禽传染性喉气管炎病毒gD蛋白单克隆抗体的制备

为制备抗鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)糖蛋白gD的单克隆抗体(MAb),本研究通过原核表达gD重组蛋白,纯化后免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,经细胞融合筛选获得一株稳定分泌抗ILTV gD蛋白的杂交瘤细胞株,MAb亚型经鉴定为IgG1,轻链为κ链。Western blot结果显示,这株杂交瘤细胞分泌的MAb能够识别ILTV。ILTV gD蛋白的MAb的制备,为ILTV检测方法的建立奠定了基础。     

鸡传染性喉气管炎病毒贵州株gD基因的遗传进化分析

为了解在贵州省开阳县某养鸡场分离的1株鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV贵州株)的遗传进化情况,试验设计、合成1对鸡传染性喉气管炎病毒gD基因引物,并通过扩增、克隆、测序该基因,分析其遗传进化情况.结果:PCR扩增基因为1134 bp.基因测序显示,ILTV贵州株与国内黑龙江、江苏、上海和国外澳大利亚、突尼斯、美国、意大利...     

鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)王岗株糖蛋白gB基因序列比较分析

根据已经发表的鸡传染性喉气管炎病毒（ILTV）SA2的株的gB基因序列,设计了1对引物,通过PCR扩增了ILTV王岗株的gB基因,并克隆到pUC119质粒的EcoR I位点中,经酶切鉴定证实后,进行了序列测定。结果表明,gB基因长2619bp,包含完整的阅读框架。序列比较分析表明,ILTV王岗株的gB基因核苷酸序列与英国的Throne 882和美国的6322个强毒株的gB基因序列完全一致,而与澳大利亚SA2疫苗株gB基因核苷酸同一性为99.8%,氨基酸的同一性为98.4%。与澳大利亚SA2疫苗株gB基因核苷酸和氨基酸序列比较发现,ILTV3个强毒株（王岗株,Throne 882株和632株)gB基因的核苷酸序列在第89位上均缺失1个碱基G,而在第102位核苷酸处又插入了1个碱基A,从而引起了在氨基酸序列中第29～32位5个氨基酸的移码突变。此变异是否与病毒的毒力有关尚待进一步研究。     

一株鸡传染性喉气管炎病毒的分离鉴定及TK基因分析

黑龙江省牡丹江市某养鸡场28周龄蛋鸡发生以呼吸困难、咳血和产蛋下降为主要症状的疾病。本研究利用特异性引物,从发病鸡喉头及其分泌物中扩增出鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)gB基因的567 bp大小片段;将发病鸡喉头及分泌物处理后接种鸡胚,在鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)上形成痘斑。病毒接种鸡胚肾细胞48 h后电镜下可以观察到典型的疱疹病毒粒子形态,并且该分离株能够与ILTV单克隆抗体发生特异性反应。动物回归试验显示,感染的SPF鸡出现典型ILT症状,并能够从发病鸡体内重新分离到ILTV,由此判定该分离株为ILTV,并将其命名为MDJ0442。根据NCBI登录的ILTV序列(HQ630064)设计引物,以MDJ0442基因组为模板,PCR扩增TK的基因片段,进行测序和序列分析。结果表明,与其他ILTV参考病毒株相比,TK基因的核酸同源性为99.62%。本研究可以为ILTV的流行病学调查和分子生物学研究提供参考。     

传染性喉气管炎病毒王岗株gB基因gC基因和gD基因的真核表达

将传染性喉气管炎病毒(ILTV)王岗(WG)株的gB、gC、gD基因分别克隆到真核表达载体pCAGGS的EcoRⅠ位点，经过酶切、测序分析，筛选鉴定出含有gB、gC、gD基因的重组质粒，分别命名为pCAGG—gB、pCAGG—gC、pCAGG—gD。用质粒纯化试剂盒对重组质粒进行了纯化，将纯化后的质粒转染293T细胞，用间接免疫荧光技术检测了目的蛋白的表达情况。检测结果表明，目的蛋白得到了真实的表达。     

