硫酸化酵母葡聚糖对鸡淋巴细胞的影响

为研究硫酸化酵母葡聚糖(SCG)对鸡细胞免疫的影响,将7种浓度SCG单独或与Con A、LPS加入到鸡脾脏淋巴细胞的培养体系中,培养48 h时用MTT法测定淋巴细胞增殖的变化;将5种浓度的SCG分别与Con A加入到鸡脾淋巴细胞的培养体系中,培养24 h后收集细胞培养上清液,测定IL-2和IFN-γ的含量。结果显示,SCG浓度在在250~2 000μg/m L时,SCG+Con A、SCG各剂量组随着多糖浓度的增加其A570值先增加后降低(P0.05);SCG+LPS各剂量组的A570随着多糖浓度的增加而降低,2 000μg/m L剂量组显著低于其他三组(P0.05);均具有显著的量效关系。SCG浓度在62.25~1 000μg/m L时,多糖组脾脏淋巴细胞体外培养上清液中IL-2与IFN-γ浓度,随着多糖浓度的增加其促进淋巴细胞分泌细胞因子的能力先增加后降低,具有明显量效关系;且均在250μg/m L时效果最好。结果表明,SCG在合适剂量能单独或协同Con A、LPS刺激鸡T、B淋巴细胞增殖,促进淋巴细胞分泌IL-2和IFN-γ,从而增强鸡的细胞免疫。     

玉屏风散总多糖对小鼠派氏结淋巴细胞活化及功能影响的研究

通过研究玉屏风散总多糖对体外培养小鼠派氏结(Peyer's patches,PPs)淋巴细胞活化和功能变化的影响,探讨其对小鼠肠黏膜免疫应答的作用机制。体外培养小鼠PPs淋巴细胞,MTT法检测PPs淋巴细胞加入Con A协同不同浓度玉屏风散总多糖(0. 5、1、2、4、8 mg/m L)在作用不同时间(0、8、12、16、24、36 h)后的增殖变化; ELISA试剂盒检测细胞因子IL-2、IL-4、IFN-γ的含量变化;流式细胞术研究PPs淋巴细胞中T、B淋巴细胞的比例变化,进行T淋巴细胞的亚群分析。结果发现,不同浓度的玉屏风散总多糖均能增强PPs淋巴细胞的活性,单独作用时,浓度达到1 mg/m L以上,差异极显著(P 0. 01);与Con A刺激组比较,Con A与玉屏风散总多糖协同作用时,浓度达到2 mg/m L以上差异极显著(P 0. 01),且对PPs淋巴细胞增殖活化有明显促进作用(P 0. 01)。同时,玉屏风散总多糖可明显促进小鼠PPs淋巴细胞产生和分泌IL-2、IL-4、IFN-γ,改变PPs淋巴细胞中T、B淋巴细胞的比值,且可显著提高CD4+/CD8+的比值。结果表明,玉屏风散总多糖能显著提高小鼠PPs淋巴细胞活性,增强肠黏膜免疫功能。     

甘草次酸脂质体体外对鸡IL-2、IL-4和IFN-γ mRNA表达的影响

为了研究甘草次酸脂质体(GAL)增强免疫的作用和分子机理.采用Primer Primier 5.0软件自行设计白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)3对引物.培养鸡外周血淋巴细胞,分别加入3种浓度的GAL、甘草次酸(GA)和空白脂质体(BL),另设LPS对照组,培养36 h后收集细胞,提取总RNA,然后对其进行反转录.用荧光定量PCR方法测定GAL对鸡外周血淋巴细胞IL-2、IL-4和IFN-γ的mRNA表达的影响.结果:在8.750 mg/L、2.188 mg/L、0.547 mg/L时,GAL促进外周血淋巴细胞3种细胞因子mRNA的转录能力显著强于GA和BL,且在8.750 mg/L时的作用最强.这可能是GAL增强机体免疫的分子机制之一.     

