用PCR和PCR-RFLP方法检测和鉴定进口海鱼中的异尖线虫幼虫

应用PCR和PCR-RFLP方法对厦门口岸进口的各种海鱼中的异尖线虫幼虫进行检测鉴定。结果在带鱼、竹荚鱼、金线鱼、大眼鲷和白姑鱼等海鱼中发现了简单异尖线虫、典型异尖线虫、对盲囊线虫和针回线虫等4种异尖线虫。带鱼和竹荚鱼的异尖线虫感染率达100%,竹荚鱼异尖线虫感染强度最高,白姑鱼感染率和感染强度相对较低。少数海鱼同时感染2种以上异尖线虫,从带鱼中同时检出简单异尖线虫和针蛔线虫,从竹荚鱼中检出简单异尖线虫、对盲囊线虫和典型异尖线虫。内切酶实验结果表明,应用限制性内切酶HinfI有效鉴别上述4种异尖线虫。     

用POR和POR-RFLP方法检测和鉴定进口海鱼中的异尖线虫幼虫

应用PeR和PCR—RFLP方法对厦门口岸进口的各种海鱼中的异尖线虫幼虫进行检测鉴定。结果在带鱼、竹荚鱼、金线鱼、大眼鲷和白姑鱼等海鱼中发现了简单异尖线虫、典型异尖线虫、对盲囊线虫和针回线虫等4种异尖线虫。带鱼和竹荚鱼的异尖线虫感染率达100％,竹荚鱼异尖线虫感染强度最高,白姑鱼感染率和感染强度相对较低。少数海鱼同时感染2种以上异尖线虫,从带鱼中同时检出简单异尖线虫和针蛔线虫,从竹荚鱼中检出简单异尖线虫、对盲囊线虫和典型异尖线虫。内切酶实验结果表明,应用限制性内切酶UinfI有效鉴别上述4种异尖线虫。     

进境海鱼异尖线虫幼虫感染情况调查

对来自15个国家和地区的78批次、31种、共255尾海鱼进行了异尖线虫幼虫的检验,100尾海鱼检出异尖线虫幼虫感染,总感染率为39.2%(100/255).16种海鱼检出异尖线虫幼虫,占所检鱼种的51.6%(16/31).共检获异尖线虫幼虫1 554条,平均感染强度为15.5条/尾.在体重≤100 g的海鱼中感染率最高...     

PCR-RFLP技术鉴别简单异尖线虫姊妹种的研究

为建立简单异尖线虫姊妹种分子生物学检测体系,以实现对其快速准确的鉴定,本实验对简单异尖线虫单条线虫总DNA进行PCR扩增,获得其rDNA-ITS序列,测序后与基因库中DNA序列比较,并根据rDNA-ITS序列比较结果鉴定线虫的种类,最后通过酶切技术获得线虫的PCR-RFLP图谱并以此作为线虫鉴定的分子标签。     

简单异尖线虫PCR检测方法的建立

根据GenBank上公布的简单异尖线虫核糖体DNA的内转录区(ITS-1、5.8S、ITS-2)序列设计特异性引物,对线虫样品进行PCR扩增并将产物克隆到pMD18-T载体后测序.结果表明,扩增的目的片段大小为430 bp,与预期扩增序列同源性为99%.该PCR检测体系的特异性强,不能在宫脂线虫、伪地新线虫DNA中扩增出条带;敏感性高,最低检测的DNA含量为0.4 Pg.该检测体系的建立为简单异尖线虫的检测、鉴定和流行病学调查提供了有力的技术支持.     