鸡传染性喉气管炎病毒的分离鉴定

从平顶山某鸡场患病鸡群中分离到一株病毒，经过鸡胚接种、中和试验、琼扩试验、理化特性和回归试验，确定分离毒为ILTV，分离毒株暂定名为ILT－PDS。     

鸡传染性喉气管炎病毒的分离鉴定

采用自然感染鸡的气管粘膜及分泌物为材料，以鸡胚接种分离出一株病毒ＣＬ９４。通过接种鸡胚的病变特点、回归本动物试验、琼脂免疫扩散试验、毒价测定、中和试验以及对有机溶剂的敏感试验等证明ＣＬ９４分离株是鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）。为证实ＩＬＴ在安徽存在提供了可靠的依据。     

鸡传染性喉气管炎病毒的分离鉴定

鸡传染性喉气管炎 (ＩＬＴ)是由疱疹病毒引起的一种急性传染病。临床症状是呼吸困难、喘气和咳出血样渗出物。本病最早发现于 1 92 5年 ,目前许多国家有该病流行 ,近几年我国不少地方也发生了该病。 1 999年 9月平顶山市某养鸡场暴发了该病 ,发病率 71 % ,死亡率 2 3 7%。我们从自然发病鸡的喉气管中分离到一毒株 ,命名为ＩＬＴ ＰＴ。1　材料和方法1 1　材料　　病料 :分离病毒材料采自平顶山市某养鸡场病鸡的喉头和气管组织。1 0日龄ＳＰＦ鸡胚及标准阴性血清 :购自河南农业大学微生物教研室。试验鸡 :经血清学检查无ＩＬＴ抗体的 1 4周…     

鸵鸟传染性喉气管炎病毒的分离鉴定

本文为国内首次报道鸵鸟传染性喉气管炎（ILT）并分离到一株ILTV。该病症状以呼吸道症状为主，病鸵鸟呼吸困难，张口呼吸、咳嗽，咳出带血的渗出物，发病率78.9%，死亡率20％。经临床症状，病理变化观察，琼脂扩散试验以及人工接种试验确诊为ILT。并通过自制组织灭活苗，紧急预防接种等综合防制措施控制了疫情。     

鸡传染性喉气管炎病毒的分离和TK基因鉴定

从临床表现以呼吸困难、喉头出血为主要特征的某蛋鸡场患鸡喉头和气管等组织分离到一株病毒。该分离毒无血凝特性,应用检测ILTVTK基因的PCR能从分离毒中扩增出大小为427bp的特异性目的片段。测序结果与GenBank收录的ILTV不同毒株序列的同源性为100%。结果初步表明该分离毒为鸡传染性喉气管炎病毒(命名为ILTV-FJ)。     

鸡传染性喉气管炎病毒的分离与鉴定

传染性喉气管炎是由传染性喉气管炎病毒(ILTV)引起的鸡的一种急性、高度接触性呼吸道传染病.本病一年四季均可发生,以冬春季发病较为常见.2007年12月,新兴县周边一养殖户饲养50多日龄肉鸡最早发生一起疑似传染性喉气管炎病例,1个星期内迅速传染到其它几个临近养户,该病发病率较高,死亡率在8%左右.采集出现典型症状病死鸡的的喉头、气管、支气管、肺等组织进行实验室病毒分离,具体情况如下:     

一株禽多瘤病毒的分离鉴定及其VP1基因序列分析

从陕西某养鸟场发病鹦鹉幼雏体内分离到1株禽多瘤病毒(201808SX株),该病毒能在7日龄SPF鸡胚上繁殖,并呈现明显的胚体病变。通过克隆测序,获得了禽多瘤病毒(201808SX株)VP1基因全基因序列。同源性分析表明,201808SX分离株与不同地区不同时间APV分离株的VP1基因核苷酸同源性均较高,不低于99.4%,与2006年日本分离株、2009年中国潍坊分离株、2018年中国山东分离株和2018年中国C4-15分离株等同源性最高,均为100%。遗传进化分析表明,201808SX分离株在遗传进化上与2006年日本分离株、2009年中国潍坊分离株、2018年中国山东分离株、2018年中国C4-15株、2010年波兰分离株和2016年葡萄牙分离株处于同一小分支,均属于CladeⅡ分支。这是国内首次报道,将临床病料组织上清经卵黄囊接种7日龄SPF鸡胚成功地分离到APV,这为BFD的研究和防控奠定基础。试验结果也首次证实陕西地区虎皮鹦鹉中存在APV感染,丰富了国内APV流行的基础数据。     

