马兜铃酸肾毒性为动物保健药敲响警钟

近年来，含马兜铃酸中草药肾毒性引起国内外医学界展社会的广泛关注，但在畜牧兽医界并未引起足够的重视。本文拟就马兜铃酸肾毒性事件的起因、含马兜铃酸中药的毒性作、在畜牧兽医中的应用情况及可能引发的问题作一综述．呼吁走出中药无毒的误区，为动物保健中药的安全合理应用提供参考。     

马兜铃酸肾纤维化毒性研究进展

马兜铃酸类中药导致肾纤维化的主要毒性成分为马兜铃酸,其所致肾损伤主要表现为慢性肾间质纤维化,临床转归为不可逆性。通过对肾纤维化及其修复过程的综述,为肾毒性的临床治疗和以马兜铃酸类中药为基础的新药开发提供思路。     

马兜铃酸Ⅰ致小鼠肾脏损伤的研究

本研究旨在观察马兜铃酸Ⅰ对小鼠肾脏超微结构及其相关生理指标的影响,初步阐明马兜铃酸Ⅰ对肾脏的损伤作用,为探讨发病机理提供理论依据。将20g左右的雄性昆明鼠随机分成4组,每日分别用低、中、高3个浓度的马兜铃酸Ⅰ溶液灌胃,对照组用等体积饮用水替代。第30天时观察各组的肾脏组织病理学变化,并检测血液和尿液中相关生理指标。随着给药剂量的增加,小鼠体质量呈加速下降趋势,初期尿量增多,后期尿量减少甚至出现无尿、肾性糖尿,而血清中TGF-β1的含量逐渐上升,小鼠红细胞、血红蛋白、单核细胞减少。与对照组相比,在皮质到皮髓交界处,试验组表现为近曲小管上皮细胞损伤,纤维化随着剂量的加大由皮质向髓质逐渐深入。电镜下观察可见细胞器损伤以及细胞核变异。马兜铃酸I对小鼠明显的剂量依赖性的损伤作用,主要导致肾小管间质病变,并改变其正常的超微结构。     

马兜铃酸Ⅰ对大鼠五脏的毒性及功能影响

【目的】探究马兜铃酸Ⅰ（aristolochic acid Ⅰ,AA-Ⅰ）对大鼠五脏（心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏）的毒性及功能影响,为今后马兜铃属类中药临床用药提供参考。【方法】将SD大鼠随机分为AA-Ⅰ给药组和空白对照组,给药组按20 mg/kg灌服AA-Ⅰ,连续7 d。于给药后0.25、0.5、1、2、24 h及停药后15 d,采集大鼠五脏组织。利用HPLC法检测各个时间点五脏组织中的AA-Ⅰ及马兜铃内酰胺Ⅰ（aristolactams-Ⅰ,AL-Ⅰ）含量,并检测大鼠五脏主要生理功能及病理组织学变化。【结果】给药后0.25 h,AA-Ⅰ主要分布于心脏、肝脏、脾脏和肺脏,同时在肝脏和脾脏中检测到AL-Ⅰ;给药后0.5 h,AA-Ⅰ主要分布于心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏,除心脏外,其余四脏中AA-Ⅰ含量均达到高峰值,且在肝脏、肺脏、肾脏中检测到AL-Ⅰ;给药后1 h,AA-Ⅰ主要分布于肝脏和肺脏,且在肝脏中检测到AL-Ⅰ;给药后2 h,AA-Ⅰ主要分布于心脏、肝脏、肺脏和肾脏,且在肾脏中检测到AL-Ⅰ;给药后24 h,AA-Ⅰ主要分布于心脏和肝脏,且在肝脏中检测到AL-Ⅰ;停药后15 d,五脏中均未检测到AA-Ⅰ及AL-Ⅰ。功能检测结果显示,大鼠灌服AA-Ⅰ可引起五脏发生氧化应激损伤。【结论】连续7 d给大鼠灌服20 mg/kg AA-Ⅰ,在五脏中均可检测到不同含量的AA-Ⅰ,且在肝脏、肾脏、肺脏及脾脏中检测到AL-Ⅰ。AA-Ⅰ可对五脏造成不同程度的损伤,其损伤与氧化应激有关。     

