真姬菇遗传多样性研究方法初探

收集国内部分真姬菇菌株于实验室进行菌株复壮,并采用多种提取方法提取其基因组。以获得的基因组DNA为模板,摸索PCR反应体系。获得PCR最佳反应体系后,开展适宜ISSR和SRAP遗传多样性分析的引物筛选。筛选得到18条适用于扩增真姬菇菌株的ISSR引物,以及适用于分析真姬菇SRAP的前端引物和后端引物配对组合。     

2个不同来源真姬菇子实体同源性的分子鉴定

为了研究2个真姬菇子实体的同源性,应用ERIC—PCR图谱分析和ITS序列分析对其进行了详细的研究。ERIC—PCR结果显示2个真姬菇存在条带多样性差异,应为不同品种或不同菌株（品系）;ITS序列测定结果显示2个真姬菇样品仅存在3个碱基差异,属于同一品种。2种分子方法结合分析表明,这两个真姬菇子实体来自同一个品种的不同亚种或不同菌株（品系）,拥有独立知识产权。     

RAPD和SRAP分子标记在真姬菇菌种鉴定中的应用

利用RAPD及SRAP分子标记技术对从国内外收集到的12个真姬菇菌株进行遗传多样性分析.结果表明,20条RAPD引物共扩增出多态性条带285条,18对SRAP引物共扩增出多态性条带176条.在相似系数0.800水平时,RAPD和SRAP分子标记分别将12个真姬菇菌株分为5个和6个类群.两种方法均适用于真姬菇种内鉴定,而SRAP标记较RAPD标记稳定性好,更适于真姬菇的种内鉴定.     

真姬菇交配型研究

显微镜下观察发现真姬菇子实体的每个担子上着生四个担孢子;从分离获得的78个有性孢子单核体之间的交配结果分析,真姬菇属于四极性担子菌;X^2测验结果显示,供试真姬菇菌株的四种交配型孢子单核体的比例符合1：1：1：1的分离规律;研究中还发现真姬菇的A因子和B因子内部发生重组,产生了新的A和B因子,其重组率皆为1．3％。     

真姬菇杂交新菌株515的抗逆性分析

通过测定不同营养限制条件下真姬菇(Hypsizygus marmoreus)两个品种白玉菇、灰蟹菇及其单核菌株杂交选育的新菌株515的菌丝生长速度及观察形态特征,明确杂交菌株515的抗逆性。结果表明,灰蟹菇对各种营养胁迫具有较好的抗逆性。新菌株515对低氮条件适应性较差,高无机盐抑制了其菌丝的生长;低氮加吐温后,其菌丝生长速度明显高于灰蟹菇,菌丝形态洁白浓密、边缘整齐,提高了菌株515对氮源胁迫的抗性;但在低碳条件下其菌丝生长速度较快,与菌株灰蟹菇相比有显著差异,与菌株白玉菇相比无显著差异,说明菌株515对碳源胁迫抵抗力较强。针对真姬菇栽培原料以碳源为主,说明该菌株具有良好的生产应用价值。     

真姬菇杂交菌株H11的选育

以2632号真姬菇和3132号真姬菇为亲本，在测定交配型后，通过单孢杂交，以菌丝生长速度、生长势、单瓶产量、相对生物转化率、农艺性状为指标，从16个杂交菌株（组合）中筛选出的H11号菌株（组合），优质高产，而且适合工厂化栽培。     

侧耳属种间杂交选育白色高产菌株

以白黄侧耳(Pleurotus cornucopiae)菌株姬菇258和糙皮侧耳(P.ostreatus)菌株青平1号为亲本,单孢杂交,选育出两株白色优质高产姬菇新菌株28号和41号菌株。28号和41号菌株的出菇单产较生产上主栽菌株西德33(对照)增产19.2%和19.1%;28号和41号菌株商品菇比例(88.6%和85.6%)高于对照西德33(71.8%),即菇体商品性优于对照;综合体现出了亲本菌株姬菇258的优质丰产性和亲本青平1号的白色菌盖菇体特征。拮抗试验和ISSR标记试验表明,28号和41号菌株与亲本具有遗传差异,即为不同于亲本的新菌株。研究认为,28号和41号菌株具有"姬菇"的典型商品性特征,是2株优质高产的白色姬菇新菌株,可做进一步的中间试验和示范栽培。     

两株真姬菇菌株培养料配方试验

分别以杨木、白枫、松木、檫木、株木、泡桐木屑为主料,米糠和麸皮为辅料配制培养料,以大试管为培养容器培养不同真姬菇菌丝.考察菌丝生长速度、菌丝形态和产量等农艺性状为指标,研究不同配方对真姬菇菌丝生长情况的影响.结果表明,配方1菌株101菌丝生长速度最快,配方2菌株201菌丝生长速度最快,且菌丝浓密洁白.同样配方1 101...     

12个真姬菇菌株拮抗试验及部分同工酶分析

测定了真姬菇的12个不同菌株间的拮抗性及部分同工酶，结果表明：12个菌株Rf值为0.8时可分为5大类；菌株编号为3、4、5号菌株亲缘关系最近。聚类分析结果与拮抗试验结果基本一致。     

液体菌种栽培真姬菇的后熟期对子实体农艺性状的影响

应用液体菌种于工厂化瓶栽真姬菇(Hypsizygus marmoreus)工艺中,考察了不同后熟期处理对真姬菇生产周期及子实体农艺性状的影响。结果表明,采用液体菌种栽培真姬菇可以缩短真姬菇的生产周期,后熟期23 d的处理组比对照组固体菌种栽培真姬菇的生产周期缩短了10 d;后熟期37 d的处理组的真姬菇生物转化率可达131.6%,比对照组固体菌种栽培真姬菇的生物转化率增加43.9%。     

