体外无血清培养牛垂体细胞分泌催乳素的调节—性腺激素的作用

本实验对牛垂体混合细胞进行24小时体外无血清培养,对其分泌催乳素的功能进行了观察,并分别在培养介质中加入0、1、10、100ng/ml的孕酮、脱氢表雄酮、雄烯二酮、雌二醇和睾酮,用放射免疫测定法测定培养液介质中催乳素含量,以研究这些性腺激素和中间产物对垂体细胞分泌催乳素的影响。结果表明:孕酮对离体牛垂体细胞无血清培养条件下分泌催乳素的功能没有影响。而脱氢表雄酮、雄烯二酮、睾酮和雌激素均引起催乳素分泌量显著升高,说明这些性腺类固醇激素对牛垂体细胞离体培养分泌催乳素具有促进作用,可能是垂体前叶催乳素分泌调节的重要组成部分。     

GnRH脉冲对体外原代培养大鼠GTH细胞中 LHβ mRNA表达水平的影响

研究不同脉冲频率GnRH对GTH细胞分泌LH的影响。利用细胞体外培养技术结合荧光定量PCR技术,对体外培养的大鼠原代垂体细胞在不同脉冲频率GnRH刺激下,细胞LHβ mRNA的变化进行了研究。在相同振幅条件下,高频刺激(30 min间隔)时,LHβ mRNA表达水平达到高峰。结果表明,高频脉冲主要引起LH的表达,支持了GnRH脉冲频率本身就是一个调控信号的假说。     

LRH—A3,hCG和PMSG对体外培养条件下牦牛垂体组织LH和FSH分泌的调节

促卵泡素３号（ＬＲＨ－Ａ３）、人绒毛膜促性腺激素（ｈＣＧ）和孕马血清促性腺激素（ＰＭＳＧ）等３种外源性激素均可增加体外培养条件下牦牛垂体组织分泌ＬＨ和ＦＳＨ的能力。培养液中ＬＨ和ＦＳＨ含量与加入的ＬＲＨ－Ａ３量呈正相关，与加入的ＰＭＳＧ和ｈＣ的量无显著关系。     

初情期前母猪垂体细胞LH和FSH的释放及其对GnRH类似物的反应

利用垂体细胞单层培养模型研究了30，60，90，120和150日龄北京黑猪母猪垂体细胞LH和FSH的释放及其对LRH－A3反应能力。结果表明，猪垂体细胞LH和FSH释放对LRH－A3的反应呈S形剂量依赖型同线。LH基础释放量和LRH－A3刺激的最大释放量在不同日龄间没有显著差异，说明初情期前母猪垂体细胞已达最大LH释放和对GnRH反应的能力。FSH的基础释放量和LRH－A3刺激的最在释放量在30日龄与60日龄之间无差异，但90日龄以后垂体细胞FSH的释施量随日龄增大而降低，提出可能由于垂体在体内时受过抑制素的作用。     

褪黑素对体外培养绵羊垂体细胞分泌FSH和LH的影响

本文采用体外细胞培养和放射免疫测定法(RIA)的方法,研究了褪黑素(MLT)对季节性繁殖的蒙古母羊垂体细胞分泌促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)的作用.结果表明当单独用递增的MLT(10、100、1000、2000 pg/mL)处理原代垂体细胞时,随时间的延长FSH的分泌量极显著下降(P<0.01),但对LH的基础分泌没有影响;无论用10IU/mLhCG单独刺激,还是用不同剂量MLT与10IU/mLhCG共同刺激垂体细胞,FSH和LH的分泌都极显著高于对照组(P<0.01),但与MLT的剂量没有关系.     

褪黑素对体外培养绵羊垂体细胞分泌FSH和LH的影响

本文采用体外细胞培养和放射免疫测定法(RIA)的方法,研究了褪黑素(MLT)对季节性繁殖的蒙古母羊垂体细胞分泌促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)的作用。结果表明:当单独用递增的MLT(10、100、1000、2000pg/mL)处理原代垂体细胞时,随时间的延长FSH的分泌量极显著下降(P<0.01),但对LH的基础分泌没有影响;无论用10IU/mLhCG单独刺激,还是用不同剂量MLT与10IU/mLhCG共同刺激垂体细胞,FSH和LH的分泌都极显著高于对照组(P<0.01),但与MLT的剂量没有关系。     

