~5.82%,叶绿素和地上植物量没有增加,地下植物量增加3.47%~33.17%,根冠比增加15.38%~30.76%。成熟期,各个处理促生作用降低,处理间差距缩小,Pseudomonas sp. N4和Azotobacter sp. O5促生效果好。     

高寒地区燕麦根际联合固氮菌研究Ⅰ固氮菌分离及鉴定

结合气相色谱仪,利用乙炔还原等方法对高寒地区重要饲用植物--燕麦(Avena sativa)根际联合固氮菌进行了分离和鉴定.结果表明,该地区燕麦根际联合固氮菌株较少(8株),菌株分布以根系表面(RP)最多,根表土壤(RS)次之,距根系较远的土壤(NRS)和根内(HP)最少,即:RP>RS>NRS≥HP;菌株固氮酶活性相差较大(C2H4 112.5～1 147.9 nmol/mL*h),具有较高固氮酶活性的菌株较少(C2H4大于500 nmol/mL*h只有2株);菌株均为革兰氏阴性菌,经鉴定分属Azotobacter(3株)、Pseudomonas(3株)和Azospirillus(2株)3个属.相对于其它生境和植物,高寒地区燕麦根际联合固氮菌种类较为单一.     

高寒地区燕麦根际联合固氮菌研究 Ι固氮菌分离及鉴定

结合气相色谱仪,利用乙炔还原等方法对高寒地区重要饲用植物——燕麦(Avenasativa)根际联合固氮菌进行了分离和鉴定。结果表明,该地区燕麦根际联合固氮菌株较少(8株),菌株分布以根系表面(RP)最多,根表土壤(RS)次之,距根系较远的土壤(NRS)和根内(HP)最少,即:RP>RS>NRS≥HP;菌株固氮酶活性相差较大(C2H4112.5～1147.9nmol/mL·h),具有较高固氮酶活性的菌株较少(C2H4大于500nmol/mL·h只有2株);菌株均为革兰氏阴性菌,经鉴定分属Azotobacter(3株)、Pseudomonas(3株)和Azospirillus(2株)3个属。相对于其它生境和植物,高寒地区燕麦根际联合固氮菌种类较为单一。     

狗牙根内生固氮菌生长条件

从已分离的多个狗牙根(Cynodon dactylon)内生固氮菌株中筛选到两株固氮酶活性较高的菌株7D和BM13,为明确固氮菌株对环境因子的适应性,研究了在不同的生长环境条件下菌株的生长量。采用Ashby无氮培养基,测定了温度、pH、渗透压以及不同氮源和碳源等环境条件对固氮菌生长的影响。结果表明,在10~40℃的温度范围内、pH值3.92~9.64的酸碱环境和30g·L~(-1) NaCl的高渗透压下,固氮菌7D和BM13均能正常生长;菌株能耐受0~10mmol·L~(-1)的NH_4~+和NO_3~-,而且能利用蔗糖、甘油、麦芽糖、甘露醇和葡萄糖等多种碳源生长。说明狗牙根内生固氮菌株7D和BM13对环境因子有很强的抗逆性和适应性,但两菌株之间存在一定差异,可望进一步研发成为优良的固氮微生物肥料生产菌种。     

2株青贮玉米根际固氮菌的筛选鉴定及促生作用研究

为了获得优良的固氮菌,并评价其对青贮玉米的促生效果,本研究采用稀释涂布平板法,利用阿须贝氏固体培养基从青贮玉米根际土壤中分离筛选到10株固氮菌,对其固氮能力进行分析,结果表明,菌株ZL-2和ZL-13的固氮能力较强,菌株ZL-2的固氮量为1.07μg·mL^-1,ZL-13的固氮量为0.95μg·mL^-1。通过细菌形态学、16S rDNA序列分析和生理生化特征,确定菌株ZL-2为生癌肠杆菌和ZL-13为成团泛菌。对2株固氮菌的促生特性进行分析,结果表明,2个菌株具有泌铵能力、溶磷能力、产嗜铁素能力和合成吲哚-3-乙酸(IAA)的能力。盆栽试验结果表明,接种固氮菌ZL-2和ZL-13能够显著提高青贮玉米的株高、根长、地上和地下干、鲜重(P<0.05)。田间试验结果表明,2株固氮菌单接种和双接种均能提高青贮玉米的株高、茎粗、产量、粗蛋白含量和全磷含量(P<0.05)。接种2株固氮菌的青贮玉米,其氮代谢和氨同化相关基因(ZmAMT-4、ZmAMTB、ZmGOGAT2和ZmGS1-3)的表达量显著提高(P<0.05)。因此,2株固氮菌...     