天门冬多糖对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖的影响

本试验旨在研究天门冬多糖对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖的影响。从正常小鼠分离脾脏淋巴细胞体外培养,在细胞培养体系中分别加入终浓度为50、100、200、400 mg/L天门冬多糖或配合刀豆素(5 mg/L)作用24、487、2 h,以MTT法测定细胞的增殖程度。结果表明,天门冬多糖可显著促进体外培养的小鼠脾脏淋巴细胞增殖,并与ConA有协同作用。     

玉米赤霉烯酮对小鼠脾淋巴细胞增殖及分泌细胞因子的影响

采用MTT法、细胞因子ELISA法来分析玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)对离体培养的小鼠淋巴细胞增殖及细胞因子分泌的影响。结果表明,不同浓度ZEN对LPS、ConA活化的脾脏T/B淋巴细胞的增殖均具有极显著的抑制作用(P＜0.01),且这种增殖抑制表现出剂量依赖性;低浓度ZEN(1 μg/mL)能显著促进脾脏淋巴细胞分泌IL-10(P＜0.05),而高浓度ZEN(10、25 μg/mL)均能极显著抑制脾脏淋巴细胞分泌IL-10(P＜0.01),并表现出剂量依赖性;不同浓度ZEN(1、10、25 μg/mL)均能显著或极显著抑制脾脏淋巴细胞分泌IFN-γ(P＜0.05或P＜0.01),并表现出剂量依赖性。     

蛹虫草多糖对鸡脾脏淋巴细胞的影响

试验将7种浓度蛹虫草多糖(CMP)单独或与刀豆蛋白A(ConA)、脂多糖(LPS)同时加入鸡脾脏淋巴细胞的培养体系中,培养48 h时用MTT法测定淋巴细胞增殖(A570值)的变化;将5种浓度的CMP 40%乙醇提取物(CMP40)、CMP 50%乙醇提取物(CMP50)分别与ConA加入到鸡脾淋巴细胞的培养体系中,培养24 h后收集细胞培养上清液,测定白细胞介素-2(IL-2)和γ-干扰素(IFN-γ)的含量。结果显示,CMP在31.25~2 000μg/mL时,CMP40+ConA组的A570值显著高于ConA对照组;CMP在31.25~500μg/mL时,CMP50+ConA组A570值显著高于ConA对照组,CMP40+LPS组、CMP50+LPS组的A570值显著高于LPS对照组;CMP40在125~1 000μg/mL时、CMP50在500μg/mL时,各多糖组的A570值显著高于细胞对照组;CMP40和CMP50在250~1 000μg/mL时,各多糖组的IL-2和IFN-γ浓度显著高于对照组。结果表明,CMP40和CMP50在合适的剂量能单独或协同ConA、LPS刺激鸡的T、B淋巴细胞增殖,促进淋巴细胞分泌IL-2和IFN-γ,从而增强鸡的细胞免疫能力。     

白花蛇舌草提取物对肉鸡淋巴细胞增殖功能的影响

为了研究中药白花蛇舌草对肉鸡免疫力的调节作用,探讨其作用机理。在体外培养的肉鸡血液和脾脏淋巴细胞中加入不同浓度的白花蛇舌草水煎剂、粗多糖和总黄酮等成分,观测其对淋巴细胞增殖功能的影响。白花蛇舌草水煎剂、粗多糖和总黄酮分别在浓度为4 000 mg/L、1 000 mg/L~2 000 mg/L和5 mg/L~100 mg/L时对鸡血液淋巴细胞有明显的刺激增殖作用(P0.05),在浓度为200 mg/L~800 mg/L、10 mg/L~1 600 mg/L和25 mg/L~50 mg/L时对鸡脾脏淋巴细胞的增殖具有明显的刺激作用(P0.05)。研究结果说明白花蛇舌草水煎剂、粗多糖和总黄酮对体外培养的肉鸡淋巴细胞的增殖均有促进作用。     

