离心速度与时间对奶牛隐孢子虫卵囊浮集效果的影响

采用饱和糖溶液漂浮法,选择不同离心速度(1000,1500,2000,2500,3000,3500r/min)与不同离心时间(6,9,12,15,18,21.24,27min)对同一隐孢子虫阳性牛粪卵囊浮集效果作了比较观察,F检验及多重比较.结果表明,在3000r/min转速条件下离心21min时卵囊浮集效果明显高于其它各组,此即为分离牛隐孢子虫卵囊较为理想的离心速度和离心时间.     

甘蔗汁澄清工艺研究

为了明确振荡工艺和离心工艺对甘蔗汁澄清效果的影响,采用单因素试验探讨了振荡时间、振荡温度和振荡速度对甘蔗汁澄清效果的影响,并利用L9(34)正交试验得出最优振荡条件组合;在最优振荡条件组合的基础上进一步考察了离心机的转速、离心时间和升降速度对甘蔗汁澄清效果的影响,并利用L9(34)正交试验得出最优离心条件组合。结果表明,最优振荡条件组合为:振荡时间60 min、振荡温度70℃、振荡速度150 r/min,各因素的主次影响顺序依次为振荡温度、振荡速度、振荡时间;最优离心条件组合为:离心机转速9 000 r/min、离心时间12 min、升降速度10档,各因素的主次影响顺序依次为离心机转速、离心时间、升降速度,在最优振荡条件和离心条件下,甘蔗汁的透光率达86.3%。     

脱毒桐饼(粕)蛋白质溶解度测定的适宜条件

通过研究脱毒桐饼 (粕 )不同重量和粒度、碱溶液的浓度及 p H值、搅拌时间与离心时间以及离心速度等对蛋白质溶解度的影响 ,确定了测定脱毒桐饼 (粕 )蛋白质溶解度的适宜条件。结果表明 ,其适宜的条件是 :脱毒桐饼(粕 )样品 1.5 g(± 0 .0 0 1) ,需置于 75 m l的 p H值为 13.8的 3% (w/ v) KOH溶液中 ,经磁力搅拌 30 min,取搅拌液5 0 ml于离心机内离心 10 min,转速为 30 0 0转 / min(Rpm) ,再取离心上清液 15 m l,通过凯氏半微量定 N法测定其蛋白质含量 ,最后计算脱毒桐饼 (粕 )蛋白质溶解度     

不同离心处理对低发芽率玉米种子发芽的影响

以一批已检测为低发芽率的玉米杂交种郑单958为试验材料,进行10种不同处理,研究离心对低发芽率玉米种子发芽势、发芽率、根长、根重以及苗长和苗重的影响。结果表明:不同离心处理对低发芽率玉米种子的发芽势和发芽率有显著促进作用,其中以10 000 r/min离心5～10 min效果最为显著。发芽7 d后的根长、根重、苗长和苗重以10 000 r/min离心5 min处理最好。     

方便面熟化度测试条件的优化

选取油面高度在23.0 cm制造出来的方便面面饼,测定方便面在不同脱脂时间、静置时间、水浴温度、离心时间下的熟化度。结果表明,方便面脱脂时间应该控制在120 min,脱脂后静置时间应该控制在通风橱静置60~90 min后测定,样品应置于(50±2)℃的恒温水浴振荡器中振荡,离心时间为10 min。     

热水解剩余污泥离心除沙试验研究

[目的]研究离心机转速的差异对热水解剩余泥沙分离效果的影响。[方法]两种不同含固率(TS)的热水解污泥(TS分别为13.22和29.42)分别在转速12 000、8 000、4 000、3 000、1 500 r/min条件下离心20 min,取上清液、污泥层和沙粒层样品测定含固率TS和挥发性固体VS。[结果]随着转速的提高,热解泥的泥水分离效果和泥沙分离效果逐渐变好。在离心转速达到8 000 r/min时,两种含固率的热解泥无机沙粒层的TS分别达到77.49%和78.22%,而相应的有机质含量(VS)则分别降为4.05%和5.13%。[结论]研究表明经8 000 r/min离心除沙即可取得较好的效果,因此经济合理的离心条件为转速8 000 r/min,持续时间20 min。     