三江源区燕麦根际PGPR菌株功能多样性研究

为探究燕麦(Avenna sativa L.)根际微生物的功能多样性,本文以三江源区燕麦根际土壤为研究对象,采用常规方法测定根际土壤理化性质、平板涂布法筛选植物根际促生菌(Plant growth-promoting rhizobacteria, PGPR),探究其固氮、溶磷及产吲哚乙酸能力,并对优异菌株进行16S rRNA基因鉴定。本研究筛选得到优异的固氮菌31株、溶磷菌5株,产吲哚乙酸菌13株。各地区土壤碱解氮、全氮、速效磷、全磷、速效钾、全钾和有机质含量以及pH值存在极显著性差异(P<0.01)。根际土壤全氮含量与PGPR数量存在显著的负相关关系(P<0.05),根际全磷含量、速效钾含量、土壤pH值、有机质含量与PGPR数量存在显著的正相关关系(P<0.05)。6株优异PGPR鉴定为假单胞菌(Pseudomonas sp.),1株为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus sp.),2株为节杆菌(Arthrobacter sp.)。不同区燕麦根际菌株具有数量和功能多样性,土壤特性和PGPR量间呈相关关系。     

联合固氮菌株分泌能力及其对燕麦的促生效应测定

测定了分离自草坪草和燕麦根际的固氮菌株的分泌植物生长素(IAA)能力及其对燕麦的促生效应。结果表明:11株固氮菌都能分泌IAA,其中加前体(色氨酸)浓度在2.16~22.3μg/mL的有9株浓度大于10μg/mL;不加前体浓度在0.81~13.8μg/mL的有6株浓度大于10μg/mL,有6株能够溶解有机磷,3株能够溶解无机磷,且溶磷强度在58~82μg/mL,1株既能溶解有机磷,又能溶解无机磷;试管试验中除了2株效果比对照差外,其他9株株高增加62.8%~142.8%、叶绿素增加2.78%~63.89%、地上植物量增加21.45%~150.48%、地下植物量增加2.04%~70.75%、总根长增加2.27%~41.27%、根表面积增加11.32%~84.9%;另外I017和I012两个菌株分泌激素能力较好,I016菌株综合能力较好。     

菊芋内生固氮菌分离、鉴定及特性研究

通过气相色谱,结合乙炔还原法,对菊芋根系的内生固氮菌进行了分离和鉴定。结果表明,筛选得到的7株具有固氮酶活性的菌株,分别属于根瘤菌属,寡养单胞菌属,假单胞菌属和肠杆菌属。菌株之间固氮酶活性相差较大,固氮酶活性较高的菌株较少,100 nmol/(mL·h)以上的只有cho1和cho9两株菌。菌株cho4的耐盐性较高,可以在盐浓度为7%的条件下正常生长。分离得到的菌株中,有5株具有解磷活性,其中以菌株cho7的活性最高,为63.84 μg/mL。菌株全部都具有分泌生长素的能力,但差异较大,分泌IAA浓度最高的是cho2,达到13.49 μg/mL。     

植株生长促进型根际细菌（PG-PRs）和层积对山楂属种子萌发的影响

据《Scientia Horticulturae》的一篇研究报道（http：//dx.doi.org/10.1016/j.scienta）,来自伊朗塔比阿特莫达勒斯大学、伊朗农业生物技术研究所的研究人员研究了植株生长促进型根际细菌（PGPRs）和层积处理对山楂属种子萌发的影响。PGPR处理分为固氮菌（Azotobacter chroococcum 12）、固氮螺菌（Azospirillum lipoferum OF）、假单胞菌（Pseudomonas fluorescens 169）、芽孢杆菌（Bacillus subtilis FzB24）以及两种或全部PGPR的组合。     

PGPR菌肥制作及其对燕麦生长和品质影响的研究

利用从牧草根际筛选的优良促生菌株制作PGPR菌肥,并进行田间完全区组随机试验,研究其对燕麦生长和品质的影响。结果表明,本试验研制的PGPR菌肥最好在4个月内使用,液态复合菌肥肥效不如固态复合菌肥。单施PGPR菌肥或PGPR菌肥 半量化肥处理下,燕麦株高、地上植物量、地下植物量、粗蛋白、粗脂肪含量均显著高于CK0,NDF和ADF含量则明显低于CK0。施用固氮(或溶磷)菌肥 半量化肥,各生育期燕麦株高、地上植物量及地下植物量与各全量化肥处理相比无显著差异。单施固氮菌肥或施用固氮(或溶磷)菌肥 半量化肥,能显著提高各生育期燕麦粗蛋白含量。溶磷(或复合)菌肥 半量化肥处理下,燕麦粗脂肪含量显著提高。PGPR菌肥 半量化肥处理,能显著降低燕麦NDF和ADF含量。     

