奶牛胎盘还原性多肽不同蛋白酶酶解方法建立与优化

为高效制备奶牛胎盘还原性多肽,试验选择自然分娩脱落健康中国荷斯坦奶牛新鲜胎盘,冰浴条件下12000 r·min-1匀浆化,分别采用木瓜蛋白酶和胃蛋白酶酶解,以奶牛胎盘组织匀浆为底物,基于Box-Behenken中心响应法,在底物浓度10％、30％、50％,酶底比1％、3％、5％,酶解时间3、5、7 h条件下制备胎盘多肽...     

黄粉虫胰蛋白酶酶解工艺的研究

以黄粉虫为原料,以水解度(DH)和水解多肽液的还原能力为指标,研究胰蛋白酶法制备黄粉虫多肽的工艺条件。通过单因素试验,初步确定pH、温度、酶用量、固液比的正交试验水平;在单因素试验基础上设计正交试验,分析各因素对酶解反应的影响及确定酶解反应的最佳工艺条件。结果表明:pH对酶解反应的影响最大,其次是温度和酶用量,固液比对酶解反应的影响最小;酶解的最佳工艺条件为:pH为8.5,温度为46℃,酶用量为1.8%,固液比为1∶10,酶解时间为4h,DH为13.223%。     

胰蛋白酶酶解鹿血条件的优化

研究了胰蛋白酶对鹿血的酶解作用,以酶解产物对超氧阴离子自由基和羟基自由基清除能力为指标,分析了酶浓度(酶∶蛋白)、底物浓度(鹿血∶水)、pH值、酶解时间和酶解温度等因素对酶解反应的影响.结果表明,最佳酶解条件是酶浓度为8%,底物浓度(鹿血∶水)为1∶3,pH值为7.5,酶解时间为3 h,酶解温度为55℃.在此条件下酶解产物对超氧阴离子自由基和羟基自由基清除率分别可达91.63%和94.32%.     

虾蛄多肽酶解工艺的优化及其体外免疫活性研究

[目的]研究虾蛄多肽的免疫活性.[方法]采用胰蛋白酶水解虾蛄的生物组织,通过单因素试验和正交试验探索其最佳酶解条件,采用MIT试验研究虾蛄多肽对小鼠巨噬细胞的细胞活性,并通过中性红吞噬试验分析虾蛄多肽的免疫调节能力.[结果]虾蛄多肽的最佳酶解条件为:温度62.5℃、pH 9.5、酶解时间8h、加酶量0.08％,此时虾蛄多肽对RAW264.7有最高的细胞活性,并对小鼠巨噬细胞的吞噬能力表现出一定的促进作用.[结论]该研究为从海洋蛋白中获取高生物活性的酶解产物和具有免疫活性的多肽提供了一定的科学依据.     

超声破碎酵母细胞提取蔗糖酶条件优化

采用单因素试验和L9(33)正交试验确定酿酒酵母的最佳超声破碎条件。结果表明,酿酒酵母的最佳超声破碎条件为:破碎功率350 W、总工作时间25 min、工作时间/间歇时间15 s/25 s。     

鹿胎盘生物活性多肽的制备及其药理作用研究

采用低温酶解法制备鹿胎盘生物活性多肽,通过正交试验确定了其水解最佳条件,并将上述提取液进行超滤,得到分子量在3 000道尔顿以下的混合肽,通过混合肽主要成分的分离、小鼠灌肠实验、细胞培养实验,研究其药理作用,结果表明,鹿胎盘生物活性多肽具有镇静作用,促进神经细胞和人皮肤细胞生长作用,具有很好的临床应用及美容保健开发价值。     

