红螯螯虾雄性生殖系统组织蛋白酶的初步研究

Cherax quadricarinatus）雄性生殖系统的组织蛋白酶（）进行了定性和定量分析,以探讨其在雄性生殖系统发育、精荚形成和精子释放过程中的作用。福林酚     

红螯螯虾输精管的结构及精荚的形成

运用组织学、组织化学和蛋白电泳等多种方法,对红螯螯虾输精管结构和精荚形成进行研究,结果发现,红螯螯虾精荚为一个连续的管状结构,由精子群、精荚基质和精荚壁组成; 精荚壁完全包裹精子,分初级、次级精荚壁2层,初级精荚壁由致密的纤丝组成,包裹精子和精荚基质;次级精荚壁由大小不等的小泡和疏松的纤丝组成,包裹在初级精荚壁之外。红螯螯虾输精管可分为前、中、后输精管。其上皮细胞均具有合成、分泌精荚形成物质的功能。前输精管卷曲段的高柱状上皮,分泌弱嗜酸性丝状分泌物,主要成分为中性粘多糖和蛋白质,形成均匀的初级精荚壁;中输精管的高柱状上皮,成丛状向内腔突起,具有分泌泡,其分泌物为嗜酸性、颗粒状物质,主要成分为酸性粘多糖和蛋白质,形成不均匀,黏性极好的次级精荚壁。后输精管结构较简单,肌层较前两者厚,同时管腔更大,其内精荚结构完整。后输精管与射精管相连处有一狭部,内有瓣膜相隔。射精管肌层厚,上皮明显突起,内无精荚。     

克氏原螯虾雄性生殖系统的超微结构

采用透射电镜研究了克氏原螯虾输精管的超微结构,采用石蜡切片法研究了克氏原螯虾的精巢、输精管和精荚的显微结构,并对精巢做了周年变化研究。结果表明,精巢由许多生精小囊和收集管组成,其结构呈葡萄串状,生殖细胞在生精小囊内发育成熟后由收集管输送到输精管;输精管有左右两条,相对于左侧输精管,右侧输精管比其约长一半,直径更大,卷曲程度更高,内容物含量更多,分泌细胞内的内质网含量更丰富;输精管根据形态不同分为前、中、后、生殖突4段,前中段具有分泌精荚壁物质的功能,后段具有储存、射出精荚的功能,末端生殖突为输精管出口;精荚呈长囊形或椭球形,由精子团、精荚基质和两层精荚壁组成,精子团偏向精荚一侧分布;克氏原螯虾雄虾精巢在一周年中的5—8月和10月处于精子细胞期的生精小囊比例很高,具有两个成熟时期。     

红螯螯虾雄性生殖系统的生化组成及精子代谢

通过对红螯螯虾（Cherax quadricarinatus）雄性生殖系统各组织的生化测定和乳酸脱氢酶（LDH）、琥珀酸脱氢酶（SDH）、延胡索酸还原酶（FR）的活性测定发现，红螯螯虾精荚（含精子）中的糖类和蛋白质含量丰富，分别为18．264和12．846mg／g（FW），总脂含量相对较低，仅为1．613mg／g（FW）；精子（含初级精荚壁）亦以糖类和蛋白质含量较高，分别达到5．227和8．475mg/g（FW），总脂含量因过低而未能测出，但精子的上述物质含量均显著低于精荚。酶活性测定发现，LDH酶活性以精巢、输精管和射精管较高，其中又以前输精管最高，为1426．258U／（g protein），可能与其功能相关；精子和精荚LDH活性极显著低于输精管，含量分别为87．375和36．215U／（g protein），两者间差异显著；FR活性在精荚和精子中较高，两者分别达到19．945和15．732U／（mg protein），显著高于生殖系统其他组织器官，但均未检测到SDH酶活性，故其SDH／FR的比值趋向于0。而生化物质的组织化学以及酶组化定位的结果进一步证实了上述结果。此外，LDH同工酶酶谱结果证实，精荚仅含有一条厌氧型LDHA编码亚基占优势的同工酶谱带。所有实验结果表明，红螯螯虾精子代谢的方式以厌氧型为主，其代谢底物主要为糖类，为厌氧型糖酵解，其代谢底物由次级精荚壁提供。     

澳洲淡水红螯虾繁殖特性及精荚显微结构的研究

报道了澳洲淡水红螯虾的繁殖特性及精荚显微结构，澳洲淡水红螯虾繁殖能力强，最适繁殖温度为２８￣３０℃，雄虾在第五对卡足左部内侧有雄性生殖孔，呈小球状。由雄虾射出的精荚中含有半透明管状结构，内含大量成熟精子，精子有一个椎形的头基部和细长的棘状部，雌雄交配过程是雄虾将成熟精荚射到雌虾蝮面，雌虾在２４ｈ内排卵并行受精。     

中华绒螯蟹雄性生殖系统生化组成及精子代谢

通过对中华绒螯蟹肝胰腺及生殖系统各组织生化成分和乳酸脱氢酶(LDH)活性的测定发现:总碳水化合物的含量以副性腺及输精管内容物(含精荚和精浆)较高,为33.456mg·g-1湿重和21.537mg·g-1湿重,肝胰腺、精荚及精巢的含量较低;碳水化合物中的糖原和葡萄糖含量分别以输精管内容物和肝胰腺最高,分别为0.385mg·g-1湿重和5.866mg·g-1湿重,精巢和肝胰腺中的糖原含量太低而无法检测到,精荚葡萄糖含量最低;蛋白质含量以肝胰腺最高,其余各部分含量显著低于肝胰腺;脂类含量以精巢和肝胰腺最高,其中的甘油三酯仅存于肝胰腺和精巢,且肝胰腺含量显著高于精巢。乳酸脱氢酶活性以贮精囊最高,精荚仅为中等,这可能与精荚壁的通透性有关,而精浆和肝胰腺显著低于其它组织。结果表明,中华绒螯蟹能量代谢主要物质是脂类和蛋白质;精子代谢的能量物质为碳水化合物,并由精浆提供,而其代谢的方式以厌氧代谢为主。     

