杜仲皮水提液对大鼠成骨细胞BMP2基因表达的影响

研究旨在观察杜仲皮水提液对大鼠成骨细胞BMP2基因表达的影响,为补肾中药治疗骨质疏松等骨科疾病提供基础数据,采用酶消化法分离大鼠颅骨成骨细胞,取第2代成骨细胞,加入不同浓度的杜仲皮水提液(3×10-1～3×10-5 mg·mL-1),提取细胞总RNA,采用实时荧光定量PCR法检测成骨细胞BMP2基因表达的变化.结果显示...     

镉对大鼠成骨细胞OPG/RANKL表达的影响

在大鼠成骨细胞体外培养过程中添加不同浓度的镉,利用xCELLigence细胞实时分析系统观察细胞指数、蛋白免疫印迹杂交检测核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)蛋白表达,研究镉对成骨细胞毒性的影响。结果表明:镉暴露可使成骨细胞指数降低,0.5μmol·L-1镉对细胞增殖和存活具有抑制作用,呈剂量-效应和时间-效应关系;随着镉染毒剂量的增加,RANKL蛋白表达量降低(P0.01);1.0μmol·L-1镉暴露组OPG蛋白表达量明显增加(P0.05),镉浓度增大则导致OPG蛋白表达量降低(P0.01或P0.05);OPG/RANKL比值升高(P0.01)。证明镉暴露通过RANKL/RANK/OPG系统调控骨代谢,效应可能与剂量有关。     

牛初乳提取物(BCE)对成骨细胞增殖及胎鼠骨骼发育的影响

ＮＩＨ小鼠孕期连续服用牛初乳提取物（ＢＣＥ）、活性钙和蒸馏水,孕后第１８天解剖母鼠,检查胎鼠骨骼发育情况。结果表明,ＢＣＥ能显著促进胎鼠骨骼的生长发育,比单纯补钙更有效。用离体培养的新生大鼠头盖骨成骨细胞检测不同浓度的ＢＣＥ和表皮生长因子（ＥＧＦ）的促细胞增殖作用时发现,ＢＣＥ浓度在２μｇ／ｍＬ至２０ｍｇ／ｍＬ之间递增时,其促细胞增殖作用随之加强,继续提高浓度则对细胞增殖产生抑制作用;不同浓度的ＥＧＦ也有促细胞增殖作用,但ＥＧＦ的剂量曲线比较平缓,提示ＢＣＥ的促细胞增殖作用是多种生长因子协同作用的结果。实验结果表明ＢＣＥ具有促进骨骼发育的作用。     

骨疏康含药血清对鸡胚成骨细胞增殖和AKP活性的影响

研究骨疏康含药血清对鸡胚成骨细胞的增殖和AKP活性的影响.ISA蛋鸡口服骨疏康后1 h、3 h、5 h采血制备血清,分别加入到鸡胚成骨细胞中,培养24 h、48 h时分别用MTT法和PNPP法检测成骨细胞的增殖率和AKP活性.结果显示,与对照组(仅给生理盐水)比较,骨疏康含药血清可促进成骨细胞的增殖和AKP的分泌,给药5 h采集的骨疏康含药血清作用最佳.表明骨疏康有利于成骨细胞的增殖、分化并提高活性,促进骨形成.     

氟化钠对小鼠成骨细胞中RANKL/OPG mRNA体外表达的影响

为探讨氟化钠对小鼠成骨细胞中核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）和骨保护素（OPG）mRNA表达比率的影响,选取新生小鼠颅盖骨,用胰蛋白酶-胶原酶消化法分离培养成骨细胞。取其第3代成骨细胞,在实验组培养液中加入不同浓度的氟化钠（10^-7、10^-6和10^-5mol/L）,并分别培养24、48、96和144 h,从细胞板贴壁细胞中提取总RNA,应用荧光定量RT-PCR方法检测细胞中RANKL与OPG mRNA表达比率的变化。结果显示,氟化钠增加了RANKL/OPG mRNA的表达比率,且呈明显的时间剂量效应关系。对照组和实验组在培养48 h时,RANKL与OPGmRNA的表达比率显著增加（P〈0.01）。本实验浓度的氟化钠能够增加小鼠颅盖骨成骨细胞中RANKL/OPG mRNA的表达比率。     

土壤养分因子对杜仲有效成分含量影响研究

[目的]筛选影响杜仲有效成分的主导土壤因子。[方法]采用HPLC测定贵州不同产地杜仲叶中绿原酸及黄酮类有效成分(芦丁、槲皮素、山萘酚)的含量,应用SPSS统计软件对贵州不同产地杜仲叶有效成分的含量和土壤养分的含量进行统计分析,计算各土壤养分因子与杜仲叶绿原酸及黄酮类有效成分含量的偏相关系数,建立杜仲有效成分含量与土壤养分因子的多元回归方程。[结果]杜仲叶中绿原酸含量的主要影响因子是土壤有机质;影响芦丁含量的主要是土壤全磷、有机质;影响槲皮素含量的主导因子主要有有机质、有效磷、FACT,其次是土壤铵态氮、pH、全氮;影响山萘酚含量的最大因子为有机质,其次为土壤有效磷、铵态氮和FACT。[结论]贵州不同产地杜仲有效成分含量差异显著,土壤养分因子对杜仲叶有效成分含量有很大影响。     

