割手密(Saccharum spontaneum L.)幼叶的组织培养

研究了从割手密幼叶诱导愈伤组织的条件,试验表明,培养基以MS附加2,4-D1～4mg/L为佳,所接种的幼叶以4cm以内为适宜的区段。不同材料在诱导愈伤组织和分化成苗方面都表现出明显的差异,说明云南的割手密在生理和遗传上存在着丰富的种内变异.     

红树秋茄愈伤组织诱导的初步研究

以秋茄顶芽和幼叶为外植体研究了光照和黑暗条件下不同激素配比对愈伤组织形成的影响。结果表明,外源生长素对秋茄幼叶愈伤组织形成是必需的,1 mg/L 2,4-D或4 mg/L以上的NAA对愈伤组织形成有较好作用,添加一定量的外源BA有助于提高愈伤组织诱导率。2,4-D较NAA有较强的愈伤组织诱导能力。     

桂花愈伤组织的诱导与增殖

[目的]探索影响桂花愈伤组织诱导及增殖的激素组合。[方法]以紫银桂的幼叶、茎尖和幼胚为材料,对影响桂花愈伤组织形成和继代培养的激素组合进行研究。[结果]叶片、茎尖和幼胚在不同培养基中均能产生愈伤组织。在诱导培养基中NAA浓度为0.3 mg/L的条件下,当幼胚、幼叶和茎尖培养基中6-BA浓度分别为3.0、5.0和5.0 mg/L时,愈伤组织的诱导率最高。在诱导培养基中NAA浓度为0.5 mg/L的条件下,当幼胚、茎尖和幼叶培养基中6-BA浓度为3.0、3.05、.0 mg/L时,愈伤组织的诱导率最高。从节省成本的因素考虑,最适合愈伤组织增殖的激素组合应为6-BA 2.0+NAA 0.5 mg/L。[结论]该研究为桂花愈伤组织的诱导和增殖的进一步研究奠定了基础。     

香竹愈伤组织诱导研究

以香竹种子为培养材料进行愈伤组织的诱导和增殖,分析了不同激素组合对愈伤组织诱导和增殖的影响,并比较了香竹的种子、无菌幼根、无菌幼茎和无菌幼叶4种不同外植体诱导愈伤组织生成的效果。结果表明:香竹种子诱导愈伤组织较合适的培养基为MS+3.0 mg.L-12,4-D+0.5 mg.L-16-BA;香竹增殖愈伤组织较适合的培养基为MS+1.0 mg.L-12,4-D+1.0 mg.L-16-BA+0.5 mg.L-1KT;无菌幼根的根冠部位比幼茎和幼叶更易产生愈伤组织,而种子作为外植体效果最佳。     

小麦幼穗愈伤组织诱导与植株再生的研究

以 3个小麦品种的幼穗为外植体 ,选用 9种培养基 ,研究了影响小麦幼穗愈伤组织诱导和分化的因素。结果表明 :小麦幼穗愈伤组织诱导和再分化都存在基因型效应 ;外源激素的种类和浓度也是影响小麦幼穗愈伤组织诱导和再分化的重要因素。在愈伤组织诱导中 ,较低的2 ,4-D浓度 ( 0 .5～ 1 .0mg/L)也能达到较好的诱导效果 ,但 2 ,4-D最适宜的使用浓度为2 .0mg/L ,细胞分裂素KT或 6-BA不利于愈伤组织的诱导。     

攀西西南山茶幼叶愈伤组织诱导研究

[目的]探讨不同植物激素对西南山茶幼叶愈伤组织诱导的影响。[方法]以西南山茶幼叶为外植体，MS培养基为基本培养基，添加3种植物激素NAA、6-BA和2，4-D，浓度分别为0．5、1．0、2．0和4．0mg／L，研究在不同浓度植物激素配比条件下西南山茶幼叶愈伤组织诱导率及生长状态。[结果]单因子诱导西南山茶幼叶愈伤组织形成时，适当浓度的NAA、6-BA和2，年D均能起到显著的诱导效应，以0．5mg/L浓度的2，4-D的效果最好，所形成的愈伤组织黄绿色，疏松，生长状态最好。利于培养，但随2，4-D浓度增高会导致愈伤组织的褐化现象严重。组合因子诱导时，以NAA 1．0mg/L＋6-BA 1．0mg/L的诱导率最高，2，4-D0．5mg／L＋6-BA1．0mg／L诱导愈伤组织的生长状态最好，利于培养。[结论]该研究为将植物组织培养技术应用于攀西西南山茶的快速繁殖提供了科学依据。     

