宁夏农垦五个羊品种舍饲行为比较试验

针对宁夏农垦贺兰山农牧场种羊场舍饲的滩羊、小尾寒羊、特克萨尔羊、萨福克羊、无角道赛特羊，分品种进行24h行为规律观察。结果表明，采食、反刍、休息时间三者的比值为滩羊1：1．72：1．78，小尾寒羊1：1．68：1．75，特克萨尔羊1：1．71：1．72，萨福克羊1：1．71：1．77，无角道赛特羊1：1．71：1．73，各品种供试羊采食多集中在白天；反刍、休息多集中在夜间。在草料充足的情况下，各品种供试羊采食量占体重的百分比为滩羊5．3％，小尾寒羊5．1％，特克萨尔羊2．94％，萨福克羊3．65％，无角道赛特羊3．83％。     

德国美利奴羊在甘肃春季主要舍饲行为观测研究

对舍饲状态下的德国美利奴羊反复进行昼夜24 h连续观测。结果表明:德国美利奴羊昼夜采食时间为424.88±44.86(min),反刍时间为626.12±7.87(min),睡眠时间为188.50±43.28(min)。采食、反刍多集中于白天,采食、反刍、睡眠三者时间之比为2.25∶3.32∶1。     

舍饲羊疾病的预防

根据笔者多年从事养羊科研、生产工作和结合各大羊场饲养管理方法，将舍饲羊疫病的预防总结如下。     

舍饲羊传染病的预防

1严防羊只与外人和其它羊只接触,尤其要严禁其它养羊者和健康状况不明的羊只进入羊场及羊舍。2保持环境卫生,搞好消毒工作。圈舍、场地及用具保持干净卫生并定期消毒,保证羊场门口及羊舍门口的消毒池中有消毒液。及时消除粪便污物,并定点堆放和发酵腐熟。保证饲料、饮水洁净卫生。认真做好灭鼠、防蝇工作。3严禁从疫区引种和购买饲料、用品。在引进种羊或购买饲料、用品时,要对引购地区的羊病进行全面、详细地调查,以防误引或误购。4严格执行检疫制度,尤其在选购种羊时,一定要进行严格检疫,以免误将病羊引入。此外,新进羊只须隔离饲养,待确…     

宁夏农垦五个羊品种舍饲行为比较试验

针对宁夏农垦贺兰山农牧场种羊场舍饲的滩羊、小尾寒羊、特克萨尔羊、萨福克羊、无角道赛特羊,分品种进行24h行为规律观察.结果表明,采食、反刍、休息时间三者的比值为滩羊1∶1.72∶1.78,小尾寒羊1∶1.68∶1.75,特克萨尔羊1∶1.71∶1.72, 萨福克羊1∶1.71∶1.77,无角道赛特羊1∶1.71∶1.73,各品种供试羊采食多集中在白天 ;反刍、休息多集中在夜间.在草料充足的情况下,各品种供试羊采食量占体重的百分比为滩羊5.3%,小尾寒羊5.1%,特克萨尔羊2.94%,萨福克羊3.65%,无角道赛特羊3.83%.     

舍饲羊尿结石的预防措施

舍饲养羊是当前和今后养羊业的发展方向,由于羊本身的生理特性所致,舍饲羊最容易发生尿结石,这给舍饲养羊业带来巨大的损失,也成为舍饲养羊的一大障碍,所以舍饲养羊必须高度重视尿结石的预防,否则舍饲养羊难以成功.在此谈谈舍饲养羊尿结石的预防措施.     

