影响牛活体采卵效果因素的研究进展

利用活体采卵技术可以连续采卵数周，每周两次，而不影响供体的正常生产，而且几乎在任何体况下都可以采卵，因此，活体采卵是目前唯一一种可以替代超数排卵的技术。目前活体采卵主要用于牛，在羊、马、水牛等体型较大的家畜也有应用，但应用相对较少，在这以牛为例总结一下影响活体采卵的各种因素，主要包括以下四个方面。     

牛活体采卵技术研究进展

应用活体采卵技术可以从活体母牛反复采集大量系谱明确的卵母细胞,用于胚胎的体外化生产。本文将对牛活体采卵技术的研究进展和操作方法进行综述,分析影响活体采卵效果的因素和存在问题,并论述活体采卵在家畜育种和胚胎生物技术等方面的应用前景。     

牛活体采卵技术研究进展

活体采卵(Ovum Pick-up,OPU)可生产大量遗传品质优良、系谱明确的体外受精胚胎,成为牛胚胎移植的重要胚胎来源,在奶牛和肉牛生产中得到广泛应用。本文综述了牛OPU技术特点和优势,重点分析了影响OUP效率的因素,以期为牛OUP胚胎生产提供参考。     

影响牛非手术法活体采卵效果因素的分析

利用非手术法活体采卵技术结合体外受精技术和胚胎移植技术,能够更大限度的发挥良种母牛的繁殖潜力,并能够用于患有生殖道疾病良种母牛的扩繁,使良种资源得以充分利用;通过活体采卵技术还可以为核移植、转基因、胚胎干细胞移植等生物工程技术提供必要的材料。本文综述了年龄、发情周期、非手术法活体采卵方法等五个方面对牛非手术法活体采卵效果的影响,为探索更加有效的活体采卵程序和方法,提高非手术法活体采卵的生产效率提供依据。     

牛活体采卵技术的研究进展

活体采卵技术是胚胎移植体系中重要组成成分,因其能在不影响个体正常生产的情况下重复提供可利用卵子而被人们广泛应用于生产实践。本文对近几年该技术及其影响因素等相关研究进行分析,以供相关人员借鉴和参考。     

牛活体采卵技术的研究进展

牛活体采卵是继牛体外受精（IVF）、胚胎移植（ET）技术之后推出的一项新的胚胎工程技术。文章就目前牛活体采卵技术最新进展及其几种常用方法的使用效果进行了阐述,综述了影响牛活体采卵效果的因素,最后对牛活体采卵技术的前景作了展望。     

淘汰牛连续活体采卵效果及影响因素分析

为挖掘利用具有优秀遗传性能的淘汰母牛的卵泡资源,本实验开展淘汰牛连续活体采卵的效果及影响因素研究。选取6头5～6岁无卵巢疾病的淘汰西门塔尔牛,分别于7、10、11月和12月每间隔4 d进行1次活体采卵,每月最高进行5次活体采卵,记录每头次的卵泡抽吸次数、获卵数、优质卵数,并对影响活体采卵效果的因素进行分析。结果表明：平均头次获卵数和优质卵数分别为4.61枚和2.22枚,卵子回收率和优质卵率分别为47.21%和49.13%;试验牛的平均头次获卵数无显著差异,但第1次活体采卵的卵子回收率高于第2～5次（P<0.05）,第2次活体采卵的优质卵率显著高于第5次;采卵月份对平均头次获卵数、回收率和优质卵率无显著影响;采卵次数与采卵月份间无交互作用（P>0.05）。综上,淘汰牛连续活体采卵的效果相对稳定,连续采卵次数对卵子回收率、优质卵率具有一定影响。     

