牛产气荚膜梭菌的分离与鉴定

针对海南牛猝死的现象，采集23头病牛的病料进行细菌分离培养。从菌落、菌体的形态、细茵生化特征、动物试验、细菌动力学试验等方面对病原菌进行了鉴定。结果表明，病原菌为革兰氏阳性粗短杆菌，严格厌氧，β-溶血，能发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和含铁牛乳；厌气肉肝汤培养物滤液0．1～O．2mL皮下注射可致死小白鼠。根据试验结果鉴定其为产气荚膜梭菌。     

一株致梅花鹿猝死症A型产气荚膜梭菌的分离与基因分型研究

对苏州某梅花鹿场 1头猝死梅花鹿进行了病原的分离与鉴定 ,在死亡鹿体内分离到 1株G+ 、无芽孢、有荚膜、粗大正直的杆菌。通过肠内容物毒素中和试验和多重PCR方法证明所分离到的细菌为A型产气荚膜梭菌。结合流行病学、临床症状和病理变化 ,证实A型产气荚膜梭菌为引起此例梅花鹿猝死症的病原     

一株羊源产气荚膜梭菌的分离与鉴定

2013年4月,扬州大学动物医院畜禽门诊接诊一例山羊急性死亡的病例,对其进行剖检,无菌恒温厌氧分离培养,纯化鉴别,革兰氏染色,生化反应,结果表明为产气荚膜梭菌,并对此进行了一定的讨论。     

猪产气荚膜梭菌的分离鉴定及药敏试验

产气荚膜梭菌又称魏氏梭菌、产气荚膜杆菌,在自然界分布极广,可见于土壤、污水、饲料、食物、粪便以及人畜的肠道等中。该菌为条件性致病菌,在一定条件下,可引起多种严重疾病。鸡的坏死性肠炎以及仔猪红痢都是由产气荚膜梭菌感染所引起的严重的肠道疾病。     

犬猝死症--产气荚膜梭菌与肉毒梭菌二联灭活疫苗的研制与应用

近年来在我国军警犬及其它各类犬中 ,出现了一种奇怪的疾病 ,一些经多种病毒弱毒疫苗免疫过的成年健壮犬突然发病死亡 (猝死 )。患犬发病急 ,死亡快 ,多在死前 1h狂燥不安 ,嚎叫 ,四处撞壁 ,转圈运动 ,口吐白沫 ,呼吸急促 ,发抖抽搐 ,卧地不起 ,不时呻吟 ,四肢划动 ,角弓反张 ,     

麋鹿产气荚膜梭菌分离鉴定方法的建立与初步应用

探索了产气荚膜梭菌在营养琼脂、甘露醇卵黄琼脂和血琼脂平板上的菌落形态和培养特点,优化了产气荚膜梭菌的分离方法,并对分离菌株进行生化鉴定;在此基础上对北京南海子麋鹿苑和江苏大丰麋鹿国家级自然保护区的麋鹿自然感染情况进行了调查。结果发现,粪样中的产气荚膜梭菌在营养琼脂上生长呈半透明边缘不整的白色菌落,接种甘露醇卵黄琼脂和血琼脂平板,分别出现伴有卵磷脂酶乳光浑浊带的粉红色火山口状菌落和伴有双溶血环的灰绿色勋章样菌落。生化试验结果确认这些分离株均为产气荚膜梭菌。对北京南海子麋鹿苑和江苏大丰麋鹿国家级自然保护区麋鹿粪样检测发现,阳性率分别为13.04%(3/23)和19.51%(8/41)。说明本研究建立的麋鹿产气荚膜梭菌分离鉴定方法简便快速,确实可行;麋鹿产气荚膜梭菌自然感染率较高,应加强麋鹿产气荚膜梭菌病的防控。     

牛出血性肠炎A型产气荚膜梭菌的分离鉴定

从新疆维吾尔自治区某牛场采集的3份疑似出血性肠炎病料中分离到8株产气荚膜梭菌,用PCR扩增保守基因16SrRNA,并进行序列测定和同源性分析,再通过多重PCR方法扩增型特异性基因进行分离菌株的分型鉴定。结果显示,所分离的8株产气荚膜梭菌之间16S rRNA基因同源型为100%,与GenBank参比序列同源性在99.8%以上,确定为产气荚膜梭菌。遗传进化分析表明,本次分离的8株产气荚膜梭菌之间拥有共同起源,但与所用的参考菌株分属不同来源。多重PCR扩增结果显示,8株菌株均为产气荚膜梭菌A型。     

A型产气荚膜梭菌最佳产毒时间的确定

测定了A型产气荚膜梭菌在庖肉培养基的生长曲线、培养液的pH值变化曲线以及不同培养时间提取的毒素液的蛋白质含量、溶血活性及卵磷脂酶活性。结果表明，A型产气荚膜梭菌在庖肉培养基培养8h是其a-毒素的最佳产毒时间。     

犬源产气荚膜梭菌分离鉴定及药敏试验

对分离于某犬场的产气荚膜梭菌疑似物进行厌氧培养、生化鉴定、动物接种、药敏试验、血清型鉴定,同时结合流行病学调查、临床症状观察、病理剖检等措施,确定该犬场发病的原因是感染A型产气荚膜梭菌,敏感药物有氟本尼考、氯霉素、替硝唑等。     

