喷雾干燥对人溶菌酶转基因山羊乳汁的影响

【目的】揭示奶粉制备过程对转基因山羊乳汁中表达的重组人溶菌酶(recombinant human lysozyme,rhLYZ)的影响。【方法】对表达有2mg/mL rhLYZ的转基因山羊乳汁进行了喷雾干燥,对获得的奶粉样品进行了溶解性,乳汁成分,蛋白组分以及溶菌酶活性的测定,对测定结果进行统计分析。【结果】喷雾干燥引发非脂固形物的损失率为42.05%;整个热处理过程引发可溶性蛋白损失率为25.3%;乳汁中rhLYZ的损失为51.1%,扣除总干物质的损耗,喷雾干燥过程引发了约17.7%的rhLYZ生物学活性损失。【结论】制备奶粉过程对转基因山羊乳汁中表达的人溶菌酶影响较小,喷雾干燥是人溶菌酶羊奶的一种可行的保存和加工方式。     

人重组溶菌酶对肉鸡营养消化及肠道组织结构的影响

研究人重组溶菌酶对肉鸡营养消化及肠道组织结构的影响,探讨其替代抗生素的可能性及其在肉鸡日粮中添加的最佳剂量。结果表明,添加0.2%人重组溶菌酶的促生长效果最好。     

人胰岛素原基因在转基因小鼠乳汁中的表达

将构建的绵羊 β-乳球蛋白基因 ( BLG)调控人胰岛素原基因的重组基因通过显微注射生产转基因小鼠。共移植 888枚注射 BLG-胰岛素原基因的小鼠卵 ,移植受体 31只 ,怀孕 1 4只 ,产仔 53只。PCR检测 51只 ,有 5只为阳性 ,并均为雌性 ,其中 2只小鼠泌乳 ,经放免检测小鼠乳汁中人胰岛素原的质量浓度分别为 37.44mg/L和 39.99mg/L。另外 3只异常消瘦而不孕 ,其中 1只极度衰竭而死亡     

人胰岛素原基因在转基因小鼠乳汁中的表达

将构建的棉羊β－乳（BLG）调控人胰岛素原基因的重组基因通过显微注射生产转基因小鼠。共移植888枚注射BLG－胰岛素原基因的小鼠卵,移植受体31只,怀孕14只,产仔53只,PCR检测51只,有5只为阳性,并均为雌性,其中2只小鼠泌器,经放免检测小鼠乳汗中人胰岛素原的质量浓度分别为37．44mg/L和39．99mg/L。另外异常消瘦而不孕,其中1只极度衰竭而死亡。     

重组人溶菌酶体外抑菌活性研究

以购买商品化的溶菌酶标准品作为对照,通过平板扩散法检测重组人溶菌酶(rhLYZ)在体外对几株致病菌及益生菌的抑菌作用,同时用梯度稀释法检测重组人溶菌酶的MIC和MBC。分别将重组酶和商品酶做梯度稀释后,滴加到涂布有一定量菌液的MH平板,通过平板扩散法测量各组抑菌环直径大小,从而判定其抑菌活性。结果表明,重组人溶菌酶抑菌活性显著高于标准溶菌酶,低质量浓度的重组酶即可对致病菌的生长产生抑制和杀灭作用。rhLYZ对金黄色葡萄球菌、致病性大肠埃希菌较为敏感,抑菌环直径达到15mm～18mm;对多杀性巴氏杆菌抑菌环直径则达到27.5mm。提示rhLYZ对金黄色葡萄球菌、致病性大肠埃希菌及多杀性巴氏杆菌等病原菌均具有较强抑菌活性。     

转人溶菌酶牛乳营养成分及食用安全研究

[目的]探究转人溶菌酶牛乳和非转基因牛乳的营养成分差异,以及重组人溶菌酶的食用安全性.[方法]通过测定转基因和非转基因组2种乳样乳常规、氨基酸和脂肪酸的含量,比较其成分差异.通过大鼠、小鼠急性经口毒性试验以及模拟胃肠液消化稳定性试验检测重组人溶菌酶的食用安全性.[结果]营养成分检测结果表明,转人溶菌酶牛乳和非转基因牛乳相比,细菌总数偏高,脂肪含量偏低,其他营养成分无明显的变化;食品安全评估说明重组人溶菌酶属于实际无毒蛋白,且无潜在的致敏性.[结论]该试验验证了转人溶菌酶牛乳的食用安全性.     

