自贡黑山羊GoLA-DRB3基因遗传多态性的研究

采用PCR-RFLP技术分析并比较自贡黑山羊、金堂黑山羊、乐至黑山羊和成都麻羊GoLA-DRB3基因区域第二外显子的遗传多态性,其特异性扩增产物经TaqⅠ、Pst Ⅰ和HaeⅢ限制性内切酶酶切,结果GoLA-DRB3基因的第二外显子的第122、154、168、220、241位碱基均为多态.自贡黑山羊3种酶切共检测到GoLA-DRB3基因的9个等位基因;金堂黑山羊3种酶切共检测到GoLA-DRB3基因的10个等位基因;乐至黑山羊3种酶切共检测到GoLA-DRB3基因的7个等位基因;成都麻羊3种酶切共检测到GoLA-DRB3基因的8个等位基因.聚类表明,金堂黑山羊和成都麻羊的亲缘关系最近,在D=0.282处首先聚为一类,两者再与乐至黑山羊在D=0.351处聚为一类;最后自贡黑山羊与前3个山羊品种在D=0.498处聚为一类.     

自贡黑山羊MHC-DRB_3基因的多态性研究

本实验研究了自贡黑山羊、金堂黑山羊、乐至黑山羊和成都麻羊MHC-DRB3基因的多态性。MHC-DRB3第2外显子的PCR扩增产物分别经限制性核酸内切酶TaqⅠ、PstⅠ、HaeⅢ消化,结果在第122、154、168、220、241位碱基显示出多态性;4个山羊群体分别检测到9、10、7个和8个等位基因;聚类分析表明:金堂黑山羊和成都麻羊亲缘关系最近,首先聚为一类,再与乐至黑山羊聚为一类,最后自贡黑山羊与其他3个山羊品种聚为一类。     

自贡黑山羊品种选育报告

通过对自贡黑山羊4年的品种选育,建立了核心群、基础群和扩繁群三级繁育体系。选育结果表明自贡黑山羊外貌特征一致,具有优良的生产性能,早期生长快、产肉力高、性成熟早、繁殖力高;性能测定表明自贡黑山羊能将典型的优良性状稳定地遗传给后代。通过PCR—RELP技术对自贡黑山羊GOLA—DRB3基因(山羊主要组织相容性复合体)多态性的研究,表明自贡黑山羊GOLA—DRB3基因第二外显子具有独特的遗传特性,与金堂黑山羊、乐至黑山羊、成都麻羊的亲缘关系远．是一个独立的品种类群。     

四川4个地方山羊品种(群体)MHC-DRB3外显子2的多态性

采用TaqⅠ、PstⅠ和HaeⅢ限制性内切酶对四川4个地方山羊品种(群体)GoLA-DRB3基因第二外显子的特异性扩增产物进行消化。结果表明:山羊GoLADRB3第二外显子多态性极丰富,在122,154,168,220,241位点的碱基且为多碱基突变;X2适合性检验表明金堂黑山羊和富顺黑山羊GoLADRB3基因的第二外显子第122位点的碱基突变未达到HardyWeinberg平衡状态;4个山羊品种(群体)在第241位点的碱基突变均已达到HardyWeinberg平衡状态;金堂黑山羊、成都麻羊和乐至黑山羊在HaeⅢ酶切位点均未达到HardyWeinberg平衡状态。     

10个山羊品种(群体)线粒体DNA D-loop序列多态性分析

对四川10个山羊品种(群体)线粒体DNA D-loop序列多态性及系统进化关系进行了探讨.结果表明:群体间共有多态位点83个,单一多态位点23个,简约信息位点24个,平均核苷酸歧异度为0.001 828,D-loop序列多态性相对贫乏;经聚类,10个品种(群体)分为两大类,合江黑山羊与江安黑山羊先聚在一起后,再与自贡黑山羊聚为1类,营山黑山羊与嘉陵黑山羊聚为1类,两类形成一大类;成都麻羊先与金堂黑山羊聚在一起后,再依次与乐至黑山羊、建昌黑山羊、白玉黑山羊形成另一大类,最后两个大类聚在一起.聚类结果与品种(群体)来源和生态地理分布相一致.     

山羊乳上皮黏蛋白MUC1的遗传多态性及其在进化分析中的应用

研究了四川5个地方山羊品种及波尔山羊乳上皮黏蛋白MUC1的遗传多态性。结果显示，山羊乳MUC1表现出丰富的多态性，共检测到22种基因型和9个等位基因，编码的蛋白质分子量范围为205～278ku，明显高于普通乳牛；MUC1的等位基因、基因型及其分布存在品种间差异；山羊乳MUC1基因杂合度较大，遗传变异程度高；根据乳MUC1等位基因频率对6个山羊品种进行了聚类分析，结果能较好地反映各品种间的亲缘关系。     

