黄芪多糖活性组分对鸡脾脏淋巴细胞功能的影响

探讨黄芪多糖不同活性组分对鸡脾脏淋巴细胞功能的影响。首先采用MTT法测定APSt和APS40、APS60、APS80、APS90黄芪多糖活性组分对鸡脾脏淋巴细胞的安全浓度,然后,分别用MTT法和ELISA法检测黄芪多糖活性组分对健康和免疫抑制鸡脾脏淋巴细胞增殖和分泌IL-2的影响。结果表明,各黄芪多糖活性组分均具有一定的促进淋巴细胞增殖和IL-2分泌的作用,且有一定的浓度依赖性,综合比较,各黄芪多糖活性组分对鸡脾脏淋巴细胞的作用顺序为:APS80APStAPS90APS60APS40。结论,APS80提高鸡脾脏淋巴细胞功能的作用最强,可作为进一步研制成免疫增强剂的候选药物。     

茶树菇多糖对小鼠脾脏淋巴细胞免疫调节的影响

【目的】试验旨在揭示茶树菇多糖(Agrocybe aegerita polysaccharid, AAP)对小鼠脾脏淋巴细胞免疫调节的影响,为阐明AAP的作用机制及其临床应用提供依据。【方法】以小鼠脾脏淋巴细胞为研究对象,用噻唑蓝(MTT)比色法测定AAP对淋巴细胞的安全浓度,以安全浓度进行后续试验;用MTT法检测不同浓度AAP对小鼠脾脏淋巴细胞增殖的影响,同时设置细胞、脂多糖(LPS)和植物血凝素(PHA)3个对照组,筛选出对小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力较强的浓度,用流式细胞仪检测其对T淋巴细胞亚型CD4⁺/CD3⁺和CD8⁺/CD3⁺比值的影响,利用ELISA法检测其对淋巴细胞上清液中白细胞介素-2(IL-2)、IL-4、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和γ-干扰素(IFN-γ)含量的影响。【结果】低于1 000μg/mL AAP对小鼠脾脏淋巴细胞不产生毒性作用。与对照组相比,不同浓度AAP均可极显著协同LPS和PHA刺激淋巴细胞增殖(P<0.01);125和250μg/mL AAP可极显著提高...     

蛹虫草多糖对鸡脾脏淋巴细胞的影响

试验将7种浓度蛹虫草多糖(CMP)单独或与刀豆蛋白A(ConA)、脂多糖(LPS)同时加入鸡脾脏淋巴细胞的培养体系中,培养48 h时用MTT法测定淋巴细胞增殖(A570值)的变化;将5种浓度的CMP 40%乙醇提取物(CMP40)、CMP 50%乙醇提取物(CMP50)分别与ConA加入到鸡脾淋巴细胞的培养体系中,培养24 h后收集细胞培养上清液,测定白细胞介素-2(IL-2)和γ-干扰素(IFN-γ)的含量。结果显示,CMP在31.25~2 000μg/mL时,CMP40+ConA组的A570值显著高于ConA对照组;CMP在31.25~500μg/mL时,CMP50+ConA组A570值显著高于ConA对照组,CMP40+LPS组、CMP50+LPS组的A570值显著高于LPS对照组;CMP40在125~1 000μg/mL时、CMP50在500μg/mL时,各多糖组的A570值显著高于细胞对照组;CMP40和CMP50在250~1 000μg/mL时,各多糖组的IL-2和IFN-γ浓度显著高于对照组。结果表明,CMP40和CMP50在合适的剂量能单独或协同ConA、LPS刺激鸡的T、B淋巴细胞增殖,促进淋巴细胞分泌IL-2和IFN-γ,从而增强鸡的细胞免疫能力。     

天门冬多糖对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖的影响

本试验旨在研究天门冬多糖对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖的影响。从正常小鼠分离脾脏淋巴细胞体外培养,在细胞培养体系中分别加入终浓度为50、100、200、400 mg/L天门冬多糖或配合刀豆素(5 mg/L)作用24、487、2 h,以MTT法测定细胞的增殖程度。结果表明,天门冬多糖可显著促进体外培养的小鼠脾脏淋巴细胞增殖,并与ConA有协同作用。     