舟山口岸进出境海鱼异尖线虫幼虫感染调查

为了解舟山口岸进出境鱼类自然感染异尖线虫情况,取进出境各种鱼类1 152尾,解剖鱼体进行检查。检获虫体清洗后,用70%酒精固定,在显微镜下鉴定。结果显示检出645尾感染异尖线虫幼虫,总感染率为55.99%(645/1 152),发现检出10 065条异尖线虫幼虫,总感染强度为15.60(10 065/645)。调查结果表明,进出境鱼类异尖线虫的感染率较高,生食海鱼时,应注意对异尖线虫病的预防。     

在进境船舶中检出鱼异尖线虫

异尖线虫是寄生于海水鱼类的一种寄生虫,可引起人畜共患传染病-异尖线虫病,该病属于我国禁止进境的动物二类寄生虫病.本病为海洋自然疫源性疾病,周而复始地在海洋中的哺乳类、甲壳类、鱼类中发生.人类主要是生食海鱼,或将鱼的内脏用于喂养畜禽以及其他经济动物,而导致食入异尖线虫引起感染发病.本病的发生与寄生异尖科线虫的鱼类宿主分布及人们的饮食习惯有关,本病呈世界性分布,主要集中于北太平洋和北大西洋沿岸及其岛屿.而与我国相邻的日本、韩国、俄罗斯等国均有发生.1992年6月8日我国农业部根据《中华人民共和国进出境动植物检疫法》第18条规定,制定公布了《进境动物一、二类传染病、寄生虫病名录》,基于异尖线虫病对我国的公共卫生有着极其重要影响,首次将海水鱼类中的异尖线虫病列入我国二类传染病、寄生虫病名录,这也是其中唯一的寄生虫病.自依据《中华人民共和国进出境动植物检疫法》实施检疫以来,许多口岸纷纷从进口的或进境国际航行船舶食品舱中的海水鱼类体内检出异尖线虫,充分说明了必须加强对海水鱼类异尖线虫的检疫,防止本病传入我国,危害人体健康和水产养殖业的发展.连云港口岸于1998年5月首次从塞浦路斯籍进境国际航行船舶中的鳕鱼体内检出异尖线虫,之后在掌握了异尖线虫的正确检疫方法后,大大地提高了本病的检出率,到1999年11月30日止共检出异尖线虫139艘次,占我局一、二类、三类检疫疫情总数的54.3%.下面将1998～1999年连云港口岸进境船舶鱼异尖线虫的检出情况作一简要分析.     

入境海鱼中截获简单异尖线虫

1998年 3月～ 8月间 ,我局检疫人员从韩国、我国台湾省、日本入境旅客携带的海鱼中先后 5次检出国家禁止入境的 2类动物寄生虫病 -简单异尖线虫 (Anisakis Simplex) ,后经中国预防医学科学院寄生虫病研究所常正山研究员复核无误 ,为开展对外贸易 ,掌握疫情提供依据。自韩国入境     

简单异尖线虫过敏症研究进展

简单异尖线虫广泛存在于海洋动物并呈全球性分布,人因食用含有该线虫幼虫的生鱼或未煮熟的鱼产品而发生感染,其所引起的临床症状与虫体在消化道所处位置相关,主要引起肠黏膜水肿等过敏性症状。文章综述了该症流行病学、病理变化、症状、诊断、抗原、过敏原和预防措施等方面内容。     

冷冻海鱼感染异尖线虫严重

异尖线虫是人畜共患寄生虫病病源之一,当人误食含有活异尖线虫蚴的海鱼或软体动物即被感染,临床表现为急性腹泻。发病后容易误诊因而得不到及时治疗,严重危胁人体健康。自1998年以来,我们先后对到达长春火车站的30车冷冻海鱼进行了检测,发现严重感染了异尖线虫。     

广州口岸进口海鱼的异尖线虫幼虫感染情况调查

本刊讯2007年9月20-22日,由我国外交部和亚洲开发银行资助,农业部国际合作与交流中心承办的中亚国家兽医人员禽流感防控技术培训班结束了在北京的首轮培训,移师青岛,在中国动物卫生与流行病学     

简单异尖线虫肌钙蛋白类过敏原基因的克隆表达及免疫特性分析

为研究简单异尖线虫肌钙蛋白类过敏原的免疫特性,本研究提取了线虫总RNA,逆转录合成cDNA,PCR扩增肌钙蛋白类过敏原(Anis1)基因,克隆入pMD18-T载体,测序正确后将anis1基因亚克隆入带有组氨酸标签的表达载体pET-30a,转入大肠杆菌BL21中,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导,表达目的蛋白。通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,融合蛋白采用Western blotting分析。将纯化的Anis1重组蛋白免疫小鼠,分离血清,ELISA检测不同时期血清抗体效价。酶切和DNA测序结果显示重组质粒构建成功,并诱导出重组Anis1蛋白,重组蛋白经Western blotting分析证实为目的蛋白,纯化蛋白Anis1免疫小鼠后,与对照组相比,能产生较高的抗体水平。Western blotting分析显示,重组蛋白Anis1能被免疫血清识别,说明简单异尖线虫重组蛋白Anis1具有较好的免疫原性和免疫反应性。     

