新鲜羊膜移植术治疗眼表烧伤晚期并发症的临床研究

目的：研究新鲜羊膜移植术治疗眼表烧伤晚期并发症的可行性、手术方法和临床效果。方法：眼表烧伤晚期病例18例(18眼)，其中角膜血管翳8例，角膜溃疡7例，睑球粘连3例，采用新鲜羊膜移植治疗。手术方法：单层与多层羊膜移植或联合眼睑成形，角膜缘干细胞移植术。术后随访6～12个月。结果：18例术后植片均未见急性排斥反应，术后4～6周稳定愈合；13眼视力有不同程度提高。18眼中有17眼治愈。结论：新鲜羊膜是治疗眼表烧伤晚期并发症的有效方法。     

体外快速构建角膜内皮的初步研究

用培养的角膜内皮细胞在羊膜和去除Descemet膜的角膜基质体外快速构建角膜内皮组织.分离家兔角膜内皮细胞并传代,将2～4代的角膜内皮细胞以1×105～5×105/mL的浓度接种到去上皮的人羊膜和去除Descemet膜的兔角膜基质上,体外快速构建角膜内皮层.角膜内皮细胞在羊膜和去除Descemet膜的角膜基质上培养48h.细胞就可形成与在体角膜内皮类似的单层角膜内皮组织,并发现角膜基质透明度随着内皮细胞的增殖而逐渐增加的过程.以1×105～5×105/mL的浓度接种到去上皮的人羊膜和去除Descemet膜的兔角膜基质上,48 h可构建与在体角膜内皮类似的单层内皮组织.     

Latency of herpes simplex virus in absence of neutralizing antibody: model for reactivation

Mice inoculated with herpes simplex virus (type 1) by the lip or corneal route and then passively immunized with rabbit antibody to herpes simplex virus developed a latent infection in the trigeminal ganglia within 96 hours. Neutralizing antibody to herpes simplex virus was cleared from the circulation and could not be detected in most of these mice after 2 months. Examination of ganglia from the antibody-negative mice revealed latent virus in over 90 percent of the animals, indicating that serum neutralizing antibody is not necessary to maintain the latent state. When the lips or corneas of these mice were traumatized, viral reactivation occurred in up to 90 percent of the mice, as demonstrated by the appearance of neutralizing antibody. This study provides a model for identifying factors that trigger viral reactivation.     

HOMOGRAFT REJECTION IN THE FETAL LAMB: THE ROLE OF CIRCULATING ANTIBODY

Specific rejection of sterile orthotopic skin homografts by the fetal lamb in utero was unaccompanied by the presence of plasma cells in either the graft and its bed, or in the reactive draining lymph node. The grafts appeared not to stimulate the production of circulating immunoglobulins. The presence in the fetal circulation of rabbit anti-sheep 7S gamma-globulin and anti-beta(2M)-globulin did not inhibit the normal course of homograft rejection. These data support the contention that conventional circulating antibody is not an obligatory participant in the rejection of solid-tissue homografts.     

家兔角膜表面结构研究 表皮火山口样结构的扫描及透射电镜观察

关于角膜上皮表面形态的扫描电镜研究,自 Blümbe 和 Morgenro 最初报告以来,到目前为止很多学者在正常及实验条件下进行了观察。角膜最表层上皮细胞表面由所谓微绒毛和微皱襞的无数细胞突起组成。一般认为微绒毛和微皱襞可以形成和维持泪膜。微绒毛的多少在扫描电镜下呈现不同的电子密度,从而明确区分为亮细胞、中间细胞和暗细胞。另外现已知道在这些最表层上皮细胞的表面常可看到许多散在的表皮火山口结构。但是关于这种表皮火山口的本质,报告者的意见很不明确。本文是关于家免眼角膜最表层所谓火山口结构的扫描和透射电镜观察结果,并对表皮火山口的存在意义进行了探讨。     

