藏绵羊肌肉抑制素C-端重组蛋白抑制肌肉生长功能的研究

本试验旨在检测注射藏绵羊肌肉抑制素C-端重组蛋白后对小鼠的影响,研究肌肉抑制素的作用,为今后生产实践提供参考。本试验对50只小白鼠(雌、雄鼠各25只)进行分组,随机将雌雄鼠分为2组,其中对照组注射生理盐水,试验组注射肌肉抑制素蛋白,每隔1 d称重,试验期共3个月。试验期结束后,处死小鼠,并取小腿肌肉样本,利用石蜡切片法和浸渍离析法,测定小鼠肌纤维直径。试验结果表明,藏绵羊肌肉抑制素C-端重组蛋白对小鼠肌肉生长早期(37~45日龄)具有抑制作用。当小鼠体内对藏绵羊肌肉抑制素C-端重组蛋白产生抗体后,对小鼠肌肉生长的抑制作用逐渐减弱。藏绵羊肌肉抑制素C-端重组蛋白可使小鼠腿肌肌纤维横切面积增加、腿肌肌纤维直径增加。     

肌肉生长抑制素研究进展

肌肉生长抑制素是一种分泌型的多肽。小鼠中该基因的缺失可导致骨骼肌的明显增大,而且在双肌牛中该基因的缺失产生了突变,这表明肌肉生长抑制素可能是骨骼肌生长的负调控因子。本文综述了肌肉生长抑制素的基因结构及其分子作用机制,并就它对动物体成分的影响、应用及尚存在的问题作了概述。     

肌肉生长抑制素的研究进展

肌肉生长抑制素(简称肌抑素)属TGF-β超家族,是骨骼肌生长的负调控因子,参与肌纤维增生和肥大的调控。本文综述了肌肉生长抑制素蛋白的结构、活性调控、信号转导途径以及肌抑素基因的表达和生物学作用。     

绵羊肌肉抑制素C-端的表达、纯化及多克隆抗体的制备

为深入了解绵羊myostatin基因的表达及调控机理,进行了绵羊myostatin蛋白多克隆抗体的制备.首先将绵羊myostatin基因C-端克隆人含组氨酸标签的表达载体pET-30a-c(+)中,转化大肠杆菌BL21后IPTG诱导表达,然后利用Ni2+亲和层析纯化重组蛋白,薄层扫描及Bradford法分别检测纯化后蛋白的纯度与含量.应用重组蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,利用间接ELISA法检测多克隆抗体效价,用Western blot及免疫细胞化学染色检测抗体特异性.结果,薄层扫描分析纯化后蛋白纯度可达95%以上,Bradford法检测蛋白浓度约5 mg·mL-1,制备的抗血清效价可达1:250 000以上,Western blot检测证明抗体特异性良好,免疫细胞化学染色表明抗血清可检测剑肌肉细胞中内源性myostatin的表达,说明所制备的多克隆抗体可以应用于进一步研究,有助于阐明绵羊myostatin的表达及调控机理.     

牛肌肉生成抑制素基因原核表达及其功能的初步研究

根据GenBank上发表的牛肌生成抑制素（MSTN）基因编码序列设计引物，扩增牛的MSTN基因．将其与pET32a（＋）质粒连接，构建pET—MSTN重组质粒，重组菌经IPTG诱导后在大肠杆菌中表达，表达的重组蛋白分子量大小约为60．4ku，表达蛋白经纯化、复性后接种小鼠，结果复性高剂量组小鼠体重的增长与其他各试验组及对照组之间差异显著，而其他各试验组与对照组之间体重增加差异不显著。     

肌肉生长抑制素对动物肌肉、脂肪和骨骼的影响

肌肉生长抑制素是转化生长因子 β超家族成员之一,具有众多的生理功能。近来的研究表明,肌肉生长抑制素除对肌肉生长有负调控作用外,还对脂肪的沉积和骨骼的生长发育具有调节作用,甚至还能影响肌腱和韧带的强硬度。本文主要从肌肉生长抑制素的结构、基因表达及其对动物肌肉、脂肪和骨骼的作用等方面进行综述。     

肌肉生长抑制素调控肌肉和脂肪组织代谢的研究进展

肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN),又名生长分化因子-8(growth differentiation factor 8,GDF-8),是一种主要由骨骼肌分泌的蛋白质,在肌肉生长发育过程中起负调控作用。若MSTN基因编码区碱基突变或缺失,可以导致肌肉异常肥大,出现典型的"双肌"性状。近年来研究还发现,MSTN在脂肪组织中也表达,并在脂肪沉积的过程中发挥重要调控作用。因此,本文将从MSTN的基因结构、组织分布、作用机制以及功能等几个方面的相关研究进展进行综述,重点阐述其在肌肉和脂肪组织中的调控作用及机制,以期更深入了解MSTN,为畜牧业新品种的改良和肉质性状的改善奠定理论基础。     