染料木素对舍饲哈萨克羊乏情期诱导发情的作用

为了解染料木素对舍饲哈萨克羊乏情期诱导发情的调理作用,选用体况接近的15月龄半同胞哈萨克母羊18只,随机分成3个组。对照组饲喂基础日粮,高剂量组和低剂量组每天每只分别给予40、20 mg的染料木素,给药24 d。结果显示:高剂量组发情羊所占比例为50.00%,低剂量组16.67%,对照组无发情绵羊;与对照组和低剂量组相比,高剂量组显著提高绵羊体内雌激素水平(P0.05),与对照组相比低剂量组显著提高绵羊体内雌激素水平(P0.05);与对照组相比,试验组绵羊血清中总蛋白、白蛋白和血清钙含量均显著增加(P0.05)。结果表明:一定剂量的染料木素可以诱导舍饲哈萨克羊在乏情期发情。     

藏猪在舍饲条件下的行为观察

对藏猪在舍饲条件下的行为特性进行了观察，结果表明：一天内母猪走动时间约占15％－25％，臣息时间占75％－85％，一天内妊娠母猪排粪5－6次，藏母猪性成熟早，发情特征明显，情期长，青年母猪70－85日龄出现性行为，母猪产前20h开始出现闹圈等一系列产前行为，产仔持续时间1．9－4．2h，母猪一天哺乳25次，仔猪拱乳时间52－57s，母猪持续放乳15－26s，藏猪调圈或合群后经咬斗过程，在一周内建立新的位次序列，藏猪耐粗食，抗逆性强，对高原恶劣的气候条件有独特的适应能力，并具有良好的定圈能力。     

舍饲羊疫病综合防控

随着羊类产品市场价格的水涨船高,羊养殖规模也不断扩大,舍饲养羊可以节约养殖成本,避免羊群对植被造成的破坏.但是舍饲养羊如果管理不当、喂养不科学会导致各类疫病的发生,直接影响到养殖户的经济效益.因此分析舍饲养羊疫病发生的特点,并采取积极有效的综合防控措施对保证舍饲羊健康发展、提高养殖户经济效益具有重要意义.     

利用单碱基编辑系统定点编辑哈萨克羊MSTN基因的研究

肌肉生长抑制素（myostatin,MSTN）可负调控骨骼肌的发育。本研究利用胞嘧啶碱基编辑器（cytidine base editor,CBE）在哈萨克羊MSTN基因编码区提前引入终止密码子,以期达到敲除MSTN基因的目的。共设计2条靶向哈萨克羊MSTN基因不同外显子的sgRNAs,分别连接至pGL3-U6-sgRNA-PGK-puromycin质粒,并与pCMV-AncBE4 max-P2A-GFP质粒共转染哈萨克羊胎儿成纤维细胞,经Cruiser^TM酶酶切检测、Sanger测序和TA克隆分析。结果显示,成功筛选出可以在哈萨克羊MSTN基因外显子提前引入终止密码子的2条sgRNAs,其中STOPsg-1靶位点编辑效率为26.7%,STOPsg-2靶位点的编辑效率为6.7%。本研究成功运用CBE（AncBE4 max）技术在哈萨克羊胎儿成纤维细胞MSTN基因编码区实现定点编辑,为培育精确编辑MSTN基因的哈萨克羊奠定基础。     

哈萨克羊iNOS基因多态性与布鲁氏菌病的相关性分析

试验旨在探讨哈萨克羊诱导型一氧化氮合酶（iNOS）基因多态性与布鲁氏菌病的相关性。使用虎红平板凝集试验（RBPT）方法对231只哈萨克羊血清进行布鲁氏菌病血清学检测,参考GenBank中绵羊iNOS基因序列,针对其第6、7、8外显子及其邻近内含子片段设计引物,利用PCR-SSCP技术和DNA测序技术对231只哈萨克羊的iNOS基因进行多态性检测,分析其SNPs与哈萨克羊布鲁氏菌病易感性的相关性。结果表明,67只哈萨克羊为布鲁氏菌感染阳性,阳性检出率为29.00%。在哈萨克羊iNOS基因的外显子6和8片段上未检测到多态位点,在外显子7片段上检测出F7-T18054C和F7-C18084T 2个多态位点,在F7-T18054C多态位点上检测到3种基因型（TC、TT、CC）,优势等位基因和基因型分别是C型和CT型,其等位基因频率和基因型频率分别是0.660和0.446。在F7-C18084T多态位点上检测到2种基因型（CT、CC）,优势等位基因频率和基因型分别是C和CC型,其等位基因和基因型频率分别是0.946和0.892。F7-C18084T属于低度多态（PIC<0.25）,F7-T18054C属于中度多态（0.25 < PIC < 0.5）。相关性分析表明,F7-T18054C和F7-C18084T多态位点与布鲁氏菌病易感性无显著相关性（P>0.05）。试验结果表明,哈萨克羊iNOS基因F7-T18054C和F7-C18084T多态位点与布鲁氏菌病易感性不存在相关性。     

