西洋杜鹃叶片离体培养及植株再生

以西洋杜鹃的嫩叶片为外植体,研究了其离体培养和植株再生的过程。结果表明：叶片愈伤组织诱导最佳培养基为Read＋ZT5．0mg／L,可用回归模型y=19．21＋7．32x1来估测西洋杜鹃叶片愈伤组织诱导情况。叶片愈伤组织增殖培养基同初代培养基,继代30d后体积可增为原来的3倍,重量增为原来的2．5～4．5倍。愈伤组织分化的最佳培养基配方为：Read＋ZT1．0mg／L＋NAA0．01mg／L,分化率为87．5％,分化出苗数在12—18株。生根培养基以Read＋IBA1．0mg／L＋NAA2．0mg／L＋ZT 0．2mg／L为好,生根率迭90％以上。炼苗基质选腐殖土：黄沙：珍珠岩：5：1：1为宜,存活率达88．33％。     

光叶楮离体叶片再生植株的研究

将光叶楮离体叶片为外植体．进行不定芽再生植株的研究。MS＋6-BA2．0mg／L（单位下）＋NAA0．1培养基。不定芽再生率达96％。继代繁殖培养基用MS＋6．BA1．0～1．5．配合NAA0．1～0．5效果好。生根培养基用1／2MS＋NAA0．3。生根率达70％以上。     

草莓离体再生研究新进展

对草莓离体再生研究中的一些新进展作了介绍,从TDZ的高效利用、AgNO3、活性碳、重金属离子等附加物的作用、光对叶片再生的影响等方面进行了探讨,还对影响外植体器官发生的生理因子如活性氧和抗氧化酶与再生的关系进行了分析。当前存在的问题主要在于积累的技术要点多是经验性的,对再生机理知之较少,有必要对再生机理及遗传转化相关研究进行深入的、综合性的研究。     

辣椒离体再生体系研究

以5个辣椒（Capsicum annuum L.）品种（系）为材料,针对不同基因型、苗龄、外植体种类、激素组合等因素对辣椒植株离体再生的影响进行了较为系统的研究,从“农城椒2号”、“农城椒3号”、“0127”、“0159”、“0171”等5个辣椒品种（系）中筛选出“农城椒2号”、“0127”、“0171”3个再生能力较强的基因型。确定了辣椒离体再生最适外植体为子叶,最适苗龄为12~14d。筛选出高效不定芽分化培养基（MS＋3%蔗糖＋0.6%琼脂＋5.0mg/L BA＋0.5~1.0mg/L IAA）,其不定芽诱导率可达98%。诱导出的不定芽转入MS＋3%蔗糖＋0.6%琼脂＋3.0mg/L BA＋1.0mg/L IAA＋2.0mg/L GA3＋10.0mg/L AgNO3 芽伸长培养基,不定芽伸长率最高可达47.1%。不定芽伸长后在MS＋3%蔗糖＋0.6%琼脂＋0.2mg/L IAA＋0.1mg/L NAA生根培养基上诱导不定根。待其长成发达根系后移栽大田成苗,建立了辣椒高效植株再生体系。     

姜薯高效离体再生体系的建立

为建立姜薯的高效离体再生体系,以姜薯的侧枝茎节为外植体,对影响植株离体再生的关键因素进行研究。结果表明,外植体最佳灭菌方式为75%乙醇消毒30s,结合0.1%升汞(加数滴吐温-20)浸泡11min;最佳初代芽诱导培养基为MS+0.8mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA,诱导率达80.0%;最佳继代增殖培养基为MS+1.2mg/L 6-BA,增殖系数达2.15;最适生根培养基为1/2MS+0.5mg/L NAA+0.2mg/L IBA+0.3g/L AC,培养30、50d后生根率分别达84.4%和98.9%;试管苗移栽于基质(珍珠岩:椰糠=1:1)后的成活率达80.0%以上;组培苗种植于大田,生长健壮,成功结薯。以侧枝茎节为外植体,经腋芽增殖,建立了姜薯高效离体再生体系,为姜薯的良种快繁、种质资源保存和品种改良打下了基础。     

梅花品种"美人"叶片离体再生体系建立

以“美人’梅离体培养的叶片为材料进行愈伤组织诱导再生研究，诱导过程分两步，第一步是愈伤组织的诱导，诱导过程中生长素2,4-D起了决定性的作用，并且以液体培养基为佳，而且暗培养的愈伤组织再分化率明显高于光培养。具体培养基为1／2WPM＋5mg／L 2,4-D；第二步是在愈伤组织诱导出之后，进一步诱导愈伤组织再生出植物，在经过7d液体培养基的诱导之后将离体叶片转入1／2WPM＋1．0mg／L 6-BA＋0．1mg／L NAA＋8mg／L AgNO3＋100mg／L水解乳蛋白培养，再分化率可以达到24．25％。愈伤组织分化出苗之后，进一步诱导生根，“美人”梅最佳生根培养基是1／2WPM＋0．5mg／L NAA。     