冬虫夏草药理作用的研究进展

冬虫夏草是一种十分名贵的虫草真菌。现代药理学研究证明,冬虫夏草具有调节肾脏和内分泌、呼吸、心血管系统及抗肿瘤、抗角膜移植排斥反应、抗应激、抗衰老、抗病毒、抗菌和护肝等作用。     

Chemical identification of a tumor-derived angiogenic factor

Neoplasms produce substances that induce blood vessel formation (angiogenesis). Fractions from ethanol extracts of the Walker 256 carcinoma were isolated by silica column chromatography and C18 reversed-phase high-performance liquid chromatography. Two of the isolated fractions induced neovascularization when tested in the rabbit corneal micropocket assay. One of the fractions was identified as nicotinamide by desorption-electron impact mass spectrometry, nuclear magnetic resonance spectroscopy, and gas chromatography-mass spectrometry. The second active fraction contained nicotinamide as part of a more complex, as yet unidentified, molecular arrangement. Microgram quantities of commercial nicotinamide induced neovascularization in the corneal micropocket assay and in the chick chorioallantoic membrane assay.     

Antibodies to rabbit cytochrome c arising in rabbits

Antibodies reactive with rabbit cytochrome c have been observed in rabbits immunized with several heterologous cytochromes. Such antibodies have also been observed in rabbits immunized with rabbit cytochrome c conjugated to bovine gamma globulin. The serum of a rabbit immunized with human cyto chrome c reacted with the cytochrome c of the same rabbit.     

CHROMATOGRAPHIC HETEROGENEITY OF RABBIT SERUM AMYLASE

A chromatograph of normal rabbit serum shows three major peaks of amylase activity. Material associated with each peak differed in composition of serum protein, electrophoretic distribution of amylolytic activity, optimum pH for activity and Michaelis-Menten constants for starch hydrolysis. These data suggest but do not prove conclusively that normal rabbit serum contains at least three molecular forms of amylase.     

兔抗猪瘟高免血清的制备及纯度鉴定

利用猪瘟弱毒疫苗(C株)免疫新西兰大白兔,制备抗猪瘟高免血清IgG。运用间接ELISA方法测血清效价,再经饱和硫酸铵盐析沉淀法提纯血清IgG,SDS-PAGE电泳法鉴定提纯IgG的纯度,结合无菌检查试验和仔猪接种试验,检测血清IgG的安全性。结果表明,获得了蛋白含量为6 mg/mL,效价为1∶6400的高效价、安全性高、成本低的抗猪瘟高免血清IgG。为猪瘟病毒的检测和猪瘟的防制提供了理想的生物制剂。     

Initiation of angiogenesis by human follicular fluid

Angiogenesis was observed and measured after injection of human follicular fluid into rabbit corneas. Undiluted human follicular fluid stimulated angiogenesis in every case, with new blood vessels visible 3 days after injection and extending 2.0 millimeters from the corneal scleral limbus into the injection site by day 15. Stimulation of angiogenesis was lost by heating or diluting the follicular fluid but was retained after charcoal stripping or dialysis. Human follicular fluid contains an angiogenic factor that may be associated with perifollicular neovascularization during folliculogenesis.     

大豆抗原蛋白β-conglycinin线性表位及其不同种属动物过敏血清结合能力比较

试验通过生物信息学方法预测β-conglycinin线性表位,综合已发表文献筛选出四段具有代表性氨基酸序列合成短肽,采用ELISA和点杂交法检测表位肽段与仔猪、犊牛、兔三种不同种属动物过敏血清结合程度差异。结果表明:通过生物信息学方法预测合成的肽段均为β-conglycinin表位肽;三种动物过敏血清与四段表位肽结合能力存在显著差异,其中四段表位肽与仔猪、犊牛过敏血清结合能力显著高于兔过敏血清(P0.05);同一动物与四段不同肽段结合敏感程度差异显著(P0.05),兔过敏血清与肽段β1结合能力最强,仔猪过敏血清与α1肽段结合能力最强,犊牛过敏血清与肽段β2肽段结合能力最强。结果为寻找β-conglycinin最佳优势表位提供理论支持,同时为揭示大豆抗原蛋白种属间致敏差异机理奠定基础。     