不结球白菜提取物对肉鸡脾脏IL-2、IL-4及IFN-γ mRNA表达的影响

本研究旨在探讨不结球白菜提取物(NCCE)对肉鸡脾脏细胞因子mRNA表达水平的影响。选取1日龄健康AA肉鸡180只,随机分为6个处理,每个处理3个重复,每个重复10只鸡。对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮,处理组分别在基础日粮中添加100、300、500、700、900 mg/kg NCCE,试验期为42 d。采用实时荧光定量PCR检测NCCE对肉鸡脾脏组织中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)及γ-干扰素(IFN-γ)mRNA的相对表达量。结果表明,与对照组相比,300、500、700、900 mg/kg处理组显著提高了鸡脾脏IL-2、IL-4 mRNA表达水平(P0.05);500、700、900 mg/kg处理组显著提高了IFN-γmRNA表达水平(P0.05);与700 mg/kg处理组相比,500 mg/kg处理组IL-2、IL-4及IFN-γmRNA表达量具有增加的趋势(P0.05)。NCCE能够诱导肉鸡脾脏IL-2、IL-4及IFN-γmRNA的表达,基础日粮中添加500 mg/kg效果最好。     

硫酸化紫锥菊多糖对鸡骨髓源树突细胞的影响

为了探究紫锥菊多糖(EPP)和硫酸化紫锥菊多糖(SEPP)对鸡骨髓源树突细胞(chBM-DCs)的影响,试验先测定EPP和SEPP对chBM-DCs的安全浓度,并设计空白组(B组),对照组(LPS组),紫锥菊多糖高(EPPH组)、中(EPPM组)、低(EPPL组)3个剂量组和硫酸化紫锥菊多糖高(SEPPH组)、中(SEPPM组)、低(SEPPL组)3个剂量组,检测多糖对chBM-DCs表型分子表达,吞噬功能,分泌NO、细胞因子和趋化因子的影响。结果表明:EPP和SEPP对鸡外周血淋巴细胞最佳安全浓度分别为2~(-2) mg/mL、2~(-3) mg/mL、2~(-4) mg/mL和2~(-7 )mg/mL、2~(-8) mg/mL、2~(-9) mg/mL。SEPP各组均能增强未成熟chBM-DCs表型分子CD11c和MHC-Ⅱ的表达。当吞噬作用45分钟时,SEPPH组、SEPPL组及EPPH组的吞噬能力与LPS组和B组相比差异不显著(P0.05);当吞噬作用90分钟时,除SEPPM组和EPPM组外,其余各组的吞噬能力与LPS组和B组相比差异不显著(P0.05)。SEPP各组、EPPH组和EPPM组未成熟chBM-DCs分泌NO的含量均高于B组,但差异不显著(P0.05)。LPS组有提高未成熟chBM-DCs分泌白细胞介素-2(interleukin-2, IL-2)和γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)及降低未成熟chBM-DCs分泌IL-4和IL-10的作用,SEPPH组、SEPPL组及EPPL组分泌IL-2的作用与LPS组相比差异不显著(P0.05),SEPP各组、EPP各组分泌IL-4的作用与LPS组相比差异不显著(P0.05),SEPPH组分泌IFN-γ的含量最高且显著高于B组(P0.05)。SEPPL组和EPPM组可促进未成熟chBM-DCs分泌Rantes。说明硫酸化修饰的EPP对chBM-DCs有免疫增强作用。     

白术、灵芝、黄芪多糖对鸡脾淋巴细胞增殖的影响

为探讨白术多糖(PAM)、灵芝多糖(GLP)及黄芪多糖(APS)对雏鸡脾脏淋巴细胞体外增殖的影响,试验用不同浓度的3种多糖培养液体外培养雏鸡脾脏淋巴细胞,选出适合的多糖浓度,分别在37℃和47℃环境下培养淋巴细胞,并用MTS法测定淋巴细胞增殖的变化。结果表明:3种多糖对淋巴细胞增殖的影响与浓度之间并无线性关系,高浓度的多糖会抑制淋巴细胞的增殖,PAM、GLP和APS的最适添加浓度分别为12.5 mg/L、25 mg/L、6.25 mg/L;在热应激环境下,12.5 mg/L的PAM可显著提高淋巴细胞的增殖能力,与热应激对照组OD490值相比,提高了38.00%,而25 mg/L的GLP和6.25 mg/L的APS分别提高32.67%和36.67%。说明白术多糖抗应激能力最好,可提高淋巴细胞在热应激环境继续增殖的能力。     