胰蛋白酶制备乌贼缠卵腺抗氧化活性多肽的研究

[目的]探讨胰蛋白酶制备乌贼缠卵腺抗氧化活性多肽的工艺及体外抗氧化活性.[方法]以乌贼缠卵腺为原料,用胰蛋白酶进行酶解,采用单因素和正交试验优化乌贼缠卵腺抗氧化活性肽的提取工艺;将酶解液超滤分成4个分子段,通过体外检测DPPH清除率、·OH清除率和还原力评价其抗氧化活性.[结果]胰蛋白酶酶解乌贼缠卵腺在加酶量2000 U/g、pH为8.5、料液比1:3、酶解时间8 h条件下得到的酶解物对DPPH的清除率最大.酶解液经超滤得到的<3 kD分子段的多肽具有良好的DPPH清除能力、·OH清除能力和还原能力.[结论]胰蛋白酶酶解制备的乌贼缠卵腺多肽具有较好的体外抗氧化活性,可作为抗氧化肽的理想来源.     

酶解蚕豆蛋白制备多肽的工艺优化及多肽酒的发酵

以蚕豆蛋白为原料,采用碱性蛋白酶酶解、酒精发酵制备蚕豆多肽酒,对其加工工艺进行了研究.结果表明:1)蚕豆蛋白酶解的优化工艺为:蚕豆蛋白质量浓度32 g/L,水解温度43.2℃,酶用量9 821.12 U/g,pH9.5,在此条件下酶解2h,蚕豆蛋白的水解度达到19.64％;2)以蚕豆酶解液为原料制备多肽酒的发酵工艺为:加糖量200g/L,酵母接种量0.22％,发酵温度28℃,发酵时间6d,在此条件下制得的蚕豆多肽酒的酒精体积分数为9.6％;发酵结束后添加柠檬酸1.5 g/L,白砂糖70 g/L,环糊精6 g/L时,产品风味较好,显著降低了产品的苦味.     

乌贼内脏酶解多肽的制备和抗氧化活性研究

[目的]探讨乌贼内脏酶解多肽的制备和抗氧化活性。[方法]以乌贼内脏为原料,用胰蛋白酶对其进行水解,采用单因素和正交试验方法研究酶解温度、酶解时间、加酶量和pH对水解度和抗氧化性的影响;通过检测羟自由基清除率、DPPH清除率和还原力评价不同分子量水解物多肽的抗氧化性。[结果]当酶解温度为35℃,时间为5 h,加酶量为5 000 U/g,pH为7.5时,水解度最大;当酶解温度为40℃、时间为7 h、加酶量为4 500 U/g,pH为8.0时,水解物对羟自由基清除率最大。超滤后不同分子量多肽对羟自由基的清除率为3～5 kD3 kD以下5～10 kD;DPPH清除率:3～5 kD3 kD以下5～10 kD;还原力:3 kD以下3～5 kD5～10 kD。[结论]乌贼内脏酶解多肽具有较好的抗氧化活性,不同分子量多肽的活性不同。     

酪蛋白的胰蛋白酶酶解条件的优化

用二次回归通用旋转设计、响应面分析法,研究三因素五水平下胰蛋白酶水解酪蛋白的反应,得到了一定条件下酪蛋白在酶作用下水解程度的变化规律。根据回归方程利用统计优选法寻优,确定了最优水解条件：温度为58℃,pH值为7．4,酶底比为0．7％。     

不同日粮对奶牛养分消化的影响

选择4头安装有永久性瘤胃、十二指肠前端和回肠末端T形瘘管的荷斯坦泌乳奶牛,按4×4拉丁方设计,分别以铬染纤维和Co-EDTA为食糜固相和液相指示剂,研究精粗比约为30∶70的"高低质粗料型"日粮、30∶70的混合型高青贮日粮、50∶50的精粗料比例相当的日粮及65∶35的高精料日粮等4种日粮对瘤胃食糜稀释率及干物质(DM)、有机物(OM)、中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)等养分的进食量、十二指肠流量及消化道不同部位表观消化量和消化率的影响.结果表明:日粮精粗比显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)影响奶牛对DM、OM、NDF和ADF的进食量,且DM进食量与日粮水分含量呈负相关;日粮精粗比对奶牛瘤胃食糜液相和固相稀释率均没有显著(P＞0.05)影响;日粮精粗比显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)影响DM、OM、NDF和ADF的十二指肠流量及瘤胃和全消化道表观消化量,而对其后肠道表观消化量没有显著(P＞0.05)影响;日粮精粗比显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)影响DM、OM和ADF的瘤胃表观消化率,而对NDF的瘤胃表观消化率及DM、OM、NDF和ADF的后肠道和全消化道表观消化率没有显著(P＞0.05)影响.     

