实验小鼠粪便中致病性病原微生物检测与耐药性分析

为了分析实验小鼠粪便中致病性病原微生物分布与耐药性,本试验从某市的实验小鼠养殖基地采集粪便样品120份,采用常规的细菌鉴定方法、致病性试验、K-B药敏纸片法对采集的粪便样品进行细菌分离鉴定、致病性及耐药性进行检测与分析.结果显示,从120份样品中分离了25株致病性大肠杆菌、24株致病性沙门菌、20株致病性志贺菌;分离的24株致病性沙门菌对氨苄西林、阿莫西林、青霉素等10种药物的耐药率在50.0%以上,对其他药物耐药率在16.7%～37.5%之间;分离的20株致病性志贺菌对氨苄西林、阿莫西林、青霉素等10种药物耐药率在65.0%以上,对其他药物的耐药率在10.0%～35.0%之间;分离的25株致病性大肠杆菌对氨苄西林、阿莫西林、青霉素等9种药物耐药率在60.0%以上,对其他药物耐药率在12.0%～48.0%之间。说明了实验小鼠粪便中分离的大肠杆菌、沙门菌、志贺菌具有很强的致病性,且存在严重的耐药性。     

徐州地区猪源致病性大肠杆菌耐药性检测

为了考察徐州地区猪源致病性大肠杆菌的耐药情况,采用传统微生物法对徐州周边地区52株猪大肠杆菌进行分离鉴定,试管二倍稀释法测定细菌对药物的敏感性,提取耐药菌质粒DNA,PCR扩增耐药基因目的片段。结果表明,氟苯尼考和阿莫西林对徐州周边临床大肠杆菌分离株的最小抑菌浓度(MIC)值与标准菌株相比较,分别提高20～512倍、10～800倍,个别临床分离株对恩诺沙星的MIC值高达80μg/mL,对头孢曲松的MIC值高达80μg/mL,对安普霉素的MIC值高达320μg/mL;经PCR检测临床分离株均扩增出氟苯尼考Flor耐药基因,Tem型ESBLs耐药基因目的片段。说明徐州周边临床大肠杆菌对氟苯尼考和阿莫西林已产生严重耐药性,对恩诺沙星和安普霉素已经耐药,但大部分菌株对头孢曲松敏感。提示徐州周边地区猪场应科学合理、有计划地轮换使用不同药物。     

猪致病性大肠杆菌的分离鉴定与耐药性分析

为有效监测四川巴中某猪场病死仔猪大肠杆菌的耐药性和致病性,对从该猪场病死仔猪的内脏和组织中分离得到的13株大肠杆菌进行了药物敏感性检测和动物致病性试验。结果表明,菌株对12种药物均存在不同程度的耐药,其中,对强力霉素、氟苯尼考和红霉素等7种药物的耐药率均达100%;对阿米卡星的敏感性最高,为69%。动物致病性结果显示,3号小鼠注射对应菌液16 h内死亡,剖检可见多个脏器组织均有出血;仔猪注射死亡小鼠分离纯化液后都没有死亡,但不同猪只出现不同的临床病理变化。该猪场大肠杆菌耐药性较为严峻,建议制定合理的用药方案实行交替用药,避免长期使用同一种药物。     

哈尔滨周边地区猪源致病性大肠杆菌耐药性分析

本文通过对哈尔滨周边地区发病的猪场进行采样处理,得到28株致病性大肠杆菌。并用Kirby-Bauer法对28株致病性大肠杆菌进行14种药物的药敏试验。结果表明,细菌对14种临床常用药物均表现出较高的耐药性,且均为四重耐药以上,更严重的甚至有些细菌对其中12种药物产生耐药性。试验细菌对链霉素和复方新诺明耐药率最高,分别为96.43%和92.86%。可见该地区细菌耐药现象较为严重。     