刺五加多糖对免疫抑制雏鸡脾脏中T淋巴细胞分布及免疫功能的影响

试验旨在研究刺五加多糖(ASPS)对免疫抑制雏鸡脾脏中T淋巴细胞分布及免疫功能的影响,从而对ASPS的免疫增强作用进行评价。300只4日龄海兰褐公雏随机分为3组,每组100只:第1组为空白对照组,第2组为环磷酰胺(CTX)致免疫抑制组,第3组为ASPS+CTX组。第2组和第3组按照80 mg/kg·d的剂量皮下注射CTX,连续注射3 d。从10日龄开始,第3组每只鸡每天皮下注射0.2 m L 200 mg/m L的ASPS,连续注射3 d。第1组和第2组以同样方式注射等量灭菌生理盐水。注射后的第7、14、21和28天分别取脾脏,通过免疫组织化学染色和流式细胞术检测脾脏中CD_4~+、CD_8~+T淋巴细胞分布和数量变化,并利用荧光定量PCR方法检测脾脏中IFN-γ和IL-2 m RNA表达水平的变化。结果显示:CTX能够造成脾脏中CD_4~+和CD_8~+T淋巴细胞数量均显著减少(P0.05),主要由CD_4~+细胞构成的PALS数量减少或消失,红髓和白髓中的CD_4~+和CD_8~+T淋巴细胞分布范围均减小,而且细胞排列疏松,IFN-γ和IL-2m RNA表达水平较空白对照组显著减少(P0.05);在ASPS的作用下,ASPS+CTX组CD_4~+和CD_8~+T淋巴细胞的数量均比CTX组显著增加(P0.05),PALS面积逐渐增加,而且结构逐渐完整清晰,CD_8~+T淋巴细胞的分布范围显著增加,红髓和白髓中CD_8~+细胞分布更加密集,免疫后28 d时基本恢复正常水平,IFN-γ和IL-2 m RNA表达水平显著提高(P0.05)。结果表明,ASPS对CTX造成的脾脏中CD_4~+和CD_8~+T淋巴细胞定位分布和数量异常以及IFN-γ和IL-2 m RNA表达水平下降有显著的修复作用,证明ASPS对鸡脾脏免疫功能具有显著的增强作用。     

马尾藻多糖对鸡脾脏淋巴细胞GSH和GSSG水平的影响

为观察马尾藻多糖(SP)对鸡脾脏淋巴细胞内氧化还原状态的影响,无菌分离鸡脾脏淋巴细胞,采用终浓度为12.5、25、50、100、200μg/mL的马尾藻多糖分别刺激培养鸡脾脏淋巴细胞4、8、12、24h,测定细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)水平。结果表明,各浓度SP与鸡脾脏淋巴细胞共同培养4、8、12h均能不同程度地升高细胞内GSH水平,降低鸡脾脏淋巴细胞内GSSG水平,升高鸡脾脏淋巴细胞内GSH/GSSG比值,与空白对照组相比差异显著或极显著(P0.05或P0.01)。说明SP可以通过调节鸡脾脏淋巴细胞内GSH和GSSG的水平来调节细胞内的氧化还原状态,从而发挥其抗氧化作用。     

山豆根多糖对鸡脾脏淋巴细胞信号转导相关分子水平的影响

为探讨山豆根多糖(SSP)对体外培养的鸡脾脏淋巴细胞信号分子的影响,采用终浓度为50、100、200、400μg/mL的山豆根多糖分4、8、12、24 h 4个时间段刺激培养鸡脾脏淋巴细胞,测定培养上清或细胞内环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)、血栓素B2(TXB2)和一氧化氮(NO)信号转导分子水平。结果表明,山豆根多糖在终浓度为100μg/mL时与鸡脾脏淋巴细胞共同培养8 h后能显著升高cAMP(P0.01)、6-keto-PGF1α(P0.05)、TXB2(P0.01)水平,4种浓度的山豆根多糖对NO分子水平随时间的变化有不同程度的升高(P0.05),影响cAMP/cGMP和6-keto-PGF1α/TXB2信号体系。提示山豆根多糖可通过影响免疫细胞内的信号转导而影响机体的免疫功能。     

黄芪多糖对鸡脾脏淋巴细胞内游离钙离子浓度的影响

为进一步探讨黄芪多糖（APS）的免疫调节机制，建立了特异性荧光探针Fura-2/AM测定鸡脾脏淋巴细胞游离钙离子浓度的方法，观察了APS对体外培养的鸡脾脏淋巴细胞内游离钙离子水平的影响。结果表明：APS以200μg/ml的终浓度加入体外培养的鸡脾脏淋巴细胞培养液中，可极显著升高细胞内游离钙离子的水平（P＜0.01）。提示黄芪多糖通过调节细胞内游离钙离子的浓度而影响机体免疫细胞的信号转导。     

蕨麻多糖对小鼠脾脏淋巴细胞NADPH氧化酶活性的影响

为探讨蕨麻多糖对体外培养的小鼠脾脏淋巴细胞NADPH氧化酶活性的影响,作者应用超氧阴离子荧光探针HE标记脾脏淋巴细胞后,借助激光扫描共聚焦显微镜,对脾淋巴细胞内HE荧光强度的变化进行了检测。结果经H2O2诱导处理的脾细胞中NADPH氧化酶活性显著降低,蕨麻多糖能使脾淋巴细胞内荧光强度增强。表明蕨麻多糖(PAP)能够拮抗由H2O2引起的酶活性降低,促进细胞NADPH氧化酶的活性的恢复,从而影响免疫细胞呼吸爆发功能。     