奶牛瘤胃液和瘤胃残渣来源固氮菌的比较研究

试验拟对奶牛瘤胃液和残渣中兼性厌氧固氮菌的一些性质进行比较研究。首先采集3头荷斯坦奶牛的瘤胃液和残渣,分离兼性厌氧固氮菌;然后对其进行固氮酶活性测定、生理生化鉴定和16S r DNA测序。结果表明,从瘤胃液和残渣中分别分离到6株(LY-1、LY-2、LY-3、LY-4、LY-5和LY-6)和4株(LC-1、LC-2、LC-3和LC-4)兼性厌氧固氮菌;从两种来源均分离到了同一种属的索诺拉沙漠芽孢杆菌(LY-3和LC-2、LC-4)。比较发现,从同一来源中分离到的同一种属的菌株(LY-5和LY-6;LC-2和LC-4)的固氮酶活性基本相同,而从不同来源中分离到的同一种属的菌株(LY-3和LC-2,LC-4)的固氮酶活性则有所不同,瘤胃残渣中菌株的酶活性高于瘤胃液中的。据此推测,兼性厌氧固氮菌可能更适合生存在饲料残渣上。     

接种不同根瘤菌菌株对热研5号柱花草的影响

为研究接种不同根瘤菌对热研5号柱花草（Stylosanthes guianensis ‘Reyan No.5’）生长的影响,以灭菌后的石英砂为培养介质,将22株根瘤菌接种到热研5号柱花草根部,通过对干重、氮磷含量、有效根瘤数及固氮酶活性等指标的测定与分析,确定各菌株对热研5号柱花草生长的影响情况,并筛选出高效的固氮菌株。结果表明：除接种菌株DF6和RJS9-1以外,其他20份菌株均能使热研5号柱花草结瘤,且显著提高其产量和氮含量,但不同菌株间接种效果差异较大;其中,接种菌株YM11-1,SM5-1,PS5-1,DH4-2,LZ3-2,CJ和BS1-1对热研5号柱花草产量和品质的提高影响较大,可作为热研5号高效固氮匹配菌株,而接种菌株RJS9-1,RJS6-1,PS2-1,CM2和DF6的效果较差。     

湿热地区腐败燕麦青贮中霉菌的分离鉴定及生物学特性研究

明晰腐败燕麦青贮中霉菌种类和生物学特性对我国湿热地区燕麦青贮具有重要意义。从腐败的燕麦青贮中分离霉菌,利用形态学特征和分子生物学方法进行鉴定,并研究其生物学特性。结果表明：（1）共筛选出霉菌6株（LSO1～6）,LSO1为钩状木霉（Trichoderma hamatum）,LSO2为轮枝镰刀菌（Fusarium verticillioides）,LSO3为毛霉属（Mucor sp.）,LSO4为多变根毛霉（Rhizomucor variabilis）,LSO5为Simplicillium aogashimaense,LSO6为散布韦斯特壳（Westerdykella dispersa）。（2）LSO1和LSO4菌株最适生长温度为30℃,LSO3菌株最适生长温度为25℃,LSO2、LSO5和LSO6菌株最适生长温度为28℃,6株霉菌均在4℃生长最慢。（3）LSO1和LSO4最适生长pH值为5,LSO2、LSO6菌株最适生长pH值分别为9和4,LSO3、LSO5菌株分别在pH值5～9、5～8时生长较好。（4）连续光照有利于LSO1、LSO3、LSO4和LSO6生长,不利于LSO2生长;完全...     

禾本科草坪草固氮菌株筛选及部分特性初步研究

从西安和兰州两地多年生禾本科草坪草根际分离到固氮菌株302株,通过气相色谱仪,利用乙炔还原法最终筛选出10个固氮酶活性较高的菌株。研究发现,菌株X4固氮酶活性最高,达180.20 nmolC2H4/h.m l,与其他菌株相比差异极显著(P<0.01),L9最小为37.78 nmol C2H4/h.m l。比较西安和兰州两地多年生草地的固氮酶活性,西安地区不同草地的差异较大,最高者是最低者的4.5倍左右。单从固氮酶活性来看,西安地区草地有开发潜力的优良菌株相对较多,如X4和X1,而兰州地区的相对较少。分离到的固氮菌70%都有溶磷能力,溶磷圈直径比(D/d)在1.044~2.729之间,其中L7菌株溶解有机磷和无机磷能力相对较好,X1和L5溶解无机磷的能力相对较好,X4和X2溶解有机磷较好。菌株大部分都有分泌生长素能力,但差异较大,分泌IAA浓度最高的是X2,达22.3mg/L,其次为X3菌株。     