蛇葡萄素对糖尿病兔的降血糖作用及对NO/NOS的影响

目的:探讨蛇葡萄素对糖尿病家兔的降糖作用,并比较给药前后糖尿病兔血清中一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)的含量变化,以进一步探讨其作用机理.方法:通过给家兔饲以高脂高糖饲料并结合腹腔注射链尿菌素,建立二型糖尿病兔模型,将动物随机分为5组:正常对照组、模型对照组、二甲双胍组、蛇葡萄素大剂量组和小剂量组.连续5周给药,并于给药后第2周和第6周分别取血测定各组家免的血糖及给药前后血清中NO、NOS的水平.结果:蛇葡萄素大、小剂量组明显降低血糖,并显著降低糖尿病家兔血清NO、iNOS、总NOS含量.结论:蛇葡萄素有明显的降糖作用,且能显著抑制iNOS的活性、降低NO的含量.对糖尿病有一定的治疗作用.     

中华鳖和杂交鳢血清免疫球蛋白免疫印迹和酶联免疫分析

[目的]探讨中华鳖和杂交鳢血清免疫球蛋白的同源性及其含量。[方法]采集中华鳖和杂交鳢血清与25种商品二抗共同抚育,进行免疫印迹及酶联免疫分析。[结果]中华鳖和杂交鳢血清可与兔抗鸡IgM、兔抗猪IgG、兔抗鸡IgG、兔抗大鼠IgM、兔抗猴IgG和羊抗人IgG等6种二抗发生免疫印迹反应。利用鸡IgG、鸡IgM、猪IgG、大鼠IgM、猴IgG和人IgG的ELISA试剂盒测定了中华鳖和杂交鳢血清免疫球蛋白水平,中华鳖血清免疫球蛋白浓度为28.5～215.4μg/L,杂交鳢血清免疫球蛋白浓度为24.5～201.5μg/L。[结论]该研究能够丰富中华鳖、杂交鳢特异性免疫系统的研究,对中华鳖、杂交鳢的健康养殖有一定的指导意义。     

兔皮肤成纤维细胞的体外培养和NESTED-PCR支原体污染检测

[目的]为动物细胞核移植、转基因操作等提供充足的供体材料。[方法]通过对兔皮肤成纤维细胞的体外原代、传代培养和冷冻复苏,检测支原体污染状况。[结果]结果表明:在含有15%FCS(Fetal Calf Serum)的DMEM中培养的细胞初期生长状态较10%FCS中的细胞长势好,后期则相反。用PCR法对培养至25代的兔皮肤成纤维细胞进行支原体检测,均没有发现支原体污染现象。[结论]PCR法检测细胞培养支原体污染具有灵敏、准确、简便、快速、特异性好的优点。     

6种血清的醋酸纤维素薄膜电泳分析

在相同的实验条件下,采用醋酸纤维素薄膜电泳,分析了人和5种动物(鸡、牛、兔、羊与猪)血清的蛋白组分,结果表明,人和兔血清的电泳图谱为5条带,从正极到负极分别为清蛋白和α1,α2,β,γ球蛋白;鸡、牛和羊血清的电泳图谱为4条带,从正极到负极分别为清蛋白和α,β,γ球蛋白;猪血清的电泳图谱为3条带,从正极到负极分别为清蛋白,α与β球蛋白混合带,γ球蛋白。且不同种类血清相对应条带的带宽、着色深浅也不同。说明不同动物血清蛋白组分与含量存在差异。     

CONTAMINATION OF COMMERCIAL RABBIT ALBUMIN PREPARATIONS BY BOVINE ALBUMIN

Seven commercial rabbit serum albumin preparations obtainied from two different sources were found to contain bovine serum albumin. The extent of contaminiation in three representative samples varied from 0.35 to 0.54 percent.     