4种多糖对鸡脾脏淋巴细胞增殖和一氧化氮分泌的影响

将5种浓度的黄芪多糖(APS)、板蓝根多糖(IRPS)、牛膝多糖(ARPS)和山药多糖(CYPS)分别加入到培养的鸡脾脏淋巴细胞中,培养48 h时用MTT法测定淋巴细胞增殖的变化。将3种浓度的APS、IRPS、ARPS和CYPS分别加入到培养的淋巴细胞中培养24 h时收集细胞培养上清液,测定一氧化氮含量和一氧化氮合酶的活力。结果表明,适宜浓度的4种多糖均能提高细胞培养液中一氧化氮的含量、一氧化氮合酶的活力和促进淋巴细胞增殖,且4种多糖效果相当,这可能是多糖提高细胞免疫功能的机理之一。     

蕨麻多糖对小鼠脾脏淋巴细胞内氧化还原状态的影响

20世纪90年代以来,体内活性氧开始受到研究者的重视,越来越多的研究表明,活性氧可作为细胞的信号分子．激活核转录因子,启动基因表达,同时促进细胞外其它信号对基因表达的影响。活性氧可以影响细胞代谢、基因表达和翻译后的修饰。当活性氧大量产生,超过机体抗氧化能力时,可导致机体的氧化损伤。细胞内氧化还原系统对维持正常细胞生理过程发挥着关键作用,GSH／GSSG的平衡是保持细胞自稳态的物质基础。而富含巯基的谷胱甘肽（GSH）在机体的抗氧化系统中起着重要作用,是调节机体氧化还原状态的主要分子。前期研究表明．蕨麻多糖具有提高机体免疫力、抗衰老、耐缺氧等作用。在本实验中笔者等通过检测细胞内GSH和GSSG水平,观察了蕨麻多糖对小鼠脾脏淋巴细胞内氧化还原状态的影响。以探讨蕨麻多糖的抗氧化能力。     

酵母细胞壁多糖与酵母硒联用对肉鸡免疫功能的影响

试验旨在考察日粮中的添加酵母细胞壁多糖和酵母硒对肉鸡死淘率、免疫功能的影响。试验选用1日龄ROSS 308白羽肉鸡,随机分为两个处理组,每组2个重复,每个重复135羽。对照组日粮为基础日粮添加1 kg/t酵母细胞壁多糖,试验组饲喂在基础日粮中添加0.5 kg/t(酵母细胞壁多糖:酵母硒=4:1)酵母细胞壁多糖和酵母硒的日粮,试验周期43 d。试验结果显示:添加酵母细胞壁多糖和酵母硒促进了免疫器官的发育,增强了抗氧化能力,降低了死淘率。     

大枣多糖对鸡淋巴细胞免疫功能影响的研究

试验研究大枣多糖对鸡免疫功能的影响。选取150只、118日龄的乌鸡,随机分为5组,每组3个重复,每个重复10只鸡。产蛋期间,KOBA组乌鸡饲喂不添加药物的配合饲料,ZXMZ组乌鸡饲喂添加0.2 g/kg盐酸左旋咪唑的配合饲料,DZDT1组、DZDT2组和DZDT3组乌鸡饲喂分别饲喂添加1、2和4 g/kg大枣多糖的配合饲料。结果显示：与KOBA组相比,DZDT1组、DZDT2组和DZDT3组乌鸡血清的新城疫病毒（NDV）抗体效价和免疫球蛋白M (IgM)含量均极显著升高（P<0.01）;DZDT2组乌鸡血清的干扰素-γ (IFN-γ)和白细胞介素-2 (IL-2)的分泌量、免疫球蛋白A (IgA)和免疫球蛋白G (IgG)含量极显著升高（P<0.01）。与KOBA组相比,DZDT1组、DZDT2组和DZDT3组乌鸡脾的脾指数、脾淋巴细胞刺激指数和脾淋巴细胞坏死因子-α(TNF-α)的分泌量均极显著升高（P<0.01）;DZDT2组的白细胞介素-4 (IL-4)分泌量极显著提高（P<0.01）。研究表明,配合饲料中添加大枣多糖能够提高蛋鸡的免疫功能,试验条件下,D...     