影响水牛活体采卵效果的因素研究

为探讨不同采卵季节、供体牛年龄和连续采卵时间3个因素对水牛活体采卵效果的影响,本实验选择3～12岁、体重400～700 kg的尼里拉菲水牛52头（其中3～7岁40头、8～12岁12头）,根据单因子完全随机试验设计进行分组,分别观察不同采卵季节、供体牛年龄、连续采卵3个月以下（包含3个月）和3～9个月时间对活体采卵效果的影响。结果表明：冬季的头均卵母细胞数、头均可用卵母细胞数均高于春季（P<0.05）和夏季（P<0.01）,且夏季的头均卵母细胞数、头均可用卵母细胞数均低于其他季节（P<0.01）;3～7岁牛的头均可用卵母细胞数比8～12岁牛的多1.78枚（P<0.05）;活体连续采卵时间在3个月以下（包含3个月）的卵母细胞可用率比连续采卵3～9个月的多8.03(P<0.01)。可见,一年四季都可进行水牛活体采卵,但秋、冬季进行活体采卵较为适宜;3～7岁年龄段牛做供体的活体采卵效果更佳;卵母细胞可用率会随着连续采卵时间延长而明显下降,建议同一批牛连续采卵不超3个月。     

影响水牛活体采卵效果的因素分析

水牛活体采卵是继水牛体外受精(IVF)、胚胎移植(ET)等技术之后推出的一项良种胚胎产业化生产的关键技术。本文叙述了水牛活体采卵技术在水牛繁殖中的应用概况,并分析了影响水牛活体采卵回收效果和胚胎生产的各项因素。这套技术可以充分挖掘优良母水牛的繁殖潜力,缩短世代间隔,加速育种进程,同时也能为水牛的胚胎生物工程、基因工程等研究提供大量的试验材料,从而促进水牛科学研究和相关产业的持续发展。     

采卵间隔时间对山羊活体采卵效果的影响

目前从离体卵巢采集卵母细胞是体外受精研究所需卵母细胞的主要来源之一.一般是从屠宰场采集母畜的卵巢,抽取卵巢上的卵母细胞.但我国缺乏良种羊的卵巢资源,故所采卵母细胞种质一般较差,而且其系谱不明.而活体采卵技术(Ovum Pick-up OPU)正是解决当前我国体外受精研究中存在的卵母细胞资源缺乏、系谱不明等问题的有效手段.羊的活体采卵主要有三种方法:常规手术法、B型超声波法和腹腔镜法.腹腔镜法活体采卵(Laparoscopic Ovum Pick-up LOPU)操作相对简便,对羊的伤害较小,可重复采卵;而常规手术法对羊的伤害较大,较难重复采卵; B型超声波法活体采卵技术需要大量的练习才能掌握,可见卵泡数和获卵数较少.因此羊的活体采卵在国外应用最为广泛的方法当属LOPU.Snyder和Dukelow在1974年首先将腹腔镜用于绵羊的活体采卵,获得了6枚卵母细胞,然而当时并没有得到充分的发展,随着胚胎体外生产技术的发展,直到近些年在国外才逐渐得到应用.而在国内,这方面的研究甚少,因此本实验开展了山羊LOPU的探索研究.     

影响羔山羊活体采卵的因素

目前,从离体卵巢采集卵母细胞是体外受精研究所需卵母细胞的主要来源之一,羊的活体采卵技术(laparoscopic ovum pick-up,LOPU)始于1974年,由于当时胚胎体外生产技术滞后,其后的20年里,羊活体采卵技术未得到较好发展[1].但我国缺乏良种羊的卵巢资源,所以所采集的卵母细胞种质一般较差,而且其系谱不明.     

羊活体采卵技术研究进展

随着羊胚胎生物技术的发展,尤其是胚胎体外生产、转基因的研究,科研生产中对卵母细胞的需求越来越大。传统的从屠宰场卵巢获得卵母细胞有许多不足,因此,发展活体采卵技术显得迫切。国内有关羊活体采卵的报道较少,文章介绍了羊活体采卵方法的基础分析影响活体采卵效率的各种因素。     