基于核极限学习机奶牛日粮能量消化预测方法

为准确评价饲料营养价值和提升饲喂管理水平,精准预测奶牛日粮能量消化指标具有重要意义。传统上主要基于线性回归(LR)方法预测奶牛日粮能量消化指标,但受参数模型假设限制,预测结果精度低,甚至偏离实际。文章首次将核极限学习机(KELM)方法应用于奶牛日粮消化能(DE)和能量消化率(ED)预测,KELM作为一种典型非参数机器学习模型,无需提前对预测模型作任何假设,仅通过学习训练样本数据,便可拟合出最接近实际的函数,特别适用于奶牛日粮能量消化等复杂系统预测问题。与传统LR方法和其他非参数模型RBF-ANN、SVM及标准ELM对比验证与讨论,结果表明,基于KELM预测方法在MAE、MAPE、RMSE及RT等多数指标上优于其他方法,特别是与传统LR方法相比,KELM方法预测精度更高,可作为对奶牛日粮DE和ED预测新型参考方法,为人工智能与机器学习在预测和评价动物饲粮营养价值应用研究提供借鉴。     

高硒酵母等制剂对奶牛机体抗氧化能力的影响

选用30头经直肠检查确认均已妊娠的健康黑白花母牛,分为5组,4组为处理组,1组为对照组．处理组分别添加4种Se添加剂为奥特奇公司的高Se酵母（Sel－Plex50）、有机Se无机Se混合物（70％Sel－Pex50加30％亚硒酸钠）、Se氨基酸络合物以及亚硒酸钠．整个饲喂实验持续了168d．在试验的第40、70,125d分别对血中的谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）、超氧化物岐化酶（SOD）的活性、血清中丙二醛（MDA）的含量作系统检测．结果表明,乳牛日粮中添加3mgSe可明显地增加GSH－Px、SOD活性,并降低血清中MDA的含量．比较起来,高Se酵母对改善奶牛机体的抗氧化能力要比无机Se好．     

放射免疫通信诊断奶牛子宫内膜炎的研究

应用放射免疫分析法对３０头正常奶牛和临床确诊有子宫内膜炎的５４头奶牛奶中孕酮含量变化的周期模式进行对比测定，发现正常奶牛奶中孕酮含量变化周期有规律，而患子宫内膜炎的奶牛奶中孕酮含量变化无规律，波动大，脉冲式或发情后孕酮跳跃式上升到最大值。根据这一特点，对５９７头奶牛测定奶中孕酮含量变化的周期模式，诊断出１４２头奶牛有子宫内膜炎。经临床复核，准确率达９８．６％。     

奶绵羊与奶牛乳成分与泌乳期血清代谢组比较分析

通过对绵羊奶与牛奶乳成分及泌乳期奶绵羊和奶牛血清代谢组进行分析,旨在探究两个物种乳成分差异及潜在调控机制。在分娩后第90天分别采集6只奶绵羊与奶牛奶样与血液样本,通过乳成分分析仪对两个物种进行乳常规成分分析,并通过非靶向代谢组学对血清代谢物进行比较分析。结果发现,绵羊奶中乳脂、蛋白质、酪蛋白、固形物和非乳脂固形物均显著高于牛奶（P＜0.05）,乳糖无明显差异（P＞0.05）。对血清进行代谢谱分析,共检测到1 615种代谢物,对其中486种进行了注释,根据条件筛选鉴定出412种差异代谢物。对差异代谢物进行通路（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG）富集分析,共富集到28条功能通路,正离子模式下18条,负离子模式下10条。在奶绵羊血清中存在许多代谢物与抗微生物、抗病毒或抗癌有关,例如芬那酸、瑞德南特和水杨酸。研究结果为揭示乳畜产奶性状和乳成分差异调控机制提供了一定的理论依据,为改良乳畜泌乳性能提供了参考。     