双甲脒对BRL 3A细胞的毒性作用

为了探讨双甲脒对BRL 3A细胞的毒性作用,本试验以0、20、40、60μmol/L的双甲脒分别处理BRL 3A细胞,MTT法检测细胞的相对活力,同时测定细胞培养上清液中细胞乳酸脱氢酶的活性,测定细胞内超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶和细胞内谷胱甘肽还原酶的活性以及还原型谷胱甘肽和活性以及丙二醛的含量。结果表明,与对照组相比,随着双甲脒浓度的升高,细胞活性显著或极显著下降(P0.05或P0.01),细胞培养上清液中LDH活性和细胞内GSH-Px、SOD、CAT的活性显著或极显著升高(P0.05或P0.01),MDA和GSH的含量增加,但差异不显著(P0.05),GR活性先升高后降低,差异显著或极显著(P0.05或P0.01)。结果表明,双甲脒对细胞有明显的毒性,并且氧化应激在其中起到了重要作用。     

去乙酰化蛋白酶1在马兜铃酸肾纤维化模型中对TGF-β1/Smad7信号通路的作用

检测马兜铃酸肾纤维化(AAN)模型肾组织中转化生长因子-p1 (TGF-β1)、Smad7、去乙酰化蛋白酶1(HDAC1)的mRNA和蛋白表达变化,探讨HADC1和Smad7的表达在AAN发展中的作用及两者间的联系.RTPCR检测TGF-β1、Smad7和HDAC1的mRNA表达,ELASA检测TGF-β1的蛋白表达,免疫组化定位和检测HADC1和Smad7蛋白,HE染色观察肾病理学改变.结果显示:AAN模型肾组织中TGF-p1和HDAC1mRNA表达呈时间依赖性升高,TGF-p1 mRNA表达较对照组有明显差异(P＜0.05),28 d开始AAN组中HDAC1mRNA增加,差异极显著(P＜0.01) ;Smad7 mRNA和蛋白表达均呈下降趋势,HDAC1蛋白免疫组化染色强度呈上调趋势,与对照组比较HDAC1阳性着色主要分布于上皮细胞和间质细胞的细胞核;肾脏病理表现为肾小管浊肿、变性和脱落等急性小管间质损伤,并随用药时间的延长呈进行性加重.本研究表明肾组织中Smad7弱表达可促进TGF-β1信号转导,HDAC1 mRNA和蛋白在肾组织中的高表达并参与TGF-β1/Smad7信号通路在肾纤维化发展中起重要作用,可能是潜在的新作用靶点.     

赭曲霉毒素A的毒性作用及致毒机理研究进展

赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)是一类免疫抑制类真菌毒素,主要由曲霉属和青霉属等产毒真菌产生。OTA作为食品和饲料原料的一种常见污染物,在各种粮食作物及其副产品中广泛存在,可对肾脏、肝脏、免疫器官、生殖系统等造成损伤,对动物和人类健康造成严重威胁,给畜牧养殖业带来巨大的经济损失。广泛存在的OTA可诱发机体产生肾毒性、肝毒性、免疫毒性、癌变畸变等,但其具体致毒机制目前尚不完全清楚。本文就国内外OTA研究情况进行归纳总结,为深入研究OTA对动物机能的毒性机制提供依据,为合理有效防控OTA损伤及保障畜禽健康养殖提供参考。     

T-2毒素致猪肾细胞损伤及氧化应激相关机理的研究

试验旨在研究T-2毒素对猪肾细胞(PK15)的毒性作用及其氧化应激反应。用不同浓度的T-2毒素处理细胞,通过MTT法检测细胞活性、测定细胞内乳酸脱氢酶(LDH)释放率及苏木素伊红(HE)染色观察细胞形态变化评估T-2毒素对细胞的毒性作用;通过检测细胞内的活性氧(ROS)水平、丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽(GSH)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性,评估不同剂量T-2毒素对细胞氧化应激水平的影响;检测Nrf2-ARE信号通路相关基因Nrf2、Keap1、GPx-1、Nqo1及Hmox1 mRNA的表达水平,分析T-2毒素对该信号通路的影响。结果表明,PK15细胞活性呈毒素剂量依赖性下降(P<0.05),LDH释放率呈毒素剂量依赖性上调(P<0.05);随T-2毒素剂量升高,细胞间隙逐渐增加,细胞固缩,细胞数量也随之减少。细胞内ROS阳性细胞率呈剂量依赖性升高,且T-2毒素为100 nmol/L时,ROS阳性细胞率显著高于其他剂量组(P<0.05);细胞内MDA含量与GPx活性呈毒素剂量依赖性升高(P<0.05),而GSH含量呈毒素剂量依赖性下降(P<0.05)。20、50及100 nmol/L的T-2毒素可显著上调Keap1、Gpx-1及Nqo1基因mRNA的相对表达量(P<0.05),且50 nmol/L的相对表达量最高。T-2毒素对K15细胞有毒性作用,可诱导其氧化损伤,且该氧化应激过程受Nrf2-AER信号通路调控。     