泉州地区猪源致病性大肠杆菌的分离鉴定血清型检测与耐药性分析

为了解泉州地区猪源致病性大肠杆菌流行血清型分布及耐药性,无菌采集的患病仔猪肝脏、肛拭子和粪便等病料组织样品87份,通过细菌的分离鉴定得到了42株大肠杆菌,其中,30株为致病性大肠杆菌。利用玻板凝集法和K-B药敏纸片法分别检测30株猪源致病性大肠杆菌分离株的血清型和耐药性。结果显示,30株猪源致病性大肠杆菌分离株属于9个血清型中,定型的猪源致病性大肠杆菌分离株27株,定型率为90%(27/30),2株未鉴定出来,占分离菌菌株的64.3%(27/42),以O147和O141为该地区流行的优势血清型;30株猪源致病性大肠杆菌分离株对新霉素、环丙沙星、恩诺沙星等5种药物的耐药率在80.0%~100%之间,对克林霉素、多西环素、丁胺卡娜霉素等5种药物的耐药率在60.0%~73.3%之间;对其他的药物耐药率在33.3%~53.3%之间,且呈现多重耐药性。本研究为该地区的猪源致病性大肠杆菌病的防治提供了重要的参考价值。     

猪致病性大肠杆菌产生耐药性原因

猪大肠杆菌病是临床上一种常见疾病,本病严重危害着养猪业的发展。由于不少猪场用大量的抗菌药物治疗疾病,以及饲料中常添加抗菌药物来预防疾病,因而形成了大量耐药菌株。笔者曾做过试验,没有不产生耐药的菌株,对两种药物同时产生耐药的菌株仅占６％,而对３～５种药...     

四川地区猪源致病性大肠杆菌的分离鉴定与耐药性检测

为了解四川地区猪源大肠杆菌的耐药情况,本试验对2015～2017年四川地区40个猪场的125个病猪样本进行了大肠杆菌的分离鉴定和耐药性检测。结果共分离到37株致病性大肠杆菌,采用K-B纸片法进行药敏试验,发现37株致病性大肠杆菌对恩诺沙星、四环素、阿莫西林、复方新诺明、氨苄西林、庆大霉素、强力霉素的耐药性强,耐药率高于80%,对四环素的耐药率甚至达到了100%;对阿米卡星有较高的敏感性,耐药率为13.5%;所有菌株的多重耐药率高达100%,表明四川地区猪源大肠杆菌的耐药性强、耐药谱广。     

应用RT-PCR检测猪粪便中PRRSV

通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),设计特异性引物检测猪粪便中猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因片段.结果发现,所检测的8份猪粪便样本中有6份扩增出了目的条带,判定为阳性.     

应用RT-PCR检测猪粪便中PRRSV

通过逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR），设计特异性引物检测猪粪便中猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因片段。结果发现，所检测的8份猪粪便样本中有6份扩增出了目的条带，判定为阳性。     

猪、禽安全生产中主要病原菌耐药性检测及控制技术研究进展

国内外研究及本课题组的调查表明,猪、禽养殖中主要病原菌的耐药性日趋严重,细菌产生耐药性的机理复杂多样.而药性的检测技术在常规药敏试验的基础上,国内外学者及本课题组已将质粒指纹图谱,PCR,SSCP,核酯探针等分子生物学技术用于耐药性检测.本文还综述和提出了加强兽药管理、制定用药规范、研究质粒消除技术、开发出针对性疫苗、益生素、噬菌体制剂等一系列耐药性的控制技术.     

猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

从湖北省襄樊地区7家猪场采集病料进行大肠杆菌分离培养,获得36株菌株。通过菌落和细菌形态学观察、生化试验和动物试验确定分离细菌为致病性大肠杆菌。应用纸片扩散法对分离的大肠杆菌进行药物敏感试验,结果表明,对丁胺卡那霉素敏感的菌株有81％,氟苯尼考42％,庆大霉素39％,痢菌净33％,新霉素31％。对阿莫西林耐药的菌株为86％,氯霉素72％,土霉素56％,卡那霉素47％、庆大霉素47％。通过本次试验可知丁胺卡那霉素可作为襄樊地区防治致病性大肠杆菌的首选药物,氟苯尼考作为备选药物。     

猪、鸡与貂源肠外致病性大肠杆菌群型、耐药性与致病性分析

为检测不同动物源肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)的耐药及致病性差异,本研究从132份鸡、猪和水貂等动物肠道外组织中分离鉴定大肠杆菌,并对分离菌株进行了16S rRNA基因测序、毒力基因检测、药敏试验、O抗原鉴定、系统进化群分析及动物致病性试验。实验结果显示:分离出53株ExPEC,且至少携带特异性毒力基因pap、sfa/foc、afa/dra、iutA、kpsMTII中的两种基因,并携带fimH、ibeA、hlyA、malX、iss、iroN等其它相关毒力基因。53株ExPEC分离株对氯霉素、卡那霉素、头孢噻吩、四环素、多粘菌素B、氨苄青霉素等呈现不同程度的多重耐药性;O抗原主要分布于O1、O2、O8、O11、O38、O78、O120血清型;系统进化群分析结果显示:28株属于A群,19株属于B1群,1株为B2群,5株属于D群。选取20株ExPEC分离菌株按照6×10~6cfu/只对小鼠进行腹腔注射,验证其致病性;并测定ExPEC6、ExPEC42、ExPEC52、ExPEC53菌株对BALB/c小鼠的LD_(50),其结果分别为3.49×10~6cfu/mL、9.49×10~5cfu/mL、9.48×10~6cfu/mL、2.38×10~7cfu/mL。本研究为动物源性ExPEC的预防诊断提供依据,并为下一步研究其致病机理等奠定基础。     

宠物犬源致病性大肠杆菌鉴定血清型检测与耐药性分析

为了分析安徽池州地区宠物犬源致病性大肠杆菌的血清型及耐药性,使用无菌肛门拭子采集26家宠物医院腹泻宠物粪便样品63份进行细菌分离鉴定,获得了30株大肠杆菌。对分离的30株大肠杆菌用灌胃方式攻毒小鼠验证其致病性,结果显示,20株为致病性大肠杆菌。利用玻板凝集试验和K-B药敏纸片法分别测定20株致病性大肠杆菌分离株的血清型和耐药性,结果显示,20株致病性大肠杆菌分离株共有10种血清型,以O8和O13为优势血清型; 20株致病性大肠杆菌分离株均对头孢克肟、头孢曲松、恩诺沙星、丁胺卡那霉素4种药物高度敏感;对其他药物存在不同程度的耐药。本试验为该地区的宠物犬大肠杆菌病的防治提供基础。     

猪源大肠杆菌耐药性的检测与分析

为了对福建省龙岩地区猪源大肠杆菌进行分离培养,开展大肠杆菌耐药性调查,试验采用纸片扩散法测定了各分离菌株对23种抗生素的敏感性。结果表明:大肠杆菌分离菌株对四环素、多西环素高度耐药,耐药率为100%;对氨苄西林、氟苯尼考、氯霉素、复方新诺明、磺胺异恶唑的耐药率也均在90%以上;对美罗培南、阿米卡星敏感率在80%以上。说明福建省龙岩地区猪源大肠杆菌分离菌株对各抗生素的敏感性不同。     