CpG ODN对仔猪淋巴细胞增殖和细胞因子诱生的影响:在体和离体试验

将CpGODN、non CpG ODN分别接种初生仔猪，同时分离仔猪的外周血单核细胞，以CpGODN、non CpG ODN对外周血单核细胞体外培养，分别检测仔猪Th1型细胞因子分泌情况。结果表明，与non CpG ODN和对照组相比，CpG ODN能在体内显著提高仔猪的淋巴细胞白介素-2诱生活性、淋巴细胞增殖、血清中IFN-γ和IL-12水平（P〈0．05），亦能在体外刺激仔猪的外周血单核细胞分泌IFN-γ和IL-12（P〈0．01）。这显示CpG—ODN能显著增强动物的免疫应答能力。     

海藻多糖对猪免疫功能影响的初步研究

为探讨不同剂量的海藻多糖对猪免疫功能的影响。选取70头临床健康的瘦肉型二元杂仔猪,随机分为7个组,设海藻多糖、空白对照和药物对照(黄芪多糖组)三个大组。其中的海藻多糖组的A、B、C、D和E组的基础日粮中分别添加海藻多糖可溶性粉300mg/kg、200mg/kg、150mg/kg、100mg/kg和50mg/kg,F组为空白对照组,G组为药物对照组,连用7天。于处理后第7天和第14天对70头猪进行静脉采血,测定血清中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)和免疫球蛋白(Ig G)的含量。结果表明,处理后第7天,海藻多糖组与空白对照组和药物对照组相比,IL-2、IL-6、IFN-γ和Ig G的水平较高且差异显著(p <0. 05),其中以添加200mg/kg、150mg/kg、100mg/kg海藻多糖组的水平升高较明显;处理后第14天,添加海藻多糖的各实验组猪血清中IL-2、IL-6、IFN-γ水平较对照组显著提高(p <0. 05),其中也是以添加200mg/kg、150mg/kg、100mg/kg海藻多糖组的效果较明显;添加海藻多糖的各组猪血清中IL-2、IL-6、IFN-γ水平较黄芪多糖组有显著提高。与黄芪多糖组比较,饲料中添加150mg/kg的海藻多糖能升高仔猪血清中Ig G水平。本实验表明海藻多糖可以提高猪血清中IL-2、IL-6、IFN-γ和Ig G水平,增强猪的免疫功能,临床推荐给药剂量为100mg/kg,连用7天。     

朱砂七多糖体外免疫增强活性研究

研究朱砂七多糖(Polygonum cillinerve polysaccharide, PCP)对鸡外周血淋巴细胞和小鼠脾淋巴细胞免疫活性的影响。用MTT法和ELISA等方法分别检测PCP对鸡外周血淋巴细胞和小鼠脾淋巴细胞的毒性、细胞增殖及小鼠脾淋巴细胞IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ细胞因子分泌水平的影响。结果显示,PCP浓度为1.95μg/mL～31.25μg/mL时,对鸡外周血淋巴细胞和小鼠脾淋巴细胞无毒性,能促进鸡外周血淋巴细胞和小鼠脾淋巴细胞增殖,促进小鼠脾淋巴细胞分泌IL-2、IL-10、IFN-γ等细胞因子,表明PCP在体外具有较好的免疫增强活性。     

