HPLC测定不同月份艾叶中绿原酸含量

目的:采用HPLC法测定汉中艾叶中绿原酸的含量。方法:色谱柱:InertsiL ODS-3(5μm 150×4.6mm);流动相:乙腈∶0.4%磷酸=10∶90;柱温:25℃;流速:1.0ml/min;检测波长:327nm;进样量:10μl。结果:2-6月份汉中艾叶中绿原酸含量分别为:0.873%、1.182%、0.742%、0.531%、0.121%。结论:艾叶生长周期中绿原酸的含量呈规律性变化,3月份绿原酸含量最高,之后呈下降趋势,6月份绿原酸含量最低。     

RP-HPLC法测定杜仲叶发酵液中绿原酸的含量

建立反相高效液相色谱(HPLC)法测定杜仲叶发酵液中绿原酸的含量。色谱条柱SymmetrySheildRP18柱(3.9mm×300mm,5μm),以水-甲醇-乙酸(88∶12∶1.2,V/V)为流动相,流速1.0ml/min,检测波长326nm,柱温25℃。绿原酸对照品在2.24～11.2μg范围内线性关系良好(r=0.9993)。该方法简便、准确、线性范围宽,可用于含绿原酸的原料及产品的质量控制。     

以绿原酸为参照物的杜仲叶HPLC指纹图谱

[目的]用绿原酸为参照物建立杜仲叶的指纹图谱。[方法]使用ZORBAX SB-C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,0.1%磷酸—乙腈梯度洗脱;流速1.0 ml/min;检测波长254 nm。[结果]所得的色谱图各色谱峰分离较好,图谱参数符合《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》的规定。[结论]方法准确,可用于杜仲叶指纹图谱的建立以及控制杜仲叶药材的质量。     

不同基因型杜仲叶片中绿原酸含量的检测

[目的]检测不同基因型杜仲叶片中的绿原酸含量。[方法]以超声波助提法提取绿原酸,采用HPLC法检测和二倍体含量,色谱柱为Eclipse xdb-c18柱（4.6 mm×150.0 mm,5μm）,以乙腈-0.4%磷酸水（10∶90）为流动相,检测波长为327 nm。[结果]四倍体和二倍体杜仲叶片中绿原酸的平均含量分别为4.005和为0.850 mg/g。[结论]四倍体杜仲叶片中绿原酸含量显著高于二倍体。     

杜仲叶绿原酸总黄酮的分离纯化及检测

对杜仲叶中绿原酸、总黄酮的大孔树脂分离工艺进行研究,并采用高效液相色谱对纯化产物进行检测,从9种大孔树脂中筛选出NKA-Ⅱ为最优树脂,最佳的吸附解吸条件为上柱液pH值为4,流速1.0mL/min,用30%乙醇洗脱杜仲叶中绿原酸,50%～70%乙醇洗脱杜仲叶中黄酮类物质.杜仲叶粗提物依次经过NKA-Ⅱ大孔树脂、聚酰胺树脂和Sephadex LH-20树脂的分离纯化,最终得到4种组分,经高效液相色谱检测分析,可能为绿原酸、金丝桃苷或陆地锦苷、槲皮素-乙酰糖苷和槲皮素.     

杜仲叶中绿原酸醇提法的工艺研究

研究以乙醇为溶剂提取杜仲叶中绿原酸的最佳工艺条件.通过单因素实验研究各因素对提取率的影响,应用正交实验优化工艺条件.乙醇提取杜仲叶绿原酸最佳工艺条件为:乙醇浓度为60%,浸提温度为60℃,时间为2.5 h,物料比1:12.在最佳条件下,绿原酸提取率为2.434%.     