灌喂石榴汁对大鼠体重及粪便和盲肠中鞣花酸、尿石素A含量的影响

目的通过给SD大鼠灌喂石榴汁,研究其体重增加和粪便及盲肠内容中鞣花酸及尿石素A含量,为深层次研究鞣花酸及尿石素A的生物学作用提供数据支持。方法选择24只平均体重为（169.08±7.88）g的雄性SD大鼠,随机分为3组,每组8只,分别为对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组。在相同日粮基础上,试验Ⅰ组大鼠每天每只灌喂1.5 mL石榴汁,试验Ⅱ组大鼠每天每只灌喂3.0 mL石榴汁,并获取大鼠体重数据及采集粪便及盲肠内容物样品。结果①试验Ⅱ组大鼠日增重显著（P<0.05）高于对照组,比对照组高36.32%;②灌喂石榴汁显著（P<0.05）增加大鼠粪便鞣花酸和尿石素A的含量;③灌喂石榴汁后,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组大鼠盲肠中鞣花酸和尿石素A的含量均极显著（P<0.01）高于对照组。结论给大鼠灌喂石榴汁可以显著提高大鼠体重,显著或极显著提高大鼠粪便和盲肠内容中鞣花酸和尿石素A的含量,且灌喂3 mL/（只·d）效果最佳。     

IL-1β、S100A8/9、HIF-1α在大鼠早期心肌缺血致心源性猝死诊断的研究进展

早期心肌缺血导致的心源性猝死是法医实践中最常见猝死类型之一,具有死亡迅速特点,常规病理学检测手段缺乏特异性的形态学改变,且存在死后自溶等因素的影响。如何有效地识别并做出早期心肌缺血所导致的心源性猝死诊断是目前法医学诊断的重要难题,同时也是目前法医病理学研究的前沿课题。国内外许多研究通过人体样本和动物模型等寻找敏感、稳定、实用的心源性猝死后诊断的标志物,然而没有一个标志物既特异又敏感。本研究追踪了IL-1β、S100A8/9、HIF-1α这3个早期心肌缺血标志物的相关文献及最新进展,探究这3个早期心肌缺血标志物用于心源性猝死法医病理学诊断的可行性。     

山奈酚对三硝基丙酸诱导氧化应激胎鼠的影响

试验旨在研究山奈酚对三硝基丙酸诱导亲代小鼠氧化应激从而对子代胎鼠氧化应激和抗氧化能力的作用.42只亲代小鼠分为3组:对照组、氧化应激模型组、抗氧化剂组,试验重复3次.测定妊娠20d后的子代胎鼠肝脏、肺脏和心脏3个器官中的总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、总抗氧化能力(T-AOC...     

Sidr honey abrogates the oxidative stress and downregulates the hyaluronic acid concentration and gene expression of TGF‐β1 and COL1a1 in rat model of thioacetamide‐induced hepatic fibrosis

Liver fibrosis is a major health concern, which might progress to cirrhosis. To date, treatment trials rely mainly on the removal of the causative factor. The current study investigated the potential ameliorative role of sidr honey on thioacetamide (TAA)‐induced liver fibrosis in rats. Forty‐eight Wistar albino rats were equally allocated into four groups: control; sidr honey (5g/kg body weight (BW), orally); TAA (200 mg/kg BW, IP three times weekly/15 weeks); and sidr honey plus TAA at the same dose and administration rout. Rats co‐treated with sidr honey plus TAA revealed significant reduction in hepatic malondialdehyde, hyaluronic acid (HA), alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase, alkaline phosphatase, gamma glutamyl transferase, direct bilirubin, and hepatic mRNA expression of transforming growth factor (TGF)‐β1 and collagen type I alpha 1 chain (COL1a1) compared to TAA‐exposed rats. In addition, the hepatoprotective potential of sidr honey was indicated via improvement of histopathologic picture of hepatocytes and upregulation of total antioxidant capacity, reduced glutathione, catalase, glutathione peroxidase, superoxide dismutase, total protein, and albumin compared to TAA‐treated rats. In conclusion, daily administration of sidr honey (5 g/kg BW) is a promising natural antioxidant and fibrosuppressive agent that could ameliorate liver fibrosis via downregulation of fibrosis genes including TGF‐β1 and COL1a1 and HA and via enhancement of antioxidant system.     