菜豆叶片原生质体的分离条件

以菜豆幼嫩叶片为材料,研究了预处理、酶液组合、酶解时间、酶解方式、甘露醇浓度及纯化时的离心转速对菜豆叶片原生质体分离的影响。结果表明:菜豆叶片质壁分离1 h后,在2%纤维素酶+1%离析酶+10%甘露醇+0.1%BSA+5 mmol/L MES+10 mmol/L CaCl2·2H2O,pH为5.8的混合液中,(25±1)℃黑暗条件下振荡酶解12 h可获得大量有活力的绿色原生质体。纯化时400 r/min离心3 min效果较好。     

球囊霉素相关土壤蛋白提取条件的优化

探讨了高温灭菌时间、离心时间和土样质量3个提取条件对柑橘园土壤球囊霉素相关土壤蛋白(GRSP)含量的影响。结果表明,与常规提取方法相比,当土样重量为0.75g、灭菌时间为1h、离心时间为20min时易提取球囊霉素相关土壤蛋白含量达到最大值,在离心时间为10min时难提取球囊霉素相关土壤蛋白含量达到最高。不同类型的土壤GRSP提取还需要进一步校正。     

离心参数对猪卵母细胞早期去脂效果的影响

【目的】卵母细胞脂肪含量较高是影响猪卵母细胞和胚胎冷冻效果不佳的主要原因,离心去脂可以提高冷冻成功率。本研究选用不同离心参数对猪卵母细胞进行离心去脂,通过研究其对卵母细胞早期去脂效果及其去脂后克隆胚胎的体内外发育和冷冻的影响,筛选最适离心参数。【方法】设定不同离心参数对猪卵母细胞进行早期去脂,利用体细胞克隆技术构建重构胚,通过离心后卵母细胞脂肪层的分离、重构胚的卵裂率和囊胚率、冷冻—解冻后的存活率以及代孕母猪妊娠等分析重构胚玻璃化冷冻前后体内外的发育效果。【结果】离心转数为10 000 r/min、离心时间为20 min时,卵母细胞的早期去脂效果最好。早期去脂重构胚的卵裂率和囊胚率分别是65.38%和13.46%;冷冻—解冻的2~4细胞、5~8细胞、9~16细胞的重构胚的存活率和囊胚率分别为49.09%、52.75%、78.57%和12.72%、2.20%、21.42%,而且冷冻胚胎移植到代孕母猪体内后成功妊娠。【结论】本研究证明了猪卵母细胞早期去脂可直接用于胚胎冷冻,最适离心参数为10 000 r/min×20 min。     

矮牵牛叶肉原生质体分离条件的优化

以幼嫩叶片为试材,探讨了渗透压(甘露醇浓度)、水解酶浓度、酶解时间等关键因素对矮牵牛叶肉原生质体分离效果的影响。研究结果表明,以2%纤维素酶R-10+0.2%果胶酶Y-23+0.4%离析酶R-10+20 mmol/L 2-(N-吗啡啉)乙磺酸(MES)+0.1%牛血清白蛋白(BSA)+0.11%无水氯化钙(CaCl_2)为酶解液,在0.5mol/L甘露醇浓度下静置酶解5h,1 100r/min离心2min沉淀原生质体,原生质体产量及活性分别为2.90×106个/g和88.1%,可为后续原生质体培养及融合提供材料。     

鹿血总蛋白分离工艺参数研究

通过影响鹿血血浆和血细胞分离效果的单因素试验,确定切实可行的分离工艺。方法是以血浆得率、血浆中总蛋白浓度和血红蛋白浓度为指标,研究离心转速和离心时间对分离效果的影响。结果是在离心转速3500r/min,离心时长15min时,血浆得率高,血浆中总蛋白质量浓度高,血红蛋白浓度低,离心分离效果最好。并且该分离参数下分离成本低,分离效果好。     