黑果枸杞多糖对菌群人源化小鼠肠道微生物调节研究

[目的]以菌群人源化小鼠(HFA-小鼠)作为模型,研究不同浓度黑果枸杞多糖对HFA小鼠肠道微生物的影响。[方法]征集一名健康志愿者,通过接种志愿者的粪便悬液构建HFA小鼠模型,将40只HFA小鼠随机分为4组,黑枸杞多糖低剂量组(CT+LPL)灌胃枸杞多糖50 mg/kg,黑枸杞多糖中剂量组(CT+LPM)灌胃枸杞多糖100 mg/kg,黑枸杞多糖高剂量组(CT+LPH)灌胃枸杞多糖200 mg/kg,正常对照组(CT)每天灌胃同体积的生理盐水。连续灌胃21 d,试验期间记录各组小鼠的体重变化,第22天处死小鼠后,取标本进行各项指标检测。[结果]CT+LPM组小鼠体重低于CT组,呈显著性差异(P<0.05),CT+LPM组HFA小鼠肠道中乳酸杆菌和双歧杆菌数量较CT组均增加,肠杆菌和肠球菌数量均减少,差异显著(P<0.01),CT+LPM组HFA小鼠肠黏膜sIgA含量极显著高于CT组(P<0.01)。[结论]黑枸杞多糖能够改善HFA小鼠肠道菌群环境,具有益生元作用,也能促进HFA小鼠肠黏膜sIgA的分泌。     

健康与腹泻幼犬肠道菌群的比较研究

通过对健康幼犬和腹泻幼犬的肠道菌群进行研究,对两者之间的差异进行探讨,以指导临床对腹泻的治疗。无菌采取健康幼犬和腹泻幼犬的粪便,通过选用不同选择性培养基,对其粪便微生物进行分离培养。比较两者菌群的差异,并筛选优势菌株,研究其生长特性以及通过生化试验进行确认。健康幼犬与腹泻幼犬粪便中常见细菌有肠杆菌、肠球菌、乳杆菌、双歧杆菌等,其数量的变化比较,腹泻幼犬粪便中肠球菌和乳酸杆菌的数量降低明显,双歧杆菌数量略有下降,肠杆菌的数量有不显著增加的趋势。肠道菌群失调易引起腹泻,临床上应正确治疗腹泻,避免滥用抗生素。     

利用转基因牛生产重组人乳铁蛋白研究

[目的]研究利用转基因牛生产重组人乳铁蛋白,为利用转基因动物生产药用或食用蛋白提供依据。[方法]对已获得的人乳铁蛋白转基因牛进行人工催乳,用乳成分分析仪分析了转基因对乳汁的影响,并利用放免法检测了重组人乳铁蛋白在转基因牛乳中的表达。[结果]重组人乳铁蛋白在牛乳中获得了高效表达,表达水平为(3.429±0.417)mg/ml。通过转基因牛乳的乳成分分析发现,转基因牛乳与常乳在乳脂、总蛋白、乳糖和干物质的含量上没有明显变化。[结论]重组人乳铁蛋白在转基因牛乳中获得了高效表达,为大规模生产重组人乳铁蛋白奠定了基础。     

“黑8”预混料——还猪群肠道健康

如今,面对养殖户的利益需求及当前复杂多变的疾病环境,多数饲料生产企业在饲料中不同程度的使用抗生素,最常见为抗腹泻及预防呼吸道疾病的药物,添加量甚至超过安全剂量好几倍,严重影响肠道中正常菌群的生长,导致猪肠道功能受到影响。猪群采食含抗生素的饲料后,体内病菌会产生严重耐     

Expression of recombinant human butyrylcholinesterase in the milk of transgenic mice

Butyrylcholinesterase (BCHE) is a natural bioscavenger that protects humans against organophosphate toxicity. Due to the limited yield of human BCHE (hBCHE) when purifying from human plasma, it is necessary to find an alternative method to produce this protein. One potential method is to produce transgenic livestock that make modified milk containing high concentration of hBCHE. In this study, we cloned the hBCHEgene into a human lactoferrin (hLF) bacterial artificial chromosome (BAC) construct to make a hLF-hBCHE BAC construct. Subsequently, we injected the BAC construct into pronuclei of mouse fertilized embryos and generated transgenic mice. Expression analysis showed that recombinant hBCHE (rhBCHE) was expressed efficiently in the mammary gland of the transgenic mice and the concentration of rhBCHE in the milk of individual mice ranged from 76±12 to 159±28 mg·L^-1. Protein function tests showed that rhBCHE has the same enzymatic activity as the native hBCHE. Our results pave the way for making transgenic livestock to produce large quantities of rhBCHE.