维生素A对动物氧化应激的减缓作用机制

花生四烯酸(ARA)、活性氧和一氧化氮(NO)过量产生可以引起细胞氧化损伤。维生素A可以有效地调控ARA和NO的生成,在减缓氧化应激方面发挥着重要作用。本文主要从提高硒蛋白谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和硫氧还蛋白还原酶(TrxR)的表达和活性、通过TrxR/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径和核因子E2相关因子2(Nrf2)/GPx1/核转录因子-κB(NF-κB)途径对ARA及NO进行调节2个方面综述了维生素A对动物氧化应激的减缓作用机制,为深入研究维生素A对氧化应激的调节机制提供理论依据。     

镉对体外培养大鼠肾小管上皮细胞的毒性损伤及乙酰半胱氨酸的保护效应

在建立肾小管上皮细胞体外培养模型的基础上,通过在培养液中添加不同浓度的醋酸镉和乙酰半胱氨酸(NAC),用CCK-8法测定细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞内活性氧与线粒体膜电位,探讨了镉对体外培养大鼠肾小管上皮细胞的毒性损伤及NAC的保护效应。结果显示,作用12 h,各染毒组与对照组相比,细胞存活率和线粒体膜电位显著下降(P0.05或P0.01),细胞凋亡率、坏死率、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率和细胞内活性氧含量均显著升高(P0.05或P0.01),呈剂量-效应关系;而NAC保护组与染毒组相比,细胞存活率和细胞凋亡率均有显著差异(P0.05),细胞坏死率无明显差异(P0.05)。结果表明,本试验所选择的镉浓度引起的肾小管上皮细胞死亡是以凋亡为主,氧化应激直接参与镉对肾小管上皮细胞的毒性损伤,NAC对肾小管上皮细胞凋亡有一定的保护效应。     

乐果亚长期暴露对大鼠肝脏氧化应激的影响

本试验旨在研究乐果(Dimethoate)对大鼠的毒性作用,探讨乐果中毒的氧化应激机制.将24只SD大鼠分成对照组和3个染毒组,分别以0、1、6、30 mg/kg体质量剂量灌服乐果,连续灌服30 d后,测定血浆和肝脏胆碱酯酶(ChE)活性及肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量,并观察肝脏组织学和超微结构变化.结果显示,乐果染毒后大鼠血浆和肝脏ChE活性均极显著降低(P<0.01);大鼠肝脏SOD活性呈上升趋势,而GSH-Px、CAT活性随染毒剂量增加呈先下降后上升趋势;各染毒组肝脏MDA含量均呈上升趋势;组织学和超微结构检查显示肝细胞脂肪变性、凋亡等.结果表明.大鼠乐果持续染毒可以诱导机体脂质过氧化增强,并导致肝脏结构损伤,说明氧化应激在乐果的肝脏毒性中发挥重要作用.     

高山草原地区箭箸豌豆和垂穗披碱草脂肪酸构成研究

摘要：用GC MS方法对高山草原地区种植的豆科牧草箭筈豌豆333/A（Vicia sativa）和禾本科牧草垂穗披碱草（Elymus nutans）中脂肪酸含量进行测定,分别检测到12种和11种脂肪酸。两种牧草中脂肪酸总量分别为4.84和4.46 g/kg,都含有4种不饱和脂肪酸（UFA）,其含量次序同为：α 亚麻酸>亚油酸>油酸>棕榈油酸;饱和脂肪酸（SFA）中均为棕榈酸含量最高;UFA/SFA值分别为1.34和2.21。垂穗披碱草与箭筈豌豆333/A相比,其UFA含量高（11%）,SFA含量低（33%）,UFA/SFA是后者的1.65倍。本研究建立的气质联用测定脂肪酸的色谱条件,各组分分离效果好,结果重现性高。     