碘乙酰胺和紫外线对烟草原生质体的钝化作用

【目的】探索烟草原生质体钝化的临界处理剂量,为不对称体细胞杂交技术改良和创新烟草种质奠定基础。【方法】以不同碘乙酰胺(IOA)浓度(0.1,0.25,0.5,0.75,1.0mmol/L)和3种处理方法(不静置直接700r/min离心5min,静置5min后700r/min离心5min,静置3min后700r/min离心2min),以及紫外线(UV)照射(2根15W紫外灯,距灯管25cm处照射0.5,1,4,5,7,10,15min)处理烟草原生质体,并进行融合培养,研究烟草原生质体钝化的临界处理条件。【结果】烟草原生质体对IOA十分敏感,以0.1mmol/L IOA静置3min后700r/min离心2min可使烟草原生质体钝化停止分裂,临界状态原生质体比例最高为92.9%;UV连续照射15min的烟草叶肉原生质体失活,但大多数原生质体处于临界状态,比例为91.4%;2种临界处理后的原生质体融合后形成杂种细胞,能进行正常的细胞分裂。【结论】0.1mmol/L IOA静置3min后700r/min离心2min或2根15W紫外灯连续照射25cm处的烟草原生质体15min,是烟草原生质体钝化的临界处理,2种临界处理后的原生质体融合体由于生理代谢上得到互补形成杂种细胞,恢复了分裂能力。     

冷冻前预处理对新西兰兔精液超低温保存品质的影响

以新西兰兔精液为研究对象,对新鲜精液采用不同的静置时间、离心速度、离心时间及精清留量进行处理,经过超低温保存后,通过测定精子活率、顶体完整性、质膜完整性来选择兔精液冷冻保存最近佳预处理方案。结果表明,精液离心前静置60~90 min再以1 000 r/min的速度离心,其冻后活率及复苏率明显优于其他静置时间;离心10 min时的效果优于其他离心时间;采用1 000 r/min的速度离心时,相同离心时间均较其他离心速率冷冻-解冻后精液活率、复苏率、精子质膜完整性和顶体完整性高;离心后,精清留量和精液的体积比为1∶1的冻后活率、复苏率、精子质膜完整性和顶体完整性优于精液与精清的体积比为0∶1、2∶1。     

黑果腺肋花楸原生质体分离研究

为建立有效的原生质体分离体系,研究了黑果腺肋花楸(Aronia melanocarpa)原生质体酶解分离纯化条件。结果表明:黑果腺肋花楸愈伤组织在20g/L纤维素酶+0.5g/L果胶酶+13%甘露醇+5mmol/LMES酶解液中黑暗静置酶解10h,可获得高产量高活力的原生质体;采用500r/min离心8min分离纯化效果最好;愈伤组织比组培苗叶片分离获得的原生质体产量与活力更高。     

抗Spodoptera f.病毒单克隆抗体的初步研制

本文介绍了 Spodoptera frugiperda 病毒多角体及病毒粒子的提纯方法。粗提材料先通过40%蔗糖,在10000r/min 下离心15分钟,随后悬浮于0.01M Tris 缓冲液,25～65%蔗糖的连续梯度中,于40000 r/min 下离心30分钟。取出多角体的条带,洗除游离残存的蔗糖,透析过夜。将多角体在4℃,0.01MNa_2CO_3,0.01MEDTA,0.17M NaCl,pH=1下,作用1小时,随后调节 pH 到8.5～8.9,2000g,离心10分钟。该制剂在4℃下,25～60%蔗糖梯度中,24000r/min,离心2小时。随后取出病毒粒子,重新悬浮于蒸馏水中,于—70℃下贮藏备用。每个 BALB/C 小白鼠免疫4～5次,最后一次注射是在融合前4～7天。将2×10~8脾细胞与2×10~7P_3×63或 SP-2骨髓瘤细胞混合,并用50%PEG(Sigma)融合,用间接酶联免疫法进行筛选阳性杂交瘤细胞,强阳性者进行克隆化。以多角体及病毒粒子为抗原者,均建立了10株能产生特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,该抗体的效价较高,并进行了血清学的分类。     

超高效液相色谱-三重四极杆质谱仪检测动物源性食品中氟虫腈及其代谢物

[目的]使用QuEChERS-EMR-Lipid前处理,超高效液相色谱-三重四极杆质谱仪建立动物源性食品中氟虫腈及其代谢物的检测方法。[方法]优化后的前处理条件:以乙腈作为萃取溶剂,摇匀后,旋涡振荡1 min,以10 000 r/min常温离心3 min,取5 mL上清液倒入已活化好的EMR-Lipid dSPE增强型脂质去除净化管并放入陶瓷颗粒,剧烈振荡3 min,以10 000 r/min常温离心3 min;上清液全部转移至EMR-Lipid Polish反萃取管中加入陶瓷颗粒并立即剧烈振荡,超声至管内粉末全部溶解,以10 000 r/min常温离心3 min,吸200μL到样品瓶中用超纯水定容到1 mL,旋涡振荡后上机检测。色谱条件:色谱柱为Poroshell 120EC-C_(18),流动相为甲醇-水,在4.6 min内4种组分分离良好。质谱条件:喷射流电喷雾离子源(AJS ESI);负离子模式同时扫描;多反应监测(MRM)采集方式。[结果]氟虫腈及其代谢物在0.1～20.0 ng/g均具有良好的线性关系,相关系数≥0.999,平均加标回收率为94.9%～113.0%,相对标准偏差为1.9%～4.9%,方法检出限为0.010～0.023 ng/g。[结论]超高效液相色谱-三重四极杆质谱仪适用于动物源性食物中氟虫腈及其代谢物的快速检测。     