东方百合胚性愈伤组织诱导和植株再生研究

为建立东方百合元帅、提拔、西伯利亚的高频愈伤体系,以幼叶、花丝、生长点为外植体,进行了不同激素组合的MS固体培养基对胚性愈伤组织诱导及植株再生研究。结果发现,Picloram比2,4-D更有利于胚性愈伤组织的诱导,幼叶、花丝更能有效诱导出胚性愈伤组织和再生植株,生长点的出愈率较低。幼叶在MS＋2mg／L Pieloram培养基,花丝在MS＋2mg／LPicloraIn＋0．1mg／L ABA培养基,生长点在MS＋2mg／LPieloram＋0．03mg／LTDZ培养基上能高效诱导出愈伤组织,来自幼叶的胚性愈伤组织在MS＋1．0mg／LBA＋0．1mg／LKT＋0．1mg／LIBA培养基上能高频再生出芽,来自花丝的胚性愈伤组织在Ms＋1．5mg／LBA＋0．3mg／LKT＋0．2mg／LIBA培养基上能高频再生出芽。愈伤组织生长呈直线生长趋势。     

不同培养基对杜仲愈伤组织诱导和生长的影响

以MS、LS、B5、N6、H、Nitsch、White、WPM为基本培养基,分别添加1.0 mg/L NAA+0.3 mg/L BA,进行不同培养基对杜仲嫩茎及幼叶愈伤组织诱导的研究;以MS、LS、B5、N6、H、Nitsch、White、1/2 MS为基本培养基,分别添加0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L BA,进行不同培养基对杜仲嫩茎及幼叶愈伤组织继代培养的研究.结果表明,MS培养基有利于杜仲幼茎愈伤组织的诱导,而B5培养基不仅对叶的愈伤组织诱导有利,对茎和叶愈伤组织的继代培养也是最理想的.     

玉米幼胚和源于幼苗的幼嫩叶段愈伤诱导及其植株再生的比较

 【目的】以育种上常用自交系的幼胚和源于幼苗的幼嫩叶段为外植体,研究它们在愈伤诱导及植株再生之间的区别与联系,为建立以叶段为外植体的另一高效稳定的玉米组培体系提供技术参考。【方法】选用6个育种上常用自交系,以幼胚和幼嫩叶段为外植体分别进行愈伤诱导及植株再生,研究2,4-D对不同外植体初级愈伤组织诱导的影响,对不同来源的6个自交系分别统计诱导率及分化率,并观察愈伤组织的形态。【结果】不同外植体对2,4-D浓度的要求不同,且幼嫩叶段相对幼胚较难诱导愈伤且需要的2,4-D浓度更高。同一基因型的幼胚和幼嫩叶段形成的愈伤形态基本无区别,不同基因型之间愈伤形态有差异。不同来源的6个基因型的愈伤诱导率、分化率也存在差异。【结论】通过再生过程中幼胚和叶段多方面的比较,筛选到3个诱导率较高且愈伤形态优良的基因型齐319、Mo17和鲁原92。     

三裂叶豚草愈伤组织的培养

以三裂叶豚草子叶、下胚轴、幼叶作为外植体,以MS为基本培养基,探索了三裂叶豚草愈伤组织生长的最佳途径.结果表明:子叶为最佳外植体,愈伤诱导的最佳培养基为MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,同时也是愈伤组织生长最佳培养基.     

