受体和移植时间对小鼠睾丸移植效果的影响

通过比较不同受体和不同移植时间对睾丸移植效果的影响,以期探索建立疾病模型小鼠安全保存的新方法。按受体不同分为C57BL/6J受体8周组和裸鼠受体8周组,按移植时间的不同分为裸鼠受体8周组和裸鼠受体10周组。移植后处死受体鼠回收移植物。测试和分析移植物存活率、回收物增重的倍数和生殖细胞的分化情况。结果表明:不同试验组移植睾丸的生殖细胞分化差异显著,裸鼠受体8周组的分化情况好于C57BL/6J受体8周组(P<0.01);裸鼠受体10周组分化好于裸鼠受体8周组(P<0.05)。由此可见裸鼠受体的移植效果要好于同品系受体,将睾丸移植时间从8周延长到10周有利于生殖细胞的分化。     

睾丸组织移植研究进展

睾丸组织移植是将同种或者异种供体的睾丸组织移植到受体的皮下、腹腔等血管丰富的部位后,检测移植物生长发育和精子发生情况。利用睾丸组织移植的方法来加速供体睾丸细胞的分化与增殖,在较短的时间内得到大量的生殖细胞,这对于种质资源保存、精子发生研究和男性不育症的治疗都是一有效的技术手段。本文对睾丸组织移植的供体选用、受体准备、移植的部位、移植物处理和检测以及移植技术的应用作一综述。     

鸡睾丸组织移植初步研究

本文对鸡睾丸组织的自体移植和异体移植作了初步的研究。将50日龄广西土鸡睾丸组织（0．3mm^3）自体移植到腹腔和腹部皮下,将30日龄竹丝鸡的睾丸组织（0．2mm^3）异体移植到新生广西土鸡的腹部皮下,在不同时间段（自体移植分为3周、1个月、2个月和3个月,异体移植定为3个月）取出移植物,检测移植组织的体积和重量,并通过组织切片观察曲精细管形成和精子发生情况。结果表明,自体和异体移植组织分别在移植后1个月和3个月内都保持生长状态,体积和重量明显增加。其中自体移植组织切片观察发现移植后3周、1个月时都有形态正常的精予形成,在异体移植组织切片中发现组织中有明显的曲精细管形成,但没有完整的精子发生。这初步证明,在鸡中进行睾丸组织自体或者异体移植是可行的。     

羊胎盘复方制剂对小鼠睾丸染色体与骨髓细胞微核的致畸变作用

研究了不同羊胎盘制剂对小鼠睾丸染色体与骨髓细胞微核的致畸作用,实验显示,羊胎盘提取物（GPE）及其制剂（GPP）的各剂量组小鼠睾丸染色体的断片数、易位数、染色体（包括常染色体和性染色体）单价数、畸变细胞数及其畸变率与阴性对照组相比差异不显著（P〉0．05）,但与环磷酰胺（CTX）处理的阳性对照组相比差异则极显著（P〈0．01）;GPE、GPPI及GPPII3个剂量组小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率与阴性对照组相比,无统计学意义（P〉0．05）。而阳性对照组的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率则显著高于其他实验组（P〈0．01）。综上所述,羊胎盘提取物及其复方制剂对小鼠无致畸作用。     

摩托车尾气对小鼠睾丸组织形态的影响

为研究摩托车尾气对小鼠睾丸形态的影响,用不同摩托车的尾气染毒小鼠4周后,取出睾丸制成组织切片,观察并分析睾丸组织结构的变化.结果表明,试验组睾丸生精小管内的生精细胞变得很稀疏,管腔内发现畸形精子,且精子数量减少,并有出血现象.生精小管之间的结缔组织结构变薄且不完整,其间质细胞也明显减少.还发现不同种类摩托车的尾气,对睾丸组织结构的影响也不同.     