胸腺素α_1调节鸡脾脏淋巴细胞免疫功能的信号转导途径

在无菌条件下,从健康墟岗黄鸡体内取出脾脏,分离淋巴细胞并进行体外培养。在细胞培养液中分别加入终浓度为0.01 mol/L咖啡碱、0.05 mol/L EDTA、0.01 mol/L氯化锂和5μg/mL甲派氟丙嗪,然后用10μg/mL胸腺素α1(Tα1)处理,再加入20μg/mL ConA,研究Ca2+-肌醇磷脂-蛋白激酶系统和cAMP-肌醇磷脂-蛋白激酶系统在Tα1调节淋巴细胞免疫功能中的作用,揭示Tα1调节免疫功能的信号转导机制。结果表明,咖啡碱处理能显著增强Tα1促进脾脏淋巴细胞增殖转化、IL-2的基因表达,提高培养液中IL-2浓度(P<0.05);而EDTA处理能显著抑制Tα1促进脾脏淋巴细胞增殖转化、IL-2的基因表达与分泌的作用(P<0.05);氯化锂和甲派氟丙嗪对Tα1的免疫调节作用的影响不明显(P>0.05)。结果提示,Tα1调节鸡脾脏淋巴细胞的增殖和IL-2的基因表达与分泌的作用,主要通过cAMP、Ca2+和PKC等第二信使的介导。     

中药地翁颗粒对小鼠脾淋巴细胞功能的影响

为观察中药地翁颗粒在体外对小鼠脾淋巴细胞功能的影响,设置高（100mg/L）、中（10mg/L）、低（1mg/L）3个剂量组,采用3 H法进行刀豆蛋白A（ConA）、脂多糖（LPS）诱导脾淋巴细胞增殖试验,ELISA方法检测ConA或金黄色葡萄球菌Cown株灭活菌体（SAC）刺激的脾淋巴细胞上清液IL-2、IL-6、IL-10、IL-12、IFN-γ和TNF-α的含量。结果显示,在安全浓度范围内,地翁颗粒能够明显促进T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖;能够促进ConA刺激的淋巴细胞分泌INF-γ;能够促进SAC刺激的淋巴细胞分泌IL-12、INF-γ和IL-6,并抑制IL-10的分泌。结果表明,地翁颗粒能够有效调节小鼠脾淋巴细胞的功能,促进细胞免疫。     

硫酸化20(S)-人参皂苷Rh_2对小鼠脾淋巴细胞分泌IL-4和IFN-γ的影响

为了进一步评价硫酸化修饰后人参皂苷Rh2的免疫活性变化,试验分别采用MTT法和ELISA法对比研究了浓度为0.2 mg/L、1 mg/L、5 mg/L的人参皂苷Rh2及其硫酸化衍生物(S-Rh2-1和S-Rh2-2)对ConA刺激小鼠的脾淋巴细胞增殖和分泌IL-4、IFN-γ的影响。结果表明:S-Rh2-1为0.2 mg/L、5 mg/L,S-Rh2-2为1 mg/L,Rh2为5 mg/L时能显著或极显著抑制由ConA引起的脾淋巴细胞增殖(P<0.05或P<0.01);S-Rh2-2为1 mg/L、5 mg/L,Rh2为0.2 mg/L、5 mg/L时能显著或极显著抑制由ConA引起的脾淋巴细胞分泌IL-4的量(P<0.05或P<0.01);S-Rh2-1、Rh2的3个试验浓度以及S-Rh2-2为0.2 mg/L、1 mg/L时都能极显著抑制由ConA引起的脾淋巴细胞分泌IFN-γ的量(P<0.01)。说明Rh2进行硫酸化修饰后其免疫活性在一定程度上得到了增强。     

刺五加多糖对鸡淋巴细胞体外增殖及细胞因子mRNA表达水平的影响

研究刺五加多糖(ASPS)对鸡淋巴细胞体外增殖及细胞因子mRNA表达水平的影响。将不同浓度的ASPS添加到体外分离培养的血液淋巴细胞中，采用噻唑蓝(MTT)法检测淋巴细胞增殖变化，以实时荧光定量PCR方法检测淋巴细胞细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10、IL-1β、IL-6、iNOS和TNF-αmRNA表达水平。结果显示，ASPS可以单独或协同植物血凝素(PHA)或脂多糖(LPS)促进淋巴细胞体外增殖，并且ASPS在质量浓度为200μg/mL时效果最佳。另外，ASPS能够促进淋巴细胞细胞因子mRNA的表达，当200μg/mL的ASPS与淋巴细胞体外共培养至24 h时，IFN-γ、IL-2、IL-1β、IL-6、iNOS和TNF-α的mRNA表达量均最高，而IL-4和IL-10 mRNA的相对表达量则以ASPS质量浓度为400μg/mL和培养时间48 h条件下最高，说明IL-4和IL-10 mRNA的表达滞后，而且呈剂量依赖性。结果表明，ASPS能够提高鸡淋巴细胞的体外增殖功能，促进Th1和Th2细胞因子分泌，这为进一步揭示刺五加多糖的免疫调节机制奠定了基础。     