三氧化二砷对大鼠成骨细胞增殖及BMP-2的影响

[目的]观察不同剂量三氧化二砷(As2O3)对体外培养的大鼠成骨细胞增殖、骨形成蛋白-2(BMP-2)基因表达的影响。[方法]不同浓度(10、1、0.1μmol/L)的三氧化二砷作用于体外培养的成骨细胞48和72 h后,观察成骨细胞的形态,采用MTT法检测成骨细胞的增殖,并通过RT-PCR检测成骨细胞BMP-2基因的表达情况。[结果]10μmol/L As2O3组可见部分成骨细胞变圆变小,细胞核固缩、碎裂,细胞膜皱褶、凹陷;1μmol/L As2O3组成骨细胞数目众多和分裂相明显;0.1μmol/L As2O3组成骨细胞间连接紧密。10μmol/LAs2O3组大鼠成骨细胞OD值明显低于对照组,而72 h OD值低于48 h OD值,有显著性差异(P0.01);1μmol/L组As2O3OD值明显高于对照组,而72 h OD值高于48 h OD值,有显著性差异(P0.01);0.1μmol/L As2O2组72 h OD值与48 h OD值无显著差异(P0.05),且OD值与对照组无显著差异(P0.05)。RT-PCR结果表明,10μmol/L组72 h BMP-2基因表达明显低于48 h,且BMP-2的表达明显低于对照组,有显著性差异(P0.01);1μmol/L As2O3组72 h BMP-2基因表达与48 h无显著差异(P0.05),且BMP-2基因表达与对照组(P0.05);0.1μmol/L As2O3组72 h BMP-2基因表达明显高于48 h,且BMP-2的表达明显高于对照组,有显著性差异(P0.01)。[结论]As2O3对体外培养大鼠成骨细胞增殖和BMP-2 mRNA表达具有双向调节作用,并且呈剂量-时间依赖性。     

杜仲对体外培养大鼠骨髓基质细胞增殖和分化的影响

取30日龄SD大鼠的骨髓细胞,置于含20%小牛血清的DMEM/F12培养基中,37℃,5%CO2培养,传代3次后进行分化诱导,诱导培养基杜仲的浓度分别为4×10^-7、4×10^-6、4×10^-5,4×10^-4 g/ml。研究不同浓度杜仲对SD大鼠骨髓基质细胞增殖和分化的影响。结果表明,除4×10^-7、4×10^-6g/ml处理组外,其余处理显著抑制细胞增殖;4×10^-6～4×10^-4g/ml杜仲可提高骨髓基质细胞ALP的活性;在各诱导组中均可见到钙化结节,4×10^-6～4×10^-4g/ml杜仲处理组钙化结节最明显。     

骨保护素的研究进展

人骨保护素是肿瘤坏死因子受体超家族的新成员,作为破骨细胞形成、分化和调节骨吸收的重要物质,骨保护素的研究在骨质疏松、骨硬化病、类风湿性关节炎、骨肿瘤、心血管疾病等临床疾病的发病机制及治疗方面均取得了较大进展。对骨保护素的发展前景进行了展望。     

骨保护素的研究进展

人骨保护素是肿瘤坏死因子受体超家族的新成员,作为破骨细胞形成、分化和调节骨吸收的重要物质,骨保护素的研究在骨质疏松、骨硬化病、类风湿性关节炎、骨肿瘤、心血管疾病等临床疾病的发病机制及治疗方面均取得了较大进展。对骨保护素的发展前景进行了展望。     

HP-20型大孔树脂富集纯化桑白皮总黄酮的工艺优选

[目的]优选桑白皮总黄酮的富集工艺条件.[方法]以总黄酮含量和洗脱率为指标,采用单因素试验考察HP-20型大孔树脂的静态饱和吸附量、动态饱和吸附量、乙醇浓度和乙醇用量等工艺条件.[结果]桑白皮经醇提浓缩后,以HP-20型大孔树脂为吸附剂,以3 BV蒸馏水洗脱,浓度15％乙醇3 BV,浓度40％乙醇以2 BV/h流速进行洗脱,收集12 BV洗脱液,总黄酮纯度达到52.95％,总黄酮洗脱率为31.89％.[结论]HP-20型大孔树脂能够有效的富集桑白皮总黄酮,工艺操作简单、效果好.     