EPO在高原藏羊和平原绵羊睾丸组织中的差异性表达

为揭示促红细胞生成素（Erythropoietin,EPO）在高原藏羊和平原绵羊睾丸组织中的表达差异,本研究采集藏羊和绵羊的睾丸组织,采用H&E染色法观察二者睾丸组织的形态结构,采用免疫组织化学染色法对藏羊和绵羊睾丸组织中EPO表达分布差异性进行分析。H&E结果显示,藏羊和绵羊睾丸组织结构均正常,绵羊生精小管形状较藏羊更为规则,且生精上皮细胞数量较多。免疫组化结果显示,藏羊和绵羊的睾丸组织中均能检测出EPO,但EPO在藏羊睾丸组织中的表达量高于绵羊睾丸组织。由此看来,藏羊在长期适应高原低氧环境的过程中,生殖器官组织结构发生了一定适应性变化,EPO在藏羊睾丸组织中的表达程度高于绵羊睾丸组织,对藏羊睾丸低氧适应性有重要调控作用,说明EPO可能与藏羊在高原环境下维持正常繁殖性能有关。     

氟致小鼠睾丸组织形态结构损伤的观察

选取20只20日龄的昆明小鼠,随机分为4组,分别给予含0,50,100和150 mg/L氟化钠的饮水120 d,通过石蜡组织切片观察氟对睾丸的损伤作用。结果发现,小鼠饮用含有氟化钠的水后,曲细精管管壁断裂、结构排列紊乱;生精细胞、次级精母细胞从生精上皮脱落;精母细胞胞质和胞核中出现大量的空泡样病变,且细胞的微核率增加;精子出现畸形。这说明氟对睾丸组织结构具有明显的损伤作用。     

脱氢表雄酮对雄性小鼠睾丸组织发育的毒性作用

昆明种雄性小鼠32只,随机分为4组。脱氢表雄酮（DHEA）日摄取量分别为0（对照组）、20、40和60mg／kg,试验期52d。各组分别在42日龄、72日龄处死小鼠,分离睾丸,制作石蜡切片,HE染色,显微观察、摄影。结果显示,与对照组比较,42日龄时中、高剂量组的曲精小管断面变形,各时期的生精细胞和成熟精子数量均减少;高剂量组曲精小管内生精细胞层次基本消失,出现较大腔隙,间质发生不同程度的变化。72日龄时中、高剂量组的曲精小管断面变形。基膜变薄伴有断裂和间质受损增加。中剂量组出现畸形精子,高剂量组曲精小管中央空白区域增大,缺乏成熟精子。以上结果表明,中、高剂量的DHEA对生长期小鼠的睾丸组织结构发育有明显的毒性作用。     

抗氧化酶在硝基苯中毒小鼠睾丸细胞凋亡中的作用

将10周龄雄性昆明小鼠随机分为硝基苯染毒组（26mg／kg、52mg／kg、105mg／kg）、花生油溶剂对照组、生理盐水对照组。对各组试验小鼠进行处理后，于第30d检测小鼠血清和睾丸中SOD、GSH-Px、CAT的活性及MDA含量，并通过DNA Ladder条带和透射电镜检测睾丸细胞的凋亡。结果，染毒组血清及睾丸中SOD、GSH—Px、CAT的活性显著或极显著（P〈0.01或P〈0．05）低于溶剂对照组，MDA含量显著或极显著（P〈0．01或P〈0，05）高于溶剂对照组，染毒组均显示DNA Ladder条带；电镜下细胞核皱缩，异染色质边聚，呈现典型凋亡现象。结果表明，硝基苯中毒能够诱使睾丸发生氧化应激，进而导致睾丸细胞发生凋亡，抗氧化酶在睾丸细胞凋亡中具有一定的作用。     