不同促生菌混配对燕麦生长及品质的影响

以前期研究筛选出的具有固氮、溶磷、分泌激素和生防特性的6株耐低温植物根际促生菌(G12、I1、Fn1、mF-4、mJ-2、Bn12)为研究材料，采用盆栽法，设不同菌液用量，T1(1∶0∶0∶0)、T2(0∶1∶0∶0)、T3(3∶5∶1∶1)、T4(4∶4∶1∶1)和T5(CK)共计5个处理，测定不同比例下燕麦生长指标和营养指标，研制对燕麦生长和品质影响最佳的复合微生物菌剂。结果表明：与T5相比，各促生菌组合处理均能促进燕麦生长和提高燕麦品质。燕麦株高、茎粗分别增加了5.18%～14.15%和27.37%～40.51%;鲜重、干重分别增加了17.20～28.95 g和3.10～5.95 g;粗蛋白、粗脂肪蛋白分别增加了6.42%～29.57%和0.65%～2.06%;中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维含量以及相对饲用价值分别增加了1.19%～4.07%、0.17%～4.63%和0.99%～6.17%。灰色关联度综合分析表明，不同比例菌株制作的菌剂加权关联度：T3(0.171)>T2(0.168)>T4(0.143)>T1(0.137)>T5(0.081)。处理T3(固氮、溶磷、分泌IAA和产铁载体4种特性的促生菌体积比是3∶5∶1∶1)对燕麦生长和品质的影响均明显高于其他处理和CK,是后续研制微生物菌肥较为理想的配方。     

结缕草根际联合固氮菌的分离及初步鉴定

联合固氮菌在植物根际土壤生长或定植于植物根表细胞,这类细菌可将空气或土壤中的氮素转化为氨态氮供植物直接吸收利用.结合气相色谱仪,利用乙炔还原等方法对结缕草根际联合固氮菌进行了分离和鉴定.结果表明:从结缕草根际土壤中分离获得9株联合固氮菌株,菌株的固氮酶活性相差较大,为67.5～343.7 C2H4nmol/(ml·h)...     

若尔盖高寒补播草地燕麦根际促生菌的筛选及促生特性研究

筛选若尔盖高寒补播草地燕麦根际的植物根际促生菌(Plant growth-promoting rhizobacteria, PGPR),可为生产适宜其微生物菌肥提供优良菌种资源。本研究采用选择性培养基筛选具不同功能的PGPR,并测定菌株的固氮酶活性、溶磷量、植物激素分泌量，16S rDNA基因序列与系统发育分析确定菌株的分类地位，促生试验检验菌株的促生效果。结果表明，从燕麦根际初步筛选出12株促生特性优良的PGPR,其中，7株具有多种促生特性，占总细菌数的58.33%,以假单胞菌属(Pseudomonas)为主，最终筛选出4株促生效果最好的PGPR,其中，菌株NCRS21、PCRS14对燕麦生长的促进作用显著(P<0.05),菌株NCHP9、MCRS16对土壤速效磷含量的促进作用显著(P<0.05)。因此，菌株NCHP9,MCRS16,PCRS14,NCRS21的促生能力稳定，在生产适宜若尔盖高寒补播草地的微生物菌肥方面具有应用潜力。     

植物生长促生菌浸种对高寒地区燕麦生长及固氮的效应

将燕麦Avena sativa种子用植物生长促生菌(PGPR)悬浮液浸泡处理后播种于栽培盆中,观测其对燕麦生长、产量及与产量形成有关的株高、根长、绿叶数、干质量等部分农艺性状的影响以及浸种后植物的固氮效率。结果表明:植物生长促生菌浸种能促进燕麦株高和根系生长,增加燕麦的叶片数,提高燕麦生物产量和固氮效率。在10个菌剂中,W6增加干质量和叶片数最明显;O3,T1,W6和W5促进株高效果较好;W6和M处理对促进根系的生长效果最好。     

燕麦根际促生菌特性研究

本试验用乙炔还原法和比色法对燕麦根际分离的9个PGPR菌株进行了酸碱度、温度和耐盐性试验,并对这些菌株的固氮、溶磷和分泌植物生长激素性能进行了测定,结果表明,其最适宜的光照强度为2 000～3 000 lx,其细胞生长的最适pH值为7.0～7.2,对盐分(NaCl)的浓度不高于1%为宜,最适宜的生长温度范围在28～30℃之间.筛选出固氮、溶磷、分泌植物生长激素和生态适应性均表现优良的菌株N-4、K-1、O3和O5.