哈萨克羊INHβA基因克隆及生物信息学分析

试验旨在克隆哈萨克羊抑制素βA （inhibin beta A，INHβA）基因序列，并探究其序列特征及编码蛋白的结构和功能。根据GenBank中绵羊INHβA基因序列（登录号：NM_001009458.1）设计1对特异性引物，通过RT-PCR方法对哈萨克羊INHβA基因进行扩增，将获得的INHβA基因片段插入到pMD19-T载体中进行克隆测序，并结合生物信息学方法预测和分析其核苷酸序列、氨基酸序列、蛋白跨膜、蛋白修饰位点及二级结构、三级结构模型等。结果显示，哈萨克羊INHβA基因长1 278 bp，编码425个氨基酸。哈萨克羊INHβA基因与绵羊、牛、野猪、小鼠、人、大鼠、猫、兔、马的同源性分别为98.6%、97.7%、90.4%、87.9%、91.1%、88.2%、91.8%、89.8%和91.8%，表明INHβA基因在不同物种之间具有较高的保守性。INHβA蛋白分子式为C₂₀₇₂H₃₃₂₅N₆₀₃O₆₂₈S₂₆，分子质量为47.57 ku，理论等电点（pI）为7.87，不稳定系数为66.16，脂溶指数为78.47，亲水值为-0.507。INHβA是一种碱性不稳定的亲水性脂溶性蛋白，没有跨膜结构，含有信号肽。二级结构预测显示，INHβA蛋白α-螺旋、β-转角、无规则卷曲、延伸链分别占22.59%、4.47%、54.12%和18.82%。三级结构预测显示，INHβA蛋白以α-螺旋为主，是含有8种蛋白修饰位点的β-桶状蛋白。本试验结果为深入研究哈萨克羊INHβA蛋白功能及探讨INHβA基因对提高哈萨克羊繁殖力的影响提供参考数据。     

抑制素α主动和被动免疫对哈萨克羊生殖激素含量的影响

为了研究抑制素α（INHα）主动和被动免疫对哈萨克羊生殖激素含量的影响，本试验在对抑制素α重组质粒表达菌株进行诱导表达的基础上，将经纯化、鉴定的抑制素α重组蛋白免疫接种新疆双峰骆驼，制备驼抗抑制素α多克隆抗体，并对其进行纯化，检测抗体效价，验证抗体的特异性。之后选择3~5岁、发情时间相近并处于间情期的45只成年哈萨克羊随机分为3组，分别作为抑制素α多克隆抗体免疫组（A组）、抑制素α重组蛋白免疫组（B组）及对照组（C组），每隔10 d连续进行3次加强免疫，应用ELISA法检测在绵羊繁殖活动中具有重要功能的5种生殖激素：促卵泡素（FSH）、促黄体素（LH）、孕酮素（P₄）、雌激素（E₂）、抑制素（INH），并检测血液生化指标。结果显示，IPTG的最佳诱导浓度是0.6 mmol/L，在4 h时诱导出产量较高的抑制素α包涵体蛋白，纯化后的抑制素α重组蛋白纯度较高，并具有较好的免疫原性，经进一步验证发现，制备的抑制素α抗体效价为1：512 000，该抗体可与抑制素α重组蛋白特异性结合。说明成功制备了具有免疫原性的抑制素α重组蛋白和高效价的驼抗抑制素α多克隆抗体。免疫后A组LH、P₄含量和B组FSH、LH、P₄、E₂、INH含量与C组相比差异不显著（P>0.05），而A组FSH含量和E₂含量显著高于C组（P<0.05），INH含量显著低于C组（P<0.05）。通过血液生化指标检测发现，抑制素α蛋白和抑制素α抗血清两种免疫制剂免疫后，试验动物均没有出现不良症状。说明两种抑制素α抗原均可对哈萨克羊血液生殖激素的分泌产生良好效果，相比之下抑制素α抗血清免疫效果更佳。     