海鱼与异尖线虫病

简要综述了异尖线虫病病原的宿主、分布、危害 ,病原形态与结构特征、生活史、抵抗力及引起疾病的症状、病理变化和诊断方法。为异尖线虫病的诊断和进一步研究提供了资料。     

冷冻铜色纹狭鳕异尖线虫感染情况调查

本文对230尾冷冻铜色纹狭鳕异尖线虫感染情况进行调查,结果表明,172尾感染,感染率为74.8%。同时,对寄生部位进行统计并讨论了异尖线虫的危害性。     

乌鲁木齐市售海鱼中首次检出异尖线虫

为配合检疫部门检查,2017年8月对乌鲁木齐市市售海鱼随机采样,收集寄生虫并通过形态学和分子生物学进行鉴定。从鳕鱼块中发现5只线虫,虫体无胃盲囊和肠盲囊,黑色圆柱形的胃与Y型的肠管以斜线相连,尾短且有一圆塔形的尾突。PCR扩增ITS基因片段获得924 bp的基因序列,测序后经BLAST比对分析显示,与简单异尖线虫(Anisakis simplex)(GenBank登录号:KY275505.1)相似性达99%,确定分离出来的虫体为简单异尖线虫。本研究在远离海洋的乌鲁木齐市发现随海鱼运输携带到新疆的异尖线虫,系异尖属线虫在新疆的首次发现和报道。     

一种异尖科线虫rDNA-ITS序列的PCR扩增及分析

以日本进境的冻鳕鱼体内分离出的异尖科线虫为研究对象,用保守引物PCR扩增其核糖体DNA(rDNA)的内转录间隔区(ITS)和5.8S序列,并进行克隆、转化和序列分析,对样品进行分子鉴定。结果获得2个异尖科线虫样品的ITS及5.8 S rDNA序列,总长为991 bp,样品间序列相似性为99.0%。将序列与GenBank公布灰海鳗对盲囊线虫(Contracaecum muraenesoxi)的相关序列进行比较分析,结果显示与C.muraenesoxi的ITS1、5.8S和ITS2序列相似性高,分别98.0%～98.4%、100%和97.0%～98.0%,表明冻鳕鱼中分离的异尖科线虫属于C.muraenesoxi。     

对朝鲜进口鳕鱼异尖线虫及其活力的检测情况

随着“动物防疫法”的贯彻落实,以水生动物及其产品为主的检疫工作,已是我们铁路运输动物卫生监督检验的主要工作之一;尤其是开展寄生虫实验室检验工作为水生动物检疫工作提供了可靠的技术依据。最近我们仅从朝鲜进口的一批鳕鱼中检出大量的人鱼共同感染的异尖线虫,并对虫体进行了复苏观察,发现有少数活虫存在。仅将此次鳕鱼异尖线虫检出情况及活力检测情况报告如下：1材料与方法4月23日一26日,在对晖着外贸由图们发往宁波北的四车计12O吨鲤鱼实施检疫工作中,经现场感观检验比较新鲜,但发现冷冻不良;按规定抽取样品56条鳕鱼,直接…     

海产品中异尖线虫虫体成分PCR检测方法的建立

根据Gen Bank上公布的异尖科线虫线粒体COI序列设计特异性引物,对线虫样品进行PCR特异性扩增,扩增的目的片段大小为178 bp。结果显示,该PCR检测体系的特异性强,在其他非异尖科线虫和鱼肉DNA中不能扩增出条带;敏感性高,最低检测的DNA含量为0.36 pg/μL。该检测体系的成功构建为海产品中异尖线虫成分的检测、鉴定和流行病学调查提供了有力的技术支持。