低温胁迫对割手密和斑茅游离脯氨酸含量的影响(Ⅱ)

研究了来自不同原生地甘蔗近缘野生种割手密、斑茅无性系叶片中游离脯氨酸(Fpro)的含量及其与低温的关系。结果表明,冬季割手密和斑茅叶片中Fpro的含量与其原生地的海拔、纬度之间呈极显著的正相关关系,冬季的Fpro含量平均值分别是夏季的11.4和7.7倍,导致Fpro积累的真正原因是低温;在持续低温胁迫条件下,割手密、斑茅叶片中Fpro含量呈波动式增长,在作变温处理时Fpro的消长是可逆的。叶片中Fpro含量与其抗寒性关系十分密切的特点,表明它可以作为甘蔗近缘野生种抗寒力鉴定的指标。     

割手密RAPD指纹图谱分析

 选用6个随机引物,对采自我国不同纬度、不同海拔高度、具有不同染色体数目和形态特征的32份割手密无性系作了多态性分析.并对各无性系的指纹图谱进行了聚类和相似性分析.结果表明,割手密野生种具有丰富的RAPD多态性,供试的32份割手密无性系可划分为9个类群.     

电解质渗漏法测定割手密抗寒性的研究

 用电解质渗漏法对云南割手密50个无性系进行了抗寒性测定,结果表明,割手密的电解质渗漏率:(1)随原生长地点海拔的上升而下降,相关系数r=-0.669,p<0.01;(2)随原生长地点纬度增高而降低,相关系数r=-0.551,p<0.01;在相近的纬度范围内,决定电解质渗漏率高低的因子是海拔;在相近的海拔范围内,决定电解质渗漏率高低的因子是纬度。     

电解质渗漏法测定割手密抗寒性的研究

用电解质渗漏法对云南割手密50个无性系进行了抗寒性测定,结果表明,割手密的电解质渗漏率:(1)随原生长地点海拔的上升而下降,相关系数r=-0.669,p<0.01;(2)随原生长地点纬度增高而降低,相关系数r=-0.551,p<0.01;在相近的纬度范围内,决定电解质渗漏率高低的因子是海拔;在相近的海拔范围内,决定电解质渗漏率高低的因子是纬度。     

四川割手密（Saccharum spontancum L.）同工酶研究

以四川省的48个割手密为材料,采用垂直板状聚丙烯酰胺凝胶电泳进行3种同工酶分析。结果表明,在酯酶、过氧化物酶、谷氨酸草酰乙酸转氨酶中,以过氧化物酶分析效果最佳,可作为甘蔗野生资源种群划分的生化指标。根据过氧化物酶谱特征,供试样本出现19个类群,反映了四川割手密的多态性、遗传差异和地理分布的特点。     

Energy Productivity Potential Assessment of Saccharum spontaneum L.Germplasm Resources

[Objective]The energy productivity potential of Saccharum spontaneum L.germplasm resources as energy plants was discussed in this paper.[Method]The energy productivity potential of Saccharum spontaneum L.germplasm resources collected from the wild was assessed from the aspects of cellulose,semicellulose,lignin and crude ash contents and caloric value.[Result]The total content of cellulose and semicellulose ranged from 41.75%to 69.13%,the lignin content ranged from 2.16%to 11.75%,the crude ash content ranged from 4.79%to 9.34%and the caloric value ranged from 16.00 to 17.69 MJ/kg among the 30 Saccharum spontaneum L.germplasms.Compared to other plants,Saccharum spontaneum L.had higher contents of cellulose and semicellulose,a higher caloric value but lower contents of lignin and crude ash.[Conclusion]From the perspective of producing fuel ethanol with lignocellulose,Saccharum spontaneum L.has a great potential for development as an energy plant.     

割手密种质资源的营养价值评价

测定43 份割手密种质营养期干物质粗脂肪粗蛋白中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、粗灰分钙和磷等8 个营养指标,以粗蛋白,粗脂肪中性洗涤纤维,酸性洗涤纤维和磷钙作为判断指标,用层次分析法对其营养价值进 行评价,结果表明,营养价值最高的为A49广西,其干物质粗蛋白粗脂肪粗灰分中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维 钙和磷的含量分别为32.35%,7.20%,4.06%,8.07%,75.81%,50.72%,0.23%和0.16%;营养价值最低的为A3(广东)其 干物质粗蛋白粗脂肪粗灰分中性洗涤纤维酸性洗涤纤维钙和磷的含量分别为32.24%,4.62%,0.51%,6.38%, 46.40%,40.02%,0.15%和0.09%,各种质材料间的粗蛋白含量差异显著,最高的A48(9.11%)是最低的A14(3.72%)的 2.4 倍并将43 份种质分为高营养型中等营养型和低营养型3 类旨在为割手密作为饲草应用提供理论依据。     