哈萨克绵羊DRB1基因外显子1和4多态性与布鲁氏菌病的相关性研究

试验旨在对哈萨克绵羊DRB1基因外显子1和4多态性与布鲁氏菌病的相关性进行研究。使用虎红平板凝集试验（RBPT）对试羊的血清进行血清学检测，参考GenBank中绵羊MHC ClassⅡ区DRB1基因序列（登录号：NC_040271.1），对其外显子1和4片段设计引物，采用PCR-SSCP和DNA测序技术对230只哈萨克绵羊的DRB1基因进行多态性检测，分析其多态位点与哈萨克绵羊布鲁氏菌易感性之间的关系。RBPT检测发现66只哈萨克绵羊为布鲁氏菌感染阳性，阳性检出率为28.7%。外显子1片段存在一个SNP位点（F1-G22A），测序确定两种基因型（GG、GA），优势等位基因和基因型分别为G、GG，F1-G22A多态位点的易感基因型为GA。卡方检验表明，哈萨克绵羊DRB1基因F1-G22A多态位点与布鲁氏菌易感性的相关性不显著（P>0.05）。通过生物信息学在线软件分析得出，F1-G22A多态位点导致了RNA二级结构的改变和最小自由能的降低，引起了蛋白质二级结构的改变。DRB1基因外显子4片段未发现SNPs。由此得出，哈萨克绵羊DRB1基因F1-G22A多态位点与布鲁氏菌易感性可能存在一定的相关性。     

基于微卫星多重PCR技术的特克塞尔×哈萨克杂交羊亲子鉴定

本研究旨在建立一套适用于特克塞尔×哈萨克杂交羊亲子关系的鉴定体系。试验选取11个微卫星标记位点进行组合扩增，通过优化微卫星标记位点组合的引物浓度、退火温度及反应体系等条件，建立了4组多重PCR体系，对多重PCR扩增产物采用毛细管电泳进行基因型分型，经PROSize3.0软件读取基因型分型结果，Cervus 3.0软件分析群体的遗传多样性，鉴定特克塞尔×哈萨克级进F2代（特哈级进F2）和横交F2代（特哈横交F2）的亲子关系。结果表明，特哈级进F2和特哈横交F2的等位基因数为180和140、平均等位基因数为16.364和12.727、平均观测杂合度（Ho）为0.533和0.544、平均期望杂合度（He）为0.807和0.831、平均多态信息含量（PIC）为0.783和0.803。对特哈级进F2和特哈横交F2两个品种70只候选亲本和64只候选子代的11个微卫星标记位点进行亲子关系鉴定，结果表明：当双亲基因型未知时的累积排除概率（CE-1P）为0.9995和0.9997；当单亲基因型已知时的累积排除概率（CE-2P）均达到1.0000；双亲基因型已知的累计排除概率（CEPP）均达到1.0000。说明选择的11个微卫星标记位点具有高度的多态性和较高的排除概率，适用于遗传分析和个体的亲子鉴定。利用微卫星标记建立的特克塞尔×哈萨克杂交羊亲子鉴定体系为分析绵羊群体遗传多样性和辅助育种工作提供了理论依据。     

The Correlation Between Polymorphisms of Exon1 and Exon4 of DRB1 Gene and Brucellosis in Kazakh Sheep