人及兔醛化红细胞的制备和应用

[目的]用4种血型的人醛化红细胞测定植物凝集素(PHA)的活性,并用标准抗血清对血型进行复查。同时初步探讨兔醛化红细胞对植物凝集素(PHA)凝集活性的测定效果。[方法]将新鲜的人A、B、O、AB型血以及兔血进行红细胞的提取并醛化,然后用抗A和抗B血清测定醛化后的人红细胞的血型,并用醛化的人的4种血型的红细胞悬液以及兔的醛化红细胞悬液对植物凝集素进行效价的测定。[结果]醛化后的人的4种血型的红细胞仍保持原血型不变,并且可以与植物凝集素发生凝集反应,结果与用新鲜血浆测定的效价一致。用兔醛化红细胞悬液也测定出同样的植物凝集素效价,且灵敏度与用人的醛化红细胞悬液测定相同。[结论]醛化的人的4种血型的红细胞以及兔醛化红细胞不仅未改变其表面的抗原,而且均可用于对植物凝集素的效价测定,同时具有保存时间长的优点。从降低成本的角度考虑,也可采用兔的醛化红细胞血液对植物凝集素进行效价测定。     

芦荟药物血清对AGEs损伤的RGMC细胞的保护作用

通过HPLC确定灌胃芦荟药物在家兔血清中达到峰值时相,确定最佳采血时间,制备芦荟药物血清,将血清加入糖基化终产物(AGEs)作用过的肾系膜细胞(RGMC)中,孵育24 h。之后,检测细胞内谷胱甘肽(GSH)和氨基葡萄糖苷酶(NAG)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、山梨醇脱氢酶(SDH)和醛糖还原酶(AR)的活性,研究芦荟药物血清对RGMC的保护效果,初步探讨芦荟防治糖尿病的机理。结果表明,芦荟药物在家兔灌胃后2 h的血清中血液达到相对峰值;AGEs作用过的细胞经芦荟药物血清处理后,其GSH含量、SOD活性均较未加芦荟处理的A组有所升高,且差异极显著(P<0.01),其SDH和AR的活性也较未经芦荟处理的A组极显著下降(P<0.01)。表明芦荟药物血清对AGEs损伤后的RGMC细胞有一定的保护修复作用,芦荟保护RGMC细胞的机制可能是通过改善细胞的氧化应激状态,同时降低多元醇通路的2种关键酶的活性而起作用的。     

枸杞多糖对泌乳母兔生产性能及血清生化指标的影响

【目的】研究日粮中添加枸杞多糖对泌乳母兔生产性能及血清生化指标的影响,为枸杞多糖在家兔日粮中的应用提供理论依据。【方法】选择同期分娩的48只泌乳獭兔,按照胎次、产仔数、体重相近的原则,随机分成4组,每组12只,每组仔兔总数相等（72只）。Ⅰ组为对照组,饲喂基础日粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组在饲喂基础日粮的基础上分别添加0.5%、0.75%、1%的枸杞多糖,试验期共30 d。【结果】添加0.5%、0.75%和1%枸杞多糖组的仔兔35日龄断奶窝增重分别比对照组提高了5.95%、4.60%和6.47%,但差异均不显著（P＞0.05）;各试验组仔兔的断奶成活率与对照组相比均差异极显著（P＜0.01）;各试验组母兔的泌乳力与对照组无显著差异（P＞0.05）;各试验组母兔和同窝仔兔的平均日采食量与对照组相比差异均不显著（P＞0.05）;添加0.5%、0.75%和1%枸杞多糖组的母兔泌乳35 d后的体重失重分别比对照组低20.9%、16.2%和15.5%,但差异均不显著（P＞0.05）。添加0.5%、0.75%和1%枸杞多糖组母兔血清LDH含量分别比对照组降低了32.6%（P＜0.01）、19.8%（P＜0.05）和48.3%（P＜0.01）;其余检测指标在各试验组母兔血清中的含量与对照组相比有不同程度的降低或升高,但均差异不显著（P＞0.05）。【结论】在泌乳母兔日粮中添加枸杞多糖可以不同程度地提高仔兔断奶成活率、促进仔兔的生长发育、降低母兔在泌乳期的失重,且对血清生化指标无不良影响。