五龙鹅GnRH、PRL和FSHβ因多态性与产蛋性状相关研究

本试验对五龙鹅促性腺激素释放激素(GnRH)、催乳素(PRL)和促卵泡激素β亚基(FSHβ)基因进行多态性检测,并分析其与产蛋性状的关系.选产蛋高峰期五龙鹅100只,采取个体圈养方式饲养,记录个体产蛋量.结果显示,FSHβ外显子3存在1个SNP位点产生3种基因型AA、AB、BB,产蛋量呈现AA型＞AB型＞BB型趋势;PRL内含子2上存在1个SNP位点产生3种基因型CC、CD、DD.CC型、CD型、DD型的开产日龄、开产蛋重、平均蛋重之间差异不显著(P＞0.05),CD型、DD型的产蛋总量显著高于CC型(P＜0.05);GnRH基因5′端调控区存在1个SNP位点产生2种基因型EE、EF型,EF型的开产日龄、开产蛋重、平均蛋重都要高于EE型,但是二者之间差异不显著(P＞0.05),EE型的产蛋总量显著高于EF型(P＜0.05).     

五龙鹅GnRH、PRL和FSHβ基因多态性与产蛋性状相关研究

本试验对五龙鹅促性腺激素释放激素(GnRH)、催乳素(PRL)和促卵泡激素β亚基(FSHβ)基因进行多态性检测,并分析其与产蛋性状的关系。选产蛋高峰期五龙鹅100只,采取个体圈养方式饲养,记录个体产蛋量。结果显示,FSHβ外显子3存在1个SNP位点产生3种基因型AA、AB、BB,产蛋量呈现AA型>AB型>BB型趋势;PRL内含子2上存在1个SNP位点产生3种基因型CC、CD、DD。CC型、CD型、DD型的开产日龄、开产蛋重、平均蛋重之间差异不显著(P>0.05),CD型、DD型的产蛋总量显著高于CC型(P<0.05);GnRH基因5′端调控区存在1个SNP位点产生2种基因型EE、EF型,EF型的开产日龄、开产蛋重、平均蛋重都要高于EE型,但是二者之间差异不显著(P>0.05),EE型的产蛋总量显著高于EF型(P<0.05)。     

LRH─A3、hCG和PMSG对体外培养条件下牦牛垂体组织LH和FSH分泌的调节

促卵泡素３号（ＬＲＨ－Ａ３）、人绒毛膜促性腺激素（ｈＣＧ）和孕马血清促性腺激素（ＰＭＳＧ）等３种外源性激素均可增加体外培养条件下牦牛垂体组织分泌ＬＨ和ＦＳＨ的能力。培养液中ＬＨ和ＦＳＨ含量与加入的ＬＲＨ－Ａ３量呈正相关，与加入的ＰＭＳＧ和ｈＣＧ的量无显著关系     

妊娠期山羊腺垂体中催乳素促卵泡素和促黄体素的分布特点

为了阐明妊娠期垂体中催乳素(PRL)、促卵泡素(FSH),促黄体素(LH)的分布和三者之间协调关系.本试验采用免疫组化SP法检测了PRL、FSH,LH三种激素在妊娠各期山羊的腺垂体细胞中免疫反应产物的分布特点.结果显示,在山羊妊娠过程中,腺垂体中PRL阳性细胞多存在于远侧部,数量逐渐增多,胞质呈强阳性;FSH和LH阳性细胞分布在远侧部和结节部,FSH胞质内颗粒着色深浅不一,LH多核膜着色;相对表达量都逐渐升高,而升高程度不同,表现为妊娠后期LH表达量急剧升高,FSH则变化较小,除了FSH的相对表达量在妊娠前期和中期之间无显著差异(P>0.05)外,3种激素的相对表达量在妊娠前期、中期和后期3个时期之间都存在显著差异(P<0.05),妊娠前、中期FSH的相对表达量均高于PRL和LH,妊娠后期LH的表达量最高.FSH次之,PRL最低.提示PRL,FSH和LH三种激素相互协同以促进胚胎着床并维持妊娠,而且在妊娠早期PRL起主要作用,之后协同FSH和LH维持妊娠.     