植物细胞中淀粉代谢与离体形态发生途径决定的关系

烟草愈伤组织在再生过程中淀粉的数量是继代过程中的８．２２倍,淀粉酶活性为４．４８倍;胡萝卜中则无显著变化,分别为０．９５和１．１３倍。再生过程中,烟草愈伤组织中淀粉粒的数量、淀粉酶的活性分别为胡萝卜的６．３７和６．１４倍;继代过程中二者无显著差异,分别为０．７４和１．５５倍。烟草细胞中的淀粉粒被Ｉ２－ＫＩ染成蓝色,于质体中单个存在,在细胞内分布不均匀,常绕细胞核聚集;有萝卜细胞中的淀粉粒被Ｉ２－ＫＩ染色紫色或红紫色,２～４个或更多个聚集子质体内,在细胞内基本均匀分布。对淀粉与植物细胞离体再生途径决定的关系进行了讨论。     

辣椒子叶离体培养再生植株

随着收集到的８个商品辣椒品种的子叶外植体在ＰＤ培养基上形成芽丛，转移到ＰＥ培养基上伸长为具２－３个节的茎芽，茎芽在ＰＲ培养基上生根，得到了再生植株。芽分化率达１００％，移栽成活率１００％。多植体切除芽后回到ＰＤ培养基上的反复操作可重复诱导芽的分化，提高繁殖系数。     

杏叶片离体繁殖研究

杏叶片培养可以产生不定芽，ZT与2，4－D配合能诱导出愈伤组织，其培养基为MS＋ZT4．0mg/L 2,4-D 3.0mg／L，但只有在KT与NAA配合使用时才能从叶愈伤组织中分化出少量不定芽，30g/L山梨醇对叶片愈伤组织分化不定芽的作用比同浓度的蔗糖强，愈伤组织第11次继代培养中，在NAA浓度一定（5．0mg/L)的情况下，随着KT浓度的增加，新愈伤组织产生率逐步增加，且愈伤组织幼嫩，茂密，第13次继代培养时，只有MS＋NAA6．0mg/L KT2.0mg/L 山梨醇30g/L及MS＋NAA5．0mg/L KT4.0mg/L＋蔗糖30g/L的培养基可以产生不定芽，产生率分别为6．67％和13．33％，叶片正铺与反铺对愈伤组织的诱导率均达100％，不仅正铺所产生的愈伤组织比反铺的重量大，而且只有正铺才能诱导出不定芽。     

杨树叶片高效离体再生系统的构建

利用速生杨树（Populus.tomentosa Car）叶片为外植体建立离体培养体系,结果表明,叶脉处和叶柄处,极易发生不定芽;芽大多是从叶片上直接产生;培养基中BA浓度是影响不定芽形成的关键;BA浓度在05~2.0mg/L范围内均有不定芽发生,BA 1.0mg/L与NAA 0.05mg/L搭配有利于不定芽的形成,培养基中添加GA3 0.1~0.2mg/L可以提高不定芽的发生频率,增殖培养基采用MS+BA 0.5mg/L+NAA 0.05mg/L+GA3 0.05mg/L,不仅能够快速增殖,而且芽苗粗壮,玻化率降低。生根过程采用过渡培养效果较好,ABT3生根粉的加入,使试管苗质量大为提高,在此基础上建立起杨树叶片离体再生系统,利用该体系能够获得高的芽苗再生频率,但是不同品种间略有差异。     

4个优良石榴品种叶片高频再生体系的建立

为提高石榴叶片再生率,增加再生芽数量及缩短再生周期,以‘泰山红’‘、泰山三白甜’‘、皮亚曼’‘、牡丹’4个石榴品种盆栽苗和无菌苗叶片为试材,研究培养基类型、生长调节剂配比、叶片来源和培养步骤对不定芽再生的影响。结果表明：MS是叶片再生最适培养基类型;无菌苗叶片比盆栽苗叶片更易再生不定芽;BA3.0mg/L+KT1.0mg/L+IBA0.3mg/L是叶片愈伤组织诱导、分化和不定芽形成过程中生长调节剂最佳配比;先在液体培养基上培养3~5天,再转至固体培养基比仅在固体培养基上效果更好,叶片再生率最高达98.47%,出芽数达7.51个。叶片不定芽的最佳单芽培养基和增殖培养基分别为B5+BA0.6mg/L+IBA0.5mg/L+椰汁100mL/L+PVP2.0g/L+GA31.0mg/L和B5+BA0.8mg/L+IBA0.5mg/L+椰汁100mL/L+PVP2.0g/L,增殖系数为5.56。适宜的生根培养基为B5+IBA1.0mg/L+椰汁100mL/L,生根率为89.63%。由此建立了石榴叶片高频再生体系。     