采卵季节对水牛活体采卵及其体外受精效果的影响

为探讨采卵季节对水牛活体采卵及其体外受精效果的影响,本研究选自2006-2008年78批次的626头牛活体采卵收集3143枚卵母细胞数据和同一操作者的51批次共培养1366枚卵母细胞的体外受精生产胚胎数据,并根据水牛繁殖特点和发情规律,每年分为3个阶段,即春季(1～4月),夏季(5～7月)和秋冬季(8～12)3个季节进行统计分析。结果发现,水牛活体采卵和体外受精效果受季节影响较大。在秋冬季进行活采时,平均头次获卵母细胞总数和可用卵母细胞数分别为(5.88±2.84)枚和(3.56±1.51)枚,平均头次卵母细胞总数明显高于夏季的(3.72±1.58)枚(P<0.01),但与春季的(4.80±1.77)枚差异不显著(P>0.05),而头均可用卵母细胞数则高于春季的(2.77±1.19)枚(P<0.05)和夏季的(2.11±1.11)枚(P<0.01);季节之间卵母细胞可用率没有差异(P>0.05);虽然每个季节活体采卵体外受精卵分裂率没有差异(P>0,05),但在秋冬季采卵时,其囊胚率(27.09%)则明显高于春季(20.95%)和夏季(20.45%),P<0.05,而春季和夏季之间没有差异(P>0.05)。研究表明:一年四季都可以进行水牛活体采卵体外生产胚胎,但从采卵效果和胚胎生产效率上看,在秋冬季进行活体采卵效果最好。     

优势卵泡与促卵泡素对牛活体采卵效果的影响

将8头荷期坦供体奶牛随机分为4组,每组2头,分别按优势卵泡+注射促卵泡素(FSH)、优势卵泡+不注射FSH、去优势卵泡+注射FSH、去优势卵泡+不注射FSH处理供体牛,处理后第4天应用B型超声波导引活体采卵,试验重复10次。结果显示:注射FSH前去优势卵泡对其可采卵泡数、回收卵母细胞数和可用卵母细胞数均有显著提高(P0.05),但不注射FSH时去优势卵泡对提高采卵效率无显著效果;活体采卵对供体牛卵巢虽造成一定损伤,但停止采卵2~3个月后均能恢复正常发情、配种后能正常妊娠,对供体牛繁殖性能无显著影响。     

影响山羊腹腔镜法活体采卵效果的研究

用屠宰厂采集的卵巢作为实验材料,比较了不同型号的采卵针对卵母细胞回收效果的影响,结果9号和12号针的回收率分别为66.78%和62.41%,显著高于7号针的52.63%(P<0.05);可用率分别为63.59%和68.82%,也显著高于7号针的55%(P<0.05)。在活体采卵实验中,比较了不同采卵间隔时间对活体采卵效果及供试羊卵巢损伤情况的影响,结果间隔1周组的每次每只卵泡数(12.08个)、每次每只获卵数(8.75枚),均显著低于间隔2周组(15.58个,11.97枚)和3周组(14.91个、11.42枚)(P<0.05)。间隔1周重复活体采卵对卵巢的损伤较大,卵巢表面有较多的血斑;间隔2周组和3周组卵巢基本能够恢复正常。同时还比较了离体卵巢与LOPU获得的卵子对体外受精效果的影响,二者在卵裂率(85.14%对83.33%)和桑椹胚率(52.38%对45.58%)方面差异不显著(P>0.05),但囊胚率差异显著(P<0.05),分别为30.16%和14.71%。     

山羊活体采卵技术(LOPU)影响因素及应用研究进展

活体采卵(laparoscopic ovum pick-up,LOPU)是继动物体外受精、胚胎移植技术之后应运而生的一项胚胎工程技术,目前在一些畜牧业发达的国家,如日本、加拿大、美国、荷兰均已实现商业化生产.     