Effects of GnRH treatment on initiation of pulses of LH,LH release,and subsequent concentrations of progesterone

Progesterone is essential for establishment and maintenance of pregnancy. One proposed method to increase progesterone is administering GnRH at insemination. However, this method has resulted in conflicting results. Therefore, 2 experiments were conducted to evaluate how administering GnRH at insemination affected pulses of luteinizing hormone (LH) and subsequent progesterone. In Experiment 1, cows were allotted to 2 treatments: (1) GnRH (100 μg) given approximately 12 h after initiation of estrus (n = 5); and (2) Control (n = 5). Blood samples were collected at 15-min intervals for 6 h at 12 (blood sampling period 1), 26 (blood sampling period 2), 40 (blood sampling period 3), 54 (blood sampling period 4), and 68 (blood sampling period 5) h after onset of estrus. Daily blood samples were collected for 17 d. In Experiment 2, cows were allotted into 2 treatments: GnRH administered 10 to 11 h (n = 10) or 14 to 15 h (n = 10) after onset of estrus. Daily blood samples were collected for 17 d. Cows treated with GnRH tended (P ≤ 0.075) to have greater LH release during blood sampling period 1, tended (P = 0.095) to have fewer pulses during blood sampling period 2, tended (P = 0.067) to have greater concentrations of progesterone, and had an earlier (P = 0.05) increase in progesterone than control cows. Cows treated with GnRH 10 to 11 h after onset of estrus had greater (P = 0.01) progesterone and an earlier (P = 0.04) increase in progesterone than cows treated 14 to 15 h. In conclusion, timing of GnRH treatment following onset of estrus influenced pulses of LH and subsequent progesterone.     

催乳素调节绵羊睾丸间质细胞睾酮分泌机制的研究

本实验利用睾丸间质细胞体外培养方法，研究了催乳素（ＰＲＳ）对睾酮分泌调节的机制。结果表明，体外培养的绵羊睾丸间质细胞对激素的刺激在培养的前四天较敏感。ｈＣＧ依剂量关系刺激睾酮的分泌。ＰＲＬ对ｈＣＧ的刺激作用起着双相调节作用：低剂量的ＰＲＬ（１￣３０ｎｇ／ｍｌ）可以增加ｈＣＧ的刺激强度３５￣７１％，而高剂量的ＰＲＬ（１０００ｎｇ／ｍｌ）则抑制ｈＣＧ的活性４０％。当培养液中加入不同剂量的睾酮合成前体物     

山羊垂体门脉和颈静脉血样同时收集法的建立

本文描述了一种实用的山羊垂体门脉和颈静脉血样同时收集法。试验中应用该法收集了１９例山羊垂体门脉和颈静脉血样，并对其中７例血样分别进行血浆ＧｎＲＨ和ＬＨ水平的检测，然后根据两种血样红细胞压积比值曲线校正ＧｎＲＨ测值。结果表明，手术后颈静脉血浆的ＬＨ平均水平与手术前差异不显著（Ｐ＞０．０５）；两种血浆样品的激素测值分别反映了ＧｎＲＨ和ＬＨ的水平及其相应关系。因而认为，本试验所建立的采样法既能收集山羊垂体门脉血样，又能保持垂体的正常内分泌功能，对于内分泌学的研究有重要的应用价值。     

公绵羊血清催乳素、促黄体素和睾酮含量在配种季节的变化及外源催乳素对其含量的影响

对8头种公羊在整个秋季配种季节中血清催乳素含量的变化及与睾酮和促黄体素(LH)水平之间的关系进行了研究。结果表明公羊催乳素水平并不是象文献报道的在秋季配种季节开始前下降,而是在配种季节开始有一个高峰(从104ng到150ng/ml)。该峰持续一个月才开始下降。在催乳素峰同时睾酮水平也呈现峰值,而此时血清中LH则无变化。在配种季节的第一个配种期(8月,实验场地规定)和非交配期(9月)分别给公绵羊注射催乳素(1.5mg/头)。连续采血测定血清中各激素水平的结果表明在这两段时间注射催乳素2小时后血清中睾酮水平总含量和总平均值显著地高于对照组(第一个配种期时分别为:17.79±2.54对3.85±0.61,P<0.01和2.20±0.66对0.48±0.09,P<0.001;非交配期分别为4.88±1.06对1.13±0.24,P<0.05和1.22±0.31对0.28±0.04,P<0.025),而且此时睾酮水平与LH水平无关,因为此时血清中LH水平无明显变化。从上述结果看出催乳素在体内的骤然增加可以促使公绵羊血清中睾酮水平升高,而且睾酮的这种增加并不是通过催乳素促使LH分泌引起的。推测在季节性生殖的公绵羊由性活动静止到活跃的这一特殊时间内,催乳素的升高是促进睾酮分泌的一个重要因子。