真姬菇融合菌株生物学特性及生产性能的研究

运用原生质体融合与漆酶转化体系筛选到一株真姬菇融合菌株(金山1号),研究了不同培养基配方、温度、pH及含水量对该菌株菌丝生长的影响,并对该菌株的漆酶活性、生产特性进行了初步分析。结果表明,金山1号在PDA胡萝卜培养基上菌丝生长最快、活力较强,菌丝最适生长温度为25℃,最适pH为6.5,最适含水量60%～65%,漆酶活力为3.95 U·mL-1,生产周期可缩短3 d～5 d,生物学效率72.86%,与真姬菇相比提高了17.15%,表现出该融合菌株具有良好的生产应用价值。     

不同培养基配方对真姬菇母种培养效果的影响

以真姬菇子实体为试材,采用组织分离法,研究了5种不同培养基配方对真姬菇母种的培养效果。结果表明:玉米粉PDA培养基效果最好,培养温度25℃可行,液态培养速度虽快,但易老化或污染,固态培养较易控制。     

斑玉蕈甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因克隆与序列分析

甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)是糖酵解和卡尔文循环中的关键酶,本实验室之前的研究发现斑玉蕈菌丝的GAPDH表达随培养基中葡萄糖添加浓度的变化而变化,在此基础上我们首次克隆了斑玉蕈GAPDH的DNA和cDNA序列,结果斑玉蕈gpd基因长2 724 bp,对比基因组DNA和cDNA序列知其中有7个内含子、8个外显子;其理论分子量为36.15 kD、编码蛋白质含338个氨基酸、等电点(PI)为8.24。     

谷秆两用稻草粉替代麦麸栽培珍稀食用菌

为了解决食用菌生产中的“菌牧”矛盾，更好地发展食用菌业和畜牧业．我们利用谷秆两用稻草粉替代麦麸作培养料，栽培珍稀食用菌秀珍菇、金福菇、茶薪菇、真姬菇等。结果表明：用谷秆两用水稻“201”优质稻草粉50％代替栽培料中的麦麸栽培秀珍菇、金福菇、茶薪菇，生物效率分别提高了5．84％(差异不显著)、7．98％(差异不显著)和25．16％(差异极显著)；100％代替麦麸栽培真姬菇(占培养料总量的20％)生物效率减少3．68％(差异不显著)。同时降低栽培袋的污染率，降低培养料成本，节省了大量麦麸用作饲料粮，提高了经济效益和社会效益。     

真姬菇“闽真2号”培养料的配方筛选

在真姬菇工厂化生产常用配方的基础上,利用玉米芯、甘蔗渣、酒糟,设计5个不同配方代替部分棉籽壳栽培真姬菇,比较菌丝生长、产量及经济效益的结果:以配方3(杂木屑18%,棉籽壳38%,麸皮17%,玉米粉5%,玉米芯10%,甘蔗渣10%,石灰2%)和配方4(杂木屑18%,棉籽壳30%,麸皮17%,玉米粉5%,甘蔗渣20%,酒糟8%,石灰2%)表现较好,单袋产量分别为524g和486g,成本低,经济效益好。     

真姬菇闽真2号工厂化栽培优势配方筛选

闽真2号为福建省认定的真姬菇新品种,在工厂化生产条件下,根据该品种营养特性需求,采用棉籽壳、巨菌草粉、杂木屑、麦麸、玉米粉等原料作为培养基,设定一定梯级配方,用草粉替代部分棉籽壳和麦麸,筛选闽真2号优势生产配方,使白真姬菇产量、质量与对照配方相比具有明显优势。     

不同营养条件对海鲜菇菌丝生长量的影响

以菌落直径为指标,采用平板培养法培养海鲜菇,研究了5种碳源和5种氮源对海鲜菇菌丝生长的影响。结果表明:不同碳氮源对菌丝的生长速度和生长势有显著影响,表明该菌株同化不同碳氮源的能力有较大差异;海鲜菇菌丝生长的最适碳源是麦芽糖,果糖和蔗糖次之,葡萄糖和乳糖最差;最适氮源是酵母粉,牛肉膏和蛋白胨次之,(NH4)2SO4和NH4NO3最差。     

蟹味菇原生质体高压电晕电场诱变的初步研究

以蟹味菇菌丝体为试验材料制备原生质体,并对其进行高压电晕电场诱变处理,以期从中筛选出优质突变菌株.结果显示,经4 kV诱变14 min、6 kV诱变5 min、6 kV诱变8 min、6 kV诱变10 min、8 kV 4 min诱变处理均可获得再生菌落,致死率在69.39％～95.92％,处理条件为4 kV 14mi...     

真姬菇菇脚和菌糠氨基酸含量测定及营养评价

测定了真姬菇菇脚和菌糠中蛋白质和氨基酸的含量,应用模糊识别法和氨基酸比值系数法,以鸡蛋蛋白为标准蛋白,以WHO/FAO的必须氨基酸参考模式为评价标准,对真姬菇菇脚和菌糠的蛋白质营养价值进行了全面评价,并与真姬菇子实体的蛋白质进行比较.结果表明:真姬菇菇脚和菌糠蛋白质中总氨基酸含量为71.50％和65.92％,氨基酸种类齐全,必需氨基酸占总氨基酸量的40.16％和38.65％,相对于鸡蛋蛋白(标准蛋白)的贴近度为0.8360和0.7520,第一限制性氨基酸均为蛋氨酸+胱氨酸,氨基酸比值系数分为76.77和70.13,虽然菇脚和菌糠的蛋白质含量比均子实体低,但与子实体一样具有较高的蛋白质营养价值.