不同Se源对奶牛繁殖性能和免疫功能的影响

30头健康、经直肠检查确定已妊娠的黑白花母牛 ,分成 5组 ,其中 4组为处理组 (T1 、T2 、T3、T4 ) ,1组作为对照组(CK) .各处理组分别添加 4种 Se添加剂 ,即 Se酵母 (Sel-Plex5 0 ,Alltech产品 )、混合 Se化合物 (70 % Se酵母 +3 0 %亚硒酸钠 )、Se氨基酸络合物 (主要是 Se蛋氨酸 )和亚硒酸钠 .试验持续了 1 68d,在此期间 ,对血液 GSH-Px活性、血清 Se水平、淋巴细胞转化率和 T细胞数做了测定 ,同时观察了某些繁殖性能的变化 .结果表明 :(1 ) GSH-Px活性和血清 Se水平 ,T1 、T2 和 T3显著高于 CK(P<0 .0 1 ) ,而 T4 亦高于 CK(P<0 .0 5 ) ;T1 显著高于 T2 、T3和 T4 (P<0 .0 5 ) .(2 )补 Se后第 70天测得的淋巴细胞转化率和 T细胞数 ,T1 和 T2 显著高于 CK(P<0 .0 1 ) ,而 T3、T4 高于 CK(P<0 .0 5 ) ;同时 T1 、T2 和 T3的淋巴细胞转化率和 T细胞数亦高于 T4 (P<0 .0 5 ) .(3 )补 Se明显改善了某些繁殖性能 ,如减少了每次受孕的配种次数并降低了诸如胎衣不下和子宫内膜炎等产科疾病的发病率 .试验也证明 ,补充有机 Se可明显提高母牛抗感染 ,促进淋巴细胞增殖 ,增进嗜中性白细胞的吞噬作用     

奶牛瘤胃中一株纤维分解菌的筛选与鉴定

试验从奶牛瘤胃中分离得到1株纤维分解菌,研究其生化性质和种属分类.将富集的纤维分解菌群,通过厌氧平板分离培养得到纤维分解菌.利用全自动微生物分析系统的革兰氏阴性菌鉴定卡鉴定纤维分解菌的生化图谱,并对菌株16SrDNA进行PCR扩增并测序,与GenBank数据库中序列进行同源性比对,确定其种属分类地位.结果表明:通过体外培养,分离得到纤维分解菌CB11,纤维分解平均消失率达82%,革兰氏染色为阴性,绝对厌氧,能够产生β-半乳糖苷酶、β-葡萄糖苷酶、β-木糖苷酶等.通过建立系统发育树,CB11的16SrDNA序列与解肝素拟杆菌的相似度达99%.     

奶牛乳房炎相关基因的功能基因组学研究进展

功能基因组学是在基因组水平上系统、全面的分析基因的功能,主要研究技术有差异显示反转录PCR、表达序列标签、基因表达系列分析、微阵列、RNA干涉、蛋白质组学及生物信息学等。综述了功能基因组学主要研究技术及其在奶牛乳房炎相关基因的表达、抗性候选基因的鉴定、病原菌蛋白质组学、基因治疗等方面的应用研究进展。     

奶牛产后不同体况对产奶量和亚临床酮病的影响

为探究奶牛产后体况对产奶量和亚临床酮病(Subclinical ketosis,SCK)的影响,在黑龙江省3个规模化养殖场在奶牛产后10、20和60 d收集试验数据,根据国内外体况(Body condition score,BCS)标准将奶牛分为低体况组(L-BCS group,BCS≤3.00)、中BCS组(M-BC...