黄柏及其炮制品的抗痛风作用研究

[目的]研究对黄柏及其不同炮制品的抗痛风作用。[方法]以黄柏及其不同炮制品的提取物灌胃,观察提取物对大鼠的血清尿酸、肌酐浓度及关节肿胀指数的影响。[结果]与阳性对照组相比,黄柏及其不同炮制品均能明显降低高尿酸血症模型大鼠的尿酸和肌酐水平,抑制急性痛风关节炎模型大鼠的关节肿胀。[结论]黄柏在炮制前后均有不同程度的抗痛风作用,不同炮制方法对该作用影响不明显。     

牡丹皮本草学考证

查阅古文献记载,对牡丹皮进行名称、产地、原植物、药性以及功效与主治考证,并进行综合分析。牡丹皮以"牡丹"始载于《神农本草经》,历代本草所载尽管名称各异,但其产地、原植物特征及其性味归经和功能主治与现代牡丹皮基本相符。古本草中记载的"牡丹"即现在的中药"牡丹皮"。古文献记载其产地、原植物、药性及功效主治与现代基本一致。     

分光光度法测悬浮培养飞廉细胞中总黄酮含量

[目的]建立悬浮培养飞廉细胞中总黄酮的含量测定方法。[方法]采用分光光度法测定悬浮培养飞廉细胞中总黄酮含量。[结果]芦丁线性范围为0~0.6 mg(r=0.999 7),平均回收率为100.4%,RSD=1.5%(n=5)。[结论]该方法简便、准确,重复性良好,可作为测定飞廉细胞总黄酮含量的方法。     

超微粉碎对银杏叶中总黄酮溶出量的影响

[目的]研究超微粉碎对银杏叶中总黄酮溶出的影响。[方法]利用扫描电镜对银杏叶细粉和超微粉进行观察;采用分光光度法测定银杏叶细粉和超微粉中总黄酮溶出量。[结果]银杏叶超微粉在电镜下观察难以看到完整的细胞结构,绝大多数细胞破壁;银杏叶超微粉中总黄酮溶出量比细粉高(P<0.05);在超声波提取或简化提取(开水冲搅)下,银杏叶超微粉中总黄酮溶出量分别比细粉提高了10.0%和11.8%(P<0.05)。[结论]超微粉碎可提高银杏叶中总黄酮溶出量。     

厚朴叶的开发利用研究进展

综述了近年来对厚朴叶化学成分其及药理活性的研究现状,结果证明其中的总酚、挥发油、棕榈酮等具有明显的生物活性,从厚朴叶中提取的厚朴酚及和厚朴酚的含量因其不同的采收季节、不同产地和不同的提取工艺而有显著差别。介绍了厚朴叶在药用、日用化工、植物源杀菌剂的开发与应用研究进展。     

厚朴药材研究进展

就厚朴的分布、生物学特性、化学成分、药理作用及提取方法进行综述,以期为厚朴的开发应用提供依据。     

淡竹叶不同部位总黄酮含量的测定

[目的]比较淡竹叶不同部位的总黄酮含量。[方法]用75%的乙醇回流浸提2 h,用NaNO2-A l（NO3）3作显色剂,用紫外-可见分光光度计测吸光度,根据回归方程求出黄酮含量。[结果]淡竹叶不同部位总黄酮含量为：茎叶1.13%、须根0.51%、花序0.36%、块根0.21%。[结论]淡竹叶总黄酮主要集中在茎叶部位,占植株总黄酮量51.13%。     

基于星点试验设计法的牡丹皮中丹皮酚的提取研究

[目的]优化提取牡丹皮中丹皮酚的工艺参数。[方法]以丹皮酚产量为指标,以加水量、浸泡时间和蒸馏液体积为考察因素,采用design expert7.05数据处理系统对工艺参数进行预测分析和优化。[结果]最优提取工艺条件为:加水量为94 ml,浸泡时间为165min,收集蒸馏液体积为300 ml;在此条件下,丹皮酚的产量为16.42 mg/g。[结论]星点试验设计方法具有应用简便、预测性好等优点,可用于牡丹皮中丹皮酚提取参数的优化。     

超临界CO2萃取厚朴提取物的HPLC指纹图谱的研究

[目的]对CO2超临界萃取的厚朴提取物的HPLC指纹图谱进行研究。[方法]采用高效液相色谱;PhenomenexLuna 5u C18(2)100R(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱;以无水甲醇-浓度0.1%醋酸(74∶26,V/V)梯度洗脱,流速为1.0 ml/min;检测波长为280 nm;柱温35℃。[结果]在重现性试验中,图谱相似性均大于0.99,所以HPLC特征指纹图谱可作为控制CO2超临界厚朴提取物的质量标准;10批厚朴提取物相似度在0.9～1.0之间,表明厚朴SFE-CO2提取物质量均一、稳定。[结论]厚朴标准提取物的纯度非常高,主要有效成分厚朴酚和和厚朴酚的含量几乎达到100%,杂质成分的含量非常少。