The purpose of this experiment was to study the correlation between exon 1 and 4 polymorphisms of DRB1 gene and brucellosis in Kazakh sheep.Using RBPT serological tests to try sheep serum,reference in GenBank sheep MHC Class Ⅱ area DRB1 gene sequences (Accession No.:NC_040271.1),the exon 1 and 4 pieces designed primers,using PCR-SSCP and DNA sequencing technology to 230 Kazak sheep DRB1 gene polymorphism detection,analyze its polymorphism loci and the relationship between the Kazak sheep Brucella susceptibility.The results showed that 66 Kazakh sheep were positive for Brucella in RBPT test,and the positive detection rate was 28.7%.There was one SNP locus (F1-G22A) in exon 1 fragment,and sequencing determined two genotypes (GG and GA),the dominant allele and genotype were G and GG respectively,and the susceptibility genotype of the polymorphisms of F1-G22A was GA.Chi-square test showed that there was no significant correlation between the polymorphisms of DRB1 gene F1-G22A and Brucella susceptibility in Kazakh sheep (P>0.05).According to the analysis of bioinformatics online software,the F1-G22A polymorphic sites lead to the change of RNA secondary structure and the decrease of minimum free energy,and lead to the change of protein secondary structure.No SNPs were found in DRB1 exon 4 fragment.Therefore,there might be a certain correlation between the polymorphisms of DRB1 gene F1-G22A and Brucella susceptibility in Kazakh sheep.     

藏东南河谷型绵羊舍饲和放牧行为的观察

通过对藏东南河谷型绵羊放牧行为的观察发现，全天放牧时间450min，其中游走68min，占15.22%；采食328min，占75.1%，休息36min，占8.35%。对藏东南河谷绵羊舍饲行为观察结果表明，昼夜24h中，采食293.8min，占20.4%；反刍398.0min，占27.6%；站立290.9min，占20.2%，卧息453.6min，占31.5%，饮水4.3min，占0.3%。在放牧条件下，用计数法人三测得绵羊的采食量为2.79kg，在舍饲条件下，日采食量为5.4kg，折算成风干物质分别为0.47和0.92kg，风干物质分别占活重的1.74%和3.41%。     

饲粮瘤胃降解蛋白质水平对哈萨克育肥羊瘤胃微生物氮合成量和氮沉积量的影响

本试验旨在研究哈萨克羊育肥羊在以低质粗饲料条件下,增加饲粮瘤胃降解蛋白质(RDP)水平对瘤胃微生物氮(MN)合成量和氮沉积量的影响。选取体重为(30.0±2.8)kg的哈萨克羊育肥羊公羔3只作为试验动物,分别饲喂RDP水平为7.94%(TMR1)、9.02%(TMR2)、10.10%(TM R3)的3种饲粮。按照3×3拉丁方试验设计进行试验,共3期,每期预试期10 d,正试期5 d。全部收集粪尿,测定尿中嘌呤衍生物(PD)排出量、瘤胃MN合成量和转化效率。结果表明:3种饲粮的干物质及有机物的采食量及表观消化率均无显著性差异(P0.05),但TM R3的氮沉积量、尿中PD排出量及瘤胃M N的合成量均显著高于TM R1和TM R2(P0.05)。饲粮RDP水平与MN合成量/瘤胃表观可消化有机物(RADOM)采食量之间存在显著的正相关(R2=0.999 4,P=0.010 9)。M CP的转化效率不受饲粮RDP水平影响(P0.05)。结果提示,低质粗饲料条件下,将饲粮RDP水平由7.94%提高至10.10%,能够提高哈萨克育肥羊氮沉积量,促进瘤胃MCP的合成,但未能显著提高MCP的转化效率。     

哈萨克羊杂交肉羊生产性能和血液生理生化指标的分析研究

本文试验探究特克赛尔羊、哈萨克羊、特哈杂交F₁,特哈杂交F₂、级近F₂、回交F₂、横交F₂等不同杂交模式下生产的公羔和母羔的生产性能分析和血液生理生化分析。研究结果表明,不同杂交代次绵羊群体血液生化指标存在差异,引入品种和杂交改良群体对本地适应性、抗病力和自身免疫力也存在差异。不同杂交方式产出的羔羊生产性能也有差异,杂交F₁代具有最明显的杂种优势,是最经济的杂交方式。为哈萨克羊的肉羊杂交育种提供理论依据。