羊踯躅离体叶片再生体系的建立

为了建立羊踯躅规模化无性繁殖和高效遗传转化体系,以羊踯躅试管苗叶片为外植体,探讨了基本培养基类型、叶片切割方式、叶位、暗培养时间及不同激素组合等因素对叶片再生不定芽的影响。结果表明：WPM培养基为最适基本培养基。垂直于主脉切割一刀并去除叶柄和叶稍的叶片再生不定芽的频率最高。羊踯躅试管苗中、上部叶片的再生能力较强,其中第5和第6位叶的不定芽诱导效果最佳。初始暗培养有利于叶片再生,暗培养10~15天的效果最佳。诱导羊踯躅试管苗叶片再生不定芽的适宜培养基为WPM+TDZ 1.0 mg/L+IAA 1.0 mg/L,其不定芽分化率和平均分化芽数分别达到82.3%和7.2个。     

葱兰的离体培养及再生体系研究

为了快速获得健康的葱兰幼苗,通过优化离体培养条件,建立葱兰高效的离体再生体系。利用葱兰叶片、鳞叶和顶芽作为外植体进行了愈伤组织和植株再生体系研究。结果表明,顶芽为最适外植体;丛生芽诱导和增殖的最适培养基为MS+TDZ 0.5 mg/L +NAA 0.1 mg/L,其次是MS+6-BA 0.5 mg/L+ NAA 0.1 mg/L;生根培养基为1/2MS+ IBA 0.5 mg/L,生根率为100%,为葱兰的工厂化生产提供技术参考。     

影响梨叶片高频不定梢再生因素的研究

本文研究了基因型、基本培养基、植物生长物质、叶片接种方法及光、暗培养条件等因素对梨叶片不定梢再生的影响。基因型对叶片不定梢再生影响最大,安久和丰水的再生率最高,可达100%,其次为鸭梨,为80%,黄金梨的再生率最低,仅为27.3%。不同基因型其获得最高不定梢再生率所需附加的植物生长物质不同。TDZ比BA更有利于鸭梨叶片的高频不定梢再生,而BA更有利于西洋梨和砂梨叶片的不定梢再生。暗培养3周后再转光下培养比直接光培养有利于不定梢的再生,叶片接种方法对再生率无明显影响。     

十里香茶离体培养及再生体系研究

为了保护珍贵的十里香茶树资源,掌握利于十里香茶的最优组培条件,本研究对十里香茶组培过程中外植体类型、消毒时间、培养基添加物及培养条件进行了筛选。结果表明,采用轻微木质化的带腋芽茎段经升汞消毒15 min,接种后暗培养5 d,MS+0.2 mg·L^-1 NAA培养基中添加3 mg·L^-1 PVP+2000 mg·L^-1 Vc或者6 mg·L^-1 PVP+3000 mg·L^-1 AC,可在低污染率的前提下将褐化率降为10%左右,一定程度上解决了茶树组培中褐化率高的难题;采用1/8 MS+1 mg·L^-1 IBA培养基有利于外植体生根且增殖迅速。本研究建立了十里香茶的无菌苗离体培养及再生体系,可通过组培手段对其进行大量繁殖。     

迷人杜鹃和马缨杜鹃杂交种愈伤组织的诱导方法

杜鹃花新品种的培育需要时间较长,而从自然界中选择自然杂交种来培育,能够节省许多时间.贵州百里杜鹃自然保护区内马缨杜鹃和迷人杜鹃自然杂交的后代能产生更多花色,具有一定的观赏价值和研究价值.本试验以贵州省百里杜鹃景区迷人杜鹃与马缨杜鹃杂交种的花苞、芽、茎段和根为材料,筛选了一种诱导迷人杜鹃和马缨杜鹃杂交种的愈伤组织的方法....     

云锦杜鹃组培快繁技术研究

（1杭州植物园，杭州 310013；2浙江省农业科学院作物与核技术利用研究所，杭州 310021）     

Efficient In Vitro Shoot-regeneration Systems in Cassava (Manihot esculenta Crantz)

Two different protocols for in vitro regeneration of cassava using zygotic embryos and nodal axillary meristems have been developed. In both cases, buds were regenerated directly from excised explants without an intervening callus phase after a two-step culture procedure. In cotyledonary explants derived from zygotic embryos, prolific shoot formation occurred within 2—3 weeks on MS medium supplemented with 0.5—5 mg/1 BAP alone or in combination with 0.1 mg/1 NAA. Nodal explants with axillary meristems derived from aseptically grown seedlings or stem cuttings were used to initiate a round compact bulb-like structure on MS medium containing 10 mg/1 BAP. These latter structures, when cultured on MS medium supplemented with 0.1 mg/1 NAA, 1 mg/1 BAP and 0.1 mg/1 GA₃, produced multiple shoots. Somatic embryos isolated at the globular/torpedo stage from zygotic embryo explants were also capable of multiple shoot production on medium with 1 mg/1 BAP. Rooting of regenerated shoots exceeded 95 % in phytohormone-free MS medium. No change in their ploidy levels was observed. Therefore, the protocols developed should be of use in the particle gun and Agrobacterium-mediated genetic transformation of cassava.