淫羊藿多糖对鸡脾脏淋巴细胞的调节作用研究

为研究淫羊藿多糖(EPS)体外增强免疫活性,采用酶学检测法测定淫羊藿多糖活性及对鸡脾脏淋巴细胞的增殖作用。根据活性检测结果,选择用50%的乙醇醇沉的淫羊藿多糖进行安全浓度试验;根据安全浓度检测结果,选择2 500.00μg/mL、1 250.00μg/mL、625.00μg/mL、312.50μg/mL、156.25μg/mL 5个浓度,用MTT法测定淫羊藿多糖单独和协同LPS刺激对鸡脾脏淋巴细胞增殖率的影响。结果显示:不同浓度乙醇醇沉的淫羊藿多糖均具有良好的活性,但乙醇浓度为50%醇沉的淫羊藿多糖活性最佳。淫羊藿多糖对鸡脾脏淋巴细胞的安全浓度为2 500.00μg/mL。淫羊藿多糖无论是单独还是协同LPS刺激脾脏淋巴细胞,均显示出不同程度增强脾脏淋巴细胞的活性,且均在浓度为1 250.00μg/mL时显示出较强的体外增强鸡脾脏淋巴细胞增殖的能力,说明淫羊藿多糖在安全浓度范围内可刺激鸡脾脏淋巴细胞增殖,从而实现调节免疫功能的作用。     

刺五加多糖对雏鸡脾脏中T、B淋巴细胞定位分布的影响

为了研究雏鸡注射不同浓度刺五加多糖(ASPS)后脾脏中T、B淋巴细胞定位分布的变化情况,将60只1日龄雏鸡随机分为3组:对照组、低剂量组和高剂量组,每组20只,10日龄起对低、高剂量组雏鸡分别皮下注射免疫50和200 mg/m L的ASPS 0.2 m L,对照组雏鸡以相同方式注射等体积的生理盐水,连续注射4 d。于末次免疫后第7天和第14天,从每组中分别随机选取5只雏鸡,取其脾脏制作冰冻切片,采用免疫组织化学方法检测CD3+T淋巴细胞和Bu-1+B淋巴细胞的定位分布。结果显示,与对照组比较,低、高剂量组在注射后的7 d和14 d ASPS均能增加脾脏中CD3+T淋巴细胞和Bu-1+B淋巴细胞的数量,由CD3+T淋巴细胞构成的脾脏特征性结构-动脉周围淋巴鞘(PALS)的面积也显著增加,红髓中CD3+T淋巴细胞也明显增多,分布范围逐渐增加;同时,由Bu-1+B淋巴细胞构成的椭球周围淋巴鞘(EALS)的面积也明显增加,红髓和白髓中的浆细胞数量显著增多,并在注射后14 d时出现生发中心。与对照组比较,高剂量组和注射后14 d时上述变化趋势更为明显。结果表明,ASPS能够增加脾脏中T、B淋巴细胞的数量,并且能够影响其在PALS、EALS等脾脏特征性结构中的定位分布,从而从组织学角度进一步证明ASPS对鸡免疫功能具有显著的增强作用。     

酵母壁多糖的生物学功能及其对反刍动物的影响

冬春换季和断奶应激常会导致反刍动物胃肠道功能紊乱、机体免疫力低下、腹泻脱水甚至死亡的情况。酵母壁多糖作为一种绿色、安全、有效的功能性多糖,不仅能提高动物生产性能、调节肠道菌群平衡、提高免疫力以及降低机体应激反应,还能减少饲料中的抗生素用量,减少药品在畜禽产品中的残留。另外酵母壁多糖化学性质稳定,无药物残留及无耐药性,对发展无抗养殖具有重要意义。文章主要介绍了酵母壁多糖的结构、生物学功能及其对反刍动物的影响,为酵母壁多糖产品的开发和应用提供参考。     

枸杞多糖对雏鸡淋巴细胞体外增殖及分泌IL-2的影响

为探讨枸杞多糖(LBP)对雏鸡T、B淋巴细胞体外增殖的影响,将不同浓度的LBP分别加入到用植物血凝素(PHA)刺激的体外培养的雏鸡胸腺、外周血、脾脏淋巴细胞中,以及用细菌脂多糖(LPS)刺激的体外培养的雏鸡法氏囊、外周血、脾脏淋巴细胞中,分别用MTT比色法和ELISA法测定淋巴细胞增殖的变化以及IL-2的分泌量.结果显示:(1)LBP在一定浓度范围内时,均能刺激T、B淋巴细胞的增殖和促进IL-2的分泌,且随着多糖浓度的增加而增加;(2)LBP对同一器官来源的T、B淋巴细胞的OD值随着雏鸡日龄的增长均呈现增长趋势;(3)同浓度LBP对相同日龄雏鸡胸腺T淋巴细胞和法氏囊B淋巴细胞的OD值均高于外周血和脾脏的T、B淋巴细胞OD值.结果表明LBP能够促进雏鸡淋巴细胞的增殖和IL-2的分泌,并且对淋巴细胞增殖的促进作用有一定的量效、时效关系和组织相关性.