柠檬酸对小鼠睾丸组织抗氧化酶活性的影响

为研究柠檬酸对小鼠睾丸组织抗氧化酶活性的影响,将40只健康昆明系小鼠随机分为对照组(生理盐水)、柠檬酸低(180mg/kg)、中(270mg/kg)、高(360mg/kg)剂量组,各组小鼠每周腹腔注射相应剂量试剂0.2mL,连续注射3周,第3次注射后的第7天时颈椎脱臼处死小鼠,取其睾丸组织制作匀浆液检测过氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乳酸脱氢酶(LDH)、总一氧化氮合酶(T-NOS)活性及丙二醛(MDA)含量。结果表明,与对照组相比,中、高柠檬酸剂量组小鼠睾丸组织SOD活性显著降低(P<0.05);柠檬酸处理组GSH-Px活性、MDA含量均显著下降(P<0.05);随着柠檬酸剂量的增加,LDH、NOS活性分别呈下降、上升趋势。此结果提示,一定剂量的柠檬酸可以降低小鼠睾丸组织SOD、GSH-Px活性,但可能通过NO途径减少睾丸细胞膜脂质过氧化,提高细胞膜的稳定性。     

猪睾丸组织与雄性生殖相关circRNA鉴定

为研究环状RNA （circRNA）在杜洛克和大白猪睾丸中的表达差异,采用去除组织总RNA中核糖体RNA （rRNA）和线性RNA的方法构建特异性猪睾丸circRNA文库,并在Illumina PE150平台上进行测序,测序数据经过质控、比对、拼接后得到用于后续分析的数据。运用生物信息学软件find_circ和CIRI识别circRNA,并进行表达水平统计,从而得到猪睾丸组织circRNA表达谱,然后用DEseq2进行组间表达差异分析,对差异表达circRNA进行功能富集分析以筛选与雄性生殖相关的circRNA。结果发现,共识别到21 743个circRNAs,其中632个circRNAs在杜洛克和大白猪中的表达差异显著（|log₂（FoldChange）|>1,P<0.05）,在杜洛克猪上调表达的circRNAs有281个,下调表达的有351个。差异表达circRNA富集结果显示,有52个GO条目与繁殖相关,其中有9个与雄性生殖相关。经进一步筛选鉴定,有6个与雄性生殖相关的circRNAs （circ_0030058、circ_0009504、circ_00178101、circ_0019933、circ_0033379和circ_0017932）,它们可能参与精原细胞分化、精子发生和精子细胞发育等生物学过程。综上所述,杜洛克和大白公猪睾丸中存在表达丰度不同的circRNA,这些circRNA可能参与精子生成,可以作为预测公猪生育能力的生物标记。     

羊胎盘制剂对小鼠免疫功能的影响

将羊胎盘提取物按一定比例辅以其他原料配制成胎盘制剂,以小鼠为实验动物进行了免疫功能影响的动物试验.结果表明,灌胃羊胎盘制剂的小鼠其胸腺指数、脾脏指数、左右侧耳重差(迟发型变态反应指标)和抗体积数(血清溶血素)均显著高于对照组(P＜0.05),其中高剂量组小鼠的左右侧耳重差和抗体积数极显著高于对照组(P＜0.01).因此,所研制的羊胎盘制剂具有增强小鼠免疫力的功效.     

不同水平母源硒对黎城大青羊后代公羔睾丸发育的影响

试验通过在妊娠期和哺乳期的母羊日粮中添加不同水平酵母硒,研究不同水平母源硒对后代公羔睾丸发育的影响。结果表明:对照组羔羊的睾丸重量、长度和周径均为最低,而0.5 mg/kg组羔羊最高,随后随着日粮硒含量的增加,睾丸重量、长度和周径逐渐降低。H-E染色的结果表明,0.5mg/kg组睾丸的曲精细管管壁最厚,生精细胞数量最多,而2.0 mg/kg与4.0 mg/kg组羔羊睾丸的曲精细管管壁较薄,生精细胞数量相对较少,而且生精细胞之间有较大空隙。试验说明母体中的硒元素可以通过胎盘与乳汁转移给后代,影响后代公羔的睾丸发育。适宜的母源硒可以促进后代公羔的睾丸发育,而较高的硒添加量会对后代睾丸的发育造成不良影响。     