不同干燥方法及存放时间对杜仲叶中绿原酸含量的影响研究

目的:绿原酸是杜仲叶中的主要成分,其性质不稳定,制药厂收购的干燥杜仲叶中绿原酸含量差异很大。实验旨在研究干燥条件及存放时间对杜仲叶中绿原酸含量的影响。方法:采用不同干燥条件对杜仲鲜叶进行干燥、干燥的杜仲叶放置不同时间,以不同溶剂浸并采用分光光度法测定绿原酸含量。结果:烘干温度以60℃含量最高,其次为室温阴干、恒温50℃;存放三年的杜仲叶中绿原酸含量仅有当年产杜仲叶的1/3。结论:最佳干燥条件为60℃恒温烘干;干燥的杜仲叶以当年产当年用为佳。     

杜仲叶中绿原酸的测定方法比较

通过不同的提取方法和分离方法,对杜仲叶中绿原酸含量的测定结果进行了比较。认为在常规实验室中,用乙醇提取—纸层析分离—紫外分光光度法测定杜仲叶、杜仲皮或杜仲产品中绿原酸含量的方法简便易行,结果可靠     

杜仲叶·皮内绿原酸含量的测定与比较

在杜仲(Eucommia ulmoidesOliv.)叶和皮的次生代谢物中,绿原酸(chlorogenic acid)是一种重要的生物活性物质和化学试剂。通过对15年树龄的光皮杜仲树皮和叶片中绿原酸含量的分析,发现绿原酸含量在叶和皮中的差异较大,同一棵树在同一时期,叶中绿原酸的含量较皮中高。4~11月绿原酸含量叶中平均为2.656%,皮中平均为0.301%。     

杜仲叶中绿原酸的研究进展

文章对杜仲叶中主要活性成分绿原酸的理化性质、生物活性、提取方法分离纯化及检测等方面进行了论述,并对绿原酸在医药保健、食品与日用化工等方面的应用作了分析, 以期推动杜仲叶中绿原酸的综合利用。     

杜仲不同部位绿原酸含量的比较

采用超声技术提取杜仲叶和皮中的绿原酸,并建立了HPLC-PAD法测定绿原酸的含量。结果表明,杜仲叶的绿原酸含量均高于杜仲皮。该方法简便、准确,线性范围宽,可用于评价含绿原酸成分的药材质量。     

RP-HPLC法测定杜仲叶中京尼平苷酸与绿原酸的累积含量

为确定提取杜仲叶中京尼平苷酸和绿原酸有效成分的最佳采收期,采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定杜仲叶中京尼平苷酸和绿原酸的累积含量.结果表明,在色谱柱,SymmetryShield RP18 (250 mm×6 mm,5μm);流动相,甲醇-水-冰醋酸(体积比29∶70∶1);检测波长,238 nm;流速,1.0 mL/min;柱温,30℃的条件下,京尼平苷酸在0.412～2.472 μg(r=0.999 6)、绿原酸在1.416～8.496μg(r=0.999 5)线性关系良好,回收率分别为98.58％和99.08％,RSD分别为1.52％和0.96％.结论:采用的方法准确、快速、重现性好,通过对5～11月份杜仲叶中京尼平苷酸与绿原酸含量的测定,并对其进行积累动态分析,确定了同时提取杜仲叶中该2种成分的最佳采收期为7月.     

从杜仲叶中提取绿原酸纯品的研究

用化学萃取、无机盐沉淀等方法首次从杜仲叶中提取、分离出绿原酸纯品,其纸色谱和紫外光谱特征与文献相符;讨论了绿原酸的药用价值及其开发应用前景     

响应面分析法优化杜仲叶中绿原酸水提工艺

[目的]优化杜仲叶中提取绿原酸水提工艺,为杜仲叶绿原酸的工业化生产提供理论依据。[方法]在单因素试验的基础上,选取料液比、提取温度、提取次数、提取时间为自变量,以绿原酸的收率为响应值,采用中心组合设计,利用响应面分析法优化杜仲叶绿原酸的水提工艺。[结果]杜仲叶中绿原酸水提工艺的最佳条件为：料液比1∶16,提取时间20 m in,提取次数2次,提取温度65℃。在该条件下,绿原酸的提取率达92.550%。[结论]水提法与传统工艺比较,具有提取率高、能耗少、时间短和低成本等特点,为杜仲叶中绿原酸的工业化生产提供了理论依据。     

杜仲叶中绿原酸的提取及其在果蔬保鲜中的应用

比较了4种提取方法对杜仲叶绿原酸提取率和含量的影响,并研究了所得绿原酸对时令果蔬的保鲜作用。结果表明:采用水提法从杜仲叶中提取绿原酸的得率最高,用超临界流体萃取法制备的绿原酸含量最高,综合考虑,乙醇提取法是最佳选择;绿原酸提取液对红富士苹果和贡梨的保鲜和防腐作用明显,但对西红柿的保鲜效果较差。     