牛精子不同获能方法对体外受精效果的影响（英文）

为了提高牛体外受精率,探讨牛冷冻精液不同获能方法对体外受精效果的影响,对牛冷冻解冻精液进行了两次离心获能法与一次离心加上游法获能对体外受精效果影响试验。结果表明,两次离心组受精率卵裂率(75.6±4.5)%与一次离心加上游法组受精卵裂率(76.4±1.9)%无显著差异(P0.05);二次离心组囊胚率(35.7±4.1)%与一次离心加上游法组(36.3±2.7)%差异不显著(P0.05)。而两次离心组却可以大大节省了体外获能时间。     

马尾松毛虫多功能氧化酶测定正交试验优化研究

应用L16(43)正交试验设计对影响马尾松毛虫多功能氧化酶细胞色素P450测定的因素PMSF浓度、酶原稀释比和离心速度进行优化研究。结果表明供试的16组复配组合中,组合A1B1D1(选用0.2 mol/L PMSF浓度、酶原稀释比为2∶1,离心速度1为5 000 r/min)最优,按照该组合的条件进行马尾松毛虫MFO酶细胞色素P450测定,效果最佳。     

HPLC测定大鼠全血中虫草素药代动力学方法的建立

建立一种灵敏、稳定的检测血液中虫草素及其代谢物的高效液相色谱方法,并报告采用该方法进行药代动力学的初步研究。大鼠全血0.5 mL,加入甲醇1 mL,涡旋振荡2 min,超声10 min,4℃条件下10 000 r·min~(-1)离心15 min,取上清室温条件下氮气吹干,用体积分数为0.06的乙腈溶液0.5 mL复溶,4℃条件下15 000 r·min~(-1)离心10 min,取上清过0.22μm微孔滤膜进行HPLC检测;色谱条件为Agilent TC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈/水,6:94(V/V),流速0.8 mL·min~(-1),柱温30℃,紫外检测波长259 nm。虫草素在0.1～5.0μg·mL-1浓度范围内线性关系良好,线性回归方程为Y=10.97X-11.73,相关系数r=0.998 0血液样品中虫草素在高、中、低浓度的回收率分别为99.63%、95.37%和93.26%。全血中虫草素的药物代谢动力学初步研究的结果为给药后10～120 min内均未检测到虫草素原型,相同色谱条件下,保留时间为8.8 min左右检测到一虫草素的未知代谢物,且该物质在30 min时含量最高,随后逐渐降低。对该产物富集后通过质谱检测得未知代谢物分子量为252 M。该方法灵敏度高,重现性好,可用于大鼠全血中虫草素的代谢研究;研究结果同时表明,虫草素在大鼠体内代谢速度快,按40 mg·kg~(-1)剂量灌胃,即使灌胃给药后10 min也未检测到虫草素原型。     

芸芥(Eruca.sativa Mill)总DNA提取方法及RAPD扩增体系研究

以芸芥9370为材料,在SDS法的基础上,通过改变离心时间,操作步骤,建立了一种较快速提取芸芥基因组DNA的方法。使用美国伯乐公司生产的Mycycler TM thermal cycler扩增仪,对影响RAPD扩增的因素进行了比较研究,确定了模板、10×buffer(主要含Mg2 )、、dNTPs、引物和Taq DNA聚合酶的适宜量和最佳的循环次数。试验结果表明在25μL体系中使用18.5μL ddH2O,2μL 10×buffer(主要含Mg2 ),2μLdNTPs,1μL引物,0.5μL TaqDNA聚合酶,1μL模板;反应条件为94℃预变性4 min,然后进行94℃50 s,38℃退火1 min 20 s,72℃延伸2 min,40个循环后,再在72℃延伸10 min,芸芥RAPD扩增效果较好。