大豆异黄酮对香猪睾丸形态及精子发生标志基因表达的影响

为研究大豆异黄酮(soybean isoflavones,SI)对香猪睾丸形态及精子发生标志基因表达的影响,选择40头健康的28日龄雄性香猪,随机分成4组,每组10个重复,每个重复1头猪。1、2、3和4组分别在基础饲粮中添加0、125、250和500 mg/kg SI,饲喂60 d后从各组分别随机选取5头屠宰,采取睾丸样品,分析睾丸的组织形态及E型钙粘连蛋白1(Cdh1)、联会复合体蛋白3(SCP3)、过渡蛋白1(Tnp1)和波形蛋白(Vim)基因的表达。结果表明:各添加水平的SI均造成了睾丸曲细精管中空泡的形成,减少了管腔中成熟精子的数量;饲粮添加SI极显著降低了睾丸组织Cdh1、SCP3和Tnp1基因的表达量(P<0.01);添加250 mg/kg的SI显著降低了睾丸组织Vim基因的表达量(P<0.05)。由此可知,饲粮添加125、250、500 mg/kg的SI对香猪睾丸形态有明显损伤,抑制了精子发生标志基因的表达;250 mg/kg SI显著抑制猪睾丸支持细胞标志基因表达。     

绵羊睾丸差异基因及蛋白质互作网络关系研究

[目的] 整合分析多个绵羊睾丸转录组数据集,揭示绵羊睾丸差异基因及蛋白质互作网络关系,以期探索影响绵羊精子生成的关键基因,为绵羊的繁殖提供理论参考。[方法] 对74个绵羊睾丸转录组进行生物信息学分析,通过limma软件包进行差异基因分析,使用WGCNA构建加权绵羊睾丸差异基因共表达网络,并通过MCODE计算网络中重要基因;利用Metascape进行功能富集分析,利用Cytoscape插件AutoAnnotate识别基因集簇。[结果] 最终筛选到11 884个基因,构建237 366对蛋白质互作关系;对2 058个差异基因构建蛋白质互作网络,产生46 169对蛋白质互作关系,确定了4个得分最高的基因集合。对2 058个差异基因构建加权共表达网络,共获得7个模块,其中Blue模块内有929个基因,功能富集分析发现显著富集于雄性配子产生、繁殖、精子发生、鞭毛运动和AMPK信号通路等,且富集结果高度连接并聚成一个完整的网络,最终确定了25个参与精子发生和精子细胞发育过程的关键基因。[结论] 本研究揭示了绵羊睾丸表达基因的蛋白质互作网络和多维差异基因的蛋白质互作网络,最终找到与睾丸精子发生相关且有互作关系的25个基因,为绵羊繁殖研究提供理论依据。     

布尔山羊、关中奶山羊、陕南白山羊三品种杂交试验对比分析

利用陕南白山羊与关中奶山羊、布尔山羊三品种杂交试验,分别测定初生重、3月龄、6月龄、12月龄四个阶段的胸围、体长、体高和体重,将测定的各项指标分别与布陕杂一代、关陕杂一代和陕南白山羊的同阶段指标进行对比分析,结果表明,布关陕杂种羊在不同生长阶段的体重优于布陕杂一代、关陕杂一代和陕南白山羊。布关陕杂种羊的初生重比布陕杂一代、关陕杂一代、陕南白山羊分别提高18.8%、48.2%、66.2%;3月龄体重分别提高17.2%、28.1%、35.1%;6月龄体重分别提高17.7%、51.3%、65.6%;12月龄体重分别提高15.2%、52.3%、58.0%。     

引入青海的辽宁绒山羊的心电轴

对34只引入青海的辽宁绒山羊的心电轴进行了测定。结果发现(1)平均心电轴显著右偏，为+134．35°±76．69°；(2)心电轴左偏的山羊占14．70％，不偏的占11．77％，右偏的占73．53％。