杜仲叶中绿原酸和黄酮同时提取分离方法的研究

[目的]对同时提取分离杜仲叶中的绿原酸和黄酮的方法进行了研究。[方法]研究了以超声波辅助乙醇同时提取杜仲叶中绿原酸和黄酮的工艺条件,以绿原酸得率为考察指标,用紫外分光光度法测定绿原酸和黄酮的含量。[结果]最佳提取工艺条件为:提取溶剂为50%乙醇,原料与溶剂比例为1∶10(g∶ml),在60℃下超声提取50 min。将提取液浓缩后用乙酸乙酯萃取,酯层纯化后得黄酮提取物,黄酮含量为37.6%;水层酸化后用乙酸乙酯萃取,该酯层纯化后得绿原酸提取物,绿原酸含量为23.4%。[结论]该工艺操作简单,成本低,提取分离效率高。     

杜仲糖基转移酶基因EuCGT1克隆及序列分析

本研究以杜仲(Eucommia ulmoides)7月雌株新生幼枝的树皮为材料,根据杜仲转录组测序数据中筛选的一个糖基转移酶基因(CGT)片段信息设计引物,采用SMART RACE技术,克隆了5’-端1432bp和3’-端535 bp cDNA片段,测序拼接后获得全长1 583 bp的杜仲CGT的cDNA序列。分析结果表明,该cDNA开放阅读框长1 464 bp,编码487个氨基酸,命名为EuGT基因。EuGT在NCBI中经blastn比对,显示序列与甜橙和草莓的UDP-葡萄糖基转移酶基因同源性分别为72%和67%;推测的氨基酸序列经blastp和CDD比对,显示序列与UDP-葡萄糖类黄酮3-O-糖基转移酶-6同源,其中含有UDP-葡萄糖基转移酶的保守域(pfam00201),初步推测EuCGT1蛋白属于糖基转移酶家族。本研究克隆的EuGT基因是首次从杜仲中克隆的糖基转移酶家族基因。以EuCGT1基因构建的植物表达载体pSH-35S-EuCGT1采用农杆菌介导法遗传转化烟草,获得了含EuCGT1基因的转基因烟株,移栽生长1个月的转基因烟草植株在表型上与野生型烟草无明显差异。     

HPLC法测定杜仲中绿原酸和芦丁

采用phenomenex C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-冰醋酸(pH=3.10)(45∶55)为流动相洗脱,体积流量为0.8 mL/min,紫外检测波长为327 nm,采用外标法测定不同产地杜仲中绿原酸和芦丁的含量.建立了HPLC法测定杜仲中绿原酸和芦丁含量,并对不同产地杜仲中绿原酸和芦丁含量进行测定.结果表明,绿原酸和芦丁分别在0.127 5～24.000 0μg(r=0.999 6),0.125 0～25.000 0μg(r=0.999 6)线性关系良好,平均回收率分别为98.73%和97.26%,相对标准偏差为1.85%和1.32%.     

杜仲叶中活性成分积累变化规律

[目的]为选择适宜采收期、保证所采杜仲叶质量提供科学依据。[方法]采用乙醇浸提和紫外分光光度计检测杜仲叶生长过程中绿原酸、木脂素、总黄酮、环烯醚萜的含量,找出每种成分含量随生长时间的变化规律。[结果]杜仲叶活性成分的合成积累呈较为明显的季节性,4种成分含量在6月份之前均快速增加,而6月份之后绿原酸、木脂素和环烯醚萜含量又逐渐减小,特别是环烯醚萜含量减小速率较快,但总黄酮含量到9月份后才开始减小。[结论]同时考虑活性成分含量和杜仲叶产量,建议以应用黄酮类和绿原酸为主时,叶片的采收宜在5~10月份进行;而以应用环烯醚萜类和木脂素为主时,叶片的采收宜在5~8月份进行。如果综合考虑各种活性成分的含量,建议采用5~8月份的叶片为宜。