家兔产气荚膜梭菌的分离、鉴定及致病性分析

为对疑似家兔产气荚膜梭菌病感染死亡的肉兔病例进行病原菌的分离鉴定,并分析其对家兔的致病性,试验采集死亡病例的肠道内容物,划线接种于兔鲜血平板和TSC选择鉴别培养基中,对病原菌进行分离纯化,利用细菌16SrDNA通用引物进行分子鉴定,分析其同源性,构建系统进化发育树,同时,对病原菌进行生化鉴定,并将病原菌腹腔接种30日龄肉兔,分析其致病性。结果表明,从病料中分离纯化到1株革兰氏阳性菌;通过对细菌16S rDNA基因测序分析及生化鉴定确定为产气荚膜梭菌,且在系统进化树中也与其聚为一簇;致病性分析发现,该菌对家兔具有较强的致死性,可使试验组肉兔在攻毒16h后全部死亡。综上所述,本研究成功获得1株具有较强毒性的兔源产气荚膜梭菌,为产气荚膜梭菌致病机制的研究奠定了基础,同时也为疫病诊断和防控提供了理论依据。     

多重PCR检测产气荚膜梭菌方法的建立及其临床应用

产气荚膜梭菌是牛羊猝死和肠出血症的重要病原之一。本研究根据其常见的A、B、C、D四种菌型菌株编码α、β和ε毒素的保守序列,分别设计合成了针对这3种毒素的特异性引物,建立了多重PCR检测不同血清型产气荚膜梭菌的技术方法。通过对参考菌株的分型检测表明,该方法不仅快速、客观,而且具有良好的特异性和敏感性。对羔羊猝死症中分出的菌株进行检测,确定其为产气荚膜梭菌A型和D型混合感染;对产后母牛血痢病料中分离的菌株进行检测确定其为产气荚膜梭菌A型。     

ELISA对动物舍气载魏氏梭菌型别的研究

采用ELISA方法对从一个犊牛舍空气中分离到的魏氏梭菌进行型别的鉴定。结果显示：88％的菌种属于A型，3.4％为C型，8.6％是D型，B型未能确认。     

REVERSE PHASE PASSIVE HAEMAGGLUTINATION AND SINGLE RADIAL IMMUNODIFFUSION TO DETECT EPSILON ANTIGEN OF CLOSTRIDIUM PERFRINGENS TYPE D

Two in vitro immunological assays were developed for detection of the epsilon (epsilon) antigen of Cl. perfringens type D. It was found that the reverse phase passive haemagglutination assay (RPHA) was able to detect concentrations of epsilon-antigen as low as 6 x 10-7 mg/ml whereas the single radial immunodiffusion techniques (SRID) was capable of detecting concentrations of epsilon-antigen above 0.01 mg/ml. When applied to gut contents from freshly dead infected sheep the RPHA test was found to be more sensitive than mouse toxicity assay in detecting the presence of epsilon-antigen. However, very low titres were detected in gut contents from normal sheep which meant that in a diagnostic situation interpretation of RPHA titres would be difficult. No epsilon-antigen was detected by SRID in gut contents from normal sheep or in gut contents from freshly dead infected sheep. The SRID assay could detect epsilon-antigen in gut contents from infected sheep allowed to decompose for 20 h post-mortem.     

不同桑树品种的叶片培养及植株再生试验

以MS为基本培养基,添加一定量的植物细胞分裂素和生长素,进行12个桑品种的叶片培养.12个桑品种叶片在离体条件下都能生长,分化出不定芽.且经发根处理形成完整植株.不定芽分化率,品种间差异呈极显著,由高到低依次为:璜桑14号、707、吉湖4号、红沧桑、新一之濑、辐1号、湖87号、湖199号、湖197号、育151号、7307、湖32号.     

不同桑树材料冬芽组织培养试验

采用相同激素浓度组成的培养基，在培养条件一致的情况下，对本研究室保存的种质资源中七个材料的冬芽进行了比较培养试验，从中筛选出生长、增殖、生根效果好且不易感染的材料贵毛十九，这为以后桑树快繁，转基因等以组培为手段的研究奠定了基础。     

高、中、矮三种多年生禾草混播比例试验

“黑土型”退化草地的治理应根据本地区草地退化的严重程度，采用不同治理模式。种植多年生牧草混播人工草地，可恢复“黑土型”退化草地植被，有效遏制草地退化，使草地生态环境得到改善。通过对多年生牧草不同混播比例下产草量、草层高度、植被盖度的测定分析，得出垂穗披碱草、中华羊茅、冷地早熟禾混播比为1：0．5：0．5适合称多县“黑土型”退化草地种植。     

三种增菌液对食品沙门氏菌检验结果比较试验

本试验以三种增菌液，对３００份鲜猪肉和１２０份鲜鸡肉检样进行沙门氏菌增菌培养，比较三种增菌液的增菌检出效果。结果表明：ＭＭ液对鲜猪肉和鲜鸡肉检样中沙门氏菌捡出率最高，分别为２２．７％、５３．３％，平均捡出率３１．４％，敏感指数８８．０％；ＳＭ液次之，检出率２０．３％、４７．５％，平均检出率２８．１％，敏感指数７８．７％；ＳＢＧ液最低，检出率分别为１９．３％、４０％，平均检出率２５．２％，敏感指数７０．７％。ＭＭ液和ＳＭ液检出沙门氏菌菌株符合率均高于ＳＢＧ液，分别为８８．０％和７８．７％。