重组牦牛肌肉生长抑制素成熟肽的纯化及其免疫原性研究

为了探索牦牛MSTN的作用机制,寻找合适的阻断MSTN活性的方法,最终实现牦牛的高效率育肥,本研究采用RT-PCR方法克隆牦牛MSTN成熟肽基因,构建MSTN-pET28a(+)重组表达载体,进而在E.coliBL21(DE3)宿主菌中进行表达,将表达产物用亲和层析纯化,最后用ELISA方法检测牦牛MSTN重组成熟肽的免疫原性。重组载体中连接的牦牛MSTN成熟肽基因包含330bp,编码109个氨基酸。含MSTN-pET28a(+)重组载体的工程菌经0.1mmol.L-1 IPTG诱导表达6h后,MSTN成熟肽的表达量约占蛋白总量的21%,总蛋白经亲和层析纯化后得到了高纯度的牦牛MSTN重组成熟肽,分子量约16.5ku;ELISA结果显示,兔抗牦牛MSTN重组成熟肽的血清效价为32 000个抗体单位,表明牦牛MSTN重组成熟肽具有较好的免疫原性。本研究建立了牦牛MSTN重组成熟肽高效表达系统并纯化获得具有免疫原性的牦牛重组MSTN成熟肽,这为通过调控MSTN功能来改良牦牛产肉性能的研究储备了技术条件。     

肌肉生长抑制素的研究进展及应用现状

肌肉生长抑制素基因是限制肌肉超常发育的负调控基因,缺失或突变会导致双肌现象的产生。本文重点探讨了肌肉生长抑制素的分子作用机理,论述了该基因的发现、遗传效应、同源性、组织特异性、定位和结构等方面的研究现状及临床应用。     

腹腔注射GnIH对雄性小鼠采食、体重和血糖稳态的影响

目的 探究促性腺激素抑制激素（gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH）对雄性小鼠采食、体重和血糖稳态的影响。方法 选取体重及日龄相近的雄性小鼠20只,随机分为2组,分别为对照组[腹腔注射生理盐水100 μL/（次·只）]和试验组[腹腔注射20 μg/100 μL GnIH,100 μL/（次·只）],每组10只,每天注射2次,连续注射21 d。观察和记录小鼠的采食情况;对小鼠的体重、空腹血糖、葡萄糖耐量、胰岛素耐量进行测定;利用实时荧光定量PCR（qPCR）方法对小鼠胰腺中胰岛素转录因子基因（NeuroD1）、胰岛素基因（Ins）、胰高血糖素基因（Gcg）、胰岛素转录调控因子基因（Pdx1）mRNA相对表达量进行检测。结果 与对照组相比,试验组小鼠平均日增重和平均日采食量极显著（P<0.01）升高;试验组小鼠空腹血糖曲线下面积极显著（P<0.01）增加,葡萄糖耐量的血糖曲线下面积极显著（P<0.01）增加,胰岛素耐量的血糖曲线下面积极显著（P<0.01）增加;试验组小鼠胰腺Gcg基因mRNA相对表达量显著（P<0.05）升高,Ins基因mRNA、Pdx1基因mRNA和NeuroD1基因mRNA相对表达量均显著（P<0.05）下降。结论 慢性腹腔注射GnIH会引起雄性小鼠采食量和体重增加,并引起机体血糖紊乱。     

猪肌生成抑制素成熟蛋白编码序列真核表达载体的构建

从猪肌生成抑制素(MSTN)cDNA序列中设计引物。以pMD18-T-MSTN质粒为模板，PCR扩增猪MSTN成熟蛋白编码序列，该片段全长1095bp。将所得片段与pMD18-T载体连接，构建重组质粒pMT—mpMSTN，将其转化到大肠杆菌DH5a中，成功地筛选到阳性克隆。双酶切重组质粒pMT—mpMSTN和真核表达载体pcDNA3．1，连接目的片段与载体pcDNA3．1，转化大肠杆菌DH5a，经酶切、PCR及测序分析，表明成功地构建了真核表达质粒pcDNA3．1-mpMSTN。     

Myostatin在地塞米松致肌原纤维损伤中的作用研究

为阐明Myostatin在肌原纤维损伤中的作用,并探讨提高畜禽肉产(质)量或控制人类肌肉萎缩的方法,本试验以小鼠为模式动物,采用高剂量地塞米松构建了严重应激模型,研究生理剂量胰岛素对地塞米松致肌原纤维损伤的影响及其与Myostatin基因表达的关系,以及Myostatin基因免疫对地塞米松致肌原纤维损伤的干预作用.结果表明:地塞米松诱导Myostatin基因表达上调及严重的肌原纤维损伤和线粒体肿胀,而胰岛素注射明显减弱了这些效应;Myostatin基因免疫明显抑制了地塞米松对肌原纤维和线粒体的损伤作用.试验结果提示,Myostatin是参与肌原纤维降解的一个关键因子,该作用可能与其刺激了线粒体的功能有关.     