鸡传染性支气管炎病毒SX01株的分离鉴定及M基因序列分析

本试验通过鸡胚矮小试验、血凝试验和RT-PCR等方法,从华北地区某鸡场发生疑似肾型传染性支气管炎的发病鸡群分离了1株鸡传染性支气管炎病毒,命名为SX01株.结果显示该分离株能引起鸡胚典型的临床症状;经1%胰酶处理后的尿囊液可凝集鸡红细胞,而未处理的则无血凝活性;利用RT-PCR对分离株M基因序列测定分析结果显示,SX01株的M基因核苷酸序列与GX-GL分离株同源性高达99.4%,与QX基因型毒株SDZB0808核苷酸同源性高达99.1%,与H120株同源性仅为90.0%,与BJ/00/02株M基因核苷酸同源性较低,为90.6%.遗传进化分析结果显示,该分离株与中国地方型分离株(GX-GL、SDZB0808、CK/CH/LJL/110302、DY07、IBVSX7)亲缘关系较近,位于同一进化分支;与H120代表的Mass型疫苗株的亲缘关系较远,是一株肾型传染性支气管炎病毒毒株.     

鸡传染性支气管炎病毒0801株的分离鉴定及S1基因序列分析

2008年1月,河北沧州某产蛋鸡场鸡群出现呼吸道症状,少数鸡只出现死亡,剖检发现鸡只肾脏肿大,呈“花斑肾”样,收集患病鸡只肾脏、气管等组织,进行病毒分离培养.经新城疫病毒干扰试验、血凝试验、动物回归试验、鸡胚交叉中和试验及分子生物学鉴定,证实分离到一株鸡传染性支气管炎病毒,并命名为0801;鸡胚交叉中和试验结果表明,0...     

鸡传染性喉气管炎及其防制

鸡传染性喉气管炎(ILT)是由鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)引起的鸡的一种急性接触性呼吸道传染病。主要以呼吸困难、结膜炎、喉部和气管黏膜肿胀、糜烂、坏死和大面积出血为特征,发病率接近100%,死亡率10%～40%,蛋鸡产蛋量明显下降。该病分布于世界各地,我国自上世纪50年代以来大     

禽传染性喉气管炎病毒TK基因狄高辛探针的研制及应用

应用狄高辛标记禽传染性喉气管炎病毒（ＡＩＬＴＶ）ＴＫ基因制备探针,经斑点杂交显色后,探针同以ＡＩＬＴＶ北京株为模板的ＴＫ基因ＰＣＲ产物及北京株核酸均呈阳性紫色斑点,而与正常尿囊液、新城疫病毒和火鸡疱疹病毒、禽传染性支气管炎病毒无反应,２株确诊为ＡＩＬＴＶ的野外分离毒也呈阳性。本研究结果表明,该ＴＫ基因探针是敏感和特异的,可用于禽传染性喉气管炎和其它呼吸道疾病的鉴别诊断。     

鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离及鉴定

本试验从天津某鸡场、呼和浩特市两个鸡场发病鸡群分离到３个肾型ＩＢＶ毒株，分别命名为Ｔ、Ｈ、Ｗ株，并对其培养特性、形态特性、血凝性、致病性、对新城疫病毒的干扰性等方面进行研究。结果表明，３个毒株很快适应于鸡胚，引起鸡胚出血、萎缩、绒毛尿囊膜增厚；３个毒株也适应于鸡胚肾、肺细胞，适应性有差异；病毒增殖后制负染样品，在电镜下观察，可看到直径约１００ｎｍ左右，病毒囊膜外有疏松刺突的冠状病毒。用接毒的肾、肺细胞制成超薄切片后电镜下观察，可看到胞浆内的典型的ＩＢＶ；分离株对鸡的红细胞无凝集性，但用１％胰酶处理后表现不同程度的血凝性；３个分离株均能抑制鸡新城疫病毒Ｂ＿１株在鸡胚中繁殖；分离株回归４２日龄雏鸡后从第３天开始发病，发病率为１００％，病死率为６０－９０％。