用5个微卫星标记分析四川7个地方山羊品种的遗传关系

选用5个微卫星标记对四川7个地方山羊品种(类群)进行了遗传关系分析。结果表明:5个微卫星标记检测到的等位基因数从1～7个不等,平均多态信息含量为0.537～0.716,其中ILSTS004、ILSTS030、McM038和OarFCB011这4个基因座位为高度多态性基因座,CSSM004为中度多态基因座,都能较好地用于山羊群体间的遗传多样性分析。7个山羊群体的平均多态信息含量为0.601～0.696,群体平均杂合度为0.530～0.655,群体间的遗传分化系数为0.1167,表明7个地方山羊群体的遗传多样性较为丰富。群体间的Nei氏遗传距离为0.0822～0.7240,以Nei氏遗传距离为基础构建的系统聚类树表明,藏山羊、建昌黑山羊、成都麻羊和北川白山羊聚为一大类,第2类为乐至黑山羊和金堂黑山羊,最后简阳大耳羊单独成一类。     

山羊生长分化因子9基因FecTT突变检测

本研究采用PCR-RFLP方法检测生长分化因子9(growth differentiation factor 9, GDF9)基因FecTT突变在济宁青山羊、贵州白山羊、大足黑山羊、陕南白山羊、古蔺马羊、马头山羊、波尔山羊、成都麻羊、萨能奶山羊、文登奶山羊、板角山羊、金堂黑山羊、关中奶山羊、川东白山羊、安哥拉山羊、辽宁绒山羊、内蒙古绒山羊等17个山羊品种中的分布。结果表明,在17个山羊品种中都未检测到FecTT突变,提示,GDF9基因影响Thoka绵羊高繁殖力的FecTT突变对以上17个山羊品种的繁殖力均没有显著影响。     

四川6个山羊品种(群体)乳的生化组成研究

用MilkScan-1340A/B型全自动综合乳质测仪和SDS-PAGE分别测定了成都麻羊、南江黄羊、金堂黑山羊、建昌黑山羊、北川白山羊、波尔山羊和波尔山羊(♂)与成都麻羊(♀)杂交一代羊乳的常规成分和乳蛋白组分。结果表明,乳中干物质波尔山羊为(160·57±8·61)g/L,显著高于成都麻羊和南江黄羊(P<0·05),其余品种(群体)间差异不显著;波尔山羊乳脂和乳蛋白含量分别为(60·62±2·81)g/L和(46·73±3·15)g/L,显著高于成都麻羊、南江黄羊和金堂黑山羊(P<0·05),其余品种(群体)间差异不显著。乳蛋白组分中,α-乳清蛋白、β-乳蛋白、免疫球蛋白的相对含量在山羊品种(群体)间差异均不显著;酪蛋白相对百分含量波尔山羊为(67·57±1·45)%,显著低于成都麻羊和南江黄羊(P<0·05)。     

西南地区羊品种资源的合理利用

西南地区分布的地方山羊品种主要有南江黄羊、成都麻羊、建昌黑山羊、金堂黑山羊、板角山羊、川东白山羊、贵州白山羊、北川白山羊、古蔺马羊、藏山羊,主要以产肉为主,肉皮兼用。引进品种有波尔山羊、萨能奶山羊、吐根堡山羊、努比羊。绵羊品种有凉山半细毛羊、云南半细毛羊、藏绵羊。在品种利用方面,目前波尔山羊、南江黄羊、努比羊利用比较好,推广面积大,产生了良好的杂交效果,并建立了良种繁育体系。     

四川九个黑山羊品种(群体)X染色体微卫星DNA多态性研究

以7个微卫星标记,PCR扩增,12%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,sanguinetti银染法显色,对四川建昌、金堂、乐至、合江、江安、自贡、嘉陵、营山、白玉9个黑山羊品种(群体),进行X染色体微卫星DNA遗传多态性研究.结果表明:7个微卫星座位在9个黑山羊品种(群体)中均为高度多态座位,建昌、金堂、乐至、合江、江安、自贡、嘉陵、营山和白玉9个黑山羊的平均PIC、H和Ne分别为:0.764 4,0.796 6,5.114 5;0.725 8,0.762 8,4.466 0;0.743 8,0.776 9,4.724 2;0.758 0,0.791 0,5.006 6;0.736 5,0.774 7,4.508 4;0.746 3,0.781 9,4.694 4;0.768 3,0.799 3,5.194 8;0.764 2,0.795 6,5.033 3;0.721 1,0.760 0,4.286 7.嘉陵与营山黑山羊在D＝0.284处聚为一类;自贡与江安黑山羊在D＝0.294处聚为一类;金堂与乐至在D＝0.381处聚为一类,在D＝0.395处再与合江黑山羊聚为一类;白玉与建昌黑山羊在D＝0.456处聚为一类.最后4种聚为一大类.     