Nutritional Value Evaluation of Saccharum spontaneum L. Germplasm Resources

The contents of dry matter, crude fat, crude protein, neutral detergent fiber, acid detergent fiber, crude ash, Ca and P in 43 Saccharum spontaneum L. germplasms during the vegetative period were determined. Among them, the crude protein, crude fat, neutral detergent fiber, acid detergent fiber, P and Ca contents were treated as the judging indicators. The nutritional value evaluation was carried out with the analytic hierarchy process （AHP）. The results showed A49 （Guangxi） had the highest nutritional value. Its dry matter, crude protein, crude fat, crude ash, neutral detergent fiber, acid detergent fiber, Ca and P contents were 32.35%, 7.20%, 4.06%, 8.07%, 75.81%, 50.72%, 0.23% and 0.16% respectively. While A3 （Guangdong） had the lowest nutritional value. Its dry matter, crude protein, crude fat, crude ash, neutral detergent fiber, acid detergent fiber, Ca and P contents were 32.24%, 4.62%, 0.51%, 6.38%, 46.40%, 40.02%, 0.15% and 0.09% respectively. The crude protein content differed significantly among different germplasms. A48 had the highest crude protein content （9.11%）, and A14 had the lowest crude protein content （3.72%）. Based on the evaluation results, the 43 Saccharum spontaneum L. germplasms were divided into 3 groups： high-nutritional value type, moderate-nutri-tional value type and low-nutritional value type. We hoped to provide a theoretical reference for the application of Saccharum spontaneum L. as a forage grass.     

割手密硫酸 解糖化的研究

割手密是生物质产量较高的纤维素类植物,作为能源植物受到国内外的普遍关注。利用纤维素类材料生产燃料乙醇的过程中,秸秆的水解糖化是关键步骤。以割手密为试验材料进行单因素和正交试验研究浓硫酸和稀硫酸的浓度、试验时间、试验温度、液固比对割手密糖化处理的影响,筛选出浓硫酸和稀硫酸处理的最佳条件,将两段硫酸处理的最佳反应条件结合,即浓硫酸水解,液固比42∶1、浓硫酸浓度70%、水浴时间20min、水浴温度55℃;稀硫酸水解,液固比115∶1、浓硫酸浓度5.5%、水解时间155min、水解温度100℃。在此工艺中,还原糖得率为48.78%。该两段水解糖化法条件温和、操作简单,不需要高压,成本低廉,还原糖得率高,为割手密的进一步有效利用奠定了基础。     

割手密AFLP分子标记技术体系建立与优化

【目的】建立和优化割手密AFLP分子标记技术体系,为割手密遗传多样性分析、遗传图谱构建提供技术支持。【方法】以广西割手密GXS87—16、GXS85．30、GXS79—9、GXS96、GXS112、GXS212为材料,利用改良SDS法提取DNA,并用EcoR I和Mse I酶切,连接接头后,采用正交试验设计对影响预扩增反应和选择性扩增反应的主要成分如Mg^2＋、模板DNA、引物、dNTP、Taq聚合酶浓度进行优化。【结果】样品DNA用限制性内切酶＆0RI和MseI各3u于PCR仪过夜可完全酶切。经正交设计优化,较佳的预扩增体系包含0．4μL dNTPs（20mmol／mL）,1．6μLMg^2＋（25mmol／mL）,2．0μL EcoRI—P（5pmol／mL）,2．0IxLMseI-P（5pmol／mL）,1UTaq酶（1U／μL）,DNA模板稀释10倍;选择性扩增体系包含0．4μL dNTPS（20mmol／mL）,0．8μLMg^2＋（25mmol／mL）,1．0μL EcoR I—AAG（6pmol／mL）,1．0μL Mse I-CAG（6pmol／mL）,3U Taq酶（1U／μL）,DNA模板稀释20倍。以对优化反应体系扩增获得的PcR产物用5％变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染后,可获得清晰的多态性指纹图谱。【结论】建立的割手密AFLP分子标记技术体系具有扩增条带清晰、多态性丰富的特点,可为构建割手密高密度遗传图谱提供技术支持。