西昌地区猪源肠外致病性大肠杆菌的分离鉴定与耐药性检测

为了解西昌地区猪源肠外致病性大肠杆菌的耐药情况,本试验对2016～2018年西昌地区21个猪场的106个病猪样本进行了大肠杆菌的分离鉴定和耐药性检测。通过培养特性、染色特点和形态观察以及PCR鉴定、致病性试验,共分离到28株肠外致病性大肠杆菌。采用K-B纸片法进行药敏试验,结果显示28株致病性大肠杆菌对阿莫西林、氨苄西林、强力霉素、四环素、庆大霉素、复方新诺明耐药严重,耐药率高于85%,对阿米卡星和头孢喹肟保持较高的敏感性,耐药率分别为14.3%和10.7%。28株大肠杆菌的多重耐药率高达100%,表明西昌地区猪源肠外致病性大肠杆菌的耐药性强、耐药谱广。     

河北地区鸡源致病性大肠杆菌毒力基因检测与耐药性分析

为分析河北地区鸡源致病性大肠杆菌(E.coli)毒力基因的携带情况及其与耐药性的相关性,本研究采用PCR方法和K-B纸片法,测定了2013年~2016年从河北省蛋鸡场分离的104株致病性E.coli的19种毒力基因及其耐药性情况。结果显示,从104株致病性E.coli中检出16种不同的毒力基因,总检出率为84.2%(16/19),其中毒力基因irp2、fyuA、ompT、iucD~a、colv、tsh的检出率均在90%以上,毒力基因iroN、fimC、papC、hlyF、ECs370、ECs3737的检出率在62.5%~88.5%,iucA、astA、vat和iss毒力基因的检出率均低于60%,Ler、eaeA和sfa毒力基因未检出;E.coli分离菌株对20种抗菌药物呈现出多重耐药性,其中耐11~14种抗生素最多,占总分离菌的50.96%(53/104),对四环素、阿莫西林、氨苄西林、复方新诺明有较高的耐药率,分别为99.04%、96.15%、92.31%、91.35%;采用SPSS18.0软件统计学方法分析显示,分离的104株鸡致病性E.coli携带的毒力基因和耐药性两者之间不存在明显的相关性。本研究为河北地区鸡致病性E.coli的防控提供科学依据。     

韩国野生鸟类粪便中检测出高致病性禽流感病毒

正11月11日,韩国农林畜产食品部发表消息称,10月28日在天安市所在的凤冈川采集的野生鸟类粪便中检测出H5N6型高致病性禽流感(HPAI)病毒。目前,韩国正在采取相关措施进行防控。     

徐州地区猪源致病性大肠杆菌耐药性调查

为了掌握徐州地区猪场大肠杆菌耐药菌株的产生情况和耐药程度,在2016-2018两年间对徐州地区猪源大肠杆菌进行耐药监测。从猪场分离鉴定致病性大肠杆菌,采用纸片扩散法测定46株分离菌株对15种抗菌药物的敏感性。结果表明,猪源大肠杆菌分离株多重耐药现象严重,至少耐药10种以上,其中10耐和11耐的菌株所占比例最大,分别为28.3%和23.9%;分离菌株对阿莫西林、氟苯尼考、强力霉素耐药率最高,达到80%以上,对头孢噻呋耐药率最低,为17.4%。两年间痢菌净耐药率下降幅度最大,丁胺卡那霉素耐药率增长幅度最大。     

聊城地区鸡源致病性大肠杆菌耐药性的检测与分析

为了研究聊城地区鸡源致病性大肠杆菌对6大类13种临床常用抗生素的耐药性,采用世界卫生组织(WHO)标准中Kirby-Bauer琼脂扩散法进行药物敏感性试验,并对耐药测试结果进行多重耐药分析,绘制耐药图谱。结果表明:分离病原菌菌株对氨苄西林、阿莫西林、链霉素、磺胺甲唑及氯霉素等多种药物已经有较高的耐药性,其中对氨苄西林的耐药性最高,已经达到85.2%,对头孢噻肟和大观霉素高度敏感,耐药性最低,在所试验的菌株中没有菌株对其有耐药性。试验对聊城地区鸡源致病性大肠杆菌对抗菌药物的耐药动向进行了研究和分析,以期为临床用药、防止耐药株的产生提供参考依据。