奶牛活体采卵-体外受精效率的影响因素研究

为建立稳定高效的活体采卵-体外受精技术体系,提高体外胚胎生产效率,本研究先利用屠宰场采集的新鲜卵巢卵母细胞进行体外受精,通过胚胎发育潜力来筛选最佳的体外胚胎培养液;再进一步研究不同种公牛精液和供卵母牛对活体采卵-体外受精效率的影响。结果显示,CR1aa培养液和mCR1aa培养液卵裂率差异不显著（P>0.05）,但mCR1aa组的囊胚发育率显著提高（28.1% vs 20.6%,P<0.05）;选取的3头荷斯坦种公牛精液的活体采卵-体外受精胚胎的卵裂率差异不显著（P>0.05）,但1号种公牛精液体外受精后囊胚率（38.7%）显著高于2号和3号（23.8%&22.9%）（P<0.05）;随机选择的3头活体采卵供体母牛（H1、H2、H3）获得的头均可用卵母细胞数无显著差异,但H1和H2供体母牛体外受精胚胎的卵裂率和囊胚率均显著高于H3供体牛（P<0.05）,且H1供体牛体外受精囊胚率显著高于H2供体牛（P<0.05）。结果表明,mCR1aa培养液能显著提高体外受精囊胚发育率,适用于体外胚胎生产;种公牛精液和供体母牛个体差异会直接影响活体采卵-体外受精胚胎的生产效率,为奶牛活体采卵-体外受精生产技术体系的优化提供参考。     

雪龙黑牛活体采卵与屠宰采卵在体外受精技术中的应用研究

利用超声波活体采卵技术(ovum pick-up,OPU)对12头纯种雪龙黑牛间隔4d采卵2次,对51头F2代遗传性能优秀的雪龙黑牛每周采卵1次,并对活体采卵与屠宰采卵及体外受精后胚胎的发育进行了对比分析.结果表明,活体采卵第2次卵泡数比第1次多82个,而获得的卵母细胞数第2次比第1次少1 2枚;屠宰采卵优秀卵母细胞率高于活体采卵,并且囊胚发育率高于活体采卵.     

连续活体采卵对水牛卵母质量的影响

本研究旨在探讨连续活体采卵(OPU)对水牛卵母细胞质量的影响,为建立高效的水牛胚胎体外培养体系奠定基础。实验选择4～12岁、体重580～700 kg的92头水牛(摩拉27头、尼里-拉菲30头、杂交水牛35头),每隔3d进行1次OPU,连续5次OPU。供体不用激素处理,收集的卵母细胞分为A、B、C和D级,计算各级卵母细胞百分率、优质卵母细胞百分率、卵母细胞回收率。结果表明:连续5次OPU时,卵母细胞回收率分别为65.91%、48.16%、43.54%、50.77%和47.31%,第1次OPU时卵母细胞回收率显著高于第2～5次,而第2、3、4、5次之间差异不显著;优质卵母细胞(A+B级)在第1～2次OPU的百分率比第3、4、5次效果差(P0.05);C级卵母细胞在第1次OPU时的百分率与第2、3、4、5次差异极显著;尼里-拉菲水牛第1次OPU时,C级卵母细胞百分率显著高于与第2、3、4、5次;第1次OPU时的优质卵母细胞百分率显著低于第2、3、5次;摩拉水牛第1次OPU时,C级卵母细胞百分率显著高于第2～5次,第1次卵母细胞百分率显著高于第2～5次,第1次的优质卵母细胞百分率显著低于第4、5次OPU;杂交水牛第1次OPU时的卵母细胞百分率显著高于第2～5次。综上,杂交水牛的优质卵母细胞百分率比尼里-拉菲和摩拉水牛好,并且效果相对稳定。     

奶牛活体采卵间隔时间对优质卵率的影响

试验通过对卵泡波发育时程的监测,以及比较间隔不同的采卵时间获得的卵母细胞-颗粒细胞复合物(COCs)质量,并通过孤雌激活的方式验证卵母细胞的质量,从而确定最佳间隔采卵的时间。利用超声波活体穿刺的方法分别对间隔5天、7天和10天的母牛进行采卵,在体外对COCs进行成熟培养后,有极体排放的卵母细胞进行孤雌激活观察胚胎发育情况发现:间隔7天采卵获得28%的桑椹囊胚发育率,间隔5天采卵获得12%的桑椹囊胚发育率,间隔10天获得16%的桑椹囊胚发育率。卵裂率没有显著性差异。因此证实活体穿刺采卵间隔7天是最合适的一个时间,可获得一定数量的优质卵母细胞。