酵母壁多糖对断奶仔猪外周血免疫和肠道免疫的影响

本试验旨在探讨饲粮中添加酵母壁多糖对断奶仔猪外周血免疫和肠道免疫的影响。采用单因素试验设计方法,选取21日龄遗传胎次、体重接近的断奶仔猪180头,随机分为4个组,每组5个重复,每个重复9头猪。4组分别饲喂饲粮中添加0(对照组)、0.15%、0.30%和0.45%酵母壁多糖的试验饲粮。试验期21 d。结果表明:1)与对照组相比,饲粮中添加0.15%、0.30%和0.45%酵母壁多糖显著提高了断奶仔猪血清免疫球蛋白A(IgA)含量(P0.05),饲粮中添加0.30%和0.45%酵母壁多糖显著提高了断奶仔猪血清免疫球蛋白G(IgG)含量(P0.05)。2)与对照组相比,饲粮中添加0.15%、0.30%和0.45%酵母壁多糖显著降低了断奶仔猪血清干扰素-γ(IFN-γ)含量(P0.05),饲粮中添加0.30%酵母壁多糖显著提高了断奶仔猪血清白细胞介素-10(IL-10)的含量(P0.05)。饲粮中添加酵母壁多糖对断奶仔猪血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量均无显著影响(P0.05)。3)与对照组相比,饲粮中添加0.30%和0.45%酵母壁多糖显著提高了断奶仔猪回肠CD4~+淋巴细胞含量(P0.05),饲粮中添加酵母壁多糖能一定程度提高断奶仔猪回肠CD8~+和CD20~+淋巴细胞含量,但差异不显著(P0.05)。由此可知,酵母壁多糖能一定程度提高断奶仔猪外周血免疫和肠道免疫,缓解断奶应激。     

茶树菇多糖对小鼠脾脏淋巴细胞免疫调节的影响

【目的】试验旨在揭示茶树菇多糖(Agrocybe aegerita polysaccharid, AAP)对小鼠脾脏淋巴细胞免疫调节的影响,为阐明AAP的作用机制及其临床应用提供依据。【方法】以小鼠脾脏淋巴细胞为研究对象,用噻唑蓝(MTT)比色法测定AAP对淋巴细胞的安全浓度,以安全浓度进行后续试验;用MTT法检测不同浓度AAP对小鼠脾脏淋巴细胞增殖的影响,同时设置细胞、脂多糖(LPS)和植物血凝素(PHA)3个对照组,筛选出对小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力较强的浓度,用流式细胞仪检测其对T淋巴细胞亚型CD4⁺/CD3⁺和CD8⁺/CD3⁺比值的影响,利用ELISA法检测其对淋巴细胞上清液中白细胞介素-2(IL-2)、IL-4、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和γ-干扰素(IFN-γ)含量的影响。【结果】低于1 000μg/mL AAP对小鼠脾脏淋巴细胞不产生毒性作用。与对照组相比,不同浓度AAP均可极显著协同LPS和PHA刺激淋巴细胞增殖(P<0.01);125和250μg/mL AAP可极显著提高...     

白藜芦醇对小鼠淋巴细胞分泌细胞因子的影响

为了探讨白藜芦醇的免疫增强作用。分离小鼠脾淋巴细胞,设空白对照组、阳性对照组及10、20、40和80μg/mL白藜芦醇组,采用ELISA法检测白藜芦醇对淋巴细胞分泌IL-3、IL-4、IL-12和IFN-γ细胞因子的影响。结果,白藜芦醇能诱导脾淋巴细胞IL-3、IL-4、IL-12和IFN-γ细胞因子的分泌。表明白藜芦醇可通过促进淋巴细胞细胞因子的分泌,来提高淋巴细胞的免疫功能。