环境条件对中国对虾交尾影响的试验观察↑（*）

本文报告了在室内条件下中国对虾雄性生殖系统不同部位精子形态、激活反应及外界环境对对虾交尾影响等的试验观察。雄性生殖系统被分为３部分：精巢（Ｔ）、输精管和精荚（ＴＡ）;输精管又分为前、中、后３段,其中的前（ＡＶＤ）、中（ＭＶＤ）、后（ＰＶＤ）３部分以及精巢和精荚被分别匀浆取样镜检,观察精子形态。结果表明：中国对虾雄性精巢、输精管、精荚及雌虾纳精囊内精子的形态、对卵水的激活反应能力有所差异,是一逐渐成熟过程;雄虾具有多次交尾能力,不同环境条件对中国对虾的交尾影响明显;当雌虾比例较高时交尾率也高;不同对虾密度对交尾影响不明显     

草虾人工受精技术简介

草虾的成本高,平均每尾亲虾都要100美金左右,且易脱壳。所以一旦没有交配,既使再度成熟,所产的卵亦不能受精,亲虾将成为无用。为了充分利用亲虾,采取人工受精,移植精荚、输精管的办法可提高产卵受精率,借以提高孵化率达到多次利用的目的。 一、雄性生殖器官: 由于要移植精荚、输精管,所以详细介绍一下雄性生殖器官的构造: 1.生殖巢:雄性草虾的生殖巢由精巢、输精管、射精管、贮精荚囊、生殖孔组成。精巢位于头胸甲胃域～心脏域正下方,肠将其分成左右两片,每片8叶,输精管与精巢相连,自左右第4叶精巢下方成急速弯曲,最粗部位直径达3.25毫米突出肝胰脏后方并与之成直角,输精管内充满粘着性分泌物将精子群包围,呈白浊部分为精子群,输精管末端急速呈细管     

[4]东海三疣梭子蟹精子发生及精荚形成

为探究东海三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus Miers,1876)雄性群体的性腺发育规律,通过定期采样,运用形态学、组织学方法对东海三疣梭子蟹精子发生及精荚形成过程进行了研究,并结合精小叶生殖节段法对处于不同发育阶段的精巢进行了定性分析.结果表明,三疣梭子蟹精巢属于叶型,由精小叶和精小管组成的叶状管交织而成.精子发生过程与其他高等短尾派蟹类相似,精子成熟后即进入精小管中.输精管可能起源于精小管.三疣梭子蟹精巢和输精管的发育存在一定的年际变化.4-5月份,精巢小叶内精原细胞占优势,输精管内精荚零星分布;6-7月份,精母细胞与精细胞比例增加;8月份精母细胞为主.到了9月份,整个精巢完全被精细胞等发育程度较高的精小叶所占据,输精管内充满精液和精荚,为即将到来的交配季节做好准备.三疣梭子蟹交配活动主要集中在10月份.12月份精巢精小叶中出现游离精子.此后,精巢逐渐退化(1-3月),但输精管中一直储存着精液和精荚.三疣梭子蟹精荚形成过程始于前输精细管,精荚膜两层,分别由来自前输精细管分泌的第一种不定物质和其中、后端分泌的第二种不定物质.精荚内的基质可能直接源于精巢的精小叶部分.输精管中的强嗜酸性颗粒与第二种不定物质有融合作用,使输精管中贮存的精荚膜嗜酸性.     

红螯光壳螯虾(Cherax quadricarinatus)酚氧化酶原基因的克隆与表达分析

为深入了解红螯光壳螯虾酚氧化酶原(proPO)基因的非特异性免疫机制,利用RACE技术从红螯光壳螯虾血细胞中克隆到酚氧化酶原基因cqproPO,cqproPO基因cDNA全长为2 962 bp,开放阅读框为1 998 bp,编码665个氨基酸,其结构中含有两个铜离子结合位点,预测分子量为75.86 ku;同源性比对结果显示,红螯光壳螯虾CqproPO与克氏原螯虾酚氧化酶原的同源性最高为79％,其次是淡水螯虾74％、挪威龙虾69％、美国龙虾67％等;进化分析发现CqproPO与克氏原鳌虾、淡水螯虾、挪威龙虾、美国龙虾等的酚氧化酶原亲缘关系最近;Realtime-PCR实验结果表明,CqproPO在血细胞中表达水平最高,其次是肠、触角腺、鳃等;在肝胰腺中有适量表达;WSSV感染后红螯光壳螯虾CqproPO mRNA在血细胞、肝胰腺和鳃组织中具有不同的时空表达趋势,但感染组和免疫后感染组mRNA表达量分别在感染后12h和24 h达到最大值,且在3种组织中2个感染组的CqproPO表达量为对照组的1.3 ～2.55倍,显著高于对照组(P＜0.05),之后cqproPO基因的转录水平明显下降.免疫后再受病毒感染的虾,CqproPO mRNA的表达量在3种组织中总体高于感染组,感染7d后的免疫保护率达到51.86％,表明免疫增强剂可使机体的抗病毒能力增强,对防御WSSV感染具有一定的免疫保护作用.