GPx-1在大脑多种疾病中的作用研究进展

谷胱甘肽过氧化物酶1（Glutathione peroxidase 1, GPx-1）以谷胱甘肽为底物催化过氧化氢、脂质过氧化物和过氧亚硝酸盐,降低细胞内氧化应激,参与大脑病理性氧化代谢的保护机制。本篇综述主要从GPx-1多态性与大脑多种疾病（阿兹海默病、帕金森病、癫痫、脑梗死等）的发展相关性认知出发总结了GPx-1基因介导的影响多种神经退行性疾病的作用机制。     

Effects of chlorogenic acid (CGA) supplementation during in vitro maturation culture on the development and quality of porcine embryos with electroporation treatment after in vitro fertilization

Electroporation is the technique of choice to introduce an exogenous gene into embryos for transgenic animal production. Although this technique is practical and effective, embryonic damage caused by electroporation treatment remains a major problem. This study was conducted to evaluate the optimal culture system for electroporation‐treated porcine embryos by supplementation of chlorogenic acid (CGA), a potent antioxidant, during in vitro oocyte maturation. The oocytes were treated with various concentrations of CGA (0, 10, 50, and 100 μmol/L) through the duration of maturation for 44 hr. The treated oocytes were then fertilized, electroporated at 30 V/mm with five 1 msec unipolar pulses, and subsequently cultured in vitro until development into the blastocyst stage. Without electroporation, the treatment with 50 μmol/L CGA had useful effects on the maturation rate of oocytes, the total cell number, and the apoptotic nucleus indices of blastocysts. When the oocytes were electroporated after in vitro fertilization, the treatment with 50 μmol/L CGA supplementation significantly improved the rate of oocytes that developed into blastocysts and reduced the apoptotic nucleus indices (4.7% and 7.6, respectively) compared with those of the untreated group (1.4% and 13.0, respectively). These results suggested that supplementation with 50 μmol/L CGA during maturation improves porcine embryonic development and quality of electroporation‐treated embryos.     

甘草查尔酮A对副猪嗜血杆菌感染猪肺泡巨噬细胞氧化应激的影响

【目的】 探究甘草查尔酮A对副猪嗜血杆菌感染猪肺泡巨噬细胞引发的氧化应激的影响, 为开发治疗副猪嗜血杆菌感染的新型药物提供参考。【方法】 利用支气管肺泡灌洗法分离猪肺泡巨噬细胞, 分为6组: 阴性对照组, 未感染副猪嗜血杆菌的猪肺泡巨噬细胞; 阳性对照组, 感染副猪嗜血杆菌的猪肺泡巨噬细胞; DMSO组, 猪肺泡巨噬细胞感染副猪嗜血杆菌后给予0.1% DMSO; 5、10和20 μg/mL甘草查尔酮A组, 猪肺泡巨噬细胞感染副猪嗜血杆菌后给予相应浓度的甘草查尔酮A。各组细胞培养24 h后, 用CCK-8法检测细胞活力, 用酶标仪或可见光分光光度计检测各组细胞上清中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性及丙二醛(malondialdehyde, MDA)、一氧化氮(nitric oxide, NO)和总抗氧化能力(total antioxidant capacity, T-AOC)水平, 用活性氧(reactive oxygen species, ROS)荧光探针(DCFH-DA)检测ROS水平。【结果】 与阴性对照组相比, 副猪嗜血杆菌感染组猪肺泡巨噬细胞活力均显著降低(P<0.05), 上清液中LDH活性均显著提高(P<0.05), MDA、NO、ROS水平及SOD活性均显著增加(P<0.05);与阳性对照组相比, 5、10和20 μg/mL甘草查尔酮A组猪肺泡巨噬细胞活力均显著提高(P<0.05), 上清液LDH活性均显著降低(P<0.05), 10和20 μg/mL甘草查尔酮A组MDA、NO和ROS水平均显著降低(P<0.05);5、10和20 μg/mL甘草查尔酮A处理组GSH-Px、SOD和T-AOC活性均呈剂量依赖性显著升高(P<0.05)。【结论】 副猪嗜血杆菌感染猪肺泡巨噬细胞导致氧化和抗氧化平衡失调, 5~20 μg/mL甘草查尔酮A可以降低细胞氧化应激反应。