四川9个黑山羊品种(群体)微卫星DNA多态性研究

以10个微卫星标记，PCR扩增，12％非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、Sanguinetti银染法显色，对四川建昌、金堂、乐至、合江、江安、自贡、嘉陵、营山、白玉9个黑山羊品种（群体），进行微卫星DNA遗传多态性研究。结果表明，10个微卫星座位在9个黑山羊品种（群体）中均为高度多态座位，建昌、金堂、乐至、合江、江安、自贡、嘉陵、营山和白玉黑山羊的平均PIC、H和Ne分别为：0．7352／0．7739／5．0176、0．7244／0．7632／4．4838、0．7503／0．7827／4．8782、0．7702／0．8007／5．2861、0．7402／0．7771／4．5768、0．7465／0．7846／4．8556、0．7511／o．7889／4．9591、0．7604／0．7905／4．8869和0．6970／0．7417／4．2728。嘉陵与营山黑山羊在D=0．386处聚为1类；自贡与江安黑山羊在D=0．428处聚在一起后，在D=0．456处再与合江黑山羊聚为1类；金堂与乐至黑山羊在D=0．437处聚为1类；白玉与建昌黑山羊在D=0．489处聚为1类。最后4种聚为1大类。     

川渝部分山羊品种(类群)遗传多样性微卫星标记研究

为分析川渝山羊品种(类群)的遗传多样性和系统发生关系,利用30个微卫星标记,对6个山羊品种(类群)进行分析。结果表明:金堂黑山羊遗传多样性最丰富,群体多态信息含量、平均杂合度和有效等位基因数分别为0.777、0.819和6.54;大足黑山羊各项指标最低,分别为0.736、0.787和5.57。对6个品种(类群)聚类分析表明,金堂黑山羊与南江黄羊的首先聚类在一起,然后依次与板角山羊、川东白山羊、大足黑山羊和波尔山羊聚类。各山羊品种(类群)的聚类关系与其来源、育成史及地理分布基本一致。     

牦牛乳中上皮粘蛋白MUC1的遗传多态性研究

采用SDS－PAGE研究了108头麦洼牦牛和98头九龙牦牛乳MUC1的生化遗传特性，结果表明；牦牛乳MUC1呈现出多态性，表现为一条或两条迁移率不同的区带。SAS－PAGE分析发现4种分子量的MUC1区带，依次为A：208kd,B;200kd,C:196kd,D185kd，分子量大于荷斯坦牛。麦洼牦牛MUC1基因座受A、B、C、D4个复等位基因支配，有9种基因型；九龙牦牛乳MUC1基因座受A、C、D3个复等位基因支配，显示5种基因型，两品种牦牛乳MUC1基因型分布差异极显著（P＜0.01），并且均偏离哈代－温伯格定律（P＜0.01），麦洼牦牛乳MUC1基因座遗传变异程序大于九龙牦牛。     

Genetic Diversity of Mitochondrial DNA D-loop Sequences in Huili Black Goat

To explore the genetic diversity and origin for genetic resource protection of Huili Black goat, the mitochondrial DNA (mtDNA) D-loop was investigated. mtDNA D-loop sequences of 41 goats were analyzed by PCR, sequencing techniques, and biological information and the phylogenetic trees were constructed. The mtDNA sequences of the Huili Black goat ranged from 1211 to 1213 bp, and 2 sequences were 1211 bp, 29 sequences 1212 bp, and 10 sequences 1213 bp. The content of A+T (60.1%) was higher than one of G+C (39.9%). There were 9 haplotypes, and the haplotype diversity was 0.842+0.00368. The nucleotide diversity was 0.01542+0.00034. The phylogenetic analysis showed that Huili Black goat was distributed in a branch, and were closed to Jianchang Black goat, Chengdu Ma goat, Jintang Black goat, Guizhou White goat, Guizhou Black goat, but they were less related to Capra falconeri. Huili Black goats had rather abundant genetic diversity, and were greatly affected by other goat breeds in history.     

3种稀释液对乐至黑山羊精液品质的影响

旨在评价不同种类稀释液对乐至黑山羊精液品质的影响。配制柠檬酸-Tris（1号）、磷酸盐（2号）和OviXcell（3号）3种稀释液,采集8只乐至黑山羊新鲜精液,采用上述稀释液进行冷冻保存;测定并比较添加不同稀释液冷冻保存的山羊精液在采集后、平衡后以及解冻后的精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率。结果表明：在3种稀释液中,添加OviXcell稀释液（3号）的精液其解冻后精子活力和顶体完整率均最高,精子畸形率最低。提示OviXcell稀释液更适用于乐至黑山羊精液的体外冷冻保存。     

5个黑山羊品种(群体)微卫星标记的遗传多样性研究

利用14个微卫星标记分析了攀枝花地方黑山羊、建昌黑山羊、云岭黑山羊、金堂黑山羊、乐至黑山羊5个品种(群体)的遗传多样性及亲缘关系。结果显示,14个微卫星座位多态信息含量(PIC)在0.5129~0.7646之间,均为高度多态位点;5个黑山羊品种(群体)的平均多态信息含量(PIC)为0.6405~0.6856,平均杂合度(H)在0.6985~0.7371之间,说明遗传多样性丰富;群体间平均遗传分化系数(Fst)为0.0296,说明群体间的变异仅为2.96%,群体间存在基因交流;攀枝花黑山羊和金堂黑山羊2个群体之间的Nei氏遗传距离最大(D=0.1286),金堂黑山羊和乐至黑山羊之间的遗传距离最小(D=0.0365);NJ聚类图中,攀枝花黑山羊、建昌黑山羊和云岭黑山羊聚为一类,金堂黑山羊和乐至黑山羊聚为一类,聚类结果与群体的地理分布较为一致。