凋亡抑制基因免疫对小鼠生长的影响

小鼠经凋亡抑制基因免疫后，从3周龄到8周龄基因免疫组小鼠平均体重比对照组分别低0．48、1．18、1．16、1．35、0．99、0．85g。基因免疫后的头2周，小鼠生长速度明显低于对照组，且生长速度的差异随着免疫时间的增加而减小。这提示该基因与小鼠生长有关，如果用基因治疗方法增加凋亡抑制基因表达量，有可能增加小鼠生长速度。将凋亡抑制基因作为候选基因，研究它对家畜生长的遗传效应，对家畜繁育有重要的意义。     

代乳粉对早期断奶犊牛体重和体尺的影响

试验选取体重相近的荷斯坦奶牛犊牛24头,分为试验组和对照组2组,每组12头。试验组犊牛出生5 d内饲喂初乳,之后饲喂代乳粉至42日龄断奶;对照组一直饲喂牛奶至42日龄。结果表明,试验组平均日增重836 g,对照组平均日增重679 g,试验组比对照组日增重提高23.12%;试验期间,试验组胸围、体高、体长分别比对照组提高2.90、1.01、1.56 cm,差异不显著;试验组与对照组的管围无明显差异。说明代乳粉代替牛乳可以达到良好的生产效果。     

不同日龄皖南黑猪体重及体尺变化的研究

对皖南黑猪初生、20、30、60和90日龄的体重和体尺进行测定。统计分析结果表明,皖南黑猪的平均日增重随着日龄的增长而提高,30日龄时头长指标与体重呈显著相关,相关系数为0.852,20、30日龄时胸围指标与体重呈极显著相关,相关系数分别为0.896和0.903,以上指标可以考虑作为留种的依据。     

苏尼特羊体重与体尺的相关性分析

[目的]分析内蒙古自治区锡林郭勒盟地方特色肉羊品种苏尼特羊体重与体尺指标的关联程度。[方法]随机选取5~6月龄发育及健康状况良好的苏尼特羊公羊247只、母羊260只,对羊只的体重（Y）、尾长（X₁）、尾宽（X₂）、体高（X₃）、体长（X₄）、胸围（X₅）进行生产性能测定,数据整理后使用SPSS 26.0统计学软件对体重与体尺指标进行相关性分析和多元线性回归分析,最终建立最优回归模型。[结果]影响苏尼特羊公羊和母羊体重的主要体尺指标为尾宽、体高、体长和胸围,且与体重均呈极显著（P<0.01）相关;逐步回归分析建立了多元线性回归模型,公羊的最优线性方程为：Y=0.57X₅+0.325X₄+0.241X₂-35.795,R²=0.834;母羊的最优线性方程为：Y=0.577X₅+0.246X₄+0.205X₂-31.94,R²=0.799。[结论]回归方程中胸围、体长、尾宽与体重相关性均较高,皆可作为苏尼特羊的体重预测模型。     

美系杜洛克种猪体尺、体重测定与体型评定研究

统计分析了2001年引进的新美系杜洛克种猪及繁殖后代在6月龄、12月龄、24月龄和36月龄四个阶段的体尺、体重数据，结合品种特征、体型外貌总结研究出杜洛克种猪的百分制评分及等级标准。     

欧拉型藏羊体重与体尺指标的回归分析

笔者采用逐步回归的方法对随机抽测的青海省河南县40只欧拉型藏羊成年公羊和104只成年母羊的体重和8个主要体尺指标进行回归分析,得到欧拉型藏羊成年公羊体重和主要体尺指标的最优回归方程为y=0.88x₂+13.64x₆-4.35x₇+1.28x₄-114.51(P<0.01);成年母羊体尺与体重的最优回归方程为y=0.49x₁+0.46x₂+0.30x₃+0.43x₄-43.51(P<0.01)。明确了欧拉型藏羊成年公羊和成年母羊体